Análise da regulação da expressão dos genes nifR3ntrBCYX de Rhizobium sp. NGR234. Caroline de Moraes de SiqueiraBolsa Permanência A.C. Bonatto / R.Wassem / D. Messias

Introdução/Objetivos

Método

Resultados/Discussão

Conclusões

Rhizobium sp. NGR234 é uma α-proteobacteria capaz de estabelecer simbiose com leguminosas, fixando N2 através de nódulos nas raízes. O sistema NTR é responsável por controlar o metabolismo de nitrogênio e induzir a fixação do mesmo. Este sistema contém dois pares de proteínas regulatórias da família de dois componentes, NtrB-NtrC e NtrY-NtrX. Estes genes estão presentes em uma única região gênica, sugerindo que formam dois operons, nifR3ntrBC e ntrYX. O objetivo deste trabalho é caracterizar a região promotora dos dois operons e analisar sua expressão em diferentes fontes de nitrogênio e concentrações de oxigênio.

As regiões promotoras foram amplificadas e clonadas no vetor pPROBE- GT, a montante do gene gfp. Os plasmídeos foram, transferidos para a estirpe selvagem e sua expressão foi testada.

Os resultados mostram que os dois promotores apresentam algum tipo de regulação em relação a disponibilidade de nitrogênio. O promotor a montante de nifR3, denominado pBC, tem sua expressão aumentada na presença de NaNO3, parecendo ser esta a condição que melhor induz a expressão desse operon. O promotor a montante de ntrY, pYX, tem sua expressão aumentada na presença de glutamato de sódio. A presença de oxigênio aumenta a expressão de ambos os promotores.

Os promotores são regulados pela fonte de nitrogênio. pBC por NaNO3 e pYX por glutamato de sódio. Também são regulados pelo oxigênio. pBC e pYX exibem níveis elevados de expressão na presença de O2, mas pYX é menos evidente.