ANLISI DALIMENTS II

Hidrats de carboni

POLISACRIDS

FIBRA MID ALTRES

(Hemicelluloses,

Gomes, pectines, etc.)

DEXTRINES

OLIGOSACRIDS

DISCRIDS

MONOSACRIDS

hidrlisi

Etanol 80% (mono i disacrids)

*CaCl2 , HClO4 , DMSO (mid)

* H2O , , oxalat amnic

KOH 5%

res. insol. hemicellulosa

cellulosa

H+ etanol KOH (24%)

(A) (B) (C)

pectines res. insol.

mostra

assecatge

material

sec

extracci amb

CHCl 3/MeOH (19:1)

residu

extracci amb

EtOH (80%)

Determinaci directa Determinaci indirecta

mtodes fsics: densitat,

polarimetria, ndex de refracci

mtodes enzimtics: -glucosidasa, -fructosidasa, -galactosidasa, etc.

mtodes qumics: (poder reductor)

tcniques instrumentals: HPLC, GC,

RMN

hidrlisi

polisacrids

inversi

(Herzfeld, Clerget)

monosacrids

disacrids

Balana de

Mohr-Westphal

picnmetre

n = sin i/ sin r

= quocient velocitats

`fenmens ondulatoris

Concentraci:

(%)

10

20

30

40

50

D-glucosa D-fructosa sacarosa

1.34775 1.34762 1.3478

1.36356 1.36335 1.3638

1.38051 1.38030 1.3811

1.39872 1.39857 1.3998

1.41826 1.41819 1.4200

ndex de refracci corresponents a diferents

dissolucions de sucres

= [] tD l P/V

H2SO4

HMF

Colorimetria

Fenol (Dubois)

Antrona (Dreywood)

Orcinol (Tillmans)

Timol (Molisch)

Volumetria

(Fehling)

(Lane-Eynon) (blau metil)

(Lehmann-Schoorl) (tiosulfat)

(Bertrand) (manganimetria)

Gravimetria

(Allihn) Cu0

+ Fe(CN)36-

Fe(CN)64-

(Blau de Prusia)

+ Cu2+ + OH-

Cu+

Colorimetria

(Nelson-Somogyi)

Arseniomolibdat

GLUCOSA + ATP G-6P + ADP

FRUCTOSA + ATP F-6P + ADP

F-6P G-6P

G-6P + NADP + gluconat-6P + NADPH + H+

HK

isomerasa

G-6P DH

HK

acetat, aspartat, citrat, creatina,

etanol, fructosa, galactosa,

glutamat, glicerol, lactat, malat,

sorbitol, mid, sacarosa, etc.

Hermann von Fehling

(1812-1885)

F = V[ 0.5] / 100

F 100 / V = % glucosa

C12 H22 O11 + H2O 2 C6 H12 O6 Herzfeld

Clerget (342) (2 x 180)

F = 342 / 360 = 0.95

MESURA DE LA CAPACITAT DINFLAMENT

DEL MID (Swelling factor) (SF)

Pes mostra (W0)

+ 5ml H2O

(bany maria

refredar)

+ 0.5ml sol. blue-

dextran

(centrifugar)

mesura a 620 nm

problema (A1)

blanc (A2)

1) Aigua lliure i intersticial

FW = 5.5 (A2/A1) 0.5

2) Volum inicial de mid (V0)

V0 = W0 / 1.4 (densitat)

3) Volum daigua absorbida (V1)

V1 = 5 - FW

4) Volum dels grnuls inflats(V2)

V2 = V0 + V1

5) Factor dinflament (SF)

SF = V2 / V1

SF = 1 + (7.700 / W) (A1 A2) / A1

Cellulosa

Lignina

Hemicellulosa

Substncies

associades

Pectines

Mid no digerible

Polisacrids

dorigen mar

alcohols fenil-proplics

(cumarlic, coniferlic)

lignina

Mtodes per a la determinaci de fibra

Gravimtrics:

- determinaci indirecta (per diferncia)

- Weende (cellulosa bruta)

- Van Soest (fibra detergent cida i neutra)

- fraccionaments enzimtics

Colorimtrics:

- Southgate

Cromatogrfics

mostra

gelatinitzaci i incubaci amb -amilasa incubaci amb proteasa incubaci amb amiloglucosidasa

producte

hidrolitzat

filtrar

rentar (EtOH, acetona)

assecar

precipitaci

(4 vols. EtOH)

Fibra total

filtrar

filtrat

rentar (EtOH,

acetona)

assecar

Cellulosa

precipitaci

(4 vols. EtOH)

rentar

(EtOH, acetona)

Hemicellulosa

Pectina

retingut

NDF

(Fibra detergent neutra) ADF

(Fibra detergent cida)

mostra

incubaci

(-amilasa) ebullici

(H2SO4 + bromur de cetilmetilamoni)

filtrar

rentar (acetona)

assecar

pesar (p1)

calcinar

pesar (p2)

NDF = cellulosa + lignina

+ hemicelluloses

mostra

ebullici

(laurilsulfat-Na +

EDTA) filtrar

rentar (aigua ) rentar (acetona)

assecar

pesar (p1) ADF

(cellulosa +

lignina) (H2SO4 72%)

filtrar

pesar (p2)

Cellulosa = ADF P2 calcinar

pesar (p3)

Lignina

Southgate mostra

EtOH

insoluble sucres solubles

-amilasa

insoluble sucres mid

H2SO4 2N hexoses, pentoses

cids urnics

hemicelluloses, pectines solubles insoluble

H2SO4 70%N

glucosa, pentoses, cids urnics

cellulosa i pectines insolubles insoluble

lignina