ANLISI DALIMENTS II
Hidrats de carboni
POLISACRIDS
FIBRA MID ALTRES
(Hemicelluloses,
Gomes, pectines, etc.)
DEXTRINES
OLIGOSACRIDS
DISCRIDS
MONOSACRIDS
hidrlisi
Etanol 80% (mono i disacrids)
*CaCl2 , HClO4 , DMSO (mid)
* H2O , , oxalat amnic
KOH 5%
res. insol. hemicellulosa
cellulosa
H+ etanol KOH (24%)
(A) (B) (C)
pectines res. insol.
mostra
assecatge
material
sec
extracci amb
CHCl 3/MeOH (19:1)
residu
extracci amb
EtOH (80%)
Determinaci directa Determinaci indirecta
mtodes fsics: densitat,
polarimetria, ndex de refracci
mtodes enzimtics: -glucosidasa, -fructosidasa, -galactosidasa, etc.
mtodes qumics: (poder reductor)
tcniques instrumentals: HPLC, GC,
RMN
hidrlisi
polisacrids
inversi
(Herzfeld, Clerget)
monosacrids
disacrids
Balana de
Mohr-Westphal
picnmetre
n = sin i/ sin r
= quocient velocitats
`fenmens ondulatoris
Concentraci:
(%)
10
20
30
40
50
D-glucosa D-fructosa sacarosa
1.34775 1.34762 1.3478
1.36356 1.36335 1.3638
1.38051 1.38030 1.3811
1.39872 1.39857 1.3998
1.41826 1.41819 1.4200
ndex de refracci corresponents a diferents
dissolucions de sucres
= [] tD l P/V
H2SO4
HMF
Colorimetria
Fenol (Dubois)
Antrona (Dreywood)
Orcinol (Tillmans)
Timol (Molisch)
Volumetria
(Fehling)
(Lane-Eynon) (blau metil)
(Lehmann-Schoorl) (tiosulfat)
(Bertrand) (manganimetria)
Gravimetria
(Allihn) Cu0
+ Fe(CN)36-
Fe(CN)64-
(Blau de Prusia)
+ Cu2+ + OH-
Cu+
Colorimetria
(Nelson-Somogyi)
Arseniomolibdat
GLUCOSA + ATP G-6P + ADP
FRUCTOSA + ATP F-6P + ADP
F-6P G-6P
G-6P + NADP + gluconat-6P + NADPH + H+
HK
isomerasa
G-6P DH
HK
acetat, aspartat, citrat, creatina,
etanol, fructosa, galactosa,
glutamat, glicerol, lactat, malat,
sorbitol, mid, sacarosa, etc.
Hermann von Fehling
(1812-1885)
F = V[ 0.5] / 100
F 100 / V = % glucosa
C12 H22 O11 + H2O 2 C6 H12 O6 Herzfeld
Clerget (342) (2 x 180)
F = 342 / 360 = 0.95
MESURA DE LA CAPACITAT DINFLAMENT
DEL MID (Swelling factor) (SF)
Pes mostra (W0)
+ 5ml H2O
(bany maria
refredar)
+ 0.5ml sol. blue-
dextran
(centrifugar)
mesura a 620 nm
problema (A1)
blanc (A2)
1) Aigua lliure i intersticial
FW = 5.5 (A2/A1) 0.5
2) Volum inicial de mid (V0)
V0 = W0 / 1.4 (densitat)
3) Volum daigua absorbida (V1)
V1 = 5 - FW
4) Volum dels grnuls inflats(V2)
V2 = V0 + V1
5) Factor dinflament (SF)
SF = V2 / V1
SF = 1 + (7.700 / W) (A1 A2) / A1
Cellulosa
Lignina
Hemicellulosa
Substncies
associades
Pectines
Mid no digerible
Polisacrids
dorigen mar
alcohols fenil-proplics
(cumarlic, coniferlic)
lignina
Mtodes per a la determinaci de fibra
Gravimtrics:
- determinaci indirecta (per diferncia)
- Weende (cellulosa bruta)
- Van Soest (fibra detergent cida i neutra)
- fraccionaments enzimtics
Colorimtrics:
- Southgate
Cromatogrfics
mostra
gelatinitzaci i incubaci amb -amilasa incubaci amb proteasa incubaci amb amiloglucosidasa
producte
hidrolitzat
filtrar
rentar (EtOH, acetona)
assecar
precipitaci
(4 vols. EtOH)
Fibra total
filtrar
filtrat
rentar (EtOH,
acetona)
assecar
Cellulosa
precipitaci
(4 vols. EtOH)
rentar
(EtOH, acetona)
Hemicellulosa
Pectina
retingut
NDF
(Fibra detergent neutra) ADF
(Fibra detergent cida)
mostra
incubaci
(-amilasa) ebullici
(H2SO4 + bromur de cetilmetilamoni)
filtrar
rentar (acetona)
assecar
pesar (p1)
calcinar
pesar (p2)
NDF = cellulosa + lignina
+ hemicelluloses
mostra
ebullici
(laurilsulfat-Na +
EDTA) filtrar
rentar (aigua ) rentar (acetona)
assecar
pesar (p1) ADF
(cellulosa +
lignina) (H2SO4 72%)
filtrar
pesar (p2)
Cellulosa = ADF P2 calcinar
pesar (p3)
Lignina
Southgate mostra
EtOH
insoluble sucres solubles
-amilasa
insoluble sucres mid
H2SO4 2N hexoses, pentoses
cids urnics
hemicelluloses, pectines solubles insoluble
H2SO4 70%N
glucosa, pentoses, cids urnics
cellulosa i pectines insolubles insoluble
lignina
Top Related