Amilase&

γ-glutamyltransferase

Arini

Neni anggraeni

Pendahuluan

•Katalisator atau senyawa yang mempercepat proses reaksitanpa habis bereaksi.

Enzim

•Molekul yang menurunkanaktivitas enzimInhibitor

•Senyawa yang meningkatkanaktivitas enzim.Aktivator

Pembahasan

D i b e d a k a n m e n j a d i t i g a

a l f a - a m i l a s e , b e t a - a m i l a s e d a n g l u k o a m i l a s e

S u m b e r A m i l a s e

Amilase yang dihasilkan di pankreas biasa

disebut amilase pankreas

Untuk menghidrolisis serat, glikogen dan karbohidrat

kecuali selulosa

Am i l a s eTipe reaksi memutuskan ikatan kimia

dengan penambahan air

Dihasilkan oleh kelenjar ludah di

mulut dan kelenjar pankreas

Amilase

• Salah satu enzim yang berperan dalam

proses degradasi pati, sejenis makromolekul

karbohidrat

α- amilase

• Enzim golongan hidrolase kelas 14 yang

digunakan dalam proses sakarifikasi pati

(sejenis karbohidrat).

β-amilase

• Salah satu enzim kelas 15 yang

berperan dalam proses sakarifikasi pati

(sejenis karbohidrat).

Glukoamilase

Tempat Kerja dan Cara Kerja

Amilase

α-amilase

• Aktif bekerja pada

kisaran suhu 25 C

– 95 C.

• Penambahan ion

Ca dan Cl aktivitas

kerja dan menjaga

kestabilan enzim

ini.

β-amilase

• Memotong ikatan

glikosidik pada

gugus

amilosa, amilopektin,

dan glikogen.

Glukoamilosa

• Memotong ikatan

alfa-1,4 pada

molekul pati.

• Hasil utama

pemecahan adalah

glukosa

Masa l a h Kl i n i s

Peningkatan

Pankreatitis akut, obstruksi

duktus

pankreas, penggunaan

alkohol, gondok, penyakit

ginjal dan tukak lambung

Penurunan

Kerusakan hati

atau pankreatitis

serta fibrosis kistik.

γ-glutamyltransferase

Definisi

• Enzim yang mengkatalisis pemindahan gugus γ -glutamil dari

suatu peptida yang mengandung gugus tersebut, misalnya

glutation, ke peptida lain atau ke asam amino.

Tempat

• Di hati dan ginjal, sementara dalam jumlah yang rendah

ditemukan dalam limpa, kelenjar prostat dan otot jantung.

Peninggian aktivitas GGT dalam serum akanmempunyai nilai diagnostik yang lebih besarbila dihubungkan dengan aktivitas enzim-enzim lainnya. Misalnya pada karsinomapankreas aktivitas GGT meningkat tanpapeninggian enzim-enzim transaminase (GOT dan GPT). Bila transaminase jugameninggi, yang harus dipikirkan adalahadanya penyakit hati yang akut

γ - g lu tamyl t ransfe rase

Pemeriksaan laboratorium

Pemeriksaan Amilase

Salah satu pemeriksaan untuk menunjangdiagnosis penyakit yang berhubungandengan kerusakan endokrin, pankreas

Metode

Kinetik

(Para-Nitro Phenyl Glucose 7/PNPG7)

Peme r i ksaan Labo ra t o r i um

Amil as e• Prinsip :

Dalam suasana netral, alfa amilase mengkatalisis reaksi hidrolisis

PNPG7 menjadi PNPGn dan glukosa primer. PNPGn yang

terbentuk dihidrolisis dengan bantuan enzim glukoamilase

menghasilkan PNPG1 dan glukosa polimer. PNPG1 yang terbentuk

dikatalisis oleh glukosidase menghasilkan p-nitrofenol dan glukosa.

Aktivitas katalitik amilase sebanding dengan terbentuknya p-

nitrofenol yang dapat ditentukan secara kinetik pada panjang

gelombang 405 nm, pada fotometer clinicon 4010 atau microlab

300.

Glukoamilase

Glukosa Oksidase

PNPG 7

Alat & bahan

Alat :

Fotometer 4010, Microlab 300.

Clinipette 20 μL dan 1000 μL

Cuvette

Tabung Khan

Tip (kuning dan biru)

Tissue

Bahan :

Sampel (serum)

Pereaksi, terdiri dari :

PNPG7 1,2 mmol/L

Glucosidase 25.000 IU/L

Glucoamilase 10.000 IU/L

NaCl 50 mmol/L

CaCl2 1 mmol/L

Hepes Buffer 50 mmol/L

pH 7,2

Cara Ker j a

1.Pipet ke dalam tabung sebanyak 20 μL serum

2.Tambahkan 1000 μL larutan pereaksi

3.Campur sampai homogeny

4.Inkubasi selama satu menit

5.Baca pada fotometer clinicon 4010 atau microlab

300, dengan program kinetik (K20 atau K60) pada

panjang gelombang 405 nm.

Nila i Rujukan

Suhu Serum

300C ≤ 85 IU/L

370C ≤ 115 IU/L

Metode Pemeriksaan GGT

Penunjang diagnosis penyakit hati alkoholik atau

penyakit hati toksis karena zat kimia dan obat

• Kinetik

• Gamma glutamil p-nitroanilida/GPNAMetode

• Dalam suasana basa GGT mengkatalis

reaksi L-Gamma Glutamil p-Niroanilida

dengan glisilglisin menjadi L-Gamma

glutamil glisilglisin dan p-nitroanilida.

Prinsip

Alat dan bahan

• Fotometer 4010,

Spektrofotometer

• Clinipette 50 μL dan 1000 μL

• Cuvette

• Tabung Khan

• Tip (kuning dan biru)

• Tissue

• Sampel (serum)

• Pereaksi GGT, terdiri dari :

• Reagen 1 (buffer)

Glisilglisin 62 mmol/L

TRIS buffer pH 8,1 95 mmol/L

• Reagen 2 (substrat)

L-G-Glutamil p-Nitroanilida2,0

mmol/L

Nila i ru jukan

Jenis Kelamin Nilai Normal

Laki-laki 2 – 30 IU/L

Perempuan 1 – 24 IU/L

Kesimpu lan

Peningkatan kadar amilase dalam serum dapatmengindikasikan gangguan yang terjadi padapankreas, endokrin, dan jaringan spesifiklainnya.

Pemeriksaan kadar amilase dapat di lakukandengan metode kinetik (PNPG7) denganmenggunakan fotometer pada panjanggelombang 405 nm.

Pemeriksaan GGT dapatdilakukan dengan metodekinetik (GPNA) denganmenggunakan fotometeratau spektrofotometer padapanjang gelombang 405 nm.