Amilase dan gama gt
-
Upload
arini-utami -
Category
Education
-
view
2.141 -
download
9
description
Transcript of Amilase dan gama gt
Amilase&
γ-glutamyltransferase
Arini
Neni anggraeni
Pendahuluan
•Katalisator atau senyawa yang mempercepat proses reaksitanpa habis bereaksi.
Enzim
•Molekul yang menurunkanaktivitas enzimInhibitor
•Senyawa yang meningkatkanaktivitas enzim.Aktivator
Pembahasan
D i b e d a k a n m e n j a d i t i g a
a l f a - a m i l a s e , b e t a - a m i l a s e d a n g l u k o a m i l a s e
S u m b e r A m i l a s e
Amilase yang dihasilkan di pankreas biasa
disebut amilase pankreas
Untuk menghidrolisis serat, glikogen dan karbohidrat
kecuali selulosa
Am i l a s eTipe reaksi memutuskan ikatan kimia
dengan penambahan air
Dihasilkan oleh kelenjar ludah di
mulut dan kelenjar pankreas
Amilase
• Salah satu enzim yang berperan dalam
proses degradasi pati, sejenis makromolekul
karbohidrat
α- amilase
• Enzim golongan hidrolase kelas 14 yang
digunakan dalam proses sakarifikasi pati
(sejenis karbohidrat).
β-amilase
• Salah satu enzim kelas 15 yang
berperan dalam proses sakarifikasi pati
(sejenis karbohidrat).
Glukoamilase
Tempat Kerja dan Cara Kerja
Amilase
α-amilase
• Aktif bekerja pada
kisaran suhu 25 C
– 95 C.
• Penambahan ion
Ca dan Cl aktivitas
kerja dan menjaga
kestabilan enzim
ini.
β-amilase
• Memotong ikatan
glikosidik pada
gugus
amilosa, amilopektin,
dan glikogen.
Glukoamilosa
• Memotong ikatan
alfa-1,4 pada
molekul pati.
• Hasil utama
pemecahan adalah
glukosa
Masa l a h Kl i n i s
Peningkatan
Pankreatitis akut, obstruksi
duktus
pankreas, penggunaan
alkohol, gondok, penyakit
ginjal dan tukak lambung
Penurunan
Kerusakan hati
atau pankreatitis
serta fibrosis kistik.
γ-glutamyltransferase
Definisi
• Enzim yang mengkatalisis pemindahan gugus γ -glutamil dari
suatu peptida yang mengandung gugus tersebut, misalnya
glutation, ke peptida lain atau ke asam amino.
Tempat
• Di hati dan ginjal, sementara dalam jumlah yang rendah
ditemukan dalam limpa, kelenjar prostat dan otot jantung.
Peninggian aktivitas GGT dalam serum akanmempunyai nilai diagnostik yang lebih besarbila dihubungkan dengan aktivitas enzim-enzim lainnya. Misalnya pada karsinomapankreas aktivitas GGT meningkat tanpapeninggian enzim-enzim transaminase (GOT dan GPT). Bila transaminase jugameninggi, yang harus dipikirkan adalahadanya penyakit hati yang akut
γ - g lu tamyl t ransfe rase
Pemeriksaan laboratorium
Pemeriksaan Amilase
Salah satu pemeriksaan untuk menunjangdiagnosis penyakit yang berhubungandengan kerusakan endokrin, pankreas
Metode
Kinetik
(Para-Nitro Phenyl Glucose 7/PNPG7)
Peme r i ksaan Labo ra t o r i um
Amil as e• Prinsip :
Dalam suasana netral, alfa amilase mengkatalisis reaksi hidrolisis
PNPG7 menjadi PNPGn dan glukosa primer. PNPGn yang
terbentuk dihidrolisis dengan bantuan enzim glukoamilase
menghasilkan PNPG1 dan glukosa polimer. PNPG1 yang terbentuk
dikatalisis oleh glukosidase menghasilkan p-nitrofenol dan glukosa.
Aktivitas katalitik amilase sebanding dengan terbentuknya p-
nitrofenol yang dapat ditentukan secara kinetik pada panjang
gelombang 405 nm, pada fotometer clinicon 4010 atau microlab
300.
Glukoamilase
Glukosa Oksidase
PNPG 7
Alat & bahan
Alat :
Fotometer 4010, Microlab 300.
Clinipette 20 μL dan 1000 μL
Cuvette
Tabung Khan
Tip (kuning dan biru)
Tissue
Bahan :
Sampel (serum)
Pereaksi, terdiri dari :
PNPG7 1,2 mmol/L
Glucosidase 25.000 IU/L
Glucoamilase 10.000 IU/L
NaCl 50 mmol/L
CaCl2 1 mmol/L
Hepes Buffer 50 mmol/L
pH 7,2
Cara Ker j a
1.Pipet ke dalam tabung sebanyak 20 μL serum
2.Tambahkan 1000 μL larutan pereaksi
3.Campur sampai homogeny
4.Inkubasi selama satu menit
5.Baca pada fotometer clinicon 4010 atau microlab
300, dengan program kinetik (K20 atau K60) pada
panjang gelombang 405 nm.
Nila i Rujukan
Suhu Serum
300C ≤ 85 IU/L
370C ≤ 115 IU/L
Metode Pemeriksaan GGT
Penunjang diagnosis penyakit hati alkoholik atau
penyakit hati toksis karena zat kimia dan obat
• Kinetik
• Gamma glutamil p-nitroanilida/GPNAMetode
• Dalam suasana basa GGT mengkatalis
reaksi L-Gamma Glutamil p-Niroanilida
dengan glisilglisin menjadi L-Gamma
glutamil glisilglisin dan p-nitroanilida.
Prinsip
Alat dan bahan
• Fotometer 4010,
Spektrofotometer
• Clinipette 50 μL dan 1000 μL
• Cuvette
• Tabung Khan
• Tip (kuning dan biru)
• Tissue
• Sampel (serum)
• Pereaksi GGT, terdiri dari :
• Reagen 1 (buffer)
Glisilglisin 62 mmol/L
TRIS buffer pH 8,1 95 mmol/L
• Reagen 2 (substrat)
L-G-Glutamil p-Nitroanilida2,0
mmol/L
Nila i ru jukan
Jenis Kelamin Nilai Normal
Laki-laki 2 – 30 IU/L
Perempuan 1 – 24 IU/L
Kesimpu lan
Peningkatan kadar amilase dalam serum dapatmengindikasikan gangguan yang terjadi padapankreas, endokrin, dan jaringan spesifiklainnya.
Pemeriksaan kadar amilase dapat di lakukandengan metode kinetik (PNPG7) denganmenggunakan fotometer pada panjanggelombang 405 nm.
Pemeriksaan GGT dapatdilakukan dengan metodekinetik (GPNA) denganmenggunakan fotometeratau spektrofotometer padapanjang gelombang 405 nm.