Ο ΠΙΘΑΝΟΣ ΡΟΛΟΣ ΤΗΣ ΟΔΟΥ Ο ΠΙΘΑΝΟΣ ΡΟΛΟΣ ΤΗΣ ΟΔΟΥ ΤΩΝ ΛΕΚΤΙΝΩΝ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΟΣ ΤΩΝ ΛΕΚΤΙΝΩΝ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΟΣ

ΣΤΟ ΑΝΟΣΟΠΟΙΗΤΙΚΟ ΣΥΣΤΗΜΑ ΣΤΟ ΑΝΟΣΟΠΟΙΗΤΙΚΟ ΣΥΣΤΗΜΑ ΤΕΛΕΙΟΜΗΝΩΝ ΝΕΟΓΝΩΝ ΤΕΛΕΙΟΜΗΝΩΝ ΝΕΟΓΝΩΝ

ΜΕ ΕΝΔΟΜΗΤΡΙΑ ΥΠΟΛΕΙΠΟΜΕΝΗ ΜΕ ΕΝΔΟΜΗΤΡΙΑ ΥΠΟΛΕΙΠΟΜΕΝΗ ΑΥΞΗΣΗΑΥΞΗΣΗ

Μπριάνα Δ¹., Λιόση Σ.¹, Γουργιώτης Δ.², Μπούτσικου Μπριάνα Δ¹., Λιόση Σ.¹, Γουργιώτης Δ.², Μπούτσικου Μ.¹, Μπάκα Στ.¹, Μαρμαρινός Α.², Χασιάκος Δ.¹, Μ.¹, Μπάκα Στ.¹, Μαρμαρινός Α.², Χασιάκος Δ.¹,

Μαλαμίτση-Πούχνερ Α.¹Μαλαμίτση-Πούχνερ Α.¹

Νεογνολογικό Τμήμα, Β΄Μαιευτική-Γυναικολογική Κλινική Πανεπιστημίου Αθηνών

Ερευνητικά Εργαστήρια, Β΄Παιδιατρική Κλινική Πανεπιστημίου Αθηνών

Ενδομήτρια υπολειπόμενη Ενδομήτρια υπολειπόμενη αύξησηαύξηση ( ( ΕΥΑΕΥΑ))

• Αδυναμία του εμβρύου να φτάσει το Αδυναμία του εμβρύου να φτάσει το προκαθορισμένο (αναμενόμενο) προκαθορισμένο (αναμενόμενο) ενδογενές δυναμικό αύξησης ενδογενές δυναμικό αύξησης

• Συνέπεια ανατομικών ανωμαλιών ή/και Συνέπεια ανατομικών ανωμαλιών ή/και

λειτουργικών διαταραχών της μητρο-λειτουργικών διαταραχών της μητρο-πλακουντο-εμβρυϊκής μονάδας πλακουντο-εμβρυϊκής μονάδας

• Σχετίζεται με αυξημένη νοσηρότητα και Σχετίζεται με αυξημένη νοσηρότητα και θνησιμότητα στην ενδομήτρια και θνησιμότητα στην ενδομήτρια και εξωμήτρια ζωήεξωμήτρια ζωή

ΕΥΑΕΥΑΣχετίζεται μεΣχετίζεται με

• μειωμένη ανοσολογική απάντηση μειωμένη ανοσολογική απάντηση

• διαταραχές του ανοσολογικού συστήματοςδιαταραχές του ανοσολογικού συστήματος↓↓

μειωμένες συγκεντρώσειςμειωμένες συγκεντρώσεις IgGIgGφαγοκυτταρικού δείκτη φαγοκυτταρικού δείκτη λυσοζύμης λυσοζύμης ουδετεροφίλωνουδετεροφίλων

• συχνότερα επιβεβαιωμένη με καλλιέργειες συχνότερα επιβεβαιωμένη με καλλιέργειες σηψαιμία σηψαιμία

Νεογνά και ανοσίαΝεογνά και ανοσία

• ανεπάρκεια κυτταρικής και χυμικής ανεπάρκεια κυτταρικής και χυμικής ανοσίας ανοσίας

• γενετικά καθορισμένοι εγγενείς γενετικά καθορισμένοι εγγενείς μηχανισμοί άμυναςμηχανισμοί άμυνας

Εγγενής ανοσιακή απάντηση Εγγενής ανοσιακή απάντηση (Ι(Ι nnate immune responsennate immune response ))

• Πρώτη γραμμή άμυνας Πρώτη γραμμή άμυνας νεογέννητου κατά παθογόνων νεογέννητου κατά παθογόνων μικροοργανισμώνμικροοργανισμών

• Ενεργοποιεί και κατευθύνει την Ενεργοποιεί και κατευθύνει την επίκτητη ανοσιακή απάντησηεπίκτητη ανοσιακή απάντηση

Σύστημα συμπληρώματοςΣύστημα συμπληρώματος

• Γέφυρα ανάμεσα στην εγγενή και Γέφυρα ανάμεσα στην εγγενή και επίκτητη ανοσιακή απάντησηεπίκτητη ανοσιακή απάντηση

• Σχετίζεται άμεσα με αγγειακή βλάβη Σχετίζεται άμεσα με αγγειακή βλάβη και υπολειπόμενη αύξησηκαι υπολειπόμενη αύξηση

Τρεις οδοί ενεργοποίησης Τρεις οδοί ενεργοποίησης συμπληρώματοςσυμπληρώματος

Οδός των λεκτινών για Οδός των λεκτινών για ενεργοποιήση ενεργοποιήση συμπληρώματοςσυμπληρώματος• Εκπροσωπεί σημαντικό τμήμα της εγγενούς Εκπροσωπεί σημαντικό τμήμα της εγγενούς

ανοσίας ανοσίας

• Αποτελείται από Αποτελείται από - Λεκτίνη συνδέουσα την μαννόζη Λεκτίνη συνδέουσα την μαννόζη mannose-binding lectin (MBL)mannose-binding lectin (MBL)- H-f icolin H-f icolin - L-f icolinL-f icolin- Μ-Μ- ficolinf icolin

Αναγνωρίζουν διάφορους μικροοργανισμούςΑναγνωρίζουν διάφορους μικροοργανισμούς

Ενεργοποιούν το συμπλήρωμα, συνδεόμενες μεΕνεργοποιούν το συμπλήρωμα, συνδεόμενες με MBL-associated serine protease-2 (MASP-MBL-associated serine protease-2 (MASP-2)2)

MBLMBL• Συντίθεται κυρίως στο ήπαρΣυντίθεται κυρίως στο ήπαρ

• Συνδέεται με γλυκοπρωτείνες στην επιφάνεια Συνδέεται με γλυκοπρωτείνες στην επιφάνεια παθογόνων βακτηρίων, ιών και μυκήτωνπαθογόνων βακτηρίων, ιών και μυκήτων

• Συγκεντρώσεις Συγκεντρώσεις MBL MBL μετρούνται στον ομφάλιο μετρούνται στον ομφάλιο λώρο και σχετίζονται θετικά με την ηλικία κύησηςλώρο και σχετίζονται θετικά με την ηλικία κύησης

• Ανεπάρκεια MBL σχετίζεται με Ανεπάρκεια MBL σχετίζεται με ↑↑ ευπάθεια σε ευπάθεια σε λοιμώξεις λοιμώξεις

• Χαμηλές συγκεντρώσεις Χαμηλές συγκεντρώσεις MBL MBL στον ομφάλιο λώρο στον ομφάλιο λώρο έχουν συσχετιστεί με έχουν συσχετιστεί με ↑↑ εμφάνιση λοιμώξεων κατά εμφάνιση λοιμώξεων κατά την παιδική ηλικίατην παιδική ηλικία

Στον άνθρωποΣτον άνθρωπο ::- L-f icolinL-ficolin- M-ficolin M-ficolin - H-ficolin H-ficolin

• Έχουν κοινή οδό ενεργοποίησης με Έχουν κοινή οδό ενεργοποίησης με MBLMBL

• Αδιευκρίνιστος ακόμα ο ρόλος τους στην Αδιευκρίνιστος ακόμα ο ρόλος τους στην σηψαιμίασηψαιμία

FicolinsFicolins

Ficolins Ficolins

• Χαμηλές συγκεντρώσεις Χαμηλές συγκεντρώσεις L-Ficolin L-Ficolin σχετίζονται με πρόωρα νεογνά και σχετίζονται με πρόωρα νεογνά και περιγεννητικές λοιμώξειςπεριγεννητικές λοιμώξεις

• Χαμηλές συγκεντρώσεις Χαμηλές συγκεντρώσεις H-Ficolin H-Ficolin στον στον ομφάλιο λώρο σχετίζονται με αυξημένη ομφάλιο λώρο σχετίζονται με αυξημένη πιθανότητα για σηψαιμία από πιθανότητα για σηψαιμία από gram gram + + βακτήριαβακτήρια

Σκοπός ΙΣκοπός Ι

• Διερεύνηση πιθανού ρόλου Διερεύνηση πιθανού ρόλου οδού των λεκτινών συμπληρώματος οδού των λεκτινών συμπληρώματος στο ανοσοποιητικό σύστημα νεογνών στο ανοσοποιητικό σύστημα νεογνών με ΕΥΑ και ΚΒΓ με ΕΥΑ και ΚΒΓ με προσδιορισμό των επιπέδων με προσδιορισμό των επιπέδων MBLMBL , , HH-- ficolinficolin και και LL -- f icolinficolin

στον ομφάλιο λώροστον ομφάλιο λώρο

Σκοπός ΙΙΣκοπός ΙΙ

• Περιγραφή πιθανών συσχετίσεων Περιγραφή πιθανών συσχετίσεων επιπέδων επιπέδων MBLMBL , , HH-- ficolinficolin και και LL -- f icolinficolin μεταξύ τους, και με δημογραφικές μεταξύ τους, και με δημογραφικές παραμέτρους των νεογνώνπαραμέτρους των νεογνών ::

-- ηλικία μητέραςηλικία μητέρας - τόκος - τόκος

-- είδος τοκετού είδος τοκετού - ηλικία κυησης - ηλικία κυησης - φύλο- φύλο

Υλικό Υλικό

• 11 54 υγιείς, μονήρεις, τελειόμηνες κυήσεις54 υγιείς, μονήρεις, τελειόμηνες κυήσεις

- - 104 ΚΒΓ (βάρος πλακούντα104 ΚΒΓ (βάρος πλακούντα : : 480-621γρ.)480-621γρ.)- - 5050 ΕΥΑ ΕΥΑ (( ασύμμετρη – βάρος πλακούνταασύμμετρη – βάρος πλακούντα

230230 -400-400γρ.γρ. ))

• Apgar scores:Apgar scores: >> 8 8 στο 1στο 1 οο και 5 και 5 οο λεπτό λεπτό

EYA:EYA: ≤5≤5 ηη Ε.Θ. σύμφωνα με πρόγραμμα Ε.Θ. σύμφωνα με πρόγραμμα GROW GROW

Gestation Related Optimal Gestation Related Optimal Weight (GROW)Weight (GROW) computer-computer-

generated programmegenerated programme

www.gestation.net

Custom baseDaysBirthweight (g)Gestation: WeeksBooking weight (kg)Maternal height (cm)SexEthnic groupParity at booking56Customised centile =

Αίτια ΕΥΑΑίτια ΕΥΑ

• ΠροεκλαμψίαΠροεκλαμψία ( ( n=6 )n=6 ) • Υπέρταση κυήσεωςΥπέρταση κυήσεως (n=5 (n=5 ))• Διάφορες παθήσειςΔιάφορες παθήσεις : :

-ΣΔ τύπου I (-ΣΔ τύπου I ( n=5)n=5)-σιδηροπενική αναιμία-σιδηροπενική αναιμία (n=3)(n=3)-υποθυρεοειδισμός-υποθυρεοειδισμός (n=7)(n=7)

• Μητέρα καπνίστριαΜητέρα καπνίστρια ( n=24 ) ( n=24 )

Δημογραφικά στοιχείαΔημογραφικά στοιχεία

ΕΥΑΕΥΑ ΚΒΓΚΒΓ

Ηλικία κυήσεωςΗλικία κυήσεως ( ( εβδομάδεςεβδομάδες )) 3838 .36.36 ±1±1 .27 * .27 * 33 8.988.98 ±± 1.07*1.07*

Βάρος γέννησηςΒάρος γέννησης ( ( γρ.γρ. )) 2525 0707 ±± 264.5 * 264.5 * 33 310310 ±± 310.5310.5 **

Προτυποποιημένη Ε.Θ.Προτυποποιημένη Ε.Θ. 33 .0 (0-5) .0 (0-5) 43.5 43.5 (20-89)(20-89)

ΦύλοΦύλο ( ( άρρενάρρεν // θήλυθήλυ )) 21/29 21/29 66/4466/44

Είδος τοκετούΕίδος τοκετού ( ( ΚΤΚΤ /E/E ΚΤΚΤ)**)** 22/28 22/28 77/33 77/33

ΤόκοςΤόκος ( ( ΙοςΙος / / άλλοςάλλος )) 3131 // 19 19 76/3476/34

** Μέσες τιμέςΜέσες τιμές ±± σταθερές αποκλίσειςσταθερές αποκλίσεις**** ΚΤΚΤ : : κολπικός τοκετόςκολπικός τοκετός / E/ EΚΤΚΤ: : εκλεκτική καισαρική τομήεκλεκτική καισαρική τομή

Μέθοδοι Μέθοδοι • Συλλογή αίματος από διπλά απολινωμένο Συλλογή αίματος από διπλά απολινωμένο

ομφάλιο λώροομφάλιο λώρο ( ( μικτό αρτηριοφλεβικόμικτό αρτηριοφλεβικό ) )

• Προσδιορισμός συγκεντρώσεων Προσδιορισμός συγκεντρώσεων MBL, H- & L-FicolinMBL, H- & L-Ficolin με ανοσοενζυμική με ανοσοενζυμική μέθοδομέθοδο ELISA (HBT Hycult Biotechnology ELISA (HBT Hycult Biotechnology b.v , Uden, The Netherlands)b.v , Uden, The Netherlands)

• Στατιστική ανάλυσηΣτατιστική ανάλυση – παραμετρικές – παραμετρικές μέθοδοιμέθοδοι

Αποτελέσματα ΙΑποτελέσματα Ι

• Επίπεδα ορού Επίπεδα ορού MBLMBL στον ομφάλιο λώροστον ομφάλιο λώρο :: ελαττωμένα σε ΕΥΑ, ελαττωμένα σε ΕΥΑ, σε σύγκριση με ΚΒΓ σε σύγκριση με ΚΒΓ ((pp=0.029)=0.029)

AGA CASES IUGR CASES

M

BP

CO

NC

EN

TR

AT

ION

S (

ng

/ml)

5000

4000

3000

2000

1000

0

Αποτελέσματα ΙΙΑποτελέσματα ΙΙ

Δεν διαπιστώθηκαν Δεν διαπιστώθηκαν διαφορές στα διαφορές στα επίπεδα ομφαλίου επίπεδα ομφαλίου λώρου λώρου HH- και - και LL -- ficolinficolin μεταξύ των ομάδων μεταξύ των ομάδων ΕΥΑ και ΚΒΓΕΥΑ και ΚΒΓ

AGA CASES IUGR CASES

L-F

ICO

LIN

CO

NC

EN

TR

AT

ION

S (

ng

/ml)

5000

4600

4200

3800

0

AGA CASES IUGR CASES

H-F

ICO

LIN

CO

NC

EN

TR

AT

ION

S (

ng

/ml)

20

19

18

17

16

15

14

13

0

Αποτελέσματα ΙΙΙΑποτελέσματα ΙΙΙ

Στην ομάδα με Στην ομάδα με ΕΥΑ, τα επίπεδα ΕΥΑ, τα επίπεδα MBLMBL ομφαλίου ομφαλίου λώρου λώρου συσχετίστηκαν συσχετίστηκαν αρνητικά με τα αρνητικά με τα επίπεδα επίπεδα LL -- ficolin f icolin

(( rr=-0.442 =-0.442 pp=0.001)=0.001)

Αποτελέσματα ΙΑποτελέσματα Ι VV Η επίδρασηΗ επίδραση ::

-- ηλικίας μητέρας ηλικίας μητέρας - - αριθμού προηγηθεισών κυήσεωναριθμού προηγηθεισών κυήσεων - - ηλικίας κύησηςηλικίας κύησης - φύλου- φύλου- βάρους γέννησης- βάρους γέννησης- - προτυποποιημένης προτυποποιημένης E.E. Θ.Θ.

στα επίπεδα ομφαλίου λώρου στα επίπεδα ομφαλίου λώρου MBLMBL , , HH- και - και LL -- ficolinficolin δεν ήταν σημαντική. δεν ήταν σημαντική.

ΣυμπεράσματαΣυμπεράσματα ΙΙ

Τα σχετικά ελαττωμένα επίπεδα Τα σχετικά ελαττωμένα επίπεδα MBLMBL στα στα έμβρυα με ΕΥΑ έμβρυα με ΕΥΑ πιθανώς αντιπροσωπεύουν πιθανώς αντιπροσωπεύουν έναν επιπλέον μηχανισμό ανοσοανεπάρκειας, έναν επιπλέον μηχανισμό ανοσοανεπάρκειας, μέσω του οποίου η ΕΥΑ μέσω του οποίου η ΕΥΑ προδιαθέτει σε αυξημένη ευπάθεια στην προδιαθέτει σε αυξημένη ευπάθεια στην ανάπτυξη λοιμώξεωνανάπτυξη λοιμώξεων

Συμπεράσματα ΙΙΣυμπεράσματα ΙΙH H απουσία στατιστικά σημαντικής διαφοράς απουσία στατιστικά σημαντικής διαφοράς

στις συγκεντρώσεις στις συγκεντρώσεις H- H- καικαι L- f icol in L- f icol in

στον ομφάλιο λώρο μεταξύ ομάδων με ΕΥΑ και ΚΒΓ στον ομφάλιο λώρο μεταξύ ομάδων με ΕΥΑ και ΚΒΓ

υποδηλώνει πως δεν σχετίζονται άμεσα υποδηλώνει πως δεν σχετίζονται άμεσα

με την παθοφυσιολογία της ΕΥΑ. με την παθοφυσιολογία της ΕΥΑ.

↓↓

Πιθανώς η οδός των λεκτινών Πιθανώς η οδός των λεκτινών

για την ενεργοποίηση του συμπληρώματος ,για την ενεργοποίηση του συμπληρώματος ,

όσον αφορά τον ρολο των όσον αφορά τον ρολο των f icolinsf icolins ,,

δεν είναι πλήρως λειτουργική στη γέννησηδεν είναι πλήρως λειτουργική στη γέννηση

Συμπεράσματα Συμπεράσματα Ι ΙΙΙ ΙΙ

Η αρνητική συσχέτιση Η αρνητική συσχέτιση μεταξύ επιπέδων μεταξύ επιπέδων MBLMBL και και LL -- f icolinficolin στην ομάδα με ΕΥΑστην ομάδα με ΕΥΑ

υποδηλώνει πιθανώς υποκείμενη υποδηλώνει πιθανώς υποκείμενη ανοσολογική διαταραχή στην ΕΥΑ ανοσολογική διαταραχή στην ΕΥΑ και χρήζει περαιτέρω διερεύνησης.και χρήζει περαιτέρω διερεύνησης.

ευχαριστώ