ò ã¿ 0k a¿N º % Fkd ÙÀ § ã 0!

中国药房 2021年第32卷第2期 China Pharmacy 2021 Vol 32 No 2

基于色差原理分析不同产地桑白皮有效成分含量与颜色的相关性Δ

高原方妍单梦瑶董金香（长春中医药大学药学院长春 130117）

中图分类号 R282 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）02-0213-07

DOI 106039jissn1001-040820210215

摘要目的研究桑白皮药材有效成分含量与颜色的相关性并对不同产地样品进行指纹图谱和聚类分析为该药材质量控制

及品质评价提供依据方法分别采用高效液相色谱法（HPLC）和盐酸-镁粉反应比色法测定桑白皮中桑根皮素和总黄酮的含量

肉眼观察桑白皮颜色采用色差仪测定其色度值（Lab）并计算总色差值（Eab）利用SPSS 210软件对桑根皮素和总黄酮的

含量与各颜色指标（LabEab）进行Pearson相关性分析采用HPLC法建立3个不同产地共20批桑白皮药材的指纹图谱

并进行相似度分析采用SPSS 210软件对20批样品进行K-均值聚类分析（基于桑根皮素总黄酮的含量及颜色指标）和系统聚

类分析（基于指纹图谱共有峰相对峰面积）结果桑白皮中桑根皮素和总黄酮的平均含量分别为 0096 0～0618 6 mgg

048～151其各颜色指标均呈显著相关（P＜001）其中LbEab值越小a值越大则桑根皮素含量越高LbEab

值越大a值越小则总黄酮含量越高20批药材样品的指纹图谱与对照图谱的相似度为0883～0983标定了13个共有峰并指

认1号峰为绿原酸K-均值聚类分析结果显示20批样品可聚为2类Ⅰ类以安徽产样品为主其桑根皮素含量较高总黄酮含量

偏低颜色较暗偏黄棕色Ⅱ类以四川贵州产样品为主其桑根皮素含量偏低总黄酮含量较高颜色较明亮偏黄白色系统聚

类分析结果与其较为一致结论桑白皮颜色与其桑根皮素总黄酮含量密切相关颜色偏黄棕色的桑白皮中桑根皮素含量较高

颜色偏黄白色的桑白皮中总黄酮含量较高

关键词桑白皮颜色桑根皮素总黄酮指纹图谱色差原理聚类分析

Correlation Analysis between Active Ingredient Content and Color of Morus alba from Different Producing

Areas Based on Color Difference Principle

GAO YuanFANG YanSHAN MengyaoDONG Jinxiang（College of PharmacyChangchun University of

TCMChangchun 130117China）

ABSTRACT OBJECTIVETo study the correlation between the contents of active ingredients and the color of Morus albato

establish fingerprint and conduct cluster analysis of samples from different producing areasso as to provide reference for its

quality control and evaluation METHODSHPLC and HCl-Mg reaction colorimetry were used to determine the contents of

morusin and total flavonoids in M alba The color of M alba was observed by naked eyeand chromaticity values（Lab）

were measured by color difference meter and color aberration（Eab）were calculated Pearson correlation of the contents of morusin

and total flavonoids with color indicators（LabEab）were analyzed by SPSS 210 software HPLC method was used to

establish the fingerprint of 20 batches of M alba from 3 different producing areasand the similarity analysis was carried out

K-means cluster analysis（based on the contents of morusin and total flavonoids and corlor index）and hierarchical cluster analysis

（based on relative peak area of common peaks in fingerprint）were performed for 20 batches of samples by SPSS 210 software

RESULTSThe average contents of morusin and total flavonoids in M alba were 0096 0-0618 6 mgg048 -151which

were significantly correlated with each color index（P＜001） The smaller LbEab and the larger awerethe higher the

Δ 基金项目吉林省重大科技专项（No20200504005YY）吉林省

科技发展计划项目（No20200404091YY）

硕士研究生研究方向中药制剂新技术电话0431-

86172786E-mail1090799874qqcom

通信作者教授硕士生导师研究方向中药制剂新技术电

话0431-86172786E-mail741833543qqcom

[12] 张宏建 Lab 色彩模式在图像处理中的应用[J]福建电

脑201127（1）146-147

[13] 张雪李晓庆王云等焦栀子炒制过程中HPLC图谱变

化与外观颜色的动态关联研究 [J]中草药201849

（17）4029-4037

[14] 张崇佩张依欣李潮等不同年份吴茱萸UPLC指纹图

谱及多成分化学模式识别研究 [J]中草药201950

（11）2700-2707

[15] 徐芳辉胡志成易欣宜等 5-羟甲基糠醛在中药质量

标准中的应用现状[J]中国医药导报201714（15）

47-50

[16] 吴翠中药变色和贮藏过程中5-羟甲基糠醛等理化指标

的分析研究[D]北京中国中医科学院2018（收稿日期2020-09-14 修回日期2020-12-02）

（编辑陈宏）

1050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882105088210508821050882

middotmiddot213

China Pharmacy 2021 Vol 32 No 2 中国药房 2021年第32卷第2期

桑白皮为桑科植物桑Morus alba L的干燥根皮具

有泻肺平喘利水消肿的功效 [1－2]主要分布于我国河

南安徽四川贵州等地现代研究表明桑白皮中含

有的桑根皮素（又名ldquo桑辛素rdquo）具有抗肿瘤镇痛抗惊

厥等药理作用对人体免疫缺陷病毒 1型 M 组 B 亚型

（HIV-1SF162）感染具有显著的抑制活性[3]此外总黄酮

类成分为桑白皮中的主要药效成分具有降血糖降血

脂镇咳平喘抗氧化镇痛抗炎减轻肝损伤等药理作

用[4]桑白皮因其广泛的药理作用于2002年被列入原

卫生部发布的保健食品类中药名单[5]

性状鉴定是中药鉴定的主要方法之一[6]桑白皮的

传统鉴别是ldquo以根皮色白皮厚味甘者为佳rdquo[7]颜色作

为性状鉴别的要素之一与药材的内在质量关系密切

具有简单直观的特点但同时也存在易受多种外界因

素（如视觉光学生理心理等因素）的影响而主观性过

大的缺点[8]因此建立一种客观可量化的颜色分析方法

对快速鉴定药材质量显得尤为重要本研究基于色差

原理通过色差仪对桑白皮药材外观颜色进行量化分析

（其测定值Lab分别代表明暗度红-绿色度黄-蓝

色度[9]）并探讨药材外观颜色与其主要药效成分（桑根

皮素总黄酮）含量之间的相关性同时建立桑白皮药

材指纹图谱并进行聚类分析旨在为其质量控制和品质

评价提供依据

1 材料11 仪器

实验使用的主要仪器包括Agilent 1260型高效液

相色谱（HPLC）仪和L5S型紫外-可见分光光度计（上海

仪电分析仪器有限公司）NH310型电脑色差仪（深圳三

恩驰科技有限公司）EL204型电子天平MS105型十万

分之一电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]

FW177型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）

KQ-500B 型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公

司）等

12 药品与试剂

桑根皮素对照品（批号AF8051823纯度98）购自

成都埃法生物科技有限公司桑根酮 C 对照品（批号

18040211纯度ge98）购自上海圻明生物科技有限公

司绿原酸对照品（批号 110753-201817纯度 968）购

自中国食品药品检定研究院镁粉（批号20120312）购自

天津市福晨化学试剂厂磷酸甲醇乙腈均为色谱纯

盐酸乙醇均为分析纯水为纯净水

20批桑白皮药材收集自四川安徽贵州等 3个产

地经长春中医药大学药学院翁丽丽教授鉴定为桑科植

物桑M alba L的干燥根皮其具体信息见表1

表1 桑白皮药材信息

Tab 1 Information of M alba

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

产地四川省双流县四川省双流县四川省双流县四川省双流县四川省双流县四川省双流县安徽省太和县安徽省亳州市安徽省亳州市安徽省亳州市

资源类型野生野生野生野生野生野生野生野生野生野生

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

产地安徽省亳州市安徽省亳州市安徽省亳州市贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县


2 方法与结果21 桑根皮素的含量测定

采用HPLC法测定桑白皮药材中桑根皮素的含量

211 对照品溶液的配制精密称取桑根皮素对照品

适量加乙醇溶解制成质量浓度为 21795 2 μgmL的对

照品溶液

212 供试品溶液的配制精密称取桑白皮粉末（过三

号筛下同）05 g置于具塞锥形瓶中精密加入乙醇 25

mL密塞后称定质量超声（频率40 kHz功率500 W）处

理 30 min冷却后再次称定质量用乙醇补足减失的质

量摇匀滤过取续滤液即得

213 色谱条件和系统适用性考察以Agilent 5 TC-C18

（250 mmtimes46 mm5 μm）为色谱柱乙腈 -水（58 ∶ 42VV）为流动相检测波长为270 nm流速为1 mLmin柱

温为25 进样量为10 μL取ldquo211rdquoldquo212rdquo项下桑根

皮素对照品和供试品溶液（编号 S7）以及空白溶剂（乙

醇）进样测定结果显示桑根皮素的理论板数大于

10 000分离度大于15且溶剂无干扰详见图1（空白溶

剂图略）

content of morusin wasthe higher the value of LbEab and the smaller the value of awerethe higher the content of total

flavonoids was The similarity between the fingerprints of 20 batches of samples and the control ranged from 0883 to 098313

common peaks were demarcatedand No1 peak was identified as chlorogenic acid K-means cluster analysis showed that 20

batches of samples could be divided into 2 categories Category Ⅰ were mainly from Anhui province with higher content of

morusinlower content of total flavonoidsdarker and yellowish brown colorcategory Ⅱ were mainly from Sichuan province and

Guizhou provincewith lower content of morusinhigher content of total flavonoidslighter and yellowish white color The results

of hierarchical cluster analysis were consistent with the results CONCLUSIONSThe color of M alba is closely related to the

contents of morusin and total flavonoids The content of morusin in yellow-brown M albais is higherwhile the content of total

flavonoids in yellow-white M albais is higher

KEYWORDS Morus albaColorMorusinTotal flavonoidsFingerprint Color difference of principleCluster analysis

middotmiddot214


214 线性关系考察分别精密吸取ldquo211rdquo项下桑根

皮素对照品溶液 0062 501250250512 mL加乙

醇定容至2 mL摇匀即得系列线性溶液取上述系列

线性溶液各适量按ldquo213rdquo项下色谱条件进样测定记

录色谱图以质量浓度（XμgmL）为横坐标峰面积

（Y）为纵坐标进行线性回归得回归方程 Y＝84565X+

1181 5（r＝0999 9）表明桑根皮素质量浓度在0681 1～

21795 2 μgmL 范围内与色谱峰峰面积呈良好的线性

关系

215 精密度试验取同一份供试品溶液（编号S7）按

ldquo213rdquo项下色谱条件连续进样测定 6次记录峰面积

结果桑根皮素峰面积的RSD为 023（n＝6）表明方

法精密度良好

216 重复性试验取桑白皮药材粉末（编号S7）适量

共 6份按ldquo212rdquo项下方法平行制备供试品溶液再按

ldquo213rdquo项下色谱条件进样测定记录峰面积并按外标法

计算含量结果桑根皮素含量的 RSD 为 087（n＝

6）表明方法重复性良好

217 稳定性试验取桑白皮药材粉末（编号S7）适量

按ldquo212rdquo项下方法制备供试品溶液分别于室温下放置

024810122448 h时按ldquo213rdquo项下色谱条件进样

测定记录峰面积结果桑根皮素峰面积的 RSD 为

136（n＝8）表明供试品溶液在室温下放置 48 h 内

稳定

218 加样回收率试验取已知桑根皮素含量的桑白

皮药材粉末（编号S7）适量共6份均按1 ∶1质量比精密

加入桑根皮素对照品溶液适量然后按ldquo212rdquo项下方法

平行制备供试品溶液再按ldquo213rdquo项下色谱条件进样测

定记录峰面积并计算加样回收率结果平均加样回

收率为 9680RSD为 143（n＝6）表明方法准确度

良好详见表2

表2 桑根皮素加样回收率试验结果（n＝6）

Tab 2 Results of recovery test of morusin（n＝6）

试验号

1

2

3

4

5

6

取样量g

0499 6

0499 8

0499 5

0500 4

0500 1

0500 7

已知含量μg

140635 4

140691 7

140607 3

140860 6

140776 2

140945 1

加入量μg

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

测得量μg

273847 5

271033 7

271967 7

272765 5

270353 7

275678 9

加样回收率

9779

9568

9643

9683

9512

9891

平均加样回收率

9680

RSD

143

219 样品中桑根皮素的含量测定取 20批桑白皮药

材粉末适量按ldquo212rdquo项下方法制备供试品溶液再按

ldquo213rdquo项下色谱条件进行测定记录峰面积并按外标法

计算含量每批样品平行测定 3次取平均值结果

20批桑白皮药材中桑根皮素的平均含量为 0096 0～

0618 6 mgg详见表3

表3 20批桑白皮药材样品中桑根皮素含量的测定结果

（n＝3）

Tab 3 Results of content determination of morusin in

20 batches of M alba（n＝3）

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

桑根皮素mgg

0170 1

0147 9

0096 0

0139 5

0105 2

0126 5

0281 0

0188 9

0238 2

0213 7

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

桑根皮素mgg

0203 7

0114 2

0200 6

0115 8

0158 4

0103 7

0618 6

0163 2

0142 9

0155 4

22 总黄酮的含量测定

由于桑白皮的黄酮类化合物结构中均存在异戊烯

基侧链故本研究以桑白皮中含量较高且结构中同样存

在异戊烯基的药效成分桑根酮C为指标采用盐酸-镁粉

反应比色法测定桑白皮药材中总黄酮的含量[10]

221 对照品溶液的配制精密称取桑根酮C对照品

适量加甲醇制成质量浓度为 0086 mgmL 的对照品

溶液

222 供试品溶液的配制精密称取桑白皮药材粉末

（过三号筛下同）05 g置于具塞锥形瓶中精密加入

50 mL 甲醇超声（频率 40 kHz功率 500 W）处理 60

min冷却至室温滤过并转移至 50 mL量瓶中加甲醇

定容至刻度摇匀即得[10－11]

223 显色方法精密吸取桑根酮C对照品溶液或者

供试品溶液 3 mL转移至含有 300 mg镁粉的具塞刻度

试管中将试管置于冷水浴（约15 ）中缓慢地精密加

入浓盐酸3 mL时时振摇待反应至不再产生气泡后

补加甲醇至10 mL摇匀于沸水浴中加热1 h迅速冷却

至室温补加甲醇至10 mL摇匀备测

224 检测波长的选择将桑根酮C对照品溶液和供

图1 桑根皮素的高效液相色谱图

Fig 1 HPLC chromatograms of morusin

0 5 10 15 20 25 30 35 40

tmin

A对照品溶液

40

30

20

10

0

mA

U

桑根皮素

0 5 10 15 20 25 30 35 40

tmin

B供试品溶液（编号S7）

40

30

20

10

0

mA

U

桑根皮素

middotmiddot215


试品溶液分别按ldquo223rdquo项下方法显色后在 200～600

nm波长范围内扫描结果桑根酮C对照品溶液和供

试品溶液在484 nm波长处均有最大吸收故选择该波长

作为总黄酮含量的检测波长详见图2

225 线性关系考察精密移取桑根酮C对照品溶液

102030354050 mL按ldquo223rdquo项下方法反应显

色后在484 nm波长处测定吸光度以桑根酮C质量浓

度（XμgmL）为横坐标吸光度（Y）为纵坐标进行线性

回归得回归方程Y＝0015 4X－0017 6（r＝0999 2）表

明桑根酮C质量浓度在 860～4300 μgmL范围内与吸

光度呈良好的线性关系

226 精密度试验精密移取同一份供试品溶液（编

号 S7）3 mL共 6份按ldquo223rdquo项下方法显色后在 484

nm波长处测定吸光度结果吸光度的RSD为 358

（n＝6）表明方法精密度良好

227 重复性试验精密称取同一批桑白皮粉末（编

号 S7）适量共 6份按ldquo222rdquo项下方法制备供试品溶

液分别精密量取 3 mL按ldquo223rdquo项下方法显色后在

484 nm波长处测定吸光度并代入标准曲线方程计算总

黄酮含量结果总黄酮含量的RSD为 431（n＝6）

表明方法重复性良好

228 稳定性试验精密吸取桑根酮C对照品溶液和

供试品溶液（编号 S7）各 3 mL按ldquo223rdquo项下方法显色

后分别于室温下放置 020406080100120 min时

在484 nm波长处测定吸光度结果对照品溶液和供试

品溶液吸光度的 RSD 分别为 083060（n＝7）表

明两种溶液在显色后于室温下放置120 min内稳定

229 加样回收率试验精密称取已知总黄酮含量的

桑白皮粉末（编号 S7）约 05 g共 6份均按 1 ∶ 1质量比

精密加入桑根酮C对照品溶液适量然后按ldquo222rdquo项下

方法制备供试品溶液分别精密量取3 mL按ldquo223rdquo项

下方法显色后在484 nm波长处测定吸光度并计算加样

回收率结果总黄酮的平均加样回收率为 9832

RSD为225（n＝6）表明方法准确度良好详见表4

表4 总黄酮加样回收率试验结果（n＝6）

Tab 4 Results of recovery test of total flavonoids

（n＝6）

试验号

1

2

3

4

5

6

取样量g

0500 2

0499 9

0499 7

0499 7

0500 1

0500 3

已知含量mg

3331 6

3329 6

3328 3

3328 3

3330 9

3332 3

加入量mg

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

测得量mg

68882

6693 1

6750 5

6681 6

6807 8

6807 8

加样回收率

10162

9610

9778

9581

9934

9930


9832

RSD

225

2210 样品中总黄酮的含量测定取20批桑白皮药材

粉末适量按ldquo222rdquo项下制备供试品溶液分别精密量

取3 mL按ldquo223rdquo项下方法显色后在484 nm波长处测

定吸光度并代入标准曲线方程计算总黄酮含量每批

样品平行测定 3次取平均值结果20批桑白皮药材

中总黄酮的平均含量为048～151详见表5

表 5 20批桑白皮药材样品中总黄酮含量的测定结果

（n＝3）

Tab 5 Results of content determination of total flavo-

noids in 20 batches of M alba（n＝3）

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

总黄酮084

096

151

099

119

102

059

079

061

061

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

总黄酮062

114

063

101

086

138

048

084

097

092

23 桑白皮药材的颜色测定

采用肉眼观察并以色差仪测定桑白皮药材的颜色

231 样品颜色观察取桑白皮药材适量置白板上观

察颜色大致按浅黄白色黄白色浅黄棕色黄棕色棕

褐色等5个级别进行记录

232 色差仪测定条件取桑白皮样品粉末（过四号

筛下同）适量均匀平铺于粉末测试盒内直至装满盖

好盖玻片色差仪设置D65光源8度视角孔径8 mm

LED蓝光激发仪器误差值小于 04用黑白板校正仪

器后进行样品测定记录色度值（Lab其中L值越

大表示颜色越亮浅a值越大表示颜色越偏红b值越

大表示颜色越偏黄[9]）并计算总色差值（Eab）Eab＝

（L2+a2+b2）12

233 精密度试验取桑白皮样品粉末（编号S1）适量

按ldquo232rdquo项下方法连续测定6次记录Lab值结

图 2 桑根酮 C 对照品和桑白皮紫外-可见光吸收光

谱图

Fig 2 UV-vis absorption spectra of sanggenone C con-

trol and M alba

2400 02200 02000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm

A桑根酮C对照品溶液

2000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0－0200 0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm

B桑白皮供试品溶液

middotmiddot216


果上述色度值的 RSD 均小于 2（n＝6）表明方法精

密度良好

234 重复性试验取桑白皮样品粉末（编号S1）适量

共 6份按ldquo232rdquo项下方法测定Lab值结果上

述色度值的 RSD 均小于 2（n＝6）表明方法重复性

良好

235 稳定性试验取桑白皮样品粉末（编号S1）适量

按ldquo232rdquo项下方法平铺于粉末测试盒内并盖好盖玻片

后分别在室温下放置02468101224 h时进行测

定 Lab值结果上述色度值的 RSD 均小于 3

（n＝8）表明样品在室温下放置24 h内稳定性良好

236 样品的颜色观察和测定取 20批桑白皮药材按

ldquo231rdquoldquo232rdquo项下进行颜色观察和色度值测定并计算

总色差值每批样品平行测定 3次取平均值结果见

表 6

表6 20批桑白皮药材样品颜色观察及色度值测定结果

（n＝3）

Tab 6 Observation and determination results of color

and chromaticity values of 20 batches of M al-

ba（n＝3）

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

颜色浅黄白色浅黄白色黄白色浅黄白色黄白色浅黄白色黄棕色浅黄棕色黄棕色黄棕色

L

6553

6755

7409

6787

6925

6870

6252

6542

6325

6356

a

612

582

522

568

549

567

673

620

672

662

b

1528

1589

1756

1621

1705

1642

1359

1506

1445

1467

Eab

6725

6973

7643

7005

7172

7093

6448

6715

6516

6576

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

外观颜色黄棕色黄白色黄棕色黄白色黄白色黄白色棕褐色黄白色黄白色黄白色

L

6389

6915

6459

6858

6703

6962

6211

6639

6771

6720

a

641

564

638

567

604

533

686

605

578

588

b

1486

1646

1498

1637

1580

1747

1350

1578

1618

1588

Eab

6605

7153

6655

7067

6900

7176

6379

6862

6994

6913

24 桑白皮药材中有效成分含量与颜色指标的相关性

分析

利用 SPSS 210软件对桑白皮中桑根皮素总黄酮

的含量与颜色指标（LabEab）进行Pearson相关

性分析结果见表7

表7 桑白皮药材中有效成分含量与颜色指标的Pearson

相关性分析结果

Tab 7 Pearson correlation analysis results between

the contents of active ingredients and color in-

dicators index in M alba

有效成分含量

桑根皮素总黄酮

L

r

－0700

0970

P

0001

＜0001

a

r

0750

－0963

P

＜0001

＜0001

b

r

－0781

0955

P

＜0001

＜0001

Eab

r

－0711

0968

P

＜0001

＜0001

由表7可知桑白皮药材中桑根皮素含量与Lb

Eab值以及总黄酮含量与 a值均呈显著负相关（r＜0

P＜001）桑根皮素含量与 a值以及总黄酮含量与L

bEab值则均呈显著正相关（r＞0P＜001）这表明

在一定程度上桑白皮LbEab值越小a值越大

则其桑根皮素含量越高LbEab值越大a值越小

则总黄酮含量越高由于L越大表示颜色越明亮a＞

0表示颜色偏红b＞0表示颜色偏黄 [12－15]根据上述

Pearson相关性分析结果可知（1）桑根皮素含量与黄蓝

值相关性最大（r 绝对值越大则相关性越大下同）在

781的程度上其颜色偏黄则桑根皮素含量较低其次

与红绿值相关性较大在750的程度上其颜色偏红则

桑根皮素含量较高最后与颜色明暗程度较相关在

700的程度上其颜色越明亮则桑根皮素含量越低（2）

桑白皮中总黄酮含量与颜色明暗程度相关性最大在

970的程度上颜色越明亮则总黄酮含量越高其次与

红绿值相关性较大在963的程度上其颜色偏红则总

黄酮含量较低最后与黄蓝值较相关在 955的程度

上其颜色偏黄则总黄酮含量较高

25 桑白皮药材的指纹图谱建立

采用HPLC法建立桑白皮药材的指纹图谱

251 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适

量加甲醇制成质量浓度为 0014 3 mgmL 的对照品

溶液

252 供试品溶液的制备精密称取桑白皮粉末（过三

号筛下同）1 g置于具塞锥形瓶中加入 70乙醇 25


理 30 min冷却后再次称定质量用甲醇补足减失的质

量滤过取续滤液即得

253 色谱条件色谱柱为 Agilent ZORBAX Eclipse

Plus C18（250 mmtimes46 mm5 μm）流动相为乙腈-甲醇[1 ∶1（VV）A相]-01磷酸水溶液（B相）梯度洗脱（0 min

15A18 min34A28 min50A38 min65A

60 min80A）检测波长为 320 nm柱温为 40 流

速为 1 mLmin进样量为10 μL[16]


ldquo253rdquo项下色谱条件连续进样 6次以 1号峰（绿原酸）

为参照计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积

结果各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD分别

小于014069（n＝6）表明方法精密度良好



ldquo253rdquo项下色谱条件进样测定以 1号峰（绿原酸）为参

照计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积结果

各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD分别小于

052195（n＝6）表明方法重复性良好


按ldquo252rdquo项下方法平行制备供试品溶液分别于室温下

放置 048122448 h时按ldquo253rdquo项下色谱条件进样

测定以1号峰（绿原酸）为参照计算各共有峰的相对保

留时间和相对峰面积结果各共有峰相对保留时间和

相对峰面积的 RSD 均小于 079188（n＝6）表明

供试品溶液在室温下放置48 h内稳定性较好

257 相似度评价及共有峰指认取 20批桑白皮药材

middotmiddot217


样品粉末适量按ldquo252rdquo项下方法制备供试品溶液按并

ldquo253rdquo项下色谱条件进样测定记录色谱图将所有样

品色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统

（2012版）》生成叠加指纹图谱（见图3）同时以S1为参

照采用中位数法设置时间窗为 01经多点校正后进

行匹配生成对照图谱（R图略）对两者进行相似度评

价结果样品S1～S20色谱图与对照色谱（R）的相似

度分别为 0962093009410975097309720948

09720883095209680978097509690983

09280978095209060981共标定13个共有峰指

认 1号峰为绿原酸（绿原酸对照品溶液按ldquo253rdquo项下色

谱条件进样测定所得色谱图见图4）

26 不同产地桑白皮药材的聚类分析

利用SPSS 210软件对20批不同产地桑白皮药材样

品中桑根皮素和总黄酮的含量颜色指标进行K-均值聚

类分析对指纹图谱共有峰的相对峰面积进行系统聚类

分析结果见表8图5

由系统聚类分析结果可知当欧氏距离为 10时20

批样品可聚为两类S7～S11S13S17聚为一类以安

徽产桑白皮为主同时K-均值聚类分析结果（该聚类结

果同时包含S1）表明其桑根皮素含量较高总黄酮含量

偏低颜色较暗偏黄棕色S1～S6S12S14～S16

S18～S20聚为一类以四川贵州产桑白皮为主同时

K-均值聚类分析结果（该聚类结果不包含S1）表明其桑

根皮素含量偏低总黄酮含量较高颜色较明亮偏黄

白色

3 讨论随着中药材基原和种类的不断增多对其进行质量

监测和控制显得尤为重要而颜色作为中药最直观的外

在特征之一与中药质量密不可分[17]历代关于桑白皮

的品质评价均以ldquo色白皮厚味甘者为佳rdquo[7]然而传统

辨色方法主观性较强且易受外在因素影响因此本研究

通过色差仪将主观性指标颜色转化为客观性指标（L

ab）以期通过药材外在表征来快速评价药材质量

经前期研究发现不同产地及批次桑白皮中二苯乙

烯苷类成分桑皮苷A的含量差异较大且有文献表明该

成分易受温度光照及pH值影响[18]故本文选择桑白皮

的主要药效成分总黄酮及化学性质较为稳定的桑根皮

素进行含量测定并将其与颜色指标LabEab值

相关联结果表明桑白皮中桑根皮素和总黄酮含量均

与LabEab值呈显著相关性其中桑根皮素含

量与 b值相关性最大b值越小则桑根皮素含量越高

即偏黄棕色的样品中桑根皮素含量较高总黄酮含量与

图4 绿原酸对照品溶液的高效液相色谱图

Fig 4 HPLC chromatogram of chlorogenic acid con-

trol

7065605550454035302520151050

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin

S1

绿原酸

图3 20批桑白皮药材的叠加指纹图谱

Fig 3 Superimposed fingerprint of 20 batches M alba

1 8001 7001 6001 5001 4001 3001 2001 1001 0009008007006005004003002001000

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin

S20S19S18S17S16S15S14S13S12S11S10S9S8S7S6S5S4S3S2S1

1

2

3 4 56 78

9 10

111213

图5 不同产地桑白皮指纹图谱相对峰面积的系统聚类

分析图

Tab 5 Hierarchical cluster analysis diagram of rela-

tive peak area of the fingerprint of M alba

from different producing areas

S5S20S1

S15S19S4

S14S12S18S2S3

S16S6S7S8

S10S9

S17S13S11

0 5 10 15 20 25

欧氏距离

表8 不同产地桑白皮中桑根皮素和总黄酮的含量以及

颜色指标的K-均值聚类分析中心值

Tab 8 Central values of K-means cluster analysis on

the content of morusin and total flavonoids

and color indicators in M alba from different

producing areas

指标

桑根皮素含量总黄酮含量L

a

b

Eab

第Ⅰ类（S1S7～S11S13S17）

中心值0264 3

065

6386

651

1455

6577

变幅0170 1～0618 6

048～084

6211～6553

612～686

1350～1528

6379～6725

第Ⅱ类（S2～S6S12S14～S16S18～S20）

中心值0130 7

107

6860

569

1642

7079

变幅0096 0～0163 2

084～151

6639～7409

522～605

1578～1756

6862～7643

middotmiddot218


L值相关性最大L值越大则总黄酮含量越高即偏黄

白色的样品中总黄酮含量较高据文献报道安徽亳州

产桑白皮产量大色白皮厚柔韧质量好称为ldquo亳桑

皮rdquo享誉全国[19－20]本研究中所用产地为安徽的桑白

皮整体颜色偏黄棕色桑根皮素含量较高总黄酮含量

偏低进一步证实了外观颜色与其质量的相关性

中药材成分的多样性决定了其质量控制的复杂性

由于产地对其质量和疗效影响较大且其化学成分与临

床药理作用之间的关系尚未明确通常以多组分联合发

挥药效可见单一成分不能完全代表药材质量故指纹

图谱的建立可以从整体上控制药材质量弥补了单一成

分质量控制具有片面性的不足[21]本课题组前期观察

了不同体积分数的甲醇和乙醇等提取溶剂的提取效果

结果显示不同提取溶剂对成分溶出影响较大并以

70乙醇提取所得供试品的成分信息较为丰富同时

本课题组对回流和超声两种提取方式及不同提取时间

也进行了比较结果显示超声提取 30 min即可提取完

全其次不同型号色谱柱对指纹图谱的影响也较大

本课题组比较了Agilent TC-C18（2）Shim-pack C18Agi-

lent ZORBAX Eclipse Plus-C18 等 3 种色谱柱的分离效

果结果以 Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18的效果最

佳此外本课题组在 190～800 nm波长范围内进行全

波长扫描结果发现320 nm波长下得到的图谱信息较丰

富且各色谱峰分离较好故选择320 nm为检测波长并

以该条件下出峰稳定的第1号峰（绿原酸）作为参照峰

最后本文对不同产地桑白皮药材进行了聚类分

析基于桑根皮素和总黄酮含量以及颜色指标的K-均值

聚类分析结果显示桑白皮可分为两类即样品S1S7～

S11S13S17聚为一类其余批次聚为另一类基于桑白

皮指纹图谱相对峰面积进行的系统聚类分析结果显示

样品 S7～S11S13S17聚为一类其余批次聚为另一

类由此可知以不同指标进行聚类分析所得的结果较

为一致即安徽产样品聚为一类四川贵州产样品聚为

另一类四川贵州产样品质量相近的原因可能为这两

个地区的地理位置较接近土壤气候生态环境等较为

相似而安徽地处中纬度地带季风气候明显降水充

沛与四川贵州存在一定产地差异

综上所述桑白皮有效成分（桑根皮素总黄酮）的

含量与其颜色具有相关性且不同产地药材的质量存在

一定差异本研究为桑白皮药材的质量控制及评价提

供了一定的试验基础但关于该药材中其他成分与颜色

的相关性以及其他产地样品间的差异有待进一步研究

参考文献[ 1 ] 国家药典委员会中华人民共和国药典一部[S]北京中

国医药科技出版社2015298

[ 2 ] 冯志毅王小兰匡海学等桑白皮性能功效的本草考证

[J]世界科学技术中医药现代化201517（3）471-475

[ 3 ] 侯楚祺抗HIV活性成分桑辛素代谢机制及药-药相互作

用研究[D]广州南方医科大学2018

[ 4 ] 杨萍桑白皮总黄酮研究进展[J]临床合理用药杂志

201811（19）180-181

[ 5 ] 候宝林施洋赵俊芳等桑白皮化学成分及药理作用研

究进展[J]辽宁中医杂志202047（8）212-214

[ 6 ] 王芸陈军峰张磊等基于ldquo有效成分-性状rdquo的关联分

析评价丹参品质的研究[J]世界科学技术中医药现代

化201921（5）835-843

[ 7 ] 李玉丽蒋屏孙梦林等经典名方中桑白皮的本草考证

[J]中国实验方剂学杂志202026（18）36-44

[ 8 ] 宿莹李翟侯晓琳等基于色差原理分析龙胆有效成分

含量与颜色的相关性[J]中国实验方剂学杂志201925

（13）151-156

[ 9 ] 林华坚张梓豪孟江等干姜及其炮制品色差值与活性

成分含量的相关性研究[J]中国药房202031（10）

1197-1202

[10] 段志涛高英霍文杰等桑白皮中总黄酮含量测定方法

研究[J]中国实验方剂学杂志201319（7）133-135

[11] 杨晶刘嘉琪王宝昌等桑不同药用部位中黄酮类成分

的定量检测[J]中国药房201425（27）2550-2552

[12] 宿莹侯晓琳刘战等基于色差原理分析黄柏有效成分

含量与颜色的相关性 [J]中药材201942（8）1766-

1770

[13] 张慧慧孙灵根黄学思等ldquo电子眼rdquo在中药炮制中应用

构想[C]中华中医药学会中药炮制分会中华中医药学

会四大怀药与地道药材研究论坛暨中药炮制分会第二

届第五次学术会与第三届会员代表大会论文集焦作

中华中医药学会中药炮制分会200735-41

[14] 徐珍珍史星星樊旭蕾等基于色差原理分析木香有效

成分含量与颜色值的相关性[J]中国实验方剂学杂志

201824（13）17-21

[15] CUI YXLIU RXLIN ZZet al Quality evaluation based

on color gradingquality discrimination of the Chinese

medicine Corni Fructus by an E-eye[J] Sci Rep20199

（8）17006-17017

[16] 陈士林中药饮片标准汤剂第 2卷[M]北京科学出版

社2018325

[17] 徐曼菲吴志生刘晓娜等从辨色论质谈中药质量评价

方法[J]中国中药杂志201641（2）177-181

[18] 喻艳向伟刘俊池等 3种二苯乙烯类化合物的稳定性

研究[J]食品工业科技201637（2）148-151155

[19] 白华亳州桑白皮本草考证[C]中国药学会药学史专业

委员会第十八届全国药学史暨本草学术研讨会学术论

文集合肥中国药学会药学史专业委员会2015

135-137

[20] 谢晋查良平彭华胜等历代本草中安徽地产药材的品

种与分布[J]中国中药杂志201742（9）1623-1627

[21] 贾毓欣刘海帆司明东等知母及其不同炮制品的指纹

图谱建立与抗氧化活性的谱-效关系研究[J]中国药房

202031（22）2706-2712

（收稿日期2020-06-23 修回日期2020-11-28）

（编辑段思怡）

middotmiddot219


桑白皮为桑科植物桑Morus alba L的干燥根皮具

有泻肺平喘利水消肿的功效 [1－2]主要分布于我国河

南安徽四川贵州等地现代研究表明桑白皮中含

有的桑根皮素（又名ldquo桑辛素rdquo）具有抗肿瘤镇痛抗惊

厥等药理作用对人体免疫缺陷病毒 1型 M 组 B 亚型

（HIV-1SF162）感染具有显著的抑制活性[3]此外总黄酮

类成分为桑白皮中的主要药效成分具有降血糖降血

脂镇咳平喘抗氧化镇痛抗炎减轻肝损伤等药理作

用[4]桑白皮因其广泛的药理作用于2002年被列入原

卫生部发布的保健食品类中药名单[5]

性状鉴定是中药鉴定的主要方法之一[6]桑白皮的

传统鉴别是ldquo以根皮色白皮厚味甘者为佳rdquo[7]颜色作

为性状鉴别的要素之一与药材的内在质量关系密切

具有简单直观的特点但同时也存在易受多种外界因

素（如视觉光学生理心理等因素）的影响而主观性过

大的缺点[8]因此建立一种客观可量化的颜色分析方法

对快速鉴定药材质量显得尤为重要本研究基于色差

原理通过色差仪对桑白皮药材外观颜色进行量化分析

（其测定值Lab分别代表明暗度红-绿色度黄-蓝

色度[9]）并探讨药材外观颜色与其主要药效成分（桑根

皮素总黄酮）含量之间的相关性同时建立桑白皮药

材指纹图谱并进行聚类分析旨在为其质量控制和品质

评价提供依据

1 材料11 仪器

实验使用的主要仪器包括Agilent 1260型高效液

相色谱（HPLC）仪和L5S型紫外-可见分光光度计（上海

仪电分析仪器有限公司）NH310型电脑色差仪（深圳三

恩驰科技有限公司）EL204型电子天平MS105型十万

分之一电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]

FW177型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）

KQ-500B 型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公

司）等

12 药品与试剂

桑根皮素对照品（批号AF8051823纯度98）购自

成都埃法生物科技有限公司桑根酮 C 对照品（批号

18040211纯度ge98）购自上海圻明生物科技有限公

司绿原酸对照品（批号 110753-201817纯度 968）购

自中国食品药品检定研究院镁粉（批号20120312）购自

天津市福晨化学试剂厂磷酸甲醇乙腈均为色谱纯

盐酸乙醇均为分析纯水为纯净水

20批桑白皮药材收集自四川安徽贵州等 3个产

地经长春中医药大学药学院翁丽丽教授鉴定为桑科植

物桑M alba L的干燥根皮其具体信息见表1

表1 桑白皮药材信息

Tab 1 Information of M alba

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

产地四川省双流县四川省双流县四川省双流县四川省双流县四川省双流县四川省双流县安徽省太和县安徽省亳州市安徽省亳州市安徽省亳州市


编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

产地安徽省亳州市安徽省亳州市安徽省亳州市贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县贵州省施秉县


2 方法与结果21 桑根皮素的含量测定

采用HPLC法测定桑白皮药材中桑根皮素的含量

211 对照品溶液的配制精密称取桑根皮素对照品

适量加乙醇溶解制成质量浓度为 21795 2 μgmL的对

照品溶液

212 供试品溶液的配制精密称取桑白皮粉末（过三

号筛下同）05 g置于具塞锥形瓶中精密加入乙醇 25


理 30 min冷却后再次称定质量用乙醇补足减失的质

量摇匀滤过取续滤液即得

213 色谱条件和系统适用性考察以Agilent 5 TC-C18

（250 mmtimes46 mm5 μm）为色谱柱乙腈 -水（58 ∶ 42VV）为流动相检测波长为270 nm流速为1 mLmin柱

温为25 进样量为10 μL取ldquo211rdquoldquo212rdquo项下桑根

皮素对照品和供试品溶液（编号 S7）以及空白溶剂（乙

醇）进样测定结果显示桑根皮素的理论板数大于

10 000分离度大于15且溶剂无干扰详见图1（空白溶

剂图略）

content of morusin wasthe higher the value of LbEab and the smaller the value of awerethe higher the content of total

flavonoids was The similarity between the fingerprints of 20 batches of samples and the control ranged from 0883 to 098313

common peaks were demarcatedand No1 peak was identified as chlorogenic acid K-means cluster analysis showed that 20

batches of samples could be divided into 2 categories Category Ⅰ were mainly from Anhui province with higher content of

morusinlower content of total flavonoidsdarker and yellowish brown colorcategory Ⅱ were mainly from Sichuan province and

Guizhou provincewith lower content of morusinhigher content of total flavonoidslighter and yellowish white color The results

of hierarchical cluster analysis were consistent with the results CONCLUSIONSThe color of M alba is closely related to the

contents of morusin and total flavonoids The content of morusin in yellow-brown M albais is higherwhile the content of total

flavonoids in yellow-white M albais is higher

KEYWORDS Morus albaColorMorusinTotal flavonoidsFingerprint Color difference of principleCluster analysis

middotmiddot214



皮素对照品溶液 0062 501250250512 mL加乙





1181 5（r＝0999 9）表明桑根皮素质量浓度在0681 1～


关系




法精密度良好











稳定







良好详见表2



试验号

1

2

3

4

5

6

取样量g

0499 6

0499 8

0499 5

0500 4

0500 1

0500 7

已知含量μg

140635 4

140691 7

140607 3

140860 6

140776 2

140945 1

加入量μg

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

测得量μg

273847 5

271033 7

271967 7

272765 5

270353 7

275678 9

加样回收率

9779

9568

9643

9683

9512

9891


9680

RSD

143








（n＝3）



编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

桑根皮素mgg

0170 1

0147 9

0096 0

0139 5

0105 2

0126 5

0281 0

0188 9

0238 2

0213 7

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

桑根皮素mgg

0203 7

0114 2

0200 6

0115 8

0158 4

0103 7

0618 6

0163 2

0142 9

0155 4








溶液















0 5 10 15 20 25 30 35 40

tmin

A对照品溶液

40

30

20

10

0

mA

U

桑根皮素

0 5 10 15 20 25 30 35 40

tmin


40

30

20

10

0

mA

U

桑根皮素

middotmiddot215










回归得回归方程Y＝0015 4X－0017 6（r＝0999 2）表




























（n＝6）

试验号

1

2

3

4

5

6

取样量g

0500 2

0499 9

0499 7

0499 7

0500 1

0500 3

已知含量mg

3331 6

3329 6

3328 3

3328 3

3330 9

3332 3

加入量mg

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

测得量mg

68882

6693 1

6750 5

6681 6

6807 8

6807 8

加样回收率

10162

9610

9778

9581

9934

9930


9832

RSD

225








（n＝3）



编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

总黄酮084

096

151

099

119

102

059

079

061

061

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

总黄酮062

114

063

101

086

138

048

084

097

092













（L2+a2+b2）12




谱图


trol and M alba

2400 02200 02000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm


2000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0－0200 0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm


middotmiddot216



密度良好




良好









表 6


（n＝3）



ba（n＝3）

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10


L

6553

6755

7409

6787

6925

6870

6252

6542

6325

6356

a

612

582

522

568

549

567

673

620

672

662

b

1528

1589

1756

1621

1705

1642

1359

1506

1445

1467

Eab

6725

6973

7643

7005

7172

7093

6448

6715

6516

6576

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20


L

6389

6915

6459

6858

6703

6962

6211

6639

6771

6720

a

641

564

638

567

604

533

686

605

578

588

b

1486

1646

1498

1637

1580

1747

1350

1578

1618

1588

Eab

6605

7153

6655

7067

6900

7176

6379

6862

6994

6913


分析









有效成分含量


L

r

－0700

0970

P

0001

＜0001

a

r

0750

－0963

P

＜0001

＜0001

b

r

－0781

0955

P

＜0001

＜0001

Eab

r

－0711

0968

P

＜0001

＜0001
























溶液






























middotmiddot217









度分别为 0962093009410975097309720948

09720883095209680978097509690983

09280978095209060981共标定13个共有峰指
















白色



















trol

7065605550454035302520151050

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin

S1

绿原酸



1 8001 7001 6001 5001 4001 3001 2001 1001 0009008007006005004003002001000

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin


1

2

3 4 56 78

9 10

111213


分析图




S5S20S1

S15S19S4

S14S12S18S2S3

S16S6S7S8

S10S9

S17S13S11

0 5 10 15 20 25

欧氏距离






producing areas

指标


a

b

Eab


中心值0264 3

065

6386

651

1455

6577

变幅0170 1～0618 6

048～084

6211～6553

612～686

1350～1528

6379～6725

第Ⅱ类（S2～S6S12S14～S16S18～S20）

中心值0130 7

107

6860

569

1642

7079

变幅0096 0～0163 2

084～151

6639～7409

522～605

1578～1756

6862～7643

middotmiddot218



















































201811（19）180-181


究进展[J]辽宁中医杂志202047（8）212-214



化201921（5）835-843


[J]中国实验方剂学杂志202026（18）36-44



（13）151-156



1197-1202




的定量检测[J]中国药房201425（27）2550-2552



1770








201824（13）17-21




（8）17006-17017


社2018325


方法[J]中国中药杂志201641（2）177-181


研究[J]食品工业科技201637（2）148-151155




135-137


种与分布[J]中国中药杂志201742（9）1623-1627



202031（22）2706-2712

（收稿日期2020-06-23 修回日期2020-11-28）


middotmiddot219



皮素对照品溶液 0062 501250250512 mL加乙





1181 5（r＝0999 9）表明桑根皮素质量浓度在0681 1～


关系




法精密度良好











稳定







良好详见表2



试验号

1

2

3

4

5

6

取样量g

0499 6

0499 8

0499 5

0500 4

0500 1

0500 7

已知含量μg

140635 4

140691 7

140607 3

140860 6

140776 2

140945 1

加入量μg

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

136220 0

测得量μg

273847 5

271033 7

271967 7

272765 5

270353 7

275678 9

加样回收率

9779

9568

9643

9683

9512

9891


9680

RSD

143








（n＝3）



编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

桑根皮素mgg

0170 1

0147 9

0096 0

0139 5

0105 2

0126 5

0281 0

0188 9

0238 2

0213 7

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

桑根皮素mgg

0203 7

0114 2

0200 6

0115 8

0158 4

0103 7

0618 6

0163 2

0142 9

0155 4








溶液















0 5 10 15 20 25 30 35 40

tmin

A对照品溶液

40

30

20

10

0

mA

U

桑根皮素

0 5 10 15 20 25 30 35 40

tmin


40

30

20

10

0

mA

U

桑根皮素

middotmiddot215










回归得回归方程Y＝0015 4X－0017 6（r＝0999 2）表




























（n＝6）

试验号

1

2

3

4

5

6

取样量g

0500 2

0499 9

0499 7

0499 7

0500 1

0500 3

已知含量mg

3331 6

3329 6

3328 3

3328 3

3330 9

3332 3

加入量mg

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

测得量mg

68882

6693 1

6750 5

6681 6

6807 8

6807 8

加样回收率

10162

9610

9778

9581

9934

9930


9832

RSD

225








（n＝3）



编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

总黄酮084

096

151

099

119

102

059

079

061

061

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

总黄酮062

114

063

101

086

138

048

084

097

092













（L2+a2+b2）12




谱图


trol and M alba

2400 02200 02000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm


2000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0－0200 0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm


middotmiddot216



密度良好




良好









表 6


（n＝3）



ba（n＝3）

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10


L

6553

6755

7409

6787

6925

6870

6252

6542

6325

6356

a

612

582

522

568

549

567

673

620

672

662

b

1528

1589

1756

1621

1705

1642

1359

1506

1445

1467

Eab

6725

6973

7643

7005

7172

7093

6448

6715

6516

6576

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20


L

6389

6915

6459

6858

6703

6962

6211

6639

6771

6720

a

641

564

638

567

604

533

686

605

578

588

b

1486

1646

1498

1637

1580

1747

1350

1578

1618

1588

Eab

6605

7153

6655

7067

6900

7176

6379

6862

6994

6913


分析









有效成分含量


L

r

－0700

0970

P

0001

＜0001

a

r

0750

－0963

P

＜0001

＜0001

b

r

－0781

0955

P

＜0001

＜0001

Eab

r

－0711

0968

P

＜0001

＜0001
























溶液






























middotmiddot217









度分别为 0962093009410975097309720948

09720883095209680978097509690983

09280978095209060981共标定13个共有峰指
















白色



















trol

7065605550454035302520151050

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin

S1

绿原酸



1 8001 7001 6001 5001 4001 3001 2001 1001 0009008007006005004003002001000

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin


1

2

3 4 56 78

9 10

111213


分析图




S5S20S1

S15S19S4

S14S12S18S2S3

S16S6S7S8

S10S9

S17S13S11

0 5 10 15 20 25

欧氏距离






producing areas

指标


a

b

Eab


中心值0264 3

065

6386

651

1455

6577

变幅0170 1～0618 6

048～084

6211～6553

612～686

1350～1528

6379～6725

第Ⅱ类（S2～S6S12S14～S16S18～S20）

中心值0130 7

107

6860

569

1642

7079

变幅0096 0～0163 2

084～151

6639～7409

522～605

1578～1756

6862～7643

middotmiddot218



















































201811（19）180-181


究进展[J]辽宁中医杂志202047（8）212-214



化201921（5）835-843


[J]中国实验方剂学杂志202026（18）36-44



（13）151-156



1197-1202




的定量检测[J]中国药房201425（27）2550-2552



1770








201824（13）17-21




（8）17006-17017


社2018325


方法[J]中国中药杂志201641（2）177-181


研究[J]食品工业科技201637（2）148-151155




135-137


种与分布[J]中国中药杂志201742（9）1623-1627



202031（22）2706-2712

（收稿日期2020-06-23 修回日期2020-11-28）


middotmiddot219










回归得回归方程Y＝0015 4X－0017 6（r＝0999 2）表




























（n＝6）

试验号

1

2

3

4

5

6

取样量g

0500 2

0499 9

0499 7

0499 7

0500 1

0500 3

已知含量mg

3331 6

3329 6

3328 3

3328 3

3330 9

3332 3

加入量mg

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

3500 0

测得量mg

68882

6693 1

6750 5

6681 6

6807 8

6807 8

加样回收率

10162

9610

9778

9581

9934

9930


9832

RSD

225








（n＝3）



编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10

总黄酮084

096

151

099

119

102

059

079

061

061

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20

总黄酮062

114

063

101

086

138

048

084

097

092













（L2+a2+b2）12




谱图


trol and M alba

2400 02200 02000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm


2000 01800 01600 01400 01200 01000 00800 00600 00400 00200 0

0－0200 0

A

200 240 280 320 360 400 440 480 520 560 600

λnm


middotmiddot216



密度良好




良好









表 6


（n＝3）



ba（n＝3）

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10


L

6553

6755

7409

6787

6925

6870

6252

6542

6325

6356

a

612

582

522

568

549

567

673

620

672

662

b

1528

1589

1756

1621

1705

1642

1359

1506

1445

1467

Eab

6725

6973

7643

7005

7172

7093

6448

6715

6516

6576

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20


L

6389

6915

6459

6858

6703

6962

6211

6639

6771

6720

a

641

564

638

567

604

533

686

605

578

588

b

1486

1646

1498

1637

1580

1747

1350

1578

1618

1588

Eab

6605

7153

6655

7067

6900

7176

6379

6862

6994

6913


分析









有效成分含量


L

r

－0700

0970

P

0001

＜0001

a

r

0750

－0963

P

＜0001

＜0001

b

r

－0781

0955

P

＜0001

＜0001

Eab

r

－0711

0968

P

＜0001

＜0001
























溶液






























middotmiddot217









度分别为 0962093009410975097309720948

09720883095209680978097509690983

09280978095209060981共标定13个共有峰指
















白色



















trol

7065605550454035302520151050

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin

S1

绿原酸



1 8001 7001 6001 5001 4001 3001 2001 1001 0009008007006005004003002001000

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin


1

2

3 4 56 78

9 10

111213


分析图




S5S20S1

S15S19S4

S14S12S18S2S3

S16S6S7S8

S10S9

S17S13S11

0 5 10 15 20 25

欧氏距离






producing areas

指标


a

b

Eab


中心值0264 3

065

6386

651

1455

6577

变幅0170 1～0618 6

048～084

6211～6553

612～686

1350～1528

6379～6725

第Ⅱ类（S2～S6S12S14～S16S18～S20）

中心值0130 7

107

6860

569

1642

7079

变幅0096 0～0163 2

084～151

6639～7409

522～605

1578～1756

6862～7643

middotmiddot218



















































201811（19）180-181


究进展[J]辽宁中医杂志202047（8）212-214



化201921（5）835-843


[J]中国实验方剂学杂志202026（18）36-44



（13）151-156



1197-1202




的定量检测[J]中国药房201425（27）2550-2552



1770








201824（13）17-21




（8）17006-17017


社2018325


方法[J]中国中药杂志201641（2）177-181


研究[J]食品工业科技201637（2）148-151155




135-137


种与分布[J]中国中药杂志201742（9）1623-1627



202031（22）2706-2712

（收稿日期2020-06-23 修回日期2020-11-28）


middotmiddot219



密度良好




良好









表 6


（n＝3）



ba（n＝3）

编号S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

S8

S9

S10


L

6553

6755

7409

6787

6925

6870

6252

6542

6325

6356

a

612

582

522

568

549

567

673

620

672

662

b

1528

1589

1756

1621

1705

1642

1359

1506

1445

1467

Eab

6725

6973

7643

7005

7172

7093

6448

6715

6516

6576

编号S11

S12

S13

S14

S15

S16

S17

S18

S19

S20


L

6389

6915

6459

6858

6703

6962

6211

6639

6771

6720

a

641

564

638

567

604

533

686

605

578

588

b

1486

1646

1498

1637

1580

1747

1350

1578

1618

1588

Eab

6605

7153

6655

7067

6900

7176

6379

6862

6994

6913


分析









有效成分含量


L

r

－0700

0970

P

0001

＜0001

a

r

0750

－0963

P

＜0001

＜0001

b

r

－0781

0955

P

＜0001

＜0001

Eab

r

－0711

0968

P

＜0001

＜0001
























溶液






























middotmiddot217









度分别为 0962093009410975097309720948

09720883095209680978097509690983

09280978095209060981共标定13个共有峰指
















白色



















trol

7065605550454035302520151050

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin

S1

绿原酸



1 8001 7001 6001 5001 4001 3001 2001 1001 0009008007006005004003002001000

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin


1

2

3 4 56 78

9 10

111213


分析图




S5S20S1

S15S19S4

S14S12S18S2S3

S16S6S7S8

S10S9

S17S13S11

0 5 10 15 20 25

欧氏距离






producing areas

指标


a

b

Eab


中心值0264 3

065

6386

651

1455

6577

变幅0170 1～0618 6

048～084

6211～6553

612～686

1350～1528

6379～6725

第Ⅱ类（S2～S6S12S14～S16S18～S20）

中心值0130 7

107

6860

569

1642

7079

变幅0096 0～0163 2

084～151

6639～7409

522～605

1578～1756

6862～7643

middotmiddot218



















































201811（19）180-181


究进展[J]辽宁中医杂志202047（8）212-214



化201921（5）835-843


[J]中国实验方剂学杂志202026（18）36-44



（13）151-156



1197-1202




的定量检测[J]中国药房201425（27）2550-2552



1770








201824（13）17-21




（8）17006-17017


社2018325


方法[J]中国中药杂志201641（2）177-181


研究[J]食品工业科技201637（2）148-151155




135-137


种与分布[J]中国中药杂志201742（9）1623-1627



202031（22）2706-2712

（收稿日期2020-06-23 修回日期2020-11-28）


middotmiddot219









度分别为 0962093009410975097309720948

09720883095209680978097509690983

09280978095209060981共标定13个共有峰指
















白色



















trol

7065605550454035302520151050

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin

S1

绿原酸



1 8001 7001 6001 5001 4001 3001 2001 1001 0009008007006005004003002001000

Um

V

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60

tmin


1

2

3 4 56 78

9 10

111213


分析图




S5S20S1

S15S19S4

S14S12S18S2S3

S16S6S7S8

S10S9

S17S13S11

0 5 10 15 20 25

欧氏距离






producing areas

指标


a

b

Eab


中心值0264 3

065

6386

651

1455

6577

变幅0170 1～0618 6

048～084

6211～6553

612～686

1350～1528

6379～6725

第Ⅱ类（S2～S6S12S14～S16S18～S20）

中心值0130 7

107

6860

569

1642

7079

变幅0096 0～0163 2

084～151

6639～7409

522～605

1578～1756

6862～7643

middotmiddot218



















































201811（19）180-181


究进展[J]辽宁中医杂志202047（8）212-214



化201921（5）835-843


[J]中国实验方剂学杂志202026（18）36-44



（13）151-156



1197-1202




的定量检测[J]中国药房201425（27）2550-2552



1770








201824（13）17-21




（8）17006-17017


社2018325


方法[J]中国中药杂志201641（2）177-181


研究[J]食品工业科技201637（2）148-151155




135-137


种与分布[J]中国中药杂志201742（9）1623-1627



202031（22）2706-2712

（收稿日期2020-06-23 修回日期2020-11-28）


middotmiddot219



















































201811（19）180-181


究进展[J]辽宁中医杂志202047（8）212-214



化201921（5）835-843


[J]中国实验方剂学杂志202026（18）36-44



（13）151-156



1197-1202




的定量检测[J]中国药房201425（27）2550-2552



1770








201824（13）17-21




（8）17006-17017


社2018325


方法[J]中国中药杂志201641（2）177-181


研究[J]食品工业科技201637（2）148-151155




135-137


种与分布[J]中国中药杂志201742（9）1623-1627



202031（22）2706-2712

（收稿日期2020-06-23 修回日期2020-11-28）


middotmiddot219

ò ã¿ 0k a¿N º % Fkd ÙÀ § ã 0!

Documents

Transcript of ò ã¿ 0k a¿N º % Fkd ÙÀ § ã 0!