Figure 9.12

RNA

ssDNA

dsDNA

MS2ss ds φφφφ6

φψφψφψφψ174fd, M13

T3, T7

MuLambda T2, T4

© 2012 Pearson Education, Inc.

VIRUS 2da. parte : BACTERIÓFAGOS

VIRUS MODELOS:

Fagos de la serie TFagos de la serie TFagos de la serie TFagos de la serie T

y fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambda

Bacteriófago T4

-Simetría: compleja -Hospedador: Escherichia coli-Es virulento: desencadena ciclos líticos

DNA:- bicatenario- bicatenario-codifica algunos de sus propios tRNA-Tiene repeticiones terminales y presenta permutación circular -Tiene la base 5-hidroximetilcitosina (en lugar de citosina)que se glicosila y permite resistir ataque por ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION del hospedador.

Pared de

Figura 9.10 Adhesión del bacteriófago T4 a la pared de Escherichia coli e inyección de DNA. (Brock. Cap. 9. XIII Ed. 2012).

deE. coli

Figure 9.13

Nearly replicatedcopies of T4genome

Endonucleasecuts

One “headful”of T4

DNA tiene repeticiones terminales y presenta permutación circular

RecombinationT4 genomesgenerated

of T4DNA

Concatemer cutby endonuclease

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Evolución de la infección por bacteriófago T4

BACTERIÓFAGO LAMBDA

Bacteriófago LAMBDA

-Simetría: compleja -Hospedador: Escherichia coli

DNA:

-Predomina la expresión de un represor de lisis (cI)-Predomina la expresión de un represor de lisis (cI)-Por eso se llama FAGO ATEMPERADO o PROFAGO: se integra al DNA de la bacteria que infecta y produce ciclos lisogénicos.

-Las bacterias lisogenizadas presentan nuevas propiedades, por ej. pueden producir toxinas.

CARACTERÍSTICAS DEL FAGO LAMBDA

-Las bacterias infectadas por fago lambda son inmunes al ataque por partículas similares

-Puede revertir a fago virulento: la inactivación del represor de lisis (cI) induce el CICLO LÍTICO debido al aumento de la expresión de la proteína Cro.

-El DNA es lineal bicatenario con extremos 5’ cohesivos formados por 12 nucleótidos complementarios: sitio cos. Al entrar al hospedador se aparean y el DNA pasa a ser circular.

-Se integra al cromosoma de Escherichia coli por el sitio att .

CICLO LÍTICO O LISOGÉNICO ?

GENOMADE LAMBDA

cI > Cro => LISOGENIA Cro > cI => LISIS

LISOGENIAIntegración de ADN de lambda en el hospedador

Bacteria hospedadora expresa nuevaspropiedades

Ej: toxinas

Replicación de lambda

por el círculo rodante

CICLO LÍTICO

3’

primers

FAGO LAMBDA: CICLO LISOGÉNICO o LÍTICO ?

Ciclo lisogénico:-Síntesis activa de cI (represor de ciclo lítico)-Genoma de fago lambda está integrado en el DNA del hospedador-No hay producción de proteínas tardías

Ciclo lítico:-Síntesis de grandes cantidades de Cro-Cro reprime proteínas cII y cIII que inducen síntesis de cI-Proteasa FtsH del hospedador degrada cII. Esto afecta a cI.

http://www.blackwellpublishing.com/trun/artwork/Animations/Lambda/lambda.html

CURIOSIDADES CURIOSIDADES CURIOSIDADES CURIOSIDADES

DE DE DE DE

OTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOS

Fago MS2

-SOLAPAMIENTO DE GENES

-HOSPEDADOR: E. coli F+ (con plásmido conjugativo), tiene pilisexuales donde el fago se une.

Fagos M13, fd, f1

-No produce lisis de la bacteria, se libera por GEMACION

Pared de la bacteria

M13 se usa como vector de clonación en Ingeniería Genética.

GEMACIÓN

Región intergénica de M13:-promotor lacP-gen lacZ’ de beta-galactosidasa- un sitio de clonado múltiple

DNA foráneo(inserto)M13

Fago M13

- un sitio de clonado múltiple

Placas de lisis por M13 sin inserto: azules

Placas de lisis por M13 con inserto: incoloras

bacteria sensible

M13

Sustrato: X-gal

Bacteriófago Mu (mutador)

-Acetilación de residuos de adeninapara eludir los sistemas de restricción del hospedador

-FAGO ATEMPERADO: Se integra dentro de genes del hospedador e induce MUTACIONES en el genoma del induce MUTACIONES en el genoma del hospedador

-Puede revertir A CICLO LÍTICO

-Se replica POR TRANSPOSICIÓN

Fago Mu se usa en Ingeniería Genética para generar fenotipos bacterianos mutantes.

Mu y la región invertible G: determina especificidad de hospedador

Especificidad de hospedador según fibras de cola: G+ (lee SU): E. coli K12

G- (lee S’U’): otros hospedadores

METODOS COMUNES PARA INACTIVAR VIRUS

A. ESTERILIZACIÓN - vapor a presión, calor seco, óxido de etileno, rayos

gamma

B. DESINFECCIÓN DE SUPERFICIES- hipoclorito de sodio, glutaraldheido, formaldheido, ácido

peracético

C. DESINFECCIÓN DE LA PIEL- clorhexidina, etanol al 70%

D. PRODUCCIÓN DE VACUNAS- formaldheido, beta-propiolactona, psoraleno + UV