Éléments utiles au diagnostic de malignité

Biologique…

… et clinique

HyperlymphocytoseMonocytopénie et leucopénieNeutropénieParaprotéineHypogammaglobulinémie, β2 microglobuline, LDHHyperéosinophilie…

AdénopathieSplénomégalie

Incidence

LBGC diffus (30 %)LBGC diffus (30 %)

Lymphome folliculaire (22.1 %)Lymphome folliculaire (22.1 %)L du MALT (7.6 %)L du MALT (7.6 %)

LLC/LL (7.6 %)LLC/LL (7.6 %)

LT Mature (7.6 %)LT Mature (7.6 %)

MCL (6.7 %)MCL (6.7 %)

LBGC mLBGC méédiastin (2.4 %)diastin (2.4 %)

LBLB anaplasiqueanaplasique (2.4 %)(2.4 %)

BurkittBurkitt (2.5 %)(2.5 %)

LZM (1.8 %)LZM (1.8 %)

LLA T (1.7 %)LLA T (1.7 %)

LLP (1 %)LLP (1 %) Autres (7.4 %)Autres (7.4 %)

Lymphome B matures : 4 % des nouveaux cancers chaque année

WHO (2001)

Pathologie lymphoïde B

Antig

ène

Antig

Antig

èè nene

MoelleMoelleosseuseosseuse

LymphocyteB mémoireCentrocyte

Centroblaste

Cellule dumanteau

Cellule de lazone marginale

Plasmocyte

Celluleplasmocytoïde

Immunoblaste B

Cellule Bnaïve

Lymphoblaste Bprécurseur

Lymphome BLymphome B àà grandes cellulesgrandes cellules LymphomeLymphomelymphoplasmocytairelymphoplasmocytaire

LLCLLCLLCLLC

MyMyéélomelomeLymphomeLymphomede la zonede la zonemarginalemarginale

LymphomeLymphomefolliculairefolliculaire

LymphomeLymphomefolliculairefolliculaire

LymphomeLymphomedu manteaudu manteau

Organe lymphoOrgane lymphoïïdedesecondairesecondaire

MoelleMoelleosseuseosseuse

ParacortexParacortex etet medullamedullaLLALLA--B/LLB/LL--BB

Leucémie lymphoïde chronique

Petite cellule au contour cytoplasmique régulier, au rapport N/C élevé et aunoyau à chromatine condensée en mottePrésence de masse de Gümprecht (fragilité cellulaire)Rares paraimmunoblastes ou prolymphocytes

Morphologie habituelle

Leucémie lymphoïde chroniqueVariantes morphologiques

LLC pleiomorpheLLC à cellules de taille moyenne et rapport N/C faible à flexionplasmocytoïdeLLC riche en prolymphocytes

Confirmation du diagnostic par cytomConfirmation du diagnostic par cytoméétrie en fluxtrie en flux

<10 % prolymphocytes

10 – 55 % prolymphocytes

>55 % prolymphocytes

LLC

LLC/PL

Leucémie prolymphocytaire

LLC à cellules de taille moyenne et rapport N/C faible à flexionplasmocytoïde

Cytométrie en flux

ScattergrammeScattergramme ((biparambiparaméétriquetrique))

DiffusionDiffusion àà 9090 °° (granularit(granularitéé))

Diff

usio

n ax

iale

(tai

lle)

Diff

usio

n ax

iale

(tai

lle)

LymphocytesLymphocytes

MonocytesMonocytesGranulocytesGranulocytes

SSéélection de lalection de lapopulationpopulationintintééressanteressantegrâcegrâce àà la crla crééationationdd une rune réégiongiondd intintéérêtrêt

DDéébrisbris

IntensitIntensitéé de fluorescencede fluorescence

CD4 FITCCD4 FITC

- +

Histogramme (Histogramme (monoparammonoparaméétriquetrique))

ScattergrammeScattergramme ((biparambiparaméétriquetrique))

ÜÜ Expression desExpression desmarqueurs fluorescentsmarqueurs fluorescents

CD3 +CD3 + CD3 +/CD8+CD3 +/CD8+

CD8 +CD8 +CD3CD3 --/CD8/CD8 --

ÜÜ Obtention duObtention dupourcentagepourcentage

Pathologie lymphoïde B non hodgkinienne

Antig

ène

Antig

Antig

èè nene

MoelleMoelleosseuseosseuse

LymphocyteB mémoireCentrocyte

Centroblaste

Cellule dumanteau

Cellule de lazone marginale

Plasmocyte

Celluleplasmocytoïde

Immunoblaste B

Cellule Bnaïve

Lymphoblaste Bprécurseur

CD20+CD20+,, cIgMcIgM++

CD23+CD23+

cIgcIg++

CD5+CD5+

CD5+/CD5+/--

CD10+CD10+

CD23CD23--Organe lymphoOrgane lymphoïïdede

secondairesecondaire MoelleMoelleosseuseosseuse

ParacortexParacortex etet medullamedulla

CD79aCD79aCD10CD10TdTTdTCCµµ

CD20,CD20, CD5+CD5+,, sIgMsIgM+, D++, D+CD5CD5--, CD23, CD23--

IgMIgM++

immunophénotype :CD19+, CD20+(faible), CD5+, CD23+, IgS faible

Leucémie lymphoïde chronique

Score de Matutes : 4 à 5/5

IgS

CD5

CD23

CD79b

FMC7

1 point

Faible

+

+

-/faible

-

0 point

Fort

-

-

+

+

Ces cellules d’un même patient vous semblent-ellesmonomorphes?

1. Oui

2. Non

3. Je ne me prononce pas

2

1

0

1

0 1

1. Oui

2. Non

3. Je ne me prononce pas

Ces cellules d un même patient vous semblent-elles monomorphes?

Monomorphe : pourquoi ?

Taille variable, rapport N/C variableCytoplasme légèrement basophileNoyau irrégulier, replié (en forme de poing fermé)Noyau parfois nucléolé

Immunophénotype :CD19+, CD20+ (forte densité), CD5+, CD23-, IgS forte densité.

Lymphome du manteau

Cytogénétique et biologie moléculaire :t(11;14), gène Bcl1, hyperexpression de protéine cyclin D1

Évolution morphologique :Apparition d’éléments blastiques de plus grande taille (formeblastoïde)ð Analyse du contenu en ADNð Tétraploïdie

Quelle est la particularité de ces cellules ?

1. Petite taille2. Noyau clivé3. Noyau à chromatine mottée4. Rapport N/C élevé5. Noyau blastique

2

0

1

0

2

1

0 1 2

1. Petite taille

2. Noyau clivé

3. Noyau à chromatinemottée

4. Rapport N/C élevé

5. Noyau blastique

Quelle est la particularité de ces cellules ?

Lymphome folliculairePrésence de centrocytes typiques

petites cellules, chromatine compacte non mottéeclivages nucléaires bien visiblescytoplasme peu abondant, de basophilie faible

Lymphome folliculaire (phase leucémique)

14

18

der(14)

der(18)

Génétique :t(14;18) et ses variantes t(2;18)et (18;22) (70 à 95%)réarrangement du gène BCL2(85% des cas)

Immunophénotype :CD19+, CD20+, CD10+/-, CD5-, CD23+/-, CD44-, CD38 -/+(faible densité)

Technique Fish

Caryotype

Quelle particularité morphologique peut-onrelever dans cette petite galerie ?

1. Ces cellules sont blastiques2. Les noyaux sont mottés3. Certains éléments possèdent des villosités4. On observe parfois des prolongements cytoplasmiques5. Les noyaux sont irréguliers6. Toutes ces cellules sont normales

0

0

2

1

2

0

0

0 1 2

1. Ces cellules sont blastiques

2. Les noyaux sont mottés

3. Certains éléments possèdent des villosités

4. On observe parfois des prolongementscytoplasmiques

5. Les noyaux sont irréguliers

6. Toutes ces cellules sont normales

Quelle particulartité morphologique peut-on relever dans cette petite galerie ?

Leucémie à tricholeucocytes (HCL)

Tricholymphocytes :• Cellule souvent de taille moyenne à grande• Contours cytoplasmiques irréguliers (villosités) sur tout le pourtour de la cellule• Cytoplasme plus ou moins abondant et peu basophile• Noyau parfois irrégulier, réniforme………• Noyau à chromatine peu condensée parfois fine contenant parfois un nucléole

Quel est l’intrus ?

Monocyte

Leucémie à tricholeucocytes (HCL)

Particularité :Leucopénie et monocytopénie

Immunophénotype :FSC faible et SSC moyen <> lymphocytes FSC faible et SSC faibleCD19+, CD20+, CD103+, CD25+, CD123+, CD24-, IgS à forte densité

Ne pas confondre avec : SLVL

Lymphome de la zone marginalesplénique (LZMs ou SLVL)

Immunophénotype :CD19+, CD20+, CD5-, CD103-, CD24+, CD123-

Morphologie :Souvent hyperlymphocytose (<> HCL)Petit lymphocyte à rapport N/C élevé et à noyau à chromatine condensée

souvent en mottes (comme dans la LLC)Villosités polarisées (> 20 % de lymphocytes villeux)

Que pensez vous des cellules de cette galerie ?

1. Contexte réactionnel2. Hémopathie chronique3. Présence de cellules anormales jeunes4. Sans avis

2

0

2

0

0

0 1 2

1. Contexte réactionnel

2. Hémopathie chronique

3. Présence de cellulesanormales jeunes

4. Sans avis

Que pensez vous des cellules de cette galerie ?

Leucémie Lymphoblastique Aiguë

Eléments parfois de petite taille pouvant être confondus avec despetits lymphocytes mûrs

Envahissement sanguin par un myélome

Globules rouges en rouleauxGlobules rouges en rouleaux

Particularité :

Et enfin !!!!! Qu’en pensez-vous ?

1. Normal2. Curieux3. Suspect4. Anormal5. Bénin6. Malin

2

1

0

0

0

0

0

0 1

1. Normal

2. Curieux

3. Suspect

4. Anormal

5. Bénin

6. Malin

Et enfin !!!!!

Lymphome de la zone marginale

Immunophénotype :CD19+, CD20+, CD5-, CD23-