Post on 19-Jul-2020
Μεταβολομική στρατηγική βασισμένη στο NMR
Τομέας Φαρμακογνωσίας & Χημείας Φυσικών Προϊόντων, Τμήμα Φαρμακευτικής, Εθνικό &Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
megrafakou@pharm.uoa.gr
Μαρία-Ελένη ΓραφάκουΥποψήφια Διδάκτωρ
Επιβλέπουσα: Καθ. Ελένη Σκαλτσά
ΦΑΡΜΑΚΟΝ + ΓΝΩΣΙΣ
ΘΕΩΡΗΤΙΚΟ ΜΕΡΟΣ
✓Στόχος: χημική και φαρμακολογική μελέτη των φαρμακευτικών φυτών
✓Τα φαρμακευτικά φυτά αποτελούν είδη ευρείας εξάπλωσης, εμφανίζοντας πληθώρα εθνοφαρμακολογικών αναφορών και φυτοχημικών μελετών. Τα αντίστοιχα ενδημικά φυτικά είδη με στενή εξάπλωση παρουσιάζουν ερευνητικό ενδιαφέρον, καθώς αποτελούν δυνητικά σημαντικές πηγές νέων βιοδραστικών δευτερογενών μεταβολιτών.
Το Εργαστήριο Φαρμακογνωσίας & Χημείας Φυσικών Προϊόντων
✓ Ελλάδα: biodiversity spot
Chemistry of Natural Products
SECONDARY METABOLITES
• Το μεταβόλομα αποτελεί το σύνολο των μεταβολιτών (πρωτογενών και δευτερογενών) ενός βιολογικού συστήματος.
• Δύο μεγάλα πεδία απαντώνται στην έρευνα μικρών μορίων βιολογικής προέλευσης, η μεταβολομική και η χημεία φυσικών προϊόντων.
Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy
Advanced analytical method for the identification &
characterization of biological small
molecules
Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy
Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy
Tα φάσματα NMR κάθε ένωσης είναι χαρακτηριστικά.
The whole fractionation and final isolation procedure is continuously monitored by NMR:
✓ Extraction and fractionation is carried out by non-deuterated solvents
✓ The resultant solutions are dried under vacuum and subsequently re-
dissolved in deuterated solvent, specifically chloroform-d
Schripsema J., 2010. Phytochem. Anal., 21, 14-21.
The whole fractionation and final isolation procedure is continuously monitored by NMR:
✓ Extraction and fractionation is carried out by non-deuterated solvents
✓ The resultant solutions are dried under vacuum and subsequently re-
dissolved in deuterated solvent, specifically chloroform-d
The whole fractionation and final isolation procedure is continuously monitored by NMR:
✓ Extraction and fractionation is carried out by non-deuterated solvents
✓ The resultant solutions are dried under vacuum and subsequently re-
dissolved in deuterated solvent, specifically chloroform-d
Project: NMR metabolomic strategy: Metabolites isolated from Calea jamaicensis
Project: NMR metabolomic strategy: Metabolites isolated from Calea jamaicensis
Χρωμένια & Σεσκιτερπενικές Λακτόνες
✓isolation
✓structure elucidation
✓evaluation of the biological activities High activity in living systems
Strong pharmacological interest
Chadwick et al., 2013. Int. J. Mol. Sci.,14, 12780-12805Costa et al., 2016. Eur J Med Chem, 10;123:487-507
ΠΡΑΚΤΙΚΟ ΜΕΡΟΣ
Amaral et al., 2017. J. Med. Plants Res., 11, 518-537.Wussow et al., 1985. Systematic Botany, 10, 241.
✓ Asteraceae family
✓ 125 spp.
✓ Τροπικές & υποτροπικές περιοχές της Αμερικής
✓ Χρήση στη λαϊκή θεραπευτική (skin infections, dermatitis, gastroenteritis & diarrhoia, diabetes, urinary problems, fever)
✓ C. jamaicensis ενδημικό από το Μεξικό έως την Κολομβία.
Το γένος Calea L. (Asteraceae)
VLC (silica gel) cHex-EtOAc-Me2CO μείγματα
αυξημένης πολικότητας
Εκχύλιση της δρόγης (maceration): cyclohexane/ether/ methanol 1:1:1
Υγρό-υγρό εκχύλιση(EtOAc)
NMR spectra of the terpenoid crude extract
and derived sub-fractions have given certain
evidence of compounds belonging to chromenes &
sesquiterpene lactones
CRUDE EXTRACT
VLC (silica gel) cHex-EtOAc-Me2CO μείγματα
αυξημένης πολικότητας
Εκχύλιση της δρόγης (maceration): cyclohexane/ether/methanol 1:1:1
Υγρό-υγρό εκχύλιση (EtOAc)
Kλάσμα Α
Kλάσμα ΒKλάσμα C
Kλάσμα D
Kλάσμα G
Kλάσμα F
Kλάσμα E
Kλάσμα HKλάσμα I
Ten metabolites have been isolated so far
Further purificationRP18-HPLC, prep.TLC, CC and microscale CC (pipette) on silica gel
Κλάσμα Β
Κλάσμα Β
Κλάσμα BM
Κλάσμα C
Κλάσμα CK
Κλάσμα D
Κλάσμα DK
Centaurea spp.
C. papposa
Crocus sativus L. (Iridaceae)
Christodoulou E, Grafakou ME, Skaltsa H, Kadoglou N,
Kostomitsopoulos N, Valsami G. JPP, accepted 18/11/2018.
Euphorbia spp.
Natural Products Chemistry