Laboratoire d’Analyses Toxicologiques en Addictologie. Eysseric Toxicologie - Médecine Légale -...
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H. Eysseric Toxicologie - Médecine Légale - Grenoble TD TD - - d d é é cembre 2010 UE d cembre 2010 UE d ’ ’ Addictologie Addictologie Hélène Eysseric pharmacien biologiste MCU-PH Médecine Légale UFR de Médecine UF Pharmacologie -Toxicologie CHU de Grenoble Laboratoire d Laboratoire d ’ ’ Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques en en Addictologie Addictologie
Transcript of Laboratoire d’Analyses Toxicologiques en Addictologie. Eysseric Toxicologie - Médecine Légale -...
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
TD TD --
ddeacuteeacutecembre 2010 UE dcembre 2010 UE drsquorsquo
AddictologieAddictologie
Heacutelegravene Eysseric pharmacien biologiste MCU-PH
Meacutedecine Leacutegale UFR de MeacutedecineUF Pharmacologie -Toxicologie CHU de Grenoble
Laboratoire dLaboratoire drsquorsquoAnalyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques en en AddictologieAddictologie
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DDeacuteeacuteroulement du TDroulement du TD
11
QuestionnaireQuestionnaire
22
Cours avec Cas pratiquesCours avec Cas pratiquesComplCompleacuteeacutetteacuteeacute par cours de toxicologie 4eme annpar cours de toxicologie 4eme anneacuteeacutee e PciePcie
-- analyses toxicologiques hospitalianalyses toxicologiques hospitaliegraveegraveres (M Bartoli)res (M Bartoli)-- toxicologie mtoxicologie meacuteeacutedicoldicoleacuteeacutegale (alcoolgale (alcooleacuteeacutemies smies seacuteeacutecuritcuriteacuteeacute
routiroutiegraveegravere soumission chimique)re soumission chimique)
33
Discussion Discussion --
SynthSynthegraveegravesese
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Questionnaire
1 Quelles peuvent ecirctre les missions drsquoun laboratoire de toxicologie analytique dans le domaine de lrsquoaddictologie
2 Quels types de preacutelegravevements peuvent ecirctre analyseacutes
3 Quand
doivent-ils ecirctre preacuteleveacutes
3 Quels eacutequipements analytiques y trouve-t-on
4 Combien de temps
dure une analyse
5 Combien coute
une analyse
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Ex de Cas CliniquesEx de Cas Cliniques
Cas nCas ndegdeg1 H pr1 H preacuteeacuteparateur en pharmacie parateur en pharmacie convulsions aprconvulsions apregraveegraves prise de s prise de tramadoltramadolhypersensibilithypersensibiliteacuteeacute banale intox aigu banale intox aigueumleuml
Cas nCas ndegdeg2 plusieurs cas de d2 plusieurs cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux mgaux meacuteeacutethadone +thadone +imputabilitimputabiliteacuteeacute
variable selon sujets (navariable selon sujets (naiumliumlfs usagers chroniques fs usagers chroniques
en sevrage) =gt en sevrage) =gt eacuteeacutetude des cheveux tude des cheveux
Cas nCas ndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internes notion toxicomanieens internes notion toxicomanieUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Quelles explications quelles solutions
Cas nCas ndegdeg4 Enfant 3 ans Somnolence 4 Enfant 3 ans Somnolence ddeacuteeacutepistage urinaire positif pistage urinaire positif en cannabis et opiacen cannabis et opiaceacuteeacutes s origine origine
Cas nCas ndegdeg5 Enfant 32 mois Somnolence 5 Enfant 32 mois Somnolence [[oxazoxazeacuteeacutepampam] ] PlasmaPlasma
= 45 mgL = 45 mgL (20 (20 agraveagrave
50 x 50 x concthconctheacuteeacuteraprap))
mais bonne tolmais bonne toleacuteeacuterance =gt exposition chronique rance =gt exposition chronique
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Objectif de la Objectif de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
isolerisoler identifieridentifier
et et doserdoser
un un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la est pas que la naturenature ddrsquorsquoun produit un produit qui dqui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute
mais aussi sa mais aussi sa concentrationconcentration
Dans le domaine de lDans le domaine de lrsquorsquoaddictologieaddictologie le le xxeacuteeacutenobiotiquenobiotique est en gest en geacuteeacutenneacuteeacuteral un produit toxicomanogral un produit toxicomanogegraveegravenene
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique en en addictologieaddictologie
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
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Norm
0
2
4
6
8
10
12
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Norm
0
5
10
15
20
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Norm
0
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1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
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Norm
0
2
4
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8
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Norm
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115
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335
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Norm
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Norm
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2
4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
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1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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DDeacuteeacuteroulement du TDroulement du TD
11
QuestionnaireQuestionnaire
22
Cours avec Cas pratiquesCours avec Cas pratiquesComplCompleacuteeacutetteacuteeacute par cours de toxicologie 4eme annpar cours de toxicologie 4eme anneacuteeacutee e PciePcie
-- analyses toxicologiques hospitalianalyses toxicologiques hospitaliegraveegraveres (M Bartoli)res (M Bartoli)-- toxicologie mtoxicologie meacuteeacutedicoldicoleacuteeacutegale (alcoolgale (alcooleacuteeacutemies smies seacuteeacutecuritcuriteacuteeacute
routiroutiegraveegravere soumission chimique)re soumission chimique)
33
Discussion Discussion --
SynthSynthegraveegravesese
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Questionnaire
1 Quelles peuvent ecirctre les missions drsquoun laboratoire de toxicologie analytique dans le domaine de lrsquoaddictologie
2 Quels types de preacutelegravevements peuvent ecirctre analyseacutes
3 Quand
doivent-ils ecirctre preacuteleveacutes
3 Quels eacutequipements analytiques y trouve-t-on
4 Combien de temps
dure une analyse
5 Combien coute
une analyse
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Ex de Cas CliniquesEx de Cas Cliniques
Cas nCas ndegdeg1 H pr1 H preacuteeacuteparateur en pharmacie parateur en pharmacie convulsions aprconvulsions apregraveegraves prise de s prise de tramadoltramadolhypersensibilithypersensibiliteacuteeacute banale intox aigu banale intox aigueumleuml
Cas nCas ndegdeg2 plusieurs cas de d2 plusieurs cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux mgaux meacuteeacutethadone +thadone +imputabilitimputabiliteacuteeacute
variable selon sujets (navariable selon sujets (naiumliumlfs usagers chroniques fs usagers chroniques
en sevrage) =gt en sevrage) =gt eacuteeacutetude des cheveux tude des cheveux
Cas nCas ndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internes notion toxicomanieens internes notion toxicomanieUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Quelles explications quelles solutions
Cas nCas ndegdeg4 Enfant 3 ans Somnolence 4 Enfant 3 ans Somnolence ddeacuteeacutepistage urinaire positif pistage urinaire positif en cannabis et opiacen cannabis et opiaceacuteeacutes s origine origine
Cas nCas ndegdeg5 Enfant 32 mois Somnolence 5 Enfant 32 mois Somnolence [[oxazoxazeacuteeacutepampam] ] PlasmaPlasma
= 45 mgL = 45 mgL (20 (20 agraveagrave
50 x 50 x concthconctheacuteeacuteraprap))
mais bonne tolmais bonne toleacuteeacuterance =gt exposition chronique rance =gt exposition chronique
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Objectif de la Objectif de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
isolerisoler identifieridentifier
et et doserdoser
un un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la est pas que la naturenature ddrsquorsquoun produit un produit qui dqui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute
mais aussi sa mais aussi sa concentrationconcentration
Dans le domaine de lDans le domaine de lrsquorsquoaddictologieaddictologie le le xxeacuteeacutenobiotiquenobiotique est en gest en geacuteeacutenneacuteeacuteral un produit toxicomanogral un produit toxicomanogegraveegravenene
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique en en addictologieaddictologie
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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0
2
4
6
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
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nm225 250 275 300 325 350 375
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nm225 250 275 300 325 350 375
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100
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200
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4
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
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5000
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7000
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9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
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3000000
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5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Questionnaire
1 Quelles peuvent ecirctre les missions drsquoun laboratoire de toxicologie analytique dans le domaine de lrsquoaddictologie
2 Quels types de preacutelegravevements peuvent ecirctre analyseacutes
3 Quand
doivent-ils ecirctre preacuteleveacutes
3 Quels eacutequipements analytiques y trouve-t-on
4 Combien de temps
dure une analyse
5 Combien coute
une analyse
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Ex de Cas CliniquesEx de Cas Cliniques
Cas nCas ndegdeg1 H pr1 H preacuteeacuteparateur en pharmacie parateur en pharmacie convulsions aprconvulsions apregraveegraves prise de s prise de tramadoltramadolhypersensibilithypersensibiliteacuteeacute banale intox aigu banale intox aigueumleuml
Cas nCas ndegdeg2 plusieurs cas de d2 plusieurs cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux mgaux meacuteeacutethadone +thadone +imputabilitimputabiliteacuteeacute
variable selon sujets (navariable selon sujets (naiumliumlfs usagers chroniques fs usagers chroniques
en sevrage) =gt en sevrage) =gt eacuteeacutetude des cheveux tude des cheveux
Cas nCas ndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internes notion toxicomanieens internes notion toxicomanieUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Quelles explications quelles solutions
Cas nCas ndegdeg4 Enfant 3 ans Somnolence 4 Enfant 3 ans Somnolence ddeacuteeacutepistage urinaire positif pistage urinaire positif en cannabis et opiacen cannabis et opiaceacuteeacutes s origine origine
Cas nCas ndegdeg5 Enfant 32 mois Somnolence 5 Enfant 32 mois Somnolence [[oxazoxazeacuteeacutepampam] ] PlasmaPlasma
= 45 mgL = 45 mgL (20 (20 agraveagrave
50 x 50 x concthconctheacuteeacuteraprap))
mais bonne tolmais bonne toleacuteeacuterance =gt exposition chronique rance =gt exposition chronique
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Objectif de la Objectif de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
isolerisoler identifieridentifier
et et doserdoser
un un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la est pas que la naturenature ddrsquorsquoun produit un produit qui dqui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute
mais aussi sa mais aussi sa concentrationconcentration
Dans le domaine de lDans le domaine de lrsquorsquoaddictologieaddictologie le le xxeacuteeacutenobiotiquenobiotique est en gest en geacuteeacutenneacuteeacuteral un produit toxicomanogral un produit toxicomanogegraveegravenene
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique en en addictologieaddictologie
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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40
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80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
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Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Ex de Cas CliniquesEx de Cas Cliniques
Cas nCas ndegdeg1 H pr1 H preacuteeacuteparateur en pharmacie parateur en pharmacie convulsions aprconvulsions apregraveegraves prise de s prise de tramadoltramadolhypersensibilithypersensibiliteacuteeacute banale intox aigu banale intox aigueumleuml
Cas nCas ndegdeg2 plusieurs cas de d2 plusieurs cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux mgaux meacuteeacutethadone +thadone +imputabilitimputabiliteacuteeacute
variable selon sujets (navariable selon sujets (naiumliumlfs usagers chroniques fs usagers chroniques
en sevrage) =gt en sevrage) =gt eacuteeacutetude des cheveux tude des cheveux
Cas nCas ndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internes notion toxicomanieens internes notion toxicomanieUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationUrgences hallucinations visuelles mydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Quelles explications quelles solutions
Cas nCas ndegdeg4 Enfant 3 ans Somnolence 4 Enfant 3 ans Somnolence ddeacuteeacutepistage urinaire positif pistage urinaire positif en cannabis et opiacen cannabis et opiaceacuteeacutes s origine origine
Cas nCas ndegdeg5 Enfant 32 mois Somnolence 5 Enfant 32 mois Somnolence [[oxazoxazeacuteeacutepampam] ] PlasmaPlasma
= 45 mgL = 45 mgL (20 (20 agraveagrave
50 x 50 x concthconctheacuteeacuteraprap))
mais bonne tolmais bonne toleacuteeacuterance =gt exposition chronique rance =gt exposition chronique
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Objectif de la Objectif de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
isolerisoler identifieridentifier
et et doserdoser
un un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la est pas que la naturenature ddrsquorsquoun produit un produit qui dqui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute
mais aussi sa mais aussi sa concentrationconcentration
Dans le domaine de lDans le domaine de lrsquorsquoaddictologieaddictologie le le xxeacuteeacutenobiotiquenobiotique est en gest en geacuteeacutenneacuteeacuteral un produit toxicomanogral un produit toxicomanogegraveegravenene
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique en en addictologieaddictologie
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Quelles explications quelles solutions
Cas nCas ndegdeg4 Enfant 3 ans Somnolence 4 Enfant 3 ans Somnolence ddeacuteeacutepistage urinaire positif pistage urinaire positif en cannabis et opiacen cannabis et opiaceacuteeacutes s origine origine
Cas nCas ndegdeg5 Enfant 32 mois Somnolence 5 Enfant 32 mois Somnolence [[oxazoxazeacuteeacutepampam] ] PlasmaPlasma
= 45 mgL = 45 mgL (20 (20 agraveagrave
50 x 50 x concthconctheacuteeacuteraprap))
mais bonne tolmais bonne toleacuteeacuterance =gt exposition chronique rance =gt exposition chronique
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Objectif de la Objectif de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
isolerisoler identifieridentifier
et et doserdoser
un un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la est pas que la naturenature ddrsquorsquoun produit un produit qui dqui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute
mais aussi sa mais aussi sa concentrationconcentration
Dans le domaine de lDans le domaine de lrsquorsquoaddictologieaddictologie le le xxeacuteeacutenobiotiquenobiotique est en gest en geacuteeacutenneacuteeacuteral un produit toxicomanogral un produit toxicomanogegraveegravenene
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique en en addictologieaddictologie
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Objectif de la Objectif de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
isolerisoler identifieridentifier
et et doserdoser
un un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la est pas que la naturenature ddrsquorsquoun produit un produit qui dqui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute
mais aussi sa mais aussi sa concentrationconcentration
Dans le domaine de lDans le domaine de lrsquorsquoaddictologieaddictologie le le xxeacuteeacutenobiotiquenobiotique est en gest en geacuteeacutenneacuteeacuteral un produit toxicomanogral un produit toxicomanogegraveegravenene
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique en en addictologieaddictologie
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
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Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
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Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
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7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique en en addictologieaddictologie
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Toxicologieeacutepideacutemiologique
1 Aide 1 Aide agraveagrave
llrsquoeacutersquoeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de de ddeacuteeacutependancependance
Confirmation biologiqueConfirmation biologique
ddrsquorsquoune conduite une conduite addictiveaddictive
(abus)(abus)
Toxicologie meacutedico-leacutegale
Toxicologie clinique
Toxicologie professionnelle
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Toxicologie Toxicologie CliniqueClinique
Hospitalisation lors dHospitalisation lors drsquorsquoune intoxication aiguune intoxication aigueumleumlPrise en charge mPrise en charge meacuteeacutedicaledicale
Cas nCas ndegdeg1 H1 H
29 ans29 ans
prpreacuteeacuteparateur pharmacieparateur pharmacie1cp 1cp ContramalContramalregreg
LP200 puis LP200 puis
6 6 cpscps
TopalgicTopalgicregreg
agraveagrave
50 en 6h pour lombalgies50 en 6h pour lombalgies
ConvulsionsConvulsions
RivotrilRivotrilregreg
1mg OK1mg OK
Analyses Toxicologiques pour confirmer Analyses Toxicologiques pour confirmer niveau dniveau drsquorsquoexpositionexposition
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
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Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
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Norm
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8
10
12
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Norm
0
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10
15
20
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Norm
0
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1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
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0
2
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Norm
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335
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2
4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
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5000
6000
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8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
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1000
2000
3000
4000
5000
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7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyse de Analyse de tramadoltramadol
TramadolTramadol
MorphineMorphineOpioideOpioide
OpiacOpiaceacuteeacute
Pas de mPas de meacuteeacutethode ICthode IC hheacuteeacuteroroiumliumlnenede dde deacuteeacutetection rapide tection rapide codcodeacuteeacuteineine
chromatographiechromatographie codcodeacuteeacutethylinethylinepholcodinepholcodine
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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TramadolTramadol
et et AbusAbus (Dossier CAP Angers 042006)(Dossier CAP Angers 042006)
min0 25 5 75 10
mAU
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
DAD1 A Sig=2304 Ref=550100 (AVR060404-029D)
47
54 5
016
72
31
nm220 240 260 280 300 320 340 360 380
Norm
0
20
40
60
80
100
DAD1 4755 (122 mAUApx) Ref=5837 of 0404-029DTRAMADOL
5 mois avant crise convulsive origine Aveu ulteacuterieur drsquoabus=gt Prise en charge pour sevrage
Analyse toxicologique type screening chromatographique (LCDAD)[tramadol] Plasma
35 mgL
toxique gt 1 mgL potentiellement leacutetale gt 2 mgL
EIT
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Toxicologie Toxicologie ProfessionnelleProfessionnelle
Analyse des Analyse des causescauses
dd
rsquorsquoun accident un accident du travail du travail (sang)(sang)
Suivi mSuivi meacuteeacutedical ddical drsquorsquoun salariun salarieacuteeacute
(urines (urines cheveux)cheveux)
--
eacuteeacutevaluation aptitude valuation aptitude agraveagrave
un poste un poste agraveagrave risquesrisques
--
cas des patients toxicomanescas des patients toxicomanes
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
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Norm
0
5
10
15
20
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
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0
2
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8
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Norm
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115
225
335
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Norm
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40
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80
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Norm
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100
150
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350
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
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5000
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7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
matricesADMEmatricesADME
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
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Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
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Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques Matrices selon CinMatrices selon Cineacuteeacutetiquetique
Sang Sang
quelques heures (24 quelques heures (24 agraveagrave
max 48)max 48)Urines Urines
quelques jours (3 quelques jours (3 agraveagrave
max 6)max 6)
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
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Norm
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2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
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Norm
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225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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40
60
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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100
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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2
4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
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Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales
inteacuterecirct du sang
Seul
milieu biologique pour lequel sont deacutefinis -
des concentrations theacuterapeutiques
-
des concentrations toxiques-
des concentrations leacutetales
ex de lrsquooxazeacutepam dans le sang chez sujet naiumlf en microgL
mortel
toxique
theacuterapeutique2000
150
3000
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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40
60
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
Matrice Avantages Inconveacutenients
Sang
Interpreacutetation (SR RCM) quantification +++ expo aigueuml
Analyse difficile Conservation Fenecirctre deacutetection de 24 heures
Urines Analyse facile (deacutepistage rapide possible) Fenecirctre deacutetection de 3 jours
Information essentiellement qualitative
Cheveux Non putreacutefiable Conservation Info sur exposition chronique
Analyse difficile
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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PrPreacuteeacutellegraveegravevements biologiques en vements biologiques en toxtox
avantages inconvavantages inconveacuteeacutenientsnients
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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40
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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GGeacuteeacutenneacuteeacuteralitraliteacuteeacutes sur les Cheveuxs sur les Cheveux
Scalp
Pointe
Racine
Passeacute
Preacutesent
Pousse dPousse drsquorsquoenviron environ 1 cmmois1 cmmois
(07 (07 ndashndash
14 cm)14 cm)laquolaquo
MMeacuteeacutemoire moire raquoraquo
de lde lrsquorsquoexposition exposition agraveagrave
des toxiquesdes toxiques
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques IntInteacuteeacuterecirct des recirct des CheveuxCheveux
Consommateur reacutegulier
Consommateur en sevrage
ToxicoramaToxicorama 1996 P1996 Peacuteeacutepin et coll pin et coll
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
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350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Mise en Mise en eacuteeacutevidence dvidence d
rsquorsquoune une consommation chroniqueconsommation chronique
ndashndash soumission chimiquesoumission chimiquebullbull Personnes vulnPersonnes vulneacuteeacuterablesrables
ndashndash conduite conduite addictiveaddictivendashndash restitution de permis injonction threstitution de permis injonction theacuteeacuterapeutiquerapeutiquendashndash dopagedopagendashndash cadavre putrcadavre putreacuteeacutefifieacuteeacute
profil de consommation profil de consommation
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalesgales
CheveuxCheveux
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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0
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40
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Dopage Dopage helliphellip
Gasquet disculpeacute par ses cheveuxDes analyses deacutemontrent que le tennisman sanctionneacute pour un controcircle positif agrave la cocaiumlne nest pas un consommateur reacutegulier Un pas vers la fin du feuilleton
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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100
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Toxicologie Toxicologie MMeacuteeacutedicodico--LLeacuteeacutegalegale
Recherches des Recherches des Causes de la MortCauses de la Mortenquenquegraveegravetete
annuelle annuelle AfssapsAfssaps
DRAMESDRAMES
(D(Deacuteeacuteccegraveegraves en Relation avec Abus Ms en Relation avec Abus Meacuteeacutedicaments ou Substances)dicaments ou Substances)
Conduite automobile Conduite automobile aprapregraveegraves usage de substances s usage de substances psychopsycho--activesactives
(Loi SR 2003) (Loi SR 2003) cfcf cours cours toxtox 44egraveegravememe AA
Infraction Infraction agraveagrave
la la lleacuteeacutegislation des stupgislation des stupeacuteeacutefiantsfiants(controcircle judiciaire analyse de saisies(controcircle judiciaire analyse de saisieshelliphellip) )
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
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Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
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Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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DRAMES 2009DRAMES 2009 260 d260 deacuteeacuteccegraveegraves s
STUP Illicites 137 cas
Opiaceacutes licites hors TSO 34 cas
TttSubstOpiaceacutes 89 cas
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
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6
8
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Norm
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115
225
335
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Norm
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40
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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2
4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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DRAMES 2009DRAMES 2009 137 d137 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec stupstupeacuteeacutefiants illicitesfiants illicites
91 cas produit unique dont 75 heacuteroiumlne
15 cocaiumlne
1 GHBGBL
346 cas associations dont 28 heacuteroiumlne + autres
17 cocaiumlne + autres
1 keacutetamine
+ autres
Sur lrsquoensemble des 137 cas
204 association avec Med PsychoActifs
387 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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DRAMES 2009DRAMES 2009 34 d34 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec opiacopiaceacuteeacutes licitess licites
Produit unique 29 cas
morphine 18
pholcodine 4
tramadol
3
codeacuteine 2
dextropropoxyphegravene
2
Sur lrsquoensemble des 34 cas
17 cas association avec Med PsychoActifs
16 cas lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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40
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80
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DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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0
5
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DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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nm225 250 275 300 325 350 375
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DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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DRAMES 2009DRAMES 2009 89 d89 deacuteeacuteccegraveegraves avec s avec Med SubstitutionMed Substitution
OpiacOpiaceacuteeacutess
48 cas meacutethadone dont 28 en association avec Med PsychoActifs
30 cas Bupreacutenorphine
Haut Dosage dont certains en association avec Med PsychoActifs
11 cas MSO + autres substances (entre elles codeacuteine heacuteroiumlne morphine ampheacutetamine GHBGBL morphine tramadol)
Sur lrsquoensemble des 89 cas
539 association avec Med PsychoActifs
371 lsquorsquo
avec Ethanol gt 05 gL
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Observation de dObservation de deacuteeacuteccegraveegraves avec une faible concentration s avec une faible concentration sanguine de msanguine de meacuteeacutethadone thadone
rArrrArr interprinterpreacuteeacutetation tation rArrrArr IntInteacuteeacuterecirct de lrecirct de l
rsquorsquoanalyse des cheveux (information sur analyse des cheveux (information sur
llrsquorsquoexposition chronique) pour lexposition chronique) pour lrsquoeacutersquoeacutevaluation de lvaluation de lrsquoeacutersquoeacutetat de tat de toltoleacuteeacuterance rance pharmacopharmaco--dynamiquedynamique
Sachant quSachant qursquorsquoune concentration sanguine est toxique une concentration sanguine est toxique ddegraveegraves 200 s 200 micromicrogL chez gL chez sujet nasujet naiumliumlffddegraveegraves 750 s 750 micromicrogL chez gL chez usager chroniqueusager chronique
Cas nCas ndegdeg22helliphellip
et RCM et RCM
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
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Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
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Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Pour 3 parmi 6 cas de dPour 3 parmi 6 cas de deacuteeacuteccegraveegraves ms meacuteeacutedicodico--lleacuteeacutegaux gaux llrsquorsquoanalyse des cheveux a apportanalyse des cheveux a apporteacuteeacute
une aide une aide agraveagrave
llrsquorsquointerprinterpreacuteeacutetation tation
Communications Communications journjourneacuteeacutees pharmacodes pharmacodeacuteeacutependances Biarritz 2005 congrpendances Biarritz 2005 congregraveegraves annuel SFTA 2006s annuel SFTA 2006
toxiquetoxique297297----Sujet Sujet nanaiumliumlff
toxiquetoxique530530++--Consommateur Consommateur rreacuteeacutecentcent
ththeacuteeacuterapeutiquerapeutique285285++++Consommateur Consommateur chroniquechronique
interprinterpreacuteeacutetationtation[m[meacuteeacutethadone] sangthadone] sangen en micromicrogLgL
MMeacuteeacutethadone capillairethadone capillaireSegment rSegment reacuteeacutecentpasscentpasseacuteeacute
helliphellipdiagnostic de ddiagnostic de deacuteeacuteccegraveegraves toxique s toxique impliquant la impliquant la mmeacuteeacutethadonethadone
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Toxicologie Toxicologie EpidEpideacuteeacutemiologiquemiologique
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence de de nouveaux usagesnouveaux usages
chez les jeunes adulteschez les jeunes adulteschez les sportifschez les sportifshelliphellip
CasnCasndegdeg3 2 lyc3 2 lyceacuteeacuteens internesens internesNotion toxicomanieNotion toxicomanieUrgences hallucinations visuellesUrgences hallucinations visuellesmydriase agitationmydriase agitationcannabis ou autre substance cannabis ou autre substance
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
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Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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Norm
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335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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40
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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2
4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
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1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Intoxication au Intoxication au DaturaDatura stramoniumstramonium
((thegravese MTollet Angers 2006)
AlcaloAlcaloiumliumldesdes
tropaniquestropaniques
responsablesresponsables
de la de la toxicittoxiciteacuteeacute
atropine scopolamineatropine scopolamine
InterrogatoireInterrogatoire
((souventsouvent
limitlimiteacuteeacute
du fait des hallucinations)du fait des hallucinations)ExamenExamen
cliniqueclinique
++++
Syndrome Syndrome anticholinergiqueanticholinergique
RechercheRecherche
urinaireurinaire
ddrsquorsquoatropineatropine
et de scopolamine et de scopolamine (GCMS)(GCMS)VoireVoire
dansdans
lesles
cheveuxcheveux
(LCMSMS) (Kintz et al JAT 2006(Kintz et al JAT 2006))
de 2000de 2000
agraveagrave
20042004
69 Intoxications (CAP 69 Intoxications (CAP Angers)Angers)Augmentation progressive des Augmentation progressive des appelsappels
(5 en 2000 23 en 2004)(5 en 2000 23 en 2004)
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
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Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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IntInteacuteeacuterecircts de la Toxicologie Analytiquerecircts de la Toxicologie Analytique
Selon le contexte Selon lSelon le contexte Selon lrsquorsquohistoire du patienthistoire du patienthelliphellip4 types d4 types drsquorsquoaide potentielleaide potentielle
1 1 eacuteeacutevaluation du degrvaluation du degreacuteeacute
de dde deacuteeacutependancependance2 suivi traitements de substitution2 suivi traitements de substitution3 suivi sevrage3 suivi sevrage4 scientifique4 scientifique
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
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854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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2 Aide au suivi des traitements 2 Aide au suivi des traitements de substitutionde substitution
Controcircle biologique Controcircle biologique ddrsquorsquoobservanceobservanceex lex leacuteeacutegislation mgislation meacuteeacutethadonethadone
Surveillance de Surveillance de rechutesrechutes
Mise en Mise en eacuteeacutevidence vidence ddrsquoeacutersquoeacutemergence dmergence drsquorsquoautres toxicomaniesautres toxicomaniesex ex
cocacocaiumliumlne en hausse chez les patients ne en hausse chez les patients
substitusubstitueacuteeacutes s agraveagrave
la mla meacuteeacutethadone thadone
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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4
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
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4000
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mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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3 Aide au suivi des sevrages3 Aide au suivi des sevrages
StupStupeacuteeacutefiantsfiants
MMeacuteeacutedicamentsdicaments
TabacTabac
AlcoolAlcool
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Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
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350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Ex de suivi urinaire Ex de suivi urinaire sevrage sevrage agraveagrave
la la buprbupreacuteeacutenorphinenorphine
050
100150200250300350400
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
0
100
200
300
400
500
600
U1 U2 U3 U4 U5 U6 U7 U8 U9 U10 U11
Bup (ngml)Nor Bup (ngml)
Patient 1 en sevrage Patient 2 en rechute
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
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Norm
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115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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40
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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2
4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
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1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques du tabacdu tabac
CO CO air expirair expireacuteeacutelt 8ppm lt 8ppm asympasymp
abstinenceabstinence
CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinine
urineurine
(tests IC LCUV)(tests IC LCUV)
lt 50 lt 50 micromicrogL gL asympasymp
abstinenceabstinenceTabagisme passif lt 150 Tabagisme passif lt 150 micromicrogLgL
Nicotine Nicotine CotinineCotinine
et et HydroxycotinineHydroxycotinineplasma salive plasma salive (LCMSMS)(LCMSMS)
Distinction fumeur lDistinction fumeur leacuteeacutegerimportant (ratio OHgerimportant (ratio OH--COTCOT)COTCOT)Suivi cinSuivi cineacuteeacutetique des patients sous patchtique des patients sous patch
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
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350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Marqueurs biologiques Marqueurs biologiques de lde lrsquorsquoalcoolalcool
IndirectsIndirectsenzymes enzymes ((γγGTGT ASAT ALAT) ASAT ALAT) VGMVGMtransferrine dtransferrine deacuteeacuteficiente en hydrates de carbone (CDT) ficiente en hydrates de carbone (CDT) transferrine transferrine ddeacuteeacutesialylsialyleacuteeacuteee
(SDT)(SDT)
DirectsDirectsesters esters eacuteeacutethyliques dthyliques drsquorsquoacides gras (FAEE) acides gras (FAEE) cheveuxcheveux
(GCMS)(GCMS)
eacuteeacutethylthyl
glucuronideglucuronide
(sang) urine cheveux (sang) urine cheveux (LCMSMS)(LCMSMS)bullbull marqueur alcoolisation rmarqueur alcoolisation reacuteeacutecente (cente (UU 3j) chronique ( 3j) chronique (CC))bullbull distinction consommateurs occasionnels rdistinction consommateurs occasionnels reacuteeacuteguliers guliers
importantsimportantsbullbull corrcorreacuteeacutelation avec quantitlation avec quantiteacuteeacute
consommconsommeacuteeacutee e
gt 30gj gt 4pgmg de cheveuxgt 30gj gt 4pgmg de cheveux
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
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Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
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Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
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Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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4 Int4 Inteacuteeacuterecircts Scientifiques recircts Scientifiques toxicocintoxicocineacuteeacutetiquetique
Ex dEx drsquoeacutersquoeacutelimination urinairelimination urinaire
de mde meacuteeacutethadone et EDDP chez le thadone et EDDP chez le nouveaunouveau--nneacuteeacute
de mde megraveegravere traitre traiteacuteeacuteee
01000200030004000500060007000
J1 J3 J5 J7 J9 J11 J13 J15 J17 J19
Meacutethadone (ng mg de creacuteatinine)EDDP (ng mg de creacuteatinine)
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
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Norm
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115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
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Norm
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40
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80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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100
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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2
4
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Exigences de la Exigences de la Toxicologie AnalytiqueToxicologie Analytique
Mise en Mise en œœuvre de moyens techniques uvre de moyens techniques pour pour
llrsquorsquoisolement lisolement lrsquorsquoidentification et le dosage didentification et le dosage drsquorsquoun un xxeacuteeacutenobiotiquenobiotiqueagraveagrave
partir dpartir drsquorsquoune matrice (le plus souvent biologiqueune matrice (le plus souvent biologiquehelliphellip))
helliphellip ce nce nrsquorsquoest pas que la nature dest pas que la nature drsquorsquoun produit qui dun produit qui deacuteeacutetermine sa termine sa toxicittoxiciteacuteeacute mais bien aussi sa concentration mais bien aussi sa concentration
qualitqualiteacuteeacute
des prdes preacuteeacutellegraveegravevements + qualitvements + qualiteacuteeacute
des techniquesdes techniques etethelliphellip
controcircles qualitcontrocircles qualiteacuteeacute
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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100
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200
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300
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
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201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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QualitQualiteacuteeacute
du Prdu Preacuteeacutellegraveegravevementvement
--
le choix du le choix du bon milieu biologique bon milieu biologique =gt Contexte=gt Contexte+ + DDeacuteeacutelailai
entre exposition et prentre exposition et preacuteeacutellegraveegravevement vement
(Cin(Cineacuteeacutetique dtique drsquoeacutersquoeacutelimination)limination)
--
une une bonne conservation bonne conservation =gt Moyens =gt Moyens Techniques Techniques (chambre froide cong(chambre froide congeacuteeacutelateurs)lateurs)
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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100
150
200
250
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350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
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0
100
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0
100
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
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245e5256
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201e5256
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435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
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0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
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118e6386
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854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques PrPreacuteeacutellegraveegravevementsvements
selon Contexteselon Contexte
Seacutecuriteacute
routiegraveredeacutepistage urine (salive)dosage sang air expireacute
restitution permis cheveux
Infraction leacutegislation des stupeacutefiants
usage urine (sueur)injonction theacuterapeutique
urine cheveux
Hospitalisation anamnegravese toxique
sang urine
Soumission chimique Selon le deacutelai sang urine
ou cheveux
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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40
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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4
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
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2000
3000
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5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
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4000
5000
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7000
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9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
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500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
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4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
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0
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
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435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
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0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
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118e6386
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854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses Toxicologiques Analyses Toxicologiques MatricesMatrices
selon Cinselon Cineacuteeacutetiquetique
Sang salive Sang salive
quelques heuresquelques heuresUrines Urines
quelques joursquelques jours
Cheveux Cheveux
des semaines des moisdes semaines des mois
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Quelles Techniques Quelles Techniques Analytiques Analytiques
11egraveegravere re eacuteeacutetape tape qualitativequalitative recherche large recherche large
(screening)(screening)
22egraveegraveme me eacuteeacutetape tape quantitativequantitative
Pas Pas uneune
mais un mais un ensemble de ensemble de mmeacuteeacutethodesthodes
avec avantages inconvavec avantages inconveacuteeacutenients nients rapiditrapiditeacuteeacutesensibilitsensibiliteacuteeacute sp speacuteeacutecificitcificiteacuteeacutecocoucircucircttreproductibilitreproductibiliteacuteeacute pr preacuteeacutecisioncision
MMeacuteeacutethodes immunochimiquesthodes immunochimiquesMMeacuteeacutethodes chromatographiquesthodes chromatographiques
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Analyses de toxicologie cliniqueAnalyses de toxicologie cliniqueddeacuteeacutemarche analytiquemarche analytique
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiques thodes Immunochimiques QualitativesQualitatives
Objectif identifier une Objectif identifier une Classe Classe de mde meacuteeacutedicaments ou dicaments ou stupstupeacuteeacutefiants donc plusieurs molfiants donc plusieurs moleacuteeacutecules dcules drsquorsquoune mecircme une mecircme famille famille
--
Choix dChoix drsquorsquoun un AnticorpsAnticorps
pour une Famille Chimique pour une Famille Chimique
--
RReacuteeacutesultatsultat
QualitatifQualitatif
Positif ou N Positif ou Neacuteeacutegatif voire Semigatif voire Semi--quantitatifquantitatif
--
InterprInterpreacuteeacutetation tation parfois dparfois deacuteeacutelicate licate
Seuil de PositivitSeuil de Positiviteacuteeacute
Seuil de D Seuil de Deacuteeacutetectiontection
AffinitAffiniteacuteeacute
variable des diffvariable des diffeacuteeacuterentes molrentes moleacuteeacutecules de cette famille cules de cette famille vis vis agraveagrave
vis de lvis de lrsquorsquoAnticorps Anticorps Faux NFaux Neacuteeacutegatifsgatifs
RReacuteeacuteactions Croisactions Croiseacuteeacutees (parentes (parenteacuteeacute
structurale) structurale) Faux PositifsFaux Positifs
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie immunoimmuno--analyseanalyse
bullbull Avantages Avantages ndashndash RapideRapidendashndash Automatisable (ex stupAutomatisable (ex stupeacuteeacutefiants dans les urines)fiants dans les urines)ndashndash CoCoucircucirctt
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash Non spNon speacuteeacutecifiquecifiquendashndash Pas toujours suffisamment sensible Pas toujours suffisamment sensible ndashndash Pas toujours adaptPas toujours adapteacuteeacute
au sang (ex stupau sang (ex stupeacuteeacutefiants)fiants)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
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Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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40
60
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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100
150
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300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Tests rapides IC et CannabisTests rapides IC et CannabisEnfant 3 ans somnolent mEnfant 3 ans somnolent meacuteeacutedicaments mdicaments megraveegravere re
Syndrome Syndrome atropiniqueatropinique extrapyramidal extrapyramidal Infection bronchiqueInfection bronchique
IC solide opiacIC solide opiaceacuteeacutes cannabis +s cannabis +eacuteeacutevolution favorable sortie J3volution favorable sortie J3
Ac niflumique 50 mgLIC solide positif
Apregraves enquecircte Nifluril regreg
suppoAutre prise Hexapneumine regreg
CPGSMcannabis neacutegatif
opiaceacutes pholcodineCLHPDAD
chlorpheacuteniramine ac niflumique
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
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25
5
75
10
125
15
175
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46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
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13
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Norm
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10
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
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2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
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40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
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Abundance
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15412165
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OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
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2000
3000
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9000
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Abundance
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289
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9000
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Abundance
167 ATROPINE124
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500000
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3000000
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5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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Exemple du Kit OpiacExemple du Kit Opiaceacuteeacutess
Anticorps anti morphinepas de FP FN (si lt seuil)
Opiaceacutes deacutetecteacutes morphine codeacuteine codeacutethyline dihydrocodeacuteine pholcodine
Opiaceacutes non deacutetecteacute bupreacutenorphine
Opioiumldes non deacutetecteacutes meacutethadone dextropropoxyphegravene fentanyl tramadol
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
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Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
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14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
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Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
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2000
4000
6000
8000
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Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
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2000
4000
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Abundance
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77303
15412165
267177192 221 239 285
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OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
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Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
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9000
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Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
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500000
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3000000
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5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
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201e5256
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435e4256
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129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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MMeacuteeacutethodes Immunochimiquesthodes Immunochimiques SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
des Tests selon famille chimiquedes Tests selon famille chimique
Benzo pas de Faux-Positifs (FP) mais Faux-Neacutegatifs (FN)
(bromazeacutepam BDZ faiblement doseacutees)
Opiaceacutes pas de FP FN (si lt seuil)bupreacutenorphine
non doseacutee
opioiumldes non doseacutes (meacutethadone DPX fentanyl tramadol)
Cocaiumlne pas de FP FN (si lt seuil)
Cannabis
pas de FP
(sauf ac niflumique en tests solides) FN (si lt seuil)
Ampheacutet
FP
(anorexigegravenes benfluorex heptaminol ofloxacine)FN (deacuteriveacutes ecstasy ampheacutet exotiques)
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
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MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
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ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
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Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
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SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
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helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
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100
120
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nm225 250 275 300 325 350 375
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25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
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115
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335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
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4000
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mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
800 820 840 860 880 900 920 940 960 980 1000
500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Objectif Objectif identifier formellement et quantifieridentifier formellement et quantifier
une ou plusieurs une ou plusieurs substances msubstances meacuteeacutedicamenteuses stupdicamenteuses stupeacuteeacutefiantes fiantes helliphellip
SSeacuteeacuteparationparationpar chromatographie en phase gazeuse (par chromatographie en phase gazeuse (CPGCPG) ou chromatographie en phase liquide ) ou chromatographie en phase liquide haute performance (haute performance (CLHPCLHP))
DDeacuteeacutetectiontectionPar spectromPar spectromeacuteeacutetrie de masse (trie de masse (MSMS) par barrette de diodes () par barrette de diodes (DADDAD))helliphellip
SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute optimale recherchoptimale rechercheacuteeacutee e
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
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8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
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350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
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10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
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mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
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Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
MMeacuteeacutethodes Chromatographiques thodes Chromatographiques Approche Approche Qualitative et QuantitativeQualitative et Quantitative
Recherche en aveugle screeningRecherche en aveugle screening(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)(LCDAD GCMS LCMS LCMSMS)
Recherchedosage ciblRecherchedosage cibleacuteeacute
(LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS (LCDAD GCMS mode SIM GCMSMS
LCMSMS)LCMSMS)
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
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500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
ChromatographieChromatographie couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
la dla deacuteeacutetection partection par
spectromspectromeacuteeacutetrie de massetrie de masse
Chromatographie analyse des constituants drsquo1 meacutelange par adsorption seacutelective (ou partage) entre une phase stationnaire et une phase mobile (liquide ou gazeuse)
Spectromeacutetrie de masse technique d rsquoidentification d rsquoune substance selon sa masse et sa charge eacutelectrique
=gt Speacutecificiteacute+++
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
Ech
InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
60
80
100
120
DAD1 6950 (150 mAUDn1) Ref=5501 of 0212BROMAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
12
DAD1 8584 (131 mAUUp2) Ref=5501 of 021NITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
DAD1 9064 (236 mAUUp2) Ref=5501 of 021NDM CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
510
1520
25
3035
DAD1 9279 (399 mAUUp2) Ref=5501 of 021LORAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
005
115
225
335
DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
20
40
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80
DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
50
100
150
200
250
300
350
DAD1 10882 (387 mAUApx) Ref=10201 of 02CLOBAZAM
nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
2
4
6
8
10
DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
94822896742 14055 107 272207 225167152 191 255237178
124289
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500000
1000000
1500000
2000000
2500000
3000000
3500000
4000000
4500000
5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
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Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Analyses de toxicologie Analyses de toxicologie chromatographiechromatographie
bullbull Avantages Avantages ndashndash SpSpeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
++++++
ndashndash SensibilitSensibiliteacuteeacute
++++++
bullbull InconvInconveacuteeacutenients nients ndashndash PrPreacuteeacuteparation des paration des eacuteeacutechantillons longuechantillons longuendashndash Investissement en matInvestissement en mateacuteeacuterielrielndashndash Personnel hautement qualifiPersonnel hautement qualifieacuteeacutendashndash cocoucircucirctt
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
COLONNE
DeacutetecteurSignal
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Ech
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Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
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DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
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10
653
10
885
11
159 A
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4261
1
13
719
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Norm
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40
60
80
100
120
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
5
10
15
20
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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25
3035
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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Norm
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115
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335
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Norm
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
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150
200
250
300
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nm225 250 275 300 325 350 375
Norm
0
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10
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H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
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4000
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O
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NCH3
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O
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CH2OHO
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5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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3081 gt 235751e3
239
187110066299
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245e5256
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201e5256
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129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
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109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
SSeacuteeacuteparation paration ChromatographiqueChromatographiquehelliphellip (GC ou LC)(GC ou LC)
CPG CLHPElution = f (Tempeacuterature) Elution = f (Solvants)
Gaz (N2 He) Injecteur
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DeacutetecteurSignal
Four50-300degC
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InjTr0
Tr1
Injecteur
COLONNE
Deacutetecteur
Ech Solvants
Pompe
Four20-50degC
Signal
InjTr0
Tr1
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
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5
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52
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159 A
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DAD1 9876 (95 mAUDn1) Ref=5501 of 0212AALPRAZOLAM
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DAD1 10013 (43 mAUApx) Ref=10201 of 021FLUNITRAZEPAM
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DAD1 10653 (108 mAUApx) Ref=10201 of 02NDM DIAZEPAM
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
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Abundance
TIC 1005002D
833
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A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
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((Sauvage et al Clin Chem 2006)
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Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
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0
100
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0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
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129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
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0
100
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0
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0
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0
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0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
helliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
uneune
DDeacuteeacutetection Barrette de Diodes tection Barrette de Diodes (LCDAD) (LCDAD) ex du sang dex du sang drsquorsquoun patient 10 picsun patient 10 pics
min0 5 10 15
mAU
0
25
5
75
10
125
15
175
DAD1 A Sig=23010 Ref=550100 (0212A03AD)
14
46
52
52
69
03
86
31 9
114
93
18 9
836
10
012
10
653
10
885
11
159 A
rea 4
4261
1
13
719
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Norm
0
20
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Norm
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DAD1 11149 (111 mAUApx) Ref=10201 of 02LORMETAZEPAM
Meacutelange 8 BDZ+ 2 meacutetabolites
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
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Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
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2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
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10842
77303
15412165
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OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
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2000
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7000
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9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
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Abundance
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500000
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Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
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0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
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uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
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uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
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uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
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186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
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uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
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118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
Scan 678 (10020 min) 1005002D (-)94 138
108 303122154
77
42 65 221197179 289254 270239
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 3000
2000
4000
6000
8000
mz--gt
Abundance
170 SCOPOLAMINE94 138
10842
77303
15412165
267177192 221 239 285
94 303135
NCH3
OC
O
CH
CH2OH
NCH3
OC
O
CH
CH2OHO
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
mz--gt
Abundance
Scan 621 (9436 min) 1005001D (-)124
289
948214067 27242 10755 253207 239159 191179 225 301
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 2800
1000
2000
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5000
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7000
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9000
mz--gt
Abundance
167 ATROPINE124
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124289
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500000
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5000000
Time--gt
Abundance
TIC 1005002D
833
873
944
1002
A
SA-H2
O
A
met 2S-H2
OAtropine Scopolamine
GCGChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par
SpectromSpectromeacuteeacutetrie trie de Masse (GCMS) de Masse (GCMS) ex dex drsquorsquoune urine hydrolysune urine hydrolyseacuteeacutee e -- DaturaDatura
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Mode Simple MSMode Simple MSIdentification
General Unknow
Screening
(GUS)
bibliothegraveque (Humbert et al)
Quantification
Selective
Ion Monitoring (SIM)
Mode Tandem MSMS Mode Tandem MSMS Identification
Enhanced
Product Ion scan (EPI)
bibliothegraveque
((Sauvage et al Clin Chem 2006)
Quantification
Multiple Reaction
Monitoring (MRM)
LCLChelliphellip
couplcoupleacuteeacutee e agraveagrave
une dune deacuteeacutetection partection par SpectromSpectromeacuteeacutetrie de Masse (LCMStrie de Masse (LCMS(n)(n)) )
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
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0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
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uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
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29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
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109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
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30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
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H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
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SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Seacutelection
ion fils
Q1 fixe Q2 Q3 fixe
Seacutelection ion parent Fragmentation
M1 H+
M2H+
M6 H+
M3 H+
M4 H+M5 H+
M3 H+
I1 +
I3 +
I2 + I2 +
Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction
Monitoring (MRM) transition
Seacutelectiviteacute
deacutetection -
quantification
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Cas ndeg4 enfant intox oxazeacutepam
45 mgL bonne toleacuterance =gt exposition chronique
Analyse capillaire
de 5 segments (LCMSMS)29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100uplc souchi0600328-40 1 MRM of 12 Channels ES+
3081 gt 235751e3
239
187110066299
uplc souchi0600328-39 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
245e5256
uplc souchi0600328-38 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
201e5256
uplc souchi0600328-37 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
435e4256
uplc souchi0600328-36 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
129e4255
201
uplc souchi0600328-35 1 MRM of 12 Channels ES+ 3081 gt 235
923e3254
186069037 149116 292
29-Mar-2006 - 145634Quattro Premier VAA171bl cheveux
Time050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
100
050 100 150 200 250 300 350 400 450
0
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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050 100 150 200 250 300 350 400 450
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100uplc souchi0600328-40 2 MRM of 12 Channels ES+
2871 gt 2411471e3
385
315 346
uplc souchi0600328-39 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
165e6386
uplc souchi0600328-38 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
126e6386
uplc souchi0600328-37 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
118e6386
uplc souchi0600328-36 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
854e5386
uplc souchi0600328-35 2 MRM of 12 Channels ES+ 2871 gt 2411
109e6385
Blanc
S1 15cm racine
S2 1cm
S3 2cm
S4 2cm
S5 4cm
Zolpidem Oxazeacutepam
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
Notion de Notion de seuil de dseuil de deacuteeacutetectiontection
Pour chaque couplePour chaque couple
1 seuil de d1 seuil de deacuteeacutetectiontection substancemsubstancemeacuteeacutethodethode
Ex du Ex du bromazbromazeacuteeacutepampam ((LexomilLexomil regreg anxiolytiqueanxiolytique))techniquetechnique seuil moyen en seuil moyen en micromicrogLgLImmunochimieImmunochimie
300 (toxique)300 (toxique)
CLHPDADCLHPDAD
30 (th30 (theacuteeacuterapeutique)rapeutique)CLHPCLHPSMSM
33
(infra (infra ThTheacuteeacuterara))
CLHPCLHPSMSMSMSM
0303
spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
- Marqueurs biologiques du tabac
- Marqueurs biologiques de lrsquoalcool
- 4 Inteacuterecircts Scientifiques toxicocineacutetique
- Exigences de la Toxicologie Analytique
- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
- Diapositive numeacutero 56
- Diapositive numeacutero 57
- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 1Biologiste Toxicologue 1
Se procurer lesSe procurer les
produits de rproduits de reacuteeacuteffeacuteeacuterencerence
et les met les meacuteeacutetabolitestabolitesrArrrArr Les industriels doivent nous aider Les industriels doivent nous aider rArrrArr Collaboration avec des chimistesCollaboration avec des chimistes
Recueillir le maximum deRecueillir le maximum de
donndonneacuteeacutees cliniques initiales es cliniques initiales pour pour le meilleur le meilleur prpreacuteeacutellegraveegravevementvement
et la meilleure et la meilleure stratstrateacuteeacutegie analytiquegie analytique
rArrrArr Collaboration Collaboration clinicoclinico--biologique essentiellebiologique essentielle
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SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
externesexterneshelliphellip
et progresseret progresser
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
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la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
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- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales Cheveux
- Dopage hellip
- Toxicologie Meacutedico-Leacutegale
- DRAMES 2009260 deacutecegraves
- DRAMES 2009137 deacutecegraves avec stupeacutefiants illicites
- DRAMES 200934 deacutecegraves avec opiaceacutes licites
- DRAMES 200989 deacutecegraves avec Med Substitution Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 28
- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
- Toxicologie Epideacutemiologique
- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytique
- 2 Aide au suivi des traitements de substitution
- 3 Aide au suivi des sevrages
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- Marqueurs biologiques du tabac
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- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
- Diapositive numeacutero 44
- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
- Analyses de toxicologie immuno-analyse
- Tests rapides IC et Cannabis
- Exemple du Kit Opiaceacutes
- Diapositive numeacutero 49
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
- Analyses de toxicologie chromatographie
- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
- Diapositive numeacutero 55
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- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
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- Notion de seuil de deacutetection
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 1
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 3
- Discussion- Conclusion
-
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 2Biologiste Toxicologue 2
ConnaConnaicircicirctre les tre les limites des mlimites des meacuteeacutethodologiesthodologies
utilisutiliseacuteeacuteesesrArrrArr Favoriser le travail en rFavoriser le travail en reacuteeacuteseau de laboratoiresseau de laboratoires
SSrsquoeacutersquoeacutevaluer gracircce valuer gracircce agraveagrave
des des controcircles de qualitcontrocircles de qualiteacuteeacute
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et progresseret progresser
Evoluer vers des Technologies de plus en plus Evoluer vers des Technologies de plus en plus sophistiqusophistiqueacuteeacuteeses
H Eysseric Toxicologie - Meacutedecine Leacutegale - Grenoble
DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
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Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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DiscussionDiscussion--
ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
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- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
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- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
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- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
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- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
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- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
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-
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DifficultDifficulteacuteeacutess
du du Biologiste Toxicologue 3Biologiste Toxicologue 3
InterprInterpreacuteeacuteterter
la concentration en tenant compte des la concentration en tenant compte des donndonneacuteeacutees es
--
toxicocintoxicocineacuteeacutetiquestiques--
et et toxicodynamiquestoxicodynamiques
de la substance identifide la substance identifieacuteeacuteeehelliphellip
et par exempleet par exemplehelliphellip
Comment distinguer la limite entre Comment distinguer la limite entre un un usage thusage theacuteeacuterapeutique justifirapeutique justifieacuteeacuteet un et un usage usage laquolaquo abusifabusif raquoraquo ddrsquorsquoun mun meacuteeacutedicament psychotrope dicament psychotrope
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ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
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- Questionnaire
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- Geacuteneacuteraliteacutes sur les Cheveux
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- hellipdiagnostic de deacutecegraves toxique impliquant la meacutethadone
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- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
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- Meacutethodes Immunochimiques Qualitatives
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- Chromatographiecoupleacutee agrave la deacutetection par spectromeacutetrie de masse
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- Seacuteparation Chromatographiquehellip(GC ou LC)
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- Spectromeacutetrie de MASSE Multiple Reaction Monitoring (MRM) transition Seacutelectiviteacute deacutetection - quantification
- Diapositive numeacutero 59
- Notion de seuil de deacutetection
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- Difficulteacutes du Biologiste Toxicologue 2
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-
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ConclusionConclusion
bullbull Essentiel Essentiel agraveagrave
retenir retenir ndashndash Le bon prLe bon preacuteeacutellegraveegravevement au bon moment bien conservvement au bon moment bien conserveacuteeacute
ndashndash Connaissance des limites de chaque type dConnaissance des limites de chaque type drsquorsquoanalyseanalysebullbull spspeacuteeacutecificitcificiteacuteeacute sensibilit sensibiliteacuteeacute rapidit rapiditeacuteeacute co coucircucirctt
ndashndash Collaboration Collaboration clinicoclinico--BiologiqueBiologique
- Laboratoire drsquoAnalyses Toxicologiques en Addictologie
- Deacuteroulement du TD
- Questionnaire
- Ex de Cas Cliniques
- Quelles explications quelles solutions
- Objectif de la Toxicologie Analytique
- Inteacuterecircts de la Toxicologie Analytiqueen addictologie
- 1 Aide agrave lrsquoeacutevaluation du degreacute de deacutependance
- Toxicologie Clinique
- Analyse de tramadol
- Tramadol et Abus(Dossier CAP Angers 042006)
- Toxicologie Professionnelle
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales matricesADME
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Analyses Toxicologiques Meacutedico-Leacutegales inteacuterecirct du sang
- Preacutelegravevements biologiques en tox avantages inconveacutenients
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- Analyses Toxicologiques Inteacuterecirct des Cheveux
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- Intoxication au Datura stramonium(thegravese MTollet Angers 2006)
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- Ex de suivi urinaire sevrage agrave la bupreacutenorphine
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- Qualiteacute du Preacutelegravevement
- Analyses Toxicologiques Preacutelegravevements selon Contexte
- Analyses Toxicologiques Matrices selon Cineacutetique
- Quelles Techniques Analytiques
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- Analyses de toxicologie immuno-analyse
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- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
- Meacutethodes Chromatographiques Approche Qualitative et Quantitative
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