Kinetex 5μm és a teljesen porózus töltetek ...gen-lab.hu/dokumentumok/2013_II_teljes.pdf · b,...

2013. XIII. évfolyam 2. szám

Gen-Lab Kft.H-1119 Budapest, Hadak útja 41.

Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451Email: [email protected] Web: www.gen-lab.hu

GEN-LAB Kft.

Tartalom

Kinetex 5μm és a teljesen porózus töltetek összehasonlítása 2-4. oldal

Módszeroptimalizálás egy Ph.Eur módszeren keresztül 5-6. oldal

Kinetex – Preptől az UHPLC-ig 7-8. oldal

HPLC oszlop élettartam növelése 9-10. oldal

Eluensszűrés és kedvezményes szűrőmembránok 11. oldal

Új, 5 μm-os Kinetex héjszerkezetes kolonnák5 μm-os Kinetex XB-C18 kromatográfiás oszlop hatékonyságának

összehasonlítása teljesen porózus 5 μm-os C18 oszloppal

1

2

Kolonna 1: Kinetex XB-C18 5 μm 150*4,6 mm

Kolonna 2: Zorbax SB-C18 5 μm150*4,6 mm

Eluens A: 0,1 % vizes TFAEluens B: 0,1 % acetonitriles TFAElúció: gradiens

Áramlási sebesség: 1,2 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 10 20 70

Hőmérséklet: 25°CDetektálás: UV @ 210 nm

Kolonna 1: Kinetex XB-C18 5 µm 250*4,6 mm

Kolonna 2: Waters Symmetry C18 5 µm250*4,6 mm

Eluens A: 20 mM KH2PO

4 (pH=7)

Eluens B: acetonitril/metanol=50/50Elúció: gradiens

Áramlási sebesség: 1,2 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 5 40 70


1

2

Kinetex kolonna alkalmazásával

22%-kal jobb felbontás

75%-kal nagyobb érzékenység

Javul a kromatográfiás teljesítmény:

-jobb felbontás-nagyobb hatékonyság

-nagyobb érzékenység érhető el

A jobb felbontás előnyei:- keverék elegyben könnyebben elválaszthatóak a komponensek

- jobban teljesülnek a rendszeralkalmassági kritériumok

A nagyobb érzékenység előnyei:- kis koncentrációjú anyagok pontosabban detektálhatóak- kisebb injektálási térfogat

elegendő- kisebb érzékenységű

tömegdetektor alkalmazható

GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT

Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu

1

1

2

2

5 μm-os Kinetex C18 kromatográfiás oszlop hatékonyságának összehasonlítása teljesen porózus, 5 μm-os C18 oszloppal

Kolonna 1: Kinetex C18 5 μm 250*4,6 mm

Kolonna 2: Hypersil C18 5 μm250*4,6 mm

Eluens A: 0,1 % vizes TFAEluens B: 0,1 % acetonitriles TFAElúció: gradiens

Áramlási sebesség: 1 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 10 40 70


Kolonna 1: Kinetex C18 5 μm 150*4,6 mm

Kolonna 2: Waters XBridge C18 5 μm 150*4,6 mm

Eluens A: víz/acetonitril/foszforsav600/400/2

Elúció: izokratikusÁramlási sebesség: 1,5 ml/perc


1

Komponensek:1.Szennyező A2.Szennyező B3.Acetilszalicilsav4.Szalicilsav5.Szennyező C

Módszeroptimalizálás


68%-kal nagyobb hatékonyság


Szeretné csökkenteni a futási időt és az eluens oldószer mennyiségét?

Használja az 5 μm-os Kinetex kalkulátort:https://www.phenomenex.com/tools/kinetex5ucalculator



1

1

2

2

3. oldal

https://www.phenomenex.com/

5 μm-os Kinetex C18 kromatográfiás oszlop hatékonyságának összehasonlítása teljesen porózus 3,5 μm-os C18 oszloppal

Kolonna 1: Waters Sunfire C18 3,5 µm 50*2,1 mm

Kolonna 2: Kinetex C18 5 µm 50*2,1 mm

Eluens A: 30 mM ammónium formiátEluens B: acetonitril

Elúció: gradiens

Áramlási sebesség: 1,2 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 5 5 60 5,1 100 6 100 7 5

Hőmérséklet: 25°CDetektálás: MS/MS (API 4000)

Komponensek:1.DMIP2.Qx3.IQ4.8-MeIQ5.4,8-DiMe-Iqx6.7,8-DiMe-Iqx7. Trp-P-28.Harman9.Norharman10.PhIP11.Aac12.MeAaC13.MeIQ

90%-kal nagyobb hatékonyság

ugyanakkora nyomáson20%-kal nagyobb

hatékonyság feleakkora nyomáson

1

2


Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu4. oldal

Column specified: octadecylsilyl silica gel (5μm) 150*4.6mm

Injection volume: 10ulElution type: Isocratic (glacial acetic acid, triethylamine, methanol, water 1:1:450:550 v/v/v/v)Column temp.: 25°CFlow rate: 1.3 ml/min UV detection: 238 nm



HOZZA KI A MAXIMUMOT MÓDSZEREIBŐL!

min0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

mAU

0

5

10

15

20

25

30

35

VWD1 A, Wavelength=238 nm (MT102612\SH1001PA 2012-10-26 14-33-26\PRAV000004.D)

1.2

03

11.

019

18.

593

Az ÚJ 5 μm-os Kinetex előnyei európai gyógyszerkönyvi példákkal

szemléltetve:

I.Pravastatin Sodium and Related Substances (01/2010:2059)

Ultrasphere 5µm ODS C18 150x4.6 mm (Application ID=8252)

Total RT: 18.6 minRS (impurity A and Pravastatin): 10.27

Total RT: 16.3minRS (impurity A and Pravastatin ): 12.20

min0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

mAU

0

5

10

15

20

25

30

35

VWD1 A, Wavelength=238 nm (MT102912\SH1001PA 2012-10-29 09-51-39\PRAV000003.D)

10.

084

16.

320

Kinetex 5µm C18 150x4.6 mm (Application ID=8153)

19%-kal nagyobb felbontás 12%-kal gyorsabb

5. oldal

HPLC Column specified: octadecylsilyl silica gel (5um) 250*4.6 mmInjection volume: 20ul Elution type: Isocratic (2.3g/L solution of ammonium

acetate, methanol 30:70 V/V)Column temp.: 30°CFlow rate: 1.5 ml/min UV detection: 237 nm



II. Amlodipine Besilate and Related Substances (01/2010:2059)

min0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

mAU

0

20

40

60

80

100

VWD 1 A, Wavelength=237 nm (MT101112\MELATONIN 2012-10-11 11-03-51\AMLO000002.D )

3.714

4.804

18.080

min0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

mAU

0

25

50

75

100

125

150

175

VWD1 A, Wavelength=237 nm (MT091312\QC KINETEX5 50X46 2012-09-13 16-50-52\001-0102.D)

2.8

87

4.3

43

5.1

58

Spherisorb 5µm ODS -1 C18 250x4.6 mm (Application ID=8208)

Total RT: 18.1 minRS (impurity G and B): 5.30

Kinetex 5µm C18 150x4.6 mm (Application ID=8143)

Total RT: 5.2minRS (impurity G and B): 13.62

157%-kal nagyobb felbontás 71%-kal gyorsabb

6. oldal


Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu7. oldal

Egyszerű módszertranszfer az UHPLC, HPLC és prep LC között, avagy a KINETEXTM kéregszerkezetes töltet méretnövelhetősége

A KinetexTM kéregszerkezetes töltet köszönhetően annak, hogy a tömör mag és a porózus réteg aránya minden szemcseméret esetében megegyezik, lehetővé teszi a módszerek transzferét a különböző szemcseméreteken. Egy hagyományos LC rendszeren fejlesztett módszer pl. egyszerűen átvihető UHPLC rendszerre, illetve akár a preparatív elválasztás is megoldható.

Rcore

Rshell

=állandó

A következő katalóguspéldán keresztül szeretnénk bemutatni, hogy a KinetexTM kolonna segítségével egy UHPLC módszer hogyan alakul hagyományos, illetve preparatív LC rendszeren.Az itt bemutatott példáról bővebben a Phenomenex TN-1135 technikai füzetében olvashat.

Rcore

: 0,95µm

Rshell

: 0,175µm

Rcore

: 1,25µm

Rshell

: 0,23µm

Rcore

: 1,9µm

Rshell

: 0,35µm

Rcore

: 3,66µm

Rshell

: 0,67µm

Oszlop: Kinetex C18 Méretek: 50 x 2,1 mmElúció: GradiensA eluens: VízB eluens: AcetonitrilProfil Idő (perc)

06

6,18

Áramlási seb.: Hőmérséklet: 300CDetektálás: UV @ 220nmKomponensek: 1, Estriol

7, Estrone2, Hydrocortisone8, Deoxycorticosterone3, Corticosterone

Kinetex C18 (különböző szemcseméretek) 50 x 2,1 mmGradiensVízAcetonitrilIdő (perc)

Kinetex C18 50 x 2,1 mm

GradiensVíz

Kinetex C18 802020

20%B

0,3 ml/min

6, 21-Hydroxyprogesterone

4, Cortisone Acetat5, β-estradiol

9, Progesterone



a, Kinetex 1,7μm C18; 50 x 2,1mm c, Kinetex 5μm C18; 50 x 2,1mm

b, Kinetex 2,6μm C18; 50 x 2,1mm

A módszerben szereplő 9 szteroid komponenst tartalmazó standardot 500 μg/l koncentrációban oldottuk metanolban, majd 0,5 µl volt az injektált minta térfogata.

Ahogy a fenti ábrákon is látszik a három különböző szemcseméretű KinetexTM (1,7µm, 2,6µm, 5µm) méretnövelhető, a szelektivitás és a relativ retenciók megegyeznek. Ebből az is következik, hogy a Kinetex kolonnára fejlesztett módszer könnyen alkalmazható egy másik HPLC rendszeren, vagy akár másik laborban. A kisebb szemcseméretű töltetnek a 4, 5 kritikus párra jobb az elválasztóképessége, a magasabb hatékonyság miatt, annak ellenére, hogy az áramlási sebesség alacsonyabb, mint az optimális.

Tudjon meg többet www.phenomenex.com/kinetex

8. oldal

Tudjon meg többet www.gen-lab.hu

9. oldal



Oszlopvédelem a SecurityGuard előtét oszlopok segítségével

ULTRA

A legáltalánosabb kromatográfiás problémák, úgymint a magas nyomásesés, a csúcskettőződés, csúcsszélesedés, alapvonali problémák és a felbontás csökkenésének oka gyakran a szennyezők. Ezek származhatnak magából a mintából, az oldószerből, de előfordul, hogy a készülék pumpáinak, vagy injektorának tömítéseiből erednek, melyek a későbbiekben visszafordíthatatlan károkat okozhatnak a HPLC oszlopainkban: eltömhetik a frittet, vagy irreverzibilisen kötődnek a töltethez, így csökkentve a hatékonyságot, sőt még az átfolyó cellában is kárt okozhatnak. A SecurityGuard használatával egyszerűen és hatékonyan védheti meg rendszerét anélkül, hogy számottevően megváltoztatná kromatogramjait.

Hasonlítsuk össze a kromatogramokat:

SecurityGuard nélkül

SecurityGuard használatával

✔ Jóformán változatlan marad a kromatogram

✔ Gazdaságosabbá teszi értékes HPLC oszlopainak használatát

✔ Az előtét oszlop cseréjét követően a nyomásértékek azonnal lecsökkennek, a hatékonyság pedig helyreáll


10. oldal



ULTRA

● Minden 2 µm alatti és kéregszerkezetes töltethez is alkalmazható

● Használata egyszerű

● Nyomáshatár: 20.000 psi / 1379 bar

● Extrém alacsony holttérfogat: (<0,3 µl)

Cartridge Holder #2

HPLC UHPLC

● Elérhető analitikai, szemipreparatív és preparatív méretben is

● Kiváló ár / érték arány

● Nyomáshatár: 5.439 psi / 375 bar

● Számtalan elérhető fázis

FELÉPÍTÉSFELÉPÍTÉS

Holder #1 HolderCartridge

5 µm 2.6 µm 2.6 µm 1.7 µm 1.3 µm

AJ0-9000KJ0-4282

A KJ0-4282 készlet

Soha ne erőltessük túl a menetet. Lezáráskor kézi erőt használjunk, valamint a kulcsokat egy negyed fordulat erejéig.

ELŐNYÖKELŐNYÖK

SZEMCSEMÉRETSZEMCSEMÉRET

Ellenőrzé

s!



Membránok kedvezményes áron elérhetők 100db vagy 200db/csomag kiszerelésben:

ELUENS- és MINTASZŰRÉS — megbízható minőség kedvező áron

● Az oszlop és a készülék védelmét is szolgálja

● Pufferekből kristálykiválás lehetséges

● Nagy víztartalmú eluensekben bekövetkezhet algák, baktériumok elszaporodása

● A szűrésen kívül az eluens gáztalanítását is elvégzi

● Kéregszerkezetes és UHPLC-s töltetek esetén az eluens szűrése is 0,2μm-es membránnal ajánlott

● 1, 2 és 4l-es méretben is elérhető

● Kiváló ár/érték arány

Néhány érv a Phenomenex eluensszűrő rendszer mellett:

Membránjaink más átmérővel, pórusmérettel is elérhetőek! A további membrántípusokról érdeklődjön kollégáinknál!

FBM047NY022 FBM047NY045

47mm-es

PVDF

PTFE (teflon)

NY (nylon)

0,22 μm pórusátmérő 0,45μm pórusátmérőFBM047PVDF022 FBM047PVDF045

FBM047PTFE022H FBM047PTFE045H

126 Ft/db 126 Ft/db

190 Ft/db190 Ft/db

65 Ft/db 65 Ft/db

2l-es szívópalack 500ml-es tölcsérrel

4l-es szívópalack1l-es tölcsérrel

AH0-15661l-es szívópalack, 300ml-es tölcsérrel

Komplett berendezés Ár (Ft)Katalógusszám

AH0-3314

AH0-3315

116325

144525

149225

2013.06.31-ig bármely FilterSys eluensszűrő rendszer vásárlása esetén a 100db-os szűrőmembránt 20% kedvezménnyel adjuk!

11. oldal

Hihetetlenárakkal !


Gen-Lab Kft.H-1119 Budapest, Hadak útja 41.

Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451Email: [email protected] Web: www.gen-lab.hu

Hírek röviden.....

Új munkatársÚj kollégával bővültünk, Héja Kornélia termékfelelős személyében.Elérhetőségei a következőek:Tel:+36-1-206-2455Mobil:+36-30-534-4336Email: [email protected]

Megújult a Gen-Lab Kft. honlapjaTekintse meg - www.gen-lab.hu Létrehoztuk technikai sarkunkat, hogy a mindennapi munkához szükséges segédleteket még könnyebben elérhessék.Például:- Puffer kalkulátor- Mértékegység átváltók- HPLC Troubleshooting- Királis módszerfejlesztés

Kinetex 5μm és 1,3μm-es szemcseméretMind a hagyományos HPLC és az UHPLC felhasználók számára új dimenziókat nyitva ezzel. Akcióinkról tájékozódjon a www.gen-lab.hu honlapunkon.

http://www.gen-lab.hu/

Kinetex 5μm és a teljesen porózus töltetek ...gen-lab.hu/dokumentumok/2013_II_teljes.pdf · b,...

Documents

Transcript of Kinetex 5μm és a teljesen porózus töltetek ...gen-lab.hu/dokumentumok/2013_II_teljes.pdf · b,...