2013. XIII. évfolyam 2. szám
Gen-Lab Kft.H-1119 Budapest, Hadak útja 41.
Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451Email: [email protected] Web: www.gen-lab.hu
GEN-LAB Kft.
Tartalom
Kinetex 5μm és a teljesen porózus töltetek összehasonlítása 2-4. oldal
Módszeroptimalizálás egy Ph.Eur módszeren keresztül 5-6. oldal
Kinetex – Preptől az UHPLC-ig 7-8. oldal
HPLC oszlop élettartam növelése 9-10. oldal
Eluensszűrés és kedvezményes szűrőmembránok 11. oldal
Új, 5 μm-os Kinetex héjszerkezetes kolonnák5 μm-os Kinetex XB-C18 kromatográfiás oszlop hatékonyságának
összehasonlítása teljesen porózus 5 μm-os C18 oszloppal
1
2
Kolonna 1: Kinetex XB-C18 5 μm 150*4,6 mm
Kolonna 2: Zorbax SB-C18 5 μm150*4,6 mm
Eluens A: 0,1 % vizes TFAEluens B: 0,1 % acetonitriles TFAElúció: gradiens
Áramlási sebesség: 1,2 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 10 20 70
Hőmérséklet: 25°CDetektálás: UV @ 210 nm
Kolonna 1: Kinetex XB-C18 5 µm 250*4,6 mm
Kolonna 2: Waters Symmetry C18 5 µm250*4,6 mm
Eluens A: 20 mM KH2PO
4 (pH=7)
Eluens B: acetonitril/metanol=50/50Elúció: gradiens
Áramlási sebesség: 1,2 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 5 40 70
Hőmérséklet: 25°CDetektálás: UV @ 280 nm
1
2
Kinetex kolonna alkalmazásával
22%-kal jobb felbontás
75%-kal nagyobb érzékenység
Javul a kromatográfiás teljesítmény:
-jobb felbontás-nagyobb hatékonyság
-nagyobb érzékenység érhető el
A jobb felbontás előnyei:- keverék elegyben könnyebben elválaszthatóak a komponensek
- jobban teljesülnek a rendszeralkalmassági kritériumok
A nagyobb érzékenység előnyei:- kis koncentrációjú anyagok pontosabban detektálhatóak- kisebb injektálási térfogat
elegendő- kisebb érzékenységű
tömegdetektor alkalmazható
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
1
1
2
2
5 μm-os Kinetex C18 kromatográfiás oszlop hatékonyságának összehasonlítása teljesen porózus, 5 μm-os C18 oszloppal
Kolonna 1: Kinetex C18 5 μm 250*4,6 mm
Kolonna 2: Hypersil C18 5 μm250*4,6 mm
Eluens A: 0,1 % vizes TFAEluens B: 0,1 % acetonitriles TFAElúció: gradiens
Áramlási sebesség: 1 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 10 40 70
Hőmérséklet: 25°CDetektálás: UV @ 210 nm
Kolonna 1: Kinetex C18 5 μm 150*4,6 mm
Kolonna 2: Waters XBridge C18 5 μm 150*4,6 mm
Eluens A: víz/acetonitril/foszforsav600/400/2
Elúció: izokratikusÁramlási sebesség: 1,5 ml/perc
Hőmérséklet: 25°CDetektálás: UV @ 235 nm
1
Komponensek:1.Szennyező A2.Szennyező B3.Acetilszalicilsav4.Szalicilsav5.Szennyező C
Módszeroptimalizálás
34%-kal jobb felbontás
68%-kal nagyobb hatékonyság
79%-kal jobb felbontás
Szeretné csökkenteni a futási időt és az eluens oldószer mennyiségét?
Használja az 5 μm-os Kinetex kalkulátort:https://www.phenomenex.com/tools/kinetex5ucalculator
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
1
1
2
2
3. oldal
5 μm-os Kinetex C18 kromatográfiás oszlop hatékonyságának összehasonlítása teljesen porózus 3,5 μm-os C18 oszloppal
Kolonna 1: Waters Sunfire C18 3,5 µm 50*2,1 mm
Kolonna 2: Kinetex C18 5 µm 50*2,1 mm
Eluens A: 30 mM ammónium formiátEluens B: acetonitril
Elúció: gradiens
Áramlási sebesség: 1,2 ml/percGradiens: Idő (perc) B (%) 0 5 5 60 5,1 100 6 100 7 5
Hőmérséklet: 25°CDetektálás: MS/MS (API 4000)
Komponensek:1.DMIP2.Qx3.IQ4.8-MeIQ5.4,8-DiMe-Iqx6.7,8-DiMe-Iqx7. Trp-P-28.Harman9.Norharman10.PhIP11.Aac12.MeAaC13.MeIQ
90%-kal nagyobb hatékonyság
ugyanakkora nyomáson20%-kal nagyobb
hatékonyság feleakkora nyomáson
1
2
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu4. oldal
Column specified: octadecylsilyl silica gel (5μm) 150*4.6mm
Injection volume: 10ulElution type: Isocratic (glacial acetic acid, triethylamine, methanol, water 1:1:450:550 v/v/v/v)Column temp.: 25°CFlow rate: 1.3 ml/min UV detection: 238 nm
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
HOZZA KI A MAXIMUMOT MÓDSZEREIBŐL!
min0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
mAU
0
5
10
15
20
25
30
35
VWD1 A, Wavelength=238 nm (MT102612\SH1001PA 2012-10-26 14-33-26\PRAV000004.D)
1.2
03
11.
019
18.
593
Az ÚJ 5 μm-os Kinetex előnyei európai gyógyszerkönyvi példákkal
szemléltetve:
I.Pravastatin Sodium and Related Substances (01/2010:2059)
Ultrasphere 5µm ODS C18 150x4.6 mm (Application ID=8252)
Total RT: 18.6 minRS (impurity A and Pravastatin): 10.27
Total RT: 16.3minRS (impurity A and Pravastatin ): 12.20
min0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
mAU
0
5
10
15
20
25
30
35
VWD1 A, Wavelength=238 nm (MT102912\SH1001PA 2012-10-29 09-51-39\PRAV000003.D)
10.
084
16.
320
Kinetex 5µm C18 150x4.6 mm (Application ID=8153)
19%-kal nagyobb felbontás 12%-kal gyorsabb
5. oldal
HPLC Column specified: octadecylsilyl silica gel (5um) 250*4.6 mmInjection volume: 20ul Elution type: Isocratic (2.3g/L solution of ammonium
acetate, methanol 30:70 V/V)Column temp.: 30°CFlow rate: 1.5 ml/min UV detection: 237 nm
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
II. Amlodipine Besilate and Related Substances (01/2010:2059)
min0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
mAU
0
20
40
60
80
100
VWD 1 A, Wavelength=237 nm (MT101112\MELATONIN 2012-10-11 11-03-51\AMLO000002.D )
3.714
4.804
18.080
min0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
mAU
0
25
50
75
100
125
150
175
VWD1 A, Wavelength=237 nm (MT091312\QC KINETEX5 50X46 2012-09-13 16-50-52\001-0102.D)
2.8
87
4.3
43
5.1
58
Spherisorb 5µm ODS -1 C18 250x4.6 mm (Application ID=8208)
Total RT: 18.1 minRS (impurity G and B): 5.30
Kinetex 5µm C18 150x4.6 mm (Application ID=8143)
Total RT: 5.2minRS (impurity G and B): 13.62
157%-kal nagyobb felbontás 71%-kal gyorsabb
6. oldal
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu7. oldal
Egyszerű módszertranszfer az UHPLC, HPLC és prep LC között, avagy a KINETEXTM kéregszerkezetes töltet méretnövelhetősége
A KinetexTM kéregszerkezetes töltet köszönhetően annak, hogy a tömör mag és a porózus réteg aránya minden szemcseméret esetében megegyezik, lehetővé teszi a módszerek transzferét a különböző szemcseméreteken. Egy hagyományos LC rendszeren fejlesztett módszer pl. egyszerűen átvihető UHPLC rendszerre, illetve akár a preparatív elválasztás is megoldható.
Rcore
Rshell
=állandó
A következő katalóguspéldán keresztül szeretnénk bemutatni, hogy a KinetexTM kolonna segítségével egy UHPLC módszer hogyan alakul hagyományos, illetve preparatív LC rendszeren.Az itt bemutatott példáról bővebben a Phenomenex TN-1135 technikai füzetében olvashat.
Rcore
: 0,95µm
Rshell
: 0,175µm
Rcore
: 1,25µm
Rshell
: 0,23µm
Rcore
: 1,9µm
Rshell
: 0,35µm
Rcore
: 3,66µm
Rshell
: 0,67µm
Oszlop: Kinetex C18 Méretek: 50 x 2,1 mmElúció: GradiensA eluens: VízB eluens: AcetonitrilProfil Idő (perc)
06
6,18
Áramlási seb.: Hőmérséklet: 300CDetektálás: UV @ 220nmKomponensek: 1, Estriol
7, Estrone2, Hydrocortisone8, Deoxycorticosterone3, Corticosterone
Kinetex C18 (különböző szemcseméretek) 50 x 2,1 mmGradiensVízAcetonitrilIdő (perc)
Kinetex C18 50 x 2,1 mm
GradiensVíz
Kinetex C18 802020
20%B
0,3 ml/min
6, 21-Hydroxyprogesterone
4, Cortisone Acetat5, β-estradiol
9, Progesterone
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
a, Kinetex 1,7μm C18; 50 x 2,1mm c, Kinetex 5μm C18; 50 x 2,1mm
b, Kinetex 2,6μm C18; 50 x 2,1mm
A módszerben szereplő 9 szteroid komponenst tartalmazó standardot 500 μg/l koncentrációban oldottuk metanolban, majd 0,5 µl volt az injektált minta térfogata.
Ahogy a fenti ábrákon is látszik a három különböző szemcseméretű KinetexTM (1,7µm, 2,6µm, 5µm) méretnövelhető, a szelektivitás és a relativ retenciók megegyeznek. Ebből az is következik, hogy a Kinetex kolonnára fejlesztett módszer könnyen alkalmazható egy másik HPLC rendszeren, vagy akár másik laborban. A kisebb szemcseméretű töltetnek a 4, 5 kritikus párra jobb az elválasztóképessége, a magasabb hatékonyság miatt, annak ellenére, hogy az áramlási sebesség alacsonyabb, mint az optimális.
Tudjon meg többet www.phenomenex.com/kinetex
8. oldal
Tudjon meg többet www.gen-lab.hu
9. oldal
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
Oszlopvédelem a SecurityGuard előtét oszlopok segítségével
ULTRA
A legáltalánosabb kromatográfiás problémák, úgymint a magas nyomásesés, a csúcskettőződés, csúcsszélesedés, alapvonali problémák és a felbontás csökkenésének oka gyakran a szennyezők. Ezek származhatnak magából a mintából, az oldószerből, de előfordul, hogy a készülék pumpáinak, vagy injektorának tömítéseiből erednek, melyek a későbbiekben visszafordíthatatlan károkat okozhatnak a HPLC oszlopainkban: eltömhetik a frittet, vagy irreverzibilisen kötődnek a töltethez, így csökkentve a hatékonyságot, sőt még az átfolyó cellában is kárt okozhatnak. A SecurityGuard használatával egyszerűen és hatékonyan védheti meg rendszerét anélkül, hogy számottevően megváltoztatná kromatogramjait.
Hasonlítsuk össze a kromatogramokat:
SecurityGuard nélkül
SecurityGuard használatával
✔ Jóformán változatlan marad a kromatogram
✔ Gazdaságosabbá teszi értékes HPLC oszlopainak használatát
✔ Az előtét oszlop cseréjét követően a nyomásértékek azonnal lecsökkennek, a hatékonyság pedig helyreáll
Tudjon meg többet www.gen-lab.hu
10. oldal
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
ULTRA
● Minden 2 µm alatti és kéregszerkezetes töltethez is alkalmazható
● Használata egyszerű
● Nyomáshatár: 20.000 psi / 1379 bar
● Extrém alacsony holttérfogat: (<0,3 µl)
Cartridge Holder #2
HPLC UHPLC
● Elérhető analitikai, szemipreparatív és preparatív méretben is
● Kiváló ár / érték arány
● Nyomáshatár: 5.439 psi / 375 bar
● Számtalan elérhető fázis
FELÉPÍTÉSFELÉPÍTÉS
Holder #1 HolderCartridge
5 µm 2.6 µm 2.6 µm 1.7 µm 1.3 µm
AJ0-9000KJ0-4282
A KJ0-4282 készlet
Soha ne erőltessük túl a menetet. Lezáráskor kézi erőt használjunk, valamint a kulcsokat egy negyed fordulat erejéig.
ELŐNYÖKELŐNYÖK
SZEMCSEMÉRETSZEMCSEMÉRET
Ellenőrzé
s!
GEN-LAB KFT GEN-LAB KFT
Telefon: 206-2455 Fax: 206-2451 E-mail: [email protected] www.gen-lab.hu
Membránok kedvezményes áron elérhetők 100db vagy 200db/csomag kiszerelésben:
ELUENS- és MINTASZŰRÉS — megbízható minőség kedvező áron
● Az oszlop és a készülék védelmét is szolgálja
● Pufferekből kristálykiválás lehetséges
● Nagy víztartalmú eluensekben bekövetkezhet algák, baktériumok elszaporodása
● A szűrésen kívül az eluens gáztalanítását is elvégzi
● Kéregszerkezetes és UHPLC-s töltetek esetén az eluens szűrése is 0,2μm-es membránnal ajánlott
● 1, 2 és 4l-es méretben is elérhető
● Kiváló ár/érték arány
Néhány érv a Phenomenex eluensszűrő rendszer mellett:
Membránjaink más átmérővel, pórusmérettel is elérhetőek! A további membrántípusokról érdeklődjön kollégáinknál!
FBM047NY022 FBM047NY045
47mm-es
PVDF
PTFE (teflon)
NY (nylon)
0,22 μm pórusátmérő 0,45μm pórusátmérőFBM047PVDF022 FBM047PVDF045
FBM047PTFE022H FBM047PTFE045H
126 Ft/db 126 Ft/db
190 Ft/db190 Ft/db
65 Ft/db 65 Ft/db
2l-es szívópalack 500ml-es tölcsérrel
4l-es szívópalack1l-es tölcsérrel
AH0-15661l-es szívópalack, 300ml-es tölcsérrel
Komplett berendezés Ár (Ft)Katalógusszám
AH0-3314
AH0-3315
116325
144525
149225
2013.06.31-ig bármely FilterSys eluensszűrő rendszer vásárlása esetén a 100db-os szűrőmembránt 20% kedvezménnyel adjuk!
11. oldal
Hihetetlenárakkal !
Tudjon meg többet www.gen-lab.hu
Gen-Lab Kft.H-1119 Budapest, Hadak útja 41.
Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451Email: [email protected] Web: www.gen-lab.hu
Hírek röviden.....
Új munkatársÚj kollégával bővültünk, Héja Kornélia termékfelelős személyében.Elérhetőségei a következőek:Tel:+36-1-206-2455Mobil:+36-30-534-4336Email: [email protected]
Megújult a Gen-Lab Kft. honlapjaTekintse meg - www.gen-lab.hu Létrehoztuk technikai sarkunkat, hogy a mindennapi munkához szükséges segédleteket még könnyebben elérhessék.Például:- Puffer kalkulátor- Mértékegység átváltók- HPLC Troubleshooting- Királis módszerfejlesztés
Kinetex 5μm és 1,3μm-es szemcseméretMind a hagyományos HPLC és az UHPLC felhasználók számára új dimenziókat nyitva ezzel. Akcióinkról tájékozódjon a www.gen-lab.hu honlapunkon.
Top Related