SINDROMES CON HEMOGLOBINA SSINDROMES CON HEMOGLOBINA S

Servicio de Hematología- OncologíaHospital de Pediatría “Prof. Dr. J. P.

Garrahan”Buenos Aires, Argentina.

Cromosoma 11-Familia de genes de β-globina

Cromosoma 16-Familia de genes de α-globina

5’ 3’

ζ2 ψζ 1 ψ α 2 ψ α 1

α 2 α 1 θ 1

5’ 3’

ε γG γA βψ β δ

HEMOGLOBINA NORMALHEMOGLOBINA NORMAL

Embrión

Hb Gower 1:ζ2ε2

Hb Gower 2:α2ε2

Hb Portland: ζ2γ2

Feto:

Hb F: α2γG2

Hb F: α2γA2

Vida extrauterina

Hb A: α2β2

Hb A2: α2δ2

DESARROLLO EMBRIONARIODESARROLLO EMBRIONARIO

.

HEMOGLOBINA NORMALHEMOGLOBINA NORMAL

α1β1

α2β1

2-3DPG

Clasificación

• Variantes estructurales:

Hemoglobinas con solubilidad alterada

Hemoglobinas inestables

Hemoglobinas con afinidad alterada por el O2

Metahemoglobinas

• Sindromes talasémicos:

β talasemia

α talasemia

δβ talasemia y Persistencia hereditaria de hemoglobina fetal

• Hemoglobinopatías talasémicas

HEMOGLOBINOPATÍASHEMOGLOBINOPATÍAS

MUTACIÓN β GLOBINA Codón 6

GAG (glutámico) → GTG (valina)

HEMOGLOBINA SHEMOGLOBINA S

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Desórdenes con Hb S asintomáticos:

Portador de Hb S (βA/ βS)

Doble heterocigota Hb S y PHHF (βS/ βPHHF)

Desórdenes con Hb S sintomáticos:

Doble heterocigota Hb S y HB C (βS/ βC)

Doble heterocigota Hb S y δβ talasemia (βS/ βδβ)

Doble heterocigota Hb S y β+ talasemia (βS/ β+)

Homocigota Hb S (βS/ βS)

Doble heterocigota Hb S y β0talasemia (βS/ β0)

Doble heterocigota Hb S y Hb D PUNJAB (βS/ βD)

Doble heterocigota Hb S y Hb O ARAB (βS/ βO)

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Criterios básicos para iniciar screening

Noción de la frecuencia de las diferentes patologías para la población en estudio

Procedencia geográfica del paciente y sus ancestros

Evitar estudiar a pacientes transfundidos

Estudiar simultáneamente:

Paciente

Su familia

Un control normal

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Pruebas de laboratorio:

Hemograma completo con recuento de reticulocitos

Marcadores de hemólisis (LDH, Haptoglobina, Bt/Bd)

Electroforesis de Hemoglobinas a pH alcalino

Test de falciformación

Test de isopropanol

Cuantificación de hemoglobinas

Metabolismo del hierro

Estudio familiar

Estudios adicionales:

Electroforesis a pH ácido

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Electroforesis de hemoglobina en acetato de celulosa, pH alcalino

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Hb AHb FHb S/D/G

Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH alcalino

Paciente

TEST DE FALCIFORMACIÓNTEST DE FALCIFORMACIÓN

A S CA2

DGLepore

F

LABORATORIOLABORATORIO

Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH ácido

Cuantificación de Hemoglobinas:

Cuantificación de Hb A2: 2.5 - 3.5%

Cuantificación de Hb F: <1%

Cuantificación de Hb S: 35 - 45%

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Homocigota S/S

Anemia normo o macrocítica:

Hb: 7-8g/dl

VCM: 85-95fl

CHCM: normal o aumentado

Anisopoiquilocitosis, hipocromía

Drepanocitos

Policromatofilia

Cuerpos de Howell-Jolly

Eritroblastos circulantes

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Laboratorio general:

Reticulocitos aumentados: 8-10%

LDH aumentada

Haptoglobina: disminuída

Bilirrubina total aumentada a expensas de indirecta

Ferritina: normal o aumentada

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

LABORATORIO

Electroforesis de hemoglobina en acetato de celulosa, pH alcalino

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Test de falciformación

Cuantificación de Hemoglobinas:

Cuantificación de Hb A2: normal

Cuantificación de Hb F: aumentada en forma variable

Cuantificación de Hb S: mayor al 80%

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Hb A/SHb A/S

Hb S/S

Estudio familiar

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Anemia microcítica hipocrómica:

Hb: 8 -10g/dl

VCM: 65 -75fl

HCM: disminuído

Anisopoiquilocitosis

Drepanocitos

Policromatofilia

Dianocitos

Cuerpos de Howell-Jolly

Eritroblastos circulantes

Doble heterocigota S/β

Laboratorio general:

Reticulocitos aumentados: 4-8%

LDH: aumentada

Haptoglobina: disminuída

Bilirrubina total: aumentada a expensas de indirecta

Ferritina: normal o aumentada

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

LABORATORIOLABORATORIO

Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH alcalino

Paciente

TEST DE FALCIFORMACIÓNTEST DE FALCIFORMACIÓN

Cuantificación de Hemoglobinas:

Cuantificación de Hb A2: 4-6%

Cuantificación de Hb F: aumentada en forma variable

Cuantificación de Hb S: variable (>50%)

Si la mutación es β+ existirá Hb A del 5-45%

SSÍNDROMES CON Hb SÍNDROMES CON Hb S

Anemia microcítica hipocrómica:

Alto recuento de eritrocitos

VCM disminuído(<78 fl)

HCM disminuído(<27pg)

ADE normal

Dianocitos y punteado basófilo

Ẽ a pH alcalino: Bandas: A/A2

Hb A2: >3.5%

Metabolismo del hierro normal

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Estudio familiar

β talasemia

Hb S/ β talasemia

Hb S

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Anemia microcítica:

VCM disminuído

CHCM aumentada

Dianocitos

Células densas

Drepanocitos

Policromatofilia

Doble heterocigota S / C (Hb C β 6glu → lys )

Laboratorio general: anemia hemolítica menor que en S/S

Reticulocitos aumentados

LDH aumentada

Haptoglobina disminuída

Bilirrubina total aumentada a expensas de indirecta

Ferritina: normal o aumentada

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

LABORATORIO

Electroforesis de Hb en acetato de celulosa a pH 8,4:

Cuantificación de Hemoglobinas:

Cuantificación de Hb A2 + HbC: 40-50%

Cuantificación de Hb F: aumentada en forma variable

Cuantificación de Hb S: 40-50%

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

LABORATORIO

ESTUDIO FAMILIAR

Electroforesis de Hb en acetato de celulosa a pH 8,4:

HbC

Hb S/C

Hb S

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

ESTUDIO FAMILIAR

LABORATORIO

Electroforesis de Hb en acetato de celulosa a pH 8,4:

Alto recuento de eritrocitos

VCM disminuído

HCM disminuído

ADE normal

Dianocitos

Bandas: A/X/A2

Hb A2: normal o disminuída

Banda X: hasta 15%

Test de falciformación: Neg

Metabolismo del hierro normal

HEMOGLOBINA LEPOREHEMOGLOBINA LEPORE

BIOLOGÍA MOLECULARBIOLOGÍA MOLECULAR

SÍNDROMES CON Hb SSÍNDROMES CON Hb S

Variantes de Hbs con movilidad Variantes de Hbs con movilidad electroforética electroforética ≈≈ HbS HbS

Electroforesis apH alcalino

Electroforesis apH ácido

Sickling/Isopropanol

Hb D–Los Angeles β 121 glu → gln S A Neg/ Neg

Hb G-Philadelphia α 68 asn → lys S A Neg/ Neg

Hb Hasharon α 47 asp → lys S S Neg/ Pos

Hb Lepore δβ fusión Ligeramenteanódica a S

A Neg/ Neg