Presentación de resultados

Parte II

Expresión de GFP en E. coli

Favarolo, Belén

Fuentes, Cynthia

Uran Landaburu, Lionel

Wisner, Darío

...Recordando conclusiones finales de la

parte I

Tiempo de inducción: 1hs

Temperatura: 37°C

Medio de cultivo: Riesenberg

Inductor: IPTG 1mM

Batch alimentado

Fermentación Centrifugación Ruptura

UltrafiltraciónCromatografía de pseudoafinidad

Cromatografía de exclusión

molecular

Flujo de trabajo

Fermentación

μMax = 0,8/h

Yx/s = 0,386 g/g

Ruptura celular

Cromatografía pseudoafinida

d (IMAC)

Cromatografía pseudoafinida

d (IMAC)

Cromatografía exclusión molecular

Cromatografía exclusión molecular

Tabla final

Vol (ml)Prot tot

(mg)FU/ml UFT Ae

Rendimient

o

Rendimient

o (%)

Entrada

IMAC500 1.963,889 404.490 202.245.000 102982 1,000 100

Entrada

CEM147 285,833 617.000 90.699.000 317314 0,448 44,846

Salida CEM 180 252 370.500 66.690.000 264643 0,735 73,529

Rendimiento global 0,330 32,975

Preparación• 2

horas

Fermentación• 10

horas

Ultracentifugación

• 20 minutos

Ruptura

• 3 horas

Ultracentrifugación• 20

minutos

Ultrafiltración• 3

minutos

IMAC

• 1 hora 40 minutos

CEM

• 4 minutos

Tiempo total:

17 horas 27

minutos

Tiempo de procesos

Otros datos de interés...

Por cada litro de cultivo, se obtiene la

cantidad de proteína equivalente a

8.502.975 UF.

Los 4 litros de cultivo procesados hubiesen

dado

una cantidad de proteína equivalente a

34.011.900 UF (considerando que los

rendimientos obtenidos se mantienen).