Producción de proteínsa recombinantes: Presentación de resultados (GFP)
Transcript of Producción de proteínsa recombinantes: Presentación de resultados (GFP)
Presentación de resultados
Parte II
Expresión de GFP en E. coli
Favarolo, Belén
Fuentes, Cynthia
Uran Landaburu, Lionel
Wisner, Darío
...Recordando conclusiones finales de la
parte I
Tiempo de inducción: 1hs
Temperatura: 37°C
Medio de cultivo: Riesenberg
Inductor: IPTG 1mM
Batch alimentado
Fermentación Centrifugación Ruptura
UltrafiltraciónCromatografía de pseudoafinidad
Cromatografía de exclusión
molecular
Flujo de trabajo
Tabla final
Vol (ml)Prot tot
(mg)FU/ml UFT Ae
Rendimient
o
Rendimient
o (%)
Entrada
IMAC500 1.963,889 404.490 202.245.000 102982 1,000 100
Entrada
CEM147 285,833 617.000 90.699.000 317314 0,448 44,846
Salida CEM 180 252 370.500 66.690.000 264643 0,735 73,529
Rendimiento global 0,330 32,975
Preparación• 2
horas
Fermentación• 10
horas
Ultracentifugación
• 20 minutos
Ruptura
• 3 horas
Ultracentrifugación• 20
minutos
Ultrafiltración• 3
minutos
IMAC
• 1 hora 40 minutos
CEM
• 4 minutos
Tiempo total:
17 horas 27
minutos
Tiempo de procesos