197HEMATOLOGÍA • Volumen 20 Nº 2: 197 - 200, 2016
Hemoglobina Groene Hart[α119(H2)Pro>Ser(α1)]
Hemoglobin Groene Hart [α119(H2)Pro>Ser(α1)]
Fernández DA1, Mansini AP1, Aguirre FM1, Pepe C1, Milanesio B1, Chávez A1, Eandi Eberle SJ1, Feliu Torres A1
1Servicio de Hematología-Oncología, “Hospital de Pediatría Prof. Dr. Juan P. Garrahan” , Buenos Aires, ´Argentina
Fecha de recepción: 06/04/2016Fecha de aprobación: 20/07/2016
HEMATOLOGÍAVolumen 20 nº 2: 197 - 200
Mayo - Agosto 2016
Palabras clave: α-talasemia, hemoglobinaGroeneHart, hemoglobinas anormales.
Keywords: α-Thalassemia, hemoglobinGroeneHart, abnormal hemoglobins.
CASOCLÍNICO
Resumen LaHbGroeneHart[α119(H2)Pro>Ser(α1)]esunavariantenodelecional,pocofrecuente,deα-talase-mia,caracterizadaporpresentarunainteracciónal-teradaconlaproteínaestabilizadoradelaαglobina,determinando la aparición de un síndrome talasémi-co.Se reportan lascaracterísticashematológicasymolecularesdeunindividuoasintomático,portadordeHbGroeneHart,conmicrocitosisehipocromía,sin anemia. Este caso resalta la importancia del análisis de todos los índices hematimétricos en la pesquisa de individuos portadores de hemoglobino-patías,enausenciadevaloresdehemoglobinadis-minuidospara laedadyel sexo,parasuposterioridentificaciónmolecularyconsejogenético.
AbstractHb Groene Hart [α119(H2)Pro>Ser(α1)] is a rarevariant of non deletional α-thalassemia, charac-terizedby an altered interactionwith theαglobinstabilizingprotein,determiningtheoccurrenceofathalassemia syndrome. Hematologic and molecular featuresofanasymptomaticindividualcarryingHbGroene Hart are reported. This case highlights the importanceofanalyzingallhematimetricindicesasascreeningtoolincarriersofhemoglobinopathies,withnormalhemoglobinlevelforageandsex,fol-lowedbymolecularidentificationandgeneticcoun-selling.
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CASO CLÍNICO
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IntroducciónLas α-talasemias son el grupo más frecuente dedesórdenes hereditarios de la hemoglobina en el mundo(1-3). Las α-talasemias son en sumayoría elresultado de deleciones de extensión variable que involucran los genes de α globina, ubicados en elbrazocortodelcromosoma16 (16p13.3).Sinem-bargo,hansidoreportadasmutacionespuntualesonodelecionalesconmenorfrecuencia.La Hb Groene Hart [α119(H2)Pro>Ser(α1)], tam-biénllamadaHbBernalda,esunavariantenodele-cionaldeα-talasemiadescriptaporprimeravezenmiembrosdeunafamiliadeorigenmarroquí,quie-nes presentaban un fenotipo talasémico. En 2014Joly y col., describieron los fenotipos de 63 indi-viduosdelNortedeÁfrica,heterocigotas,homoci-gotas y heterocigotas compuestos para Hb Groene Hart,confirmandolascaracterísticasdeα-talasemiade dicha hemoglobina(4).Sedescribenlascaracterís-ticas hematológicas y moleculares en un individuo conmicrocitosisehipocromía,sinanemia,portadorde Hb Groene Hart.
Materiales y métodosEl propósito, varón de 28 años, asintomático, sinantecedentespersonalesnifamiliares,fuederivadoa nuestro hospital por presentar microcitosis e hipo-cromía con niveles normales de hemoglobina con el objetivodeconfirmareldiagnósticodeα-talasemia.El estudio de patología eritrocitaria incluyó: la his-toriaclínica,elhemogramacompleto(SysmexXS-800i,SysmexCorporation,Kobe,Japan),elexamendelfrotisdesangreperiférica,elrecuentoreticuloci-tario,laelectroforesisdehemoglobinasemiautoma-tizadaengeldeagarosaapHalcalino,lacuantifica-cióndelaHbA2porcromatografíadeintercambioaniónico(Helena),lacuantificacióndehemoglobina
fetalpordesnaturalizaciónalcalina,lapruebadere-sistenciaosmóticaeritrocitaria,elperfildehierroylapruebadeBrewer.Para la realización del estudio molecular se aislóADNdeleucocitostotalesdesangreperiféricaporel método de precipitación salina. El ADN obtenido del propósito y de sugrupo familiar fue evaluadopordiferentesmetodologíasutilizadasparadetectaralteracionesdentrodelclusterαglobina.Lapresen-ciade lasgrandesdelecionesmásfrecuentesen lapoblaciónargentina(-α3.7,-α4.2,--MEDy--20.5)fueevaluadaporGAP-PCRutilizandoloscebado-resylaestrategiadescriptapreviamenteporChongy col con algunasmodificaciones(5). Otras grandes delecionesdentrodelclusterαglobinafuerondes-cartadasporMLPA(amplificacióndesondasdepen-diente de ligando), utilizando el equipo comercialSalsaMLPAP140BHBA(MRC-Holland)ysiguien-dolasinstruccionesdelfabricante.Lapresenciademutaciones puntuales y/o pequeñas inserciones odelecionesenlosgenesHBA2yHBA1seanalizóporPCR-Secuenciación,utilizandocebadoresdes-criptos previamente(6) y un secuenciador automático ABIPRISM3130(AppliedBiosystems).Los estudios fueron aprobados por el Comité deÉtica del “Hospital de Pediatría Prof. Dr. Juan P.Garrahan” y cumplen con las directrices éticas de la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial, de lasGuías Éticas Internacionales parala Investigación Biomédica del Consejo paralas Organizaciones Internacionales de CienciasMédicas, y con la Declaración en Bioética yDerechosHumanosdelaUNESCO.
ResultadosLos resultados de laboratorio del propósito y sus pa-dres se muestran en la Tabla 1.
Propósito Madre Padre
Hematíes(1012/L) 5.80 4.81 5.59
Hb(g/dL) 14.4 12.8 15.2
Hto(%) 43.4 37.9 45.8
VCM(fL) 74.8 78.8 81.9
HCM(pg) 24.8 26.6 27.2
CHCM(g/dL) 33.2 33.8 33.2
Tabla1.Resultadosdelaboratorio
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No se encontraron las mutaciones delecionales más frecuentesenelgenαenningúnmiembrodelafa-milia. Sin embargo la secuenciación identificó lasustituciónCCT>TCTenelcodón119delgenα-1de la globina en el propósito y en su madre.
DiscusiónLa Hb Groene Hart es producida por una mutación puntual,dondeeltripleteCCTenlaposición119delosgenesα1,quecodificaparaunresiduodeproli-na,essustituidoporunaserina(7). Esto provoca una interacción alterada con la proteína estabilizadoradelascadenasαdelahemoglobina(ASHP)consi-deradaunachaperonaque,alunirsealascadenasdeαglobina,evitalaprecipitacióndelasmismasenlosprecursoreseritroides.Porlotanto,elefectotalasé-micoesresultadodelamodificacióndeldominiodelacadenaαglobinareconocidoporlaASHP(8).La alteración de los valores hematimétricos encon-tradosenelpropósitoyensumadresonleves,estopodría deberse a la menor expresión que tiene el gen HBA1 respecto del HBA2, disminuyendo así lasmanifestaciones hematológicas ocasionadas por lamutación.Dichoshallazgossonsimilaresa losre-portadosporJolyycol.,enelgrupodeindividuosheterocigotas para Hb Groene Hart(4).Ennuestropaís,aligualqueenelrestodelmundo,lasα-talasemiassonsubdiagnosticadasdebidoaque
losportadoressilentessonasintomáticos,ylospará-metros hematimétricos secundarios del hemograma (volumencorpuscularmedio-VCM-,hemoglobinacorpuscularmedia -HCM- y concentración de he-moglobinacorpuscularmedia-CHCM-)suelensersubestimados, loquedeterminaquelosindividuosno sean evaluados de manera exhaustiva.En este caso el análisis de los índices hematimétricos (HCM,VCM)ydelrecuentodeeritrocitosplanteóel diagnóstico de una talasemia. El resultado normal deHbA2orientólabúsquedadeα-talasemia.Cabedestacar que tanto el propósito como su madre no presentabanotraspatologíasyelperfildehierrofuenormal.Seresaltadeestamaneralaimportanciadesecuen-ciarlosgenesαdeaquellospacientesconfenotipotalasémico,enlosquesedescartaronlasdelecionesy/omutacionespuntualesmásfrecuentesenlosge-nesαparaundiagnósticocorrectoyconsejogené-tico.
Hb: hemoglobina: Hto: hematocrito; VCM: volumen corpuscular medio; HCM: hemoglobina corpuscular me-dia; CHCM: concentración hemoglobina corpuscular media; ADE: amplitud de dispersión eritrocitaria; LDH: lactato deshidrogenasa.
Declaración de conflictos de interesesLosautoresdeclaranquenoposeenconflictosdeinterés.
ADE(%) 13.9 13 14
Reticulocitos(%) 2.0 2.6 1.0
Morfologíaeritrocitaria
Anisocitosis+ Anisocitosis+
microcitosis++ microcitosis+/++ Anisocitosis+
hipocromía++ hipocromía+ microcitosis+
ovalocitos+ ovalocitos+
eliptocitos+ eliptocitos+
LDH(UI/L) 326 390 330
ElectroforesisdeHbengeldeágar A / A2 A / A2 A / A2
CuantificaciónHbA2(%) 3.2 2.6 3.0
CuantificaciónHbF(%) < 2 < 2 < 2
CuerposdeInclusión Negativo Negativo Negativo
Bibliografía:
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HEMOGLOBINA GROENE HART [Α119(H2)PRO>SER(Α1)]
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