197HEMATOLOGÍA • Volumen 20 Nº 2: 197 - 200, 2016

Hemoglobina Groene Hart[α119(H2)Pro>Ser(α1)]

Hemoglobin Groene Hart [α119(H2)Pro>Ser(α1)]

Fernández DA1, Mansini AP1, Aguirre FM1, Pepe C1, Milanesio B1, Chávez A1, Eandi Eberle SJ1, Feliu Torres A1

1Servicio de Hematología-Oncología, “Hospital de Pediatría Prof. Dr. Juan P. Garrahan” , Buenos Aires, ´Argentina

afeliu@garrahan.gov.ar

Fecha de recepción: 06/04/2016Fecha de aprobación: 20/07/2016

HEMATOLOGÍAVolumen 20 nº 2: 197 - 200

Mayo - Agosto 2016

Palabras clave: α-talasemia, hemoglobinaGroeneHart, hemoglobinas anormales.

Keywords: α-Thalassemia, hemoglobinGroeneHart, abnormal hemoglobins.

CASOCLÍNICO

Resumen LaHbGroeneHart[α119(H2)Pro>Ser(α1)]esunavariantenodelecional,pocofrecuente,deα-talase-mia,caracterizadaporpresentarunainteracciónal-teradaconlaproteínaestabilizadoradelaαglobina,determinando la aparición de un síndrome talasémi-co.Se reportan lascaracterísticashematológicasymolecularesdeunindividuoasintomático,portadordeHbGroeneHart,conmicrocitosisehipocromía,sin anemia. Este caso resalta la importancia del análisis de todos los índices hematimétricos en la pesquisa de individuos portadores de hemoglobino-patías,enausenciadevaloresdehemoglobinadis-minuidospara laedadyel sexo,parasuposterioridentificaciónmolecularyconsejogenético.

AbstractHb Groene Hart [α119(H2)Pro>Ser(α1)] is a rarevariant of non deletional α-thalassemia, charac-terizedby an altered interactionwith theαglobinstabilizingprotein,determiningtheoccurrenceofathalassemia syndrome. Hematologic and molecular featuresofanasymptomaticindividualcarryingHbGroene Hart are reported. This case highlights the importanceofanalyzingallhematimetricindicesasascreeningtoolincarriersofhemoglobinopathies,withnormalhemoglobinlevelforageandsex,fol-lowedbymolecularidentificationandgeneticcoun-selling.

198

CASO CLÍNICO

HEMATOLOGÍA • Volumen 20 Nº 2: 197 - 200, 2016

IntroducciónLas α-talasemias son el grupo más frecuente dedesórdenes hereditarios de la hemoglobina en el mundo(1-3). Las α-talasemias son en sumayoría elresultado de deleciones de extensión variable que involucran los genes de α globina, ubicados en elbrazocortodelcromosoma16 (16p13.3).Sinem-bargo,hansidoreportadasmutacionespuntualesonodelecionalesconmenorfrecuencia.La Hb Groene Hart [α119(H2)Pro>Ser(α1)], tam-biénllamadaHbBernalda,esunavariantenodele-cionaldeα-talasemiadescriptaporprimeravezenmiembrosdeunafamiliadeorigenmarroquí,quie-nes presentaban un fenotipo talasémico. En 2014Joly y col., describieron los fenotipos de 63 indi-viduosdelNortedeÁfrica,heterocigotas,homoci-gotas y heterocigotas compuestos para Hb Groene Hart,confirmandolascaracterísticasdeα-talasemiade dicha hemoglobina(4).Sedescribenlascaracterís-ticas hematológicas y moleculares en un individuo conmicrocitosisehipocromía,sinanemia,portadorde Hb Groene Hart.

Materiales y métodosEl propósito, varón de 28 años, asintomático, sinantecedentespersonalesnifamiliares,fuederivadoa nuestro hospital por presentar microcitosis e hipo-cromía con niveles normales de hemoglobina con el objetivodeconfirmareldiagnósticodeα-talasemia.El estudio de patología eritrocitaria incluyó: la his-toriaclínica,elhemogramacompleto(SysmexXS-800i,SysmexCorporation,Kobe,Japan),elexamendelfrotisdesangreperiférica,elrecuentoreticuloci-tario,laelectroforesisdehemoglobinasemiautoma-tizadaengeldeagarosaapHalcalino,lacuantifica-cióndelaHbA2porcromatografíadeintercambioaniónico(Helena),lacuantificacióndehemoglobina

fetalpordesnaturalizaciónalcalina,lapruebadere-sistenciaosmóticaeritrocitaria,elperfildehierroylapruebadeBrewer.Para la realización del estudio molecular se aislóADNdeleucocitostotalesdesangreperiféricaporel método de precipitación salina. El ADN obtenido del propósito y de sugrupo familiar fue evaluadopordiferentesmetodologíasutilizadasparadetectaralteracionesdentrodelclusterαglobina.Lapresen-ciade lasgrandesdelecionesmásfrecuentesen lapoblaciónargentina(-α3.7,-α4.2,--MEDy--20.5)fueevaluadaporGAP-PCRutilizandoloscebado-resylaestrategiadescriptapreviamenteporChongy col con algunasmodificaciones(5). Otras grandes delecionesdentrodelclusterαglobinafuerondes-cartadasporMLPA(amplificacióndesondasdepen-diente de ligando), utilizando el equipo comercialSalsaMLPAP140BHBA(MRC-Holland)ysiguien-dolasinstruccionesdelfabricante.Lapresenciademutaciones puntuales y/o pequeñas inserciones odelecionesenlosgenesHBA2yHBA1seanalizóporPCR-Secuenciación,utilizandocebadoresdes-criptos previamente(6) y un secuenciador automático ABIPRISM3130(AppliedBiosystems).Los estudios fueron aprobados por el Comité deÉtica del “Hospital de Pediatría Prof. Dr. Juan P.Garrahan” y cumplen con las directrices éticas de la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial, de lasGuías Éticas Internacionales parala Investigación Biomédica del Consejo paralas Organizaciones Internacionales de CienciasMédicas, y con la Declaración en Bioética yDerechosHumanosdelaUNESCO.

ResultadosLos resultados de laboratorio del propósito y sus pa-dres se muestran en la Tabla 1.

Propósito Madre Padre

Hematíes(1012/L) 5.80 4.81 5.59

Hb(g/dL) 14.4 12.8 15.2

Hto(%) 43.4 37.9 45.8

VCM(fL) 74.8 78.8 81.9

HCM(pg) 24.8 26.6 27.2

CHCM(g/dL) 33.2 33.8 33.2

Tabla1.Resultadosdelaboratorio

199HEMATOLOGÍA • Volumen 20 Nº 2: 197 - 200, 2016

No se encontraron las mutaciones delecionales más frecuentesenelgenαenningúnmiembrodelafa-milia. Sin embargo la secuenciación identificó lasustituciónCCT>TCTenelcodón119delgenα-1de la globina en el propósito y en su madre.

DiscusiónLa Hb Groene Hart es producida por una mutación puntual,dondeeltripleteCCTenlaposición119delosgenesα1,quecodificaparaunresiduodeproli-na,essustituidoporunaserina(7). Esto provoca una interacción alterada con la proteína estabilizadoradelascadenasαdelahemoglobina(ASHP)consi-deradaunachaperonaque,alunirsealascadenasdeαglobina,evitalaprecipitacióndelasmismasenlosprecursoreseritroides.Porlotanto,elefectotalasé-micoesresultadodelamodificacióndeldominiodelacadenaαglobinareconocidoporlaASHP(8).La alteración de los valores hematimétricos encon-tradosenelpropósitoyensumadresonleves,estopodría deberse a la menor expresión que tiene el gen HBA1 respecto del HBA2, disminuyendo así lasmanifestaciones hematológicas ocasionadas por lamutación.Dichoshallazgossonsimilaresa losre-portadosporJolyycol.,enelgrupodeindividuosheterocigotas para Hb Groene Hart(4).Ennuestropaís,aligualqueenelrestodelmundo,lasα-talasemiassonsubdiagnosticadasdebidoaque

losportadoressilentessonasintomáticos,ylospará-metros hematimétricos secundarios del hemograma (volumencorpuscularmedio-VCM-,hemoglobinacorpuscularmedia -HCM- y concentración de he-moglobinacorpuscularmedia-CHCM-)suelensersubestimados, loquedeterminaquelosindividuosno sean evaluados de manera exhaustiva.En este caso el análisis de los índices hematimétricos (HCM,VCM)ydelrecuentodeeritrocitosplanteóel diagnóstico de una talasemia. El resultado normal deHbA2orientólabúsquedadeα-talasemia.Cabedestacar que tanto el propósito como su madre no presentabanotraspatologíasyelperfildehierrofuenormal.Seresaltadeestamaneralaimportanciadesecuen-ciarlosgenesαdeaquellospacientesconfenotipotalasémico,enlosquesedescartaronlasdelecionesy/omutacionespuntualesmásfrecuentesenlosge-nesαparaundiagnósticocorrectoyconsejogené-tico.

Hb: hemoglobina: Hto: hematocrito; VCM: volumen corpuscular medio; HCM: hemoglobina corpuscular me-dia; CHCM: concentración hemoglobina corpuscular media; ADE: amplitud de dispersión eritrocitaria; LDH: lactato deshidrogenasa.

Declaración de conflictos de interesesLosautoresdeclaranquenoposeenconflictosdeinterés.

ADE(%) 13.9 13 14

Reticulocitos(%) 2.0 2.6 1.0

Morfologíaeritrocitaria

Anisocitosis+ Anisocitosis+

microcitosis++ microcitosis+/++ Anisocitosis+

hipocromía++ hipocromía+ microcitosis+

ovalocitos+ ovalocitos+

eliptocitos+ eliptocitos+

LDH(UI/L) 326 390 330

ElectroforesisdeHbengeldeágar A / A2 A / A2 A / A2

CuantificaciónHbA2(%) 3.2 2.6 3.0

CuantificaciónHbF(%) < 2 < 2 < 2

CuerposdeInclusión Negativo Negativo Negativo

Bibliografía:

1.HiggsDR,WeatherallDJ.Thealphathalasse-mias.CellMolLifeSci.2009;66:1154.

HEMOGLOBINA GROENE HART [Α119(H2)PRO>SER(Α1)]

200

CASO CLÍNICO

HEMATOLOGÍA • Volumen 20 Nº 2: 197 - 200, 2016

2.GalanelloR,CaoA.GenetestReview.Alphathalassemia.GenetMed.2011;13:83.

3.HiggsDR.ThemolecularbasisofAlphatha-lassemia.DisordersofHemoglobin:GeneticsPathophysiology and Clinical Managements.Steinberg MH, Forget BG, Higgs DR,WeatherallDJ. 2009, p 241-65. 2daEdición.Cambridge,CambridgeUniversity.

4. Joly P, Lacan P, García C, Francina A.Descriptionofthephenotypesof63heterozy-gous and compound heterozygous patientscarrying the Hb Groene Hart [alpha119(H2)Pro-->Ser; HBA1: c.358C>T] variant.Hemoglobine.2014;38:64-6.

5. Chong SS, Boehm CD, Cutting GR et al.Simplifiedmultiplex-PCRdiagnosisofcommonsoutheast asian deletional determinants of al-pha-thalassemia.ClinChem.2000;46:1692-95.

6.ZoraiA,HarteveldCL,BakirAetal.Molecularspectrumofalpha-thalassemiainTunisia:epi-demiology and detection at birth. Hemoglobin. 2002;26:353-62.

7.HarteveldCL1,vanDelftP,PlugR,VersteeghFG et al. Hb Groene Hart: a new Pro-->Seraminoacidsubstitutionatposition119ofthealpha1-globinchain isassociatedwithamildalpha-thalassemia phenotype. Hemoglobin. 2002;26:255-60.

8. Giordano PC1, Zweegman S, Akkermans Net al. The first case of Hb Groene Hart [al-pha119(H2)Pro-->Ser, CCT-->TCT (alpha1)]homozygosityconfirmsthatathalassemiaphe-notypeisassociatedwiththisabnormalhemog-lobinvariant.Hemoglobin.2007;31:179-82.