Cortical plaques

Lambotin et al, J Cell Science 2005

EzrinActine

(nid d’abeille)

Lambotin et al, J Cell Science 2005

Doulet et al, J Cell Biol 2006

Nécessaire à l’adhésion "forte" en condition de flux(G. Mikaty, G. Dumenil & coll)

PI3K

GTPases

β-arrestins

Lan Ma and Gang Pei, Journal of Cell Science 120, 213-218 (2007)

•MapK•Src•Akt

A

B C

β-arrestins - SiRNA

βarrestin 1/2

Actin

Con

trol

siR

NA

βar

rest

in 1

/2 s

iRN

A

2,5 fold

Exp

ress

ion

is

redu

ced

by

Beta arrestine 2GFP ezrin

Ezrin recruitment

0%

20%

40%

60%

80%

100%

ControlsiRNA

Arrestin 1+2sirRNA

FLNA sirRNA GRK2 sirRNA

Ezrin

β-arrestins - SiRNA

βarrestin 1/2

Filamin A

GRK2

Actin

Con

trol

siR

NA

βar

rest

in 1

/2 s

iRN

A

Fila

min

A s

iRN

A

GR

K2

siR

NA

2,5 fold

Exp

ress

ion

is

redu

ced

by

7,5 fold

3 fold

Beta arrestine 2GFP ezrin

Ezrin recruitment

0%

20%

40%

60%

80%

100%

ControlsiRNA

Arrestin 1+2sirRNA

FLNA sirRNA GRK2 sirRNA

Ezrin

Recepteur adrénergique

Beta2 AR - YFP ezrin

0

20

40

60

80

100

% o

f re

cru

itin

g c

olo

ny

Ezrin recruitment

Control Phentolamine10 uM

Propranolol10 uM

αα--antagonistantagonist ββ--antagonistantagonist

Recepteur adrénergique

Beta2 AR - YFP ezrin

+

ββ--agonistagonist

0

20

40

60

80

100

Ct 0,0001 0,01 1 10

Ezrin recruitment

% o

f re

cru

itin

g c

olo

ny

Isoproterenol (μM)

Recepteur adrénergique

Beta2 AR - YFP ezrin

ββ--agonistagonist

0

20

40

60

80

100

Ct 0,0001 0,01 1 10

Ezrin recruitment

% o

f re

cru

itin

g c

olo

ny

Isoproterenol (μM)

+

Recepteur adrénergique

Ezrin recruitment

0%

20%

40%

60%

80%

100%

cont

rol

Isopr

oter

enol

1uM

Isopr

oter

enol

100n

M

SDF1M

IP IL8

AT2

5 à10 x Kd

Ezrin recruitment

0%

20%

40%

60%

80%

100%

IsoproterenolPropranolol

- 10µM 10µM 1µM 1µM - - + - +

Signaling des protéines G

0

20

40

60

80

100

Control PKA-PS

20uM 10uM

Forkolin10-5 M

PKA-PS Forkolin10-6 M

Ezrin recruitment

% o

f re

cru

itin

g c

olo

ny

Activation partielle

Billes coatées, cellules hCMEC/D3

Phenylephrineα1 agoniste

Isoproterenolβ1 agoniste

contraste actin ezrin

BSA ou Metoprolol

Effet des agonistes adrénergiques

Nm - + - + P-Ezrin

P-Moesin

CtIsoproterenol

0

1

2

3

4

5

Ezr

in p

hosp

hory

latio

n fo

ld in

crea

se

CtIsoproterenol

0

20

40

60

80

100

Ct 0,0001 0,01 1 10

Recrutment d’Ezrin%

re

cru

itin

g c

olo

nie

s

Isoproterenol (μM)

Ct 0,0001 0,01 1 100 Iso +

Phe

10:10

0

20

40

60

80

100

% r

ecr

uiti

ng

co

lon

ies

Recrutment d’Ezrin

Phenylephrine (μM)