BAB IV

HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN

4.1 Determinasi Tanaman Berdasarkan determinasi di Herbarium Bandungense Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati

Institut Teknologi Bandung, dinyatakan bahwa daun yang diperoleh dari Perkebunan bibit

Cihideung, Bandung adalah Carica papaya Linn.

4.2 Ekstraksi Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi adalah etanol-air (1:3). Penggunaan pelarut

tersebut berdasarkan kelarutan papain dan karpain yang diperkirakan sebagai komponen

aktif. Rendemen yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 4.1.

Proses ekstraksi serbuk simplisia daun pepaya dilakukan dengan cara maserasi. Hal ini

dilakukan berdasarkan stabilita papain yang dapat terdegradasi pada suhu lebih tinggi dari

60 oC.

Pemekatan ekstrak dilakukan dengan menggunakan penguap vakum berputar (rotavapor)

sampai diperoleh ekstrak kental. Selanjutnya, ekstrak kental tersebut diuapkan dengan

menggunakan oven vakum suhu 38 2 oC , sampai mencapai bobot tetap, mengacu pada

stabilita papain yang dapat terdegradasi pada suhu lebih tinggi dari 60 oC.

Tabel 4.1 Rendemen

Daun pepaya basah Serbuk simplisia Ekstrak Rendemen (% b/ b)

6740 1537 - 22,80 Berat (g) - 1300 341,98 26,30

39

40

4.3 Karakterisasi Mutu Simplisia dan Ekstrak Karakterisasi mutu serbuk simplisia dan ekstrak meliputi pemeriksaan secara makroskopik,

pemeriksaan kandungan, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut air, penetapan

kadar sari larut etanol. Khusus terhadap ekstrak juga dilakukan penentuan pola

kromatogram, penentuan bobot jenis, penentuan pH, penentuan angka kapang, dan angka

lempeng total.

4.3.1 Pemeriksaan Makroskopik Pemeriksaan makroskopik simplisia dan ekstrak dilakukan dengan mengamati warna, bau,

adanya lendir, cendawan serta pengotor lainnya, ukuran partikel, dan konsistensi. Hasil

pemeriksaan makroskopik dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan Ekstrak secara Makroskopik

No. Parameter Simplisia Ekstrak

1. Warna Hijau Coklat tua 2. Bau Khas Khas 3. Mikroorganisme x x 4. Ukuran partikel 20 mesh - 5. Konsistensi Serbuk Kental

Keterangan : x = tidak terdapat pertumbuhan mikroba, cendawan

4.3.2 Penetapan Kadar Air, Kadar Sari Larut Air, Kadar Sari Larut Etanol Simplisia dan Ekstrak serta Penentuan pH dan Bobot Jenis Ekstrak

Hasil penetapan kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol simplisia dan ekstrak

memberikan data spesifikasi simplisia dan ekstrak. Data spesifikasi simplisia dan ekstrak

dapat dilihat pada Tabel 4.3.

Tabel 4.3 Spesifikasi Simplisia dan Ekstrak

No. Parameter Simplisia Ekstrak

1. Kadar air 7,99 % v/b 15,22 % v/b

2. Kadar sari larut dalam air 5,64 % b/b 16,16 % b/b

3. Kadar sari larut dalam etanol 1,75 % b/b 0,64 % b/b

4. pH - 5,16

5. Bobot Jenis - 1,31 g/mL

41

Hasil penetapan kadar air simplisia adalah 7,99 % v/b. Menurut Materia Medika Indonesia,

kadar air simplisia tidak lebih dari 10 % v/b. Hal ini dimaksudkan untuk menghambat atau

mencegah pertumbuhan mikroba pada simplisia.

Persentase kadar sari larut air yang lebih tinggi daripada kadar sari larut etanol

menunjukkan bahwa pada serbuk simplisia dan ekstrak daun pepaya terdapat lebih banyak

senyawa yang terlarut dalam air daripada senyawa yang terlarut dalam etanol.

Oleh karena pH ekstrak cukup asam, maka perlu dipilih basis gel yang cocok pada rentang

pH tersebut sehingga tercapai stabilitas sediaan yang cukup baik.

4.3.3 Penapisan Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Hasil penapisan fitokimia simplisia dan ekstrak daun pepaya menunjukkan hasil yang

positif pada golongan alkaloid dan steroid/triterpenoid (Tabel 4.4). Karpain (suatu

alkaloid) dan terpenoid yang terkandung dalam pepaya mempunyai efek antimikroba (3)(Cowan, 1999).

Tabel 4.4 Hasil Penapisan Fitokimia

Golongan Senyawa Simplisia Ekstrak

1. Alkaloid + +

2. Tanin - -

a) Tanin Galat - -

b) Tanin Katekat - -

3. Flavonoid - -

4. Steroid / Triterpenoid + +

5. Kuinon - -

6. Saponin - -

Keterangan (+) = positif mengandung golongan senyawa tersebut (-) = negatif tidak mengandung golongan senyawa tersebut

(3) Jozef, F., 2005, The Chemical Anthropology of Antimicrobial Plants, Skadi.net [Serial Online],

http://forum.skadi.net/showthread.php?p=353823 [7 Oktober 2006].

42

4.3.4 Penentuan Pola Kromatogram Gambar pola kromatogram terlihat pada gambar di bawah ini.

E

E P EE PEP P P E P

1a 1b 1c 2a 2b 2c

Gambar 4.1 Pola kromatogram KLT ekstrak daun pepaya terhadap papain dengan fase diam silika gel GF 254, pengembang kloroform-metanol-NH3 30 %-etil asetat (2:2:1:2), E = Ekstrak daun pepaya, P = papain, 1 = tanpa penampak bercak, 2 = dengan penampak bercak H2SO4 10 %, a = visibel, b = sinar UV 254 nm, c = sinar UV 366 nm

E E EE EE

1a 1b 1c 2a 2b 2c

Gambar 4.2

Pola kromatogram KLT ekstrak daun pepaya terhadap papain dengan fase diam silika gel GF 254, pengembang kloroform-metanol-NH3 30 %-etil asetat (2:2:1:2), E = Ekstrak daun pepaya, P = papain, 1 = tanpa penampak bercak, 2 = dengan penampak bercak Dragendorff, a = visibel, b = sinar UV 254 nm, c = sinar UV 366 nm

43

P P P P

G

Krom

beber

asam

kroma

merah

kandu

Krom

denga

senya

4.3.5 Bahan

angka

penen

dan T

P

1a 1b

ambar 4.3

Pola kdenganmetano= tanpa0,2 %,

atogram ekstrak dan

apa bercak dengan w

amino dan peptida

togram ekstrak yang

ungu pada kromato

ngan papain.

atogram ekstrak den

n warna merah jing

wa alkaloid yang terk

Penentuan ALT da

baku tanaman yan

bakteri 107 cfu/g da

tuan angka kapang d

abel 4.5.

1c

romatogram KLT ekstr fase diam silika gel l-NH3 30 % (2:2:1), E = penampak bercak, 2 =

a = visibel, b = sinar UV

papain dengan penampa

arna merah hingga ung

(Kibardin and Lazurkin

berwarna merah ungu

gram papain, menunjuk

gan penampak bercak D

ga hingga merah bata

andung dalam ekstrak.

n Angka Kapang Ekstra

g akan digunakan sebag

n angka kapang 104 cfu

an angka lempeng total

2a 2b

ak daun pepaya teGF 254, pengemba

Ekstrak daun pepayadengan penampak be 254 nm, c = sinar U

k bercak ninhidrin 0,

u (visibel) yang men

s, 1969; Allen, 198

mempunyai kesamaa

kan bahwa di dalam

ragendorff memberik

(visibel) yang men

k

ai sediaan topikal, m

/g (Handa, 2005; W

ekstrak dapat dilihat

P

2

rhadap papng klorofo, P = papainrcak ninhidV 366 nm

2 % memb

unjukkan a

9). Bercak

n dengan b

ekstrak te

an empat b

unjukkan a

empunyai

HO, 1998).

pada Gamb

E

E E E EE

c

ain rm-, 1 rin

erikan

danya

pada

ercak

rdapat

ercak

danya

batas

Hasil

ar 4.4

44

Tabel 4.5 Penentuan Angka Lempeng Total Ekstrak dan Angka Kapang pada Ekstrak

No. Parameter Jumlah koloni pada ekstrak (cfu/mL) 1. Angka lempeng total (ALT) 7,60 . 1052. Angka kapang 3,79 . 105

(a.) (b.)

Gambar 4.4 Keterangan :

Angka kapang dan ALT ekstrak (a.) = Angka kapang, (b.) = Angka lempeng total (ALT)

Sebagai bahan baku, ekstrak mempunyai angka kapang lebih besar dari 104 cfu/g,

menunjukkan bahwa ekstrak berpotensi untuk menjadi media pertumbuhan kapang. Hal ini

terjadi karena adanya kandungan steroid / lemak-lemak / minyak dan air dalam ekstrak

dapat menjadi nutrisi bagi mikroorganisme. Oleh karena itu, formulasi memerlukan

penambahan pengawet yang bersifat bakteriostatik sehingga dapat menghambat

pertumbuhan bakteri dan kapang dalam ekstrak.

4.4 Penyiapan Biakan Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes Untuk uji potensi gel ekstrak, Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes

dibuat biakan Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes sebesar masing-

masing 8,65.109 cfu/mL dan 2,7.107 cfu/mL. Untuk Staphylococcus epidermidis dan

Propionibacterium acnes, masing-masing biakan tersebut setara dengan transmisi 27 %

dan transmisi 60,8 % dengan spektronic pada panjang gelombang 580 nm.

45

4.5 Penentuan KHM Penentuan nilai KHM dari ekstrak daun pepaya dan papain dilakukan terhadap

Staphylococcus epidermidis dan Propionibacterium acnes. Penentuan KHM ini bertujuan

untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak daun pepaya terhadap Staphylococcus

epidermidis dan Propionibacterium acnes, seperti yang terlihat pada gambar 4.5 dan 4.6.

Gambar 4.5

Keterangan :

Diameter zona hambat ekstrak daun pepaya terhadap Staphylococcus epidermidis E = ekstrak, 0.5, 1, 3, 5, 7, 10, 13, 15, 21, 25, 35, 50, 75 = Ekstrak (% b/v) dalam etanolair 1: 3

Gambar 4.6

Keterangan :

Diameter zona hambat ekstrak daun pepaya terhadap Propionibacterium acnes E = ekstrak, 0.5, 1, 3, 5, 7, 10, 15, 21, 25, 35, 50, 75 = Ekstrak (%b/v) dalam etanolair 1: 3

46

Tabel 4.6 Aktiv