Η Αναγεννητική Ιατρική ένας αναδυόμενος κλάδος της Ιατρικής

Κ ΚΟΥΖΗ-ΚΟΛΙΑΚΟΥΔΙΕΥΘΥΝΤΡΙΑ ΤΟΥ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟΥ ΤΗΣ ΙΣΤΟΛΟΓΙΑΣ-ΕΜΒΡΥΟΛΟΓΙΑΣ ΙΑΤΡΙΚΗΣ

ΣΧΟΛΗΣ ΑΠΘ

Η αναγέννηση των ιστών αποτελεί μέρος της φυσιολογικής λειτουργίας του οργανισμού η οποία επιβραδύνεται με την αύξηση της ηλικίας και δεν μπορεί να ανταποκριθεί στα νοσήματα φθοράς και τραυματισμούς

ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΤΩΝ ΙΣΤΩΝ

ΥΨΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΥΨΗΛΗ ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

ΥΨΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΧΑΜΗΛΗ

ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

1) Αίμα

2) Επιδερμίδα

3) Επιθήλια

4) Αγγειακό ενδοθήλιο

5) Βλεννογόνος εντέρου

1) Ήπαρ

2) Πάγκρεας

3) Μυϊκό σύστημα

4) Φλοιός επινεφριδίων

5) Οστό

6) Συνδετικός Ιστός

ΧΑΜΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΧΑΜΗΛΗ

ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

1) Εγκέφαλος

2) Νεφροί

3) Νωτιαίος μυελός

4) Πνεύμονας

5) Χόνδρος

6) Αμφιβληστροειδής

7) Καρδιά

Η αναγέννηση των ιστών γίνεται μέσω των αρχέγονων κυττάρων που διατηρεί ο κάθε ιστός είτε στα πλαίσια της φυσιολογικής ανανέωσης ή της αποκατάστασης

Effect of aging on stem cells World J Exp Med 2017 Feb 20 7(1) 1ndash10 Abu Shufian Ishtiaq Ahmed at al

Telomerase reactivation reverses tissue regeneration in aged telomerase deficient mice Jaskelioft M at Al 2011 Nature 469 (7328)102

Proteasome activation enhances stemness and lifespan of human mesenchymal stem cellsM Kapetanou Free Radical Biology and Medicine 103 (2017) 226ndash235

Η αναγέννηση των ιστών αποτελεί μέρος της φυσιολογικής λειτουργίας του οργανισμού η οποία επιβραδύνεται με την αύξηση της ηλικίας και δεν μπορεί να ανταποκριθεί στα νοσήματα φθοράς και τραυματισμούς

ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΤΩΝ ΙΣΤΩΝ

ΥΨΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΥΨΗΛΗ ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

ΥΨΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΧΑΜΗΛΗ

ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

1) Αίμα

2) Επιδερμίδα

3) Επιθήλια

4) Αγγειακό ενδοθήλιο

5) Βλεννογόνος εντέρου

1) Ήπαρ

2) Πάγκρεας

3) Μυϊκό σύστημα

4) Φλοιός επινεφριδίων

5) Οστό

6) Συνδετικός Ιστός

ΧΑΜΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΧΑΜΗΛΗ

ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

1) Εγκέφαλος

2) Νεφροί

3) Νωτιαίος μυελός

4) Πνεύμονας

5) Χόνδρος

6) Αμφιβληστροειδής

7) Καρδιά

Η αναγέννηση των ιστών γίνεται μέσω των αρχέγονων κυττάρων που διατηρεί ο κάθε ιστός είτε στα πλαίσια της φυσιολογικής ανανέωσης ή της αποκατάστασης

Effect of aging on stem cells World J Exp Med 2017 Feb 20 7(1) 1ndash10 Abu Shufian Ishtiaq Ahmed at al

Telomerase reactivation reverses tissue regeneration in aged telomerase deficient mice Jaskelioft M at Al 2011 Nature 469 (7328)102

Proteasome activation enhances stemness and lifespan of human mesenchymal stem cellsM Kapetanou Free Radical Biology and Medicine 103 (2017) 226ndash235

ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΤΩΝ ΙΣΤΩΝ

ΥΨΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΥΨΗΛΗ ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

ΥΨΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΧΑΜΗΛΗ

ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

1) Αίμα

2) Επιδερμίδα

3) Επιθήλια

4) Αγγειακό ενδοθήλιο

5) Βλεννογόνος εντέρου

1) Ήπαρ

2) Πάγκρεας

3) Μυϊκό σύστημα

4) Φλοιός επινεφριδίων

5) Οστό

6) Συνδετικός Ιστός

ΧΑΜΗΛΗ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΚΑΙ ΧΑΜΗΛΗ

ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΑΝΕΩΣΗ

1) Εγκέφαλος

2) Νεφροί

3) Νωτιαίος μυελός

4) Πνεύμονας

5) Χόνδρος

6) Αμφιβληστροειδής

7) Καρδιά

Η αναγέννηση των ιστών γίνεται μέσω των αρχέγονων κυττάρων που διατηρεί ο κάθε ιστός είτε στα πλαίσια της φυσιολογικής ανανέωσης ή της αποκατάστασης

Effect of aging on stem cells World J Exp Med 2017 Feb 20 7(1) 1ndash10 Abu Shufian Ishtiaq Ahmed at al

Telomerase reactivation reverses tissue regeneration in aged telomerase deficient mice Jaskelioft M at Al 2011 Nature 469 (7328)102

Proteasome activation enhances stemness and lifespan of human mesenchymal stem cellsM Kapetanou Free Radical Biology and Medicine 103 (2017) 226ndash235

Η αναγέννηση των ιστών γίνεται μέσω των αρχέγονων κυττάρων που διατηρεί ο κάθε ιστός είτε στα πλαίσια της φυσιολογικής ανανέωσης ή της αποκατάστασης

Effect of aging on stem cells World J Exp Med 2017 Feb 20 7(1) 1ndash10 Abu Shufian Ishtiaq Ahmed at al

Telomerase reactivation reverses tissue regeneration in aged telomerase deficient mice Jaskelioft M at Al 2011 Nature 469 (7328)102

Proteasome activation enhances stemness and lifespan of human mesenchymal stem cellsM Kapetanou Free Radical Biology and Medicine 103 (2017) 226ndash235

Τα αρχέγονα κύτταρα στην καθομιλουμένη αναφέρονται ως

βλαστοκύτταραStem cells- στελεχιαία κύτταρα

εμβρυικά βλαστοκύτταραεπαγώμενα βλαστοκύτταρα (iPs)

ενήλικα βλαστοκύτταρααιμοποιητικά βλαστοκύτταραμεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

ολοδύναμα-παντοδύναμαπολυδύναμαπλειοδύναμα

μονοδύναμα-βλαστοκύτταρα των ιστών

Τι είναι τα αρχέγονα κύτταρα-Βλαστοκύτταρα

httpdelsnaseduresourcesstatic-assetsmaterials-based-on reportsbookletsUnderstanding_Stem_Cellspdf

Κύτταρα τα οποία μπορούν

Να διαιρούνται και να παράγουνΘυγατρικά κύτταρα όμοια με τα Μητρικά

ή να διαφοροποιούνται παράγοντας άλλα είδη κυττάρων

Τα βλαστοκύτταρα είναι

Number of publicationsHuman clinical trials

7001 stem cells

clinical trials

Research worldwide focuses on stem cells transplantations

Stem cells have been successfully used in clinical trials for

therapeutic applications in adults

53 clinical trials with embryonic stem cells

318380Publications todayon stem cells

Τύποι Πλαστικότητα Πηγές λήψης

Ολοδύναμα (Totipotent )Δημιουργία ολόκληρου οργανισμού

Έμβρυο 3 ημερών

Πολυδύναμα (Pluripotent) Εμβρυϊκά βλαστοκύτταρακαι iPs (induced Pluripotent)

Δημιουργούν 200 κυτταρικούς τύπους

Βλαστοκύστες 5-14 ημερών

Εμβρυϊκά VSELs Ομφαλοπλακουντιακό αίμα

Πλειοδύναμα (Multipotent)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα

Διαφοροποιούνται σε περιορισμένο αριθμό κυττάρων

Εμβρυϊκοί ιστοί (υλικό αποξέσεων) Ομφαλοπλακουντιακό αίμα μυελός οστών λιπώδης ιστός πολφός νεογιλών δοντιών

Μονοδύναμα (Unipotent-Committed stem cells)

Δημιουργούν μόνο ένα είδος κυττάρου

Ερυθροβλάστες μυελοβλάστες λεμφοβλάστες

ΤΥΠΟΙ ΑΡΧΕΓΟΝΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ

Από τους παρακάτω ιστούς μπορούν να απομονωθούν αρχέγονα κύτταρα χωρίς να διαταραχθεί η αρχιτεκτονική των οργάνων που

περιέχονται και να χρησιμοποιηθούν στην πράξη

bull Βλαστοκύστεις

bull Έμβρυα

bull Αίμα ομφαλίου λώρου

bull Ιστό ομφαλίου λώρου

bull Πλακούντας

bull Αμνιακό Υγρό

bull Αμνιακή Μεμβράνη

bull Ενδομήτριο που αποπίπτει

bull Οδοντικός πολφός

bull Περιοδοντικοί σύνδεσμοι

bull Λιπώδης ιστός

bull Μυελός των οστών

bull Περιφερικό αίμα μετά από ενεργοποίηση

Διαφορές μεταξύ εμβρυικών και ενήλικων βλαστοκυττάρων

Εμβρυικά και επαγόμενα

(iPSCs)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μπορούν να δημιουργήσουν έμβρυα

bull Είναι ανοσολογικά ανώριμα και δεν απορρίπτονται από τον οργανισμό προτού να διαφοροποιηθούν

bull Θα μπορούσαν να αντικαταστήσουν ασθενή ή νεκρά κύτταρα

bull Θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση

bull Δημιουργούν όγκους (Τερατώματα)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα (μετά τηγέννηση)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μεταναστεύουν στην πάσχουσα περιοχή και συμβάλουν στην επούλωση

bull Δεν απορρίπτονται σε αυτόλογη χρήση

bull Υποστηρίζουν τα κύτταρα των ιστών με αυξητικούς παράγοντες για την αποκατάσταση της βλάβης

bull Αντικαθιστούν τα ασθενή ή νεκρά κύτταρα στην περιοχή της βλάβης

bull Έχουν ήδη χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση (τραχεία καρδιακές βαλβίδες)

bull Αποτελούν μέρος της φυσικής άμυνας του οργανισμού και δεν δημιουργούν όγκους

CFUs assays from the placental perfusion

A Erythroid (BFU-E)

B Granulocyte-macrophage (CFU-GM) colonies and

C Granulocyte-erythroid-macrophage-megakaryocyte (CFU-GEMM)

(Koliakos at al 2007 Cytotherapy V9 (7)654)

Αρχέγονα-Στελεχιαία-Πλειοδύναμα Αιμοποιητικά κύτταρα (CD34+)

Αιμοποιητικές αποικίες μετά από καλλιέργεια

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Τι είναι τα αρχέγονα κύτταρα-Βλαστοκύτταρα

httpdelsnaseduresourcesstatic-assetsmaterials-based-on reportsbookletsUnderstanding_Stem_Cellspdf

Κύτταρα τα οποία μπορούν

Να διαιρούνται και να παράγουνΘυγατρικά κύτταρα όμοια με τα Μητρικά

ή να διαφοροποιούνται παράγοντας άλλα είδη κυττάρων

Τα βλαστοκύτταρα είναι

Number of publicationsHuman clinical trials

7001 stem cells

clinical trials

Research worldwide focuses on stem cells transplantations

Stem cells have been successfully used in clinical trials for

therapeutic applications in adults

53 clinical trials with embryonic stem cells

318380Publications todayon stem cells

Τύποι Πλαστικότητα Πηγές λήψης

Ολοδύναμα (Totipotent )Δημιουργία ολόκληρου οργανισμού

Έμβρυο 3 ημερών

Πολυδύναμα (Pluripotent) Εμβρυϊκά βλαστοκύτταρακαι iPs (induced Pluripotent)

Δημιουργούν 200 κυτταρικούς τύπους

Βλαστοκύστες 5-14 ημερών

Εμβρυϊκά VSELs Ομφαλοπλακουντιακό αίμα

Πλειοδύναμα (Multipotent)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα

Διαφοροποιούνται σε περιορισμένο αριθμό κυττάρων

Εμβρυϊκοί ιστοί (υλικό αποξέσεων) Ομφαλοπλακουντιακό αίμα μυελός οστών λιπώδης ιστός πολφός νεογιλών δοντιών

Μονοδύναμα (Unipotent-Committed stem cells)

Δημιουργούν μόνο ένα είδος κυττάρου

Ερυθροβλάστες μυελοβλάστες λεμφοβλάστες

ΤΥΠΟΙ ΑΡΧΕΓΟΝΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ

Από τους παρακάτω ιστούς μπορούν να απομονωθούν αρχέγονα κύτταρα χωρίς να διαταραχθεί η αρχιτεκτονική των οργάνων που

περιέχονται και να χρησιμοποιηθούν στην πράξη

bull Βλαστοκύστεις

bull Έμβρυα

bull Αίμα ομφαλίου λώρου

bull Ιστό ομφαλίου λώρου

bull Πλακούντας

bull Αμνιακό Υγρό

bull Αμνιακή Μεμβράνη

bull Ενδομήτριο που αποπίπτει

bull Οδοντικός πολφός

bull Περιοδοντικοί σύνδεσμοι

bull Λιπώδης ιστός

bull Μυελός των οστών

bull Περιφερικό αίμα μετά από ενεργοποίηση

Διαφορές μεταξύ εμβρυικών και ενήλικων βλαστοκυττάρων

Εμβρυικά και επαγόμενα

(iPSCs)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μπορούν να δημιουργήσουν έμβρυα

bull Είναι ανοσολογικά ανώριμα και δεν απορρίπτονται από τον οργανισμό προτού να διαφοροποιηθούν

bull Θα μπορούσαν να αντικαταστήσουν ασθενή ή νεκρά κύτταρα

bull Θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση

bull Δημιουργούν όγκους (Τερατώματα)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα (μετά τηγέννηση)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μεταναστεύουν στην πάσχουσα περιοχή και συμβάλουν στην επούλωση

bull Δεν απορρίπτονται σε αυτόλογη χρήση

bull Υποστηρίζουν τα κύτταρα των ιστών με αυξητικούς παράγοντες για την αποκατάσταση της βλάβης

bull Αντικαθιστούν τα ασθενή ή νεκρά κύτταρα στην περιοχή της βλάβης

bull Έχουν ήδη χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση (τραχεία καρδιακές βαλβίδες)

bull Αποτελούν μέρος της φυσικής άμυνας του οργανισμού και δεν δημιουργούν όγκους

CFUs assays from the placental perfusion

A Erythroid (BFU-E)

B Granulocyte-macrophage (CFU-GM) colonies and

C Granulocyte-erythroid-macrophage-megakaryocyte (CFU-GEMM)

(Koliakos at al 2007 Cytotherapy V9 (7)654)

Αρχέγονα-Στελεχιαία-Πλειοδύναμα Αιμοποιητικά κύτταρα (CD34+)

Αιμοποιητικές αποικίες μετά από καλλιέργεια

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Number of publicationsHuman clinical trials

7001 stem cells

clinical trials

Research worldwide focuses on stem cells transplantations

Stem cells have been successfully used in clinical trials for

therapeutic applications in adults

53 clinical trials with embryonic stem cells

318380Publications todayon stem cells

Τύποι Πλαστικότητα Πηγές λήψης

Ολοδύναμα (Totipotent )Δημιουργία ολόκληρου οργανισμού

Έμβρυο 3 ημερών

Πολυδύναμα (Pluripotent) Εμβρυϊκά βλαστοκύτταρακαι iPs (induced Pluripotent)

Δημιουργούν 200 κυτταρικούς τύπους

Βλαστοκύστες 5-14 ημερών

Εμβρυϊκά VSELs Ομφαλοπλακουντιακό αίμα

Πλειοδύναμα (Multipotent)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα

Διαφοροποιούνται σε περιορισμένο αριθμό κυττάρων

Εμβρυϊκοί ιστοί (υλικό αποξέσεων) Ομφαλοπλακουντιακό αίμα μυελός οστών λιπώδης ιστός πολφός νεογιλών δοντιών

Μονοδύναμα (Unipotent-Committed stem cells)

Δημιουργούν μόνο ένα είδος κυττάρου

Ερυθροβλάστες μυελοβλάστες λεμφοβλάστες

ΤΥΠΟΙ ΑΡΧΕΓΟΝΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ

Από τους παρακάτω ιστούς μπορούν να απομονωθούν αρχέγονα κύτταρα χωρίς να διαταραχθεί η αρχιτεκτονική των οργάνων που

περιέχονται και να χρησιμοποιηθούν στην πράξη

bull Βλαστοκύστεις

bull Έμβρυα

bull Αίμα ομφαλίου λώρου

bull Ιστό ομφαλίου λώρου

bull Πλακούντας

bull Αμνιακό Υγρό

bull Αμνιακή Μεμβράνη

bull Ενδομήτριο που αποπίπτει

bull Οδοντικός πολφός

bull Περιοδοντικοί σύνδεσμοι

bull Λιπώδης ιστός

bull Μυελός των οστών

bull Περιφερικό αίμα μετά από ενεργοποίηση

Διαφορές μεταξύ εμβρυικών και ενήλικων βλαστοκυττάρων

Εμβρυικά και επαγόμενα

(iPSCs)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μπορούν να δημιουργήσουν έμβρυα

bull Είναι ανοσολογικά ανώριμα και δεν απορρίπτονται από τον οργανισμό προτού να διαφοροποιηθούν

bull Θα μπορούσαν να αντικαταστήσουν ασθενή ή νεκρά κύτταρα

bull Θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση

bull Δημιουργούν όγκους (Τερατώματα)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα (μετά τηγέννηση)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μεταναστεύουν στην πάσχουσα περιοχή και συμβάλουν στην επούλωση

bull Δεν απορρίπτονται σε αυτόλογη χρήση

bull Υποστηρίζουν τα κύτταρα των ιστών με αυξητικούς παράγοντες για την αποκατάσταση της βλάβης

bull Αντικαθιστούν τα ασθενή ή νεκρά κύτταρα στην περιοχή της βλάβης

bull Έχουν ήδη χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση (τραχεία καρδιακές βαλβίδες)

bull Αποτελούν μέρος της φυσικής άμυνας του οργανισμού και δεν δημιουργούν όγκους

CFUs assays from the placental perfusion

A Erythroid (BFU-E)

B Granulocyte-macrophage (CFU-GM) colonies and

C Granulocyte-erythroid-macrophage-megakaryocyte (CFU-GEMM)

(Koliakos at al 2007 Cytotherapy V9 (7)654)

Αρχέγονα-Στελεχιαία-Πλειοδύναμα Αιμοποιητικά κύτταρα (CD34+)

Αιμοποιητικές αποικίες μετά από καλλιέργεια

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Τύποι Πλαστικότητα Πηγές λήψης

Ολοδύναμα (Totipotent )Δημιουργία ολόκληρου οργανισμού

Έμβρυο 3 ημερών

Πολυδύναμα (Pluripotent) Εμβρυϊκά βλαστοκύτταρακαι iPs (induced Pluripotent)

Δημιουργούν 200 κυτταρικούς τύπους

Βλαστοκύστες 5-14 ημερών

Εμβρυϊκά VSELs Ομφαλοπλακουντιακό αίμα

Πλειοδύναμα (Multipotent)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα

Διαφοροποιούνται σε περιορισμένο αριθμό κυττάρων

Εμβρυϊκοί ιστοί (υλικό αποξέσεων) Ομφαλοπλακουντιακό αίμα μυελός οστών λιπώδης ιστός πολφός νεογιλών δοντιών

Μονοδύναμα (Unipotent-Committed stem cells)

Δημιουργούν μόνο ένα είδος κυττάρου

Ερυθροβλάστες μυελοβλάστες λεμφοβλάστες

ΤΥΠΟΙ ΑΡΧΕΓΟΝΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ

Από τους παρακάτω ιστούς μπορούν να απομονωθούν αρχέγονα κύτταρα χωρίς να διαταραχθεί η αρχιτεκτονική των οργάνων που

περιέχονται και να χρησιμοποιηθούν στην πράξη

bull Βλαστοκύστεις

bull Έμβρυα

bull Αίμα ομφαλίου λώρου

bull Ιστό ομφαλίου λώρου

bull Πλακούντας

bull Αμνιακό Υγρό

bull Αμνιακή Μεμβράνη

bull Ενδομήτριο που αποπίπτει

bull Οδοντικός πολφός

bull Περιοδοντικοί σύνδεσμοι

bull Λιπώδης ιστός

bull Μυελός των οστών

bull Περιφερικό αίμα μετά από ενεργοποίηση

Διαφορές μεταξύ εμβρυικών και ενήλικων βλαστοκυττάρων

Εμβρυικά και επαγόμενα

(iPSCs)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μπορούν να δημιουργήσουν έμβρυα

bull Είναι ανοσολογικά ανώριμα και δεν απορρίπτονται από τον οργανισμό προτού να διαφοροποιηθούν

bull Θα μπορούσαν να αντικαταστήσουν ασθενή ή νεκρά κύτταρα

bull Θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση

bull Δημιουργούν όγκους (Τερατώματα)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα (μετά τηγέννηση)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μεταναστεύουν στην πάσχουσα περιοχή και συμβάλουν στην επούλωση

bull Δεν απορρίπτονται σε αυτόλογη χρήση

bull Υποστηρίζουν τα κύτταρα των ιστών με αυξητικούς παράγοντες για την αποκατάσταση της βλάβης

bull Αντικαθιστούν τα ασθενή ή νεκρά κύτταρα στην περιοχή της βλάβης

bull Έχουν ήδη χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση (τραχεία καρδιακές βαλβίδες)

bull Αποτελούν μέρος της φυσικής άμυνας του οργανισμού και δεν δημιουργούν όγκους

CFUs assays from the placental perfusion

A Erythroid (BFU-E)

B Granulocyte-macrophage (CFU-GM) colonies and

C Granulocyte-erythroid-macrophage-megakaryocyte (CFU-GEMM)

(Koliakos at al 2007 Cytotherapy V9 (7)654)

Αρχέγονα-Στελεχιαία-Πλειοδύναμα Αιμοποιητικά κύτταρα (CD34+)

Αιμοποιητικές αποικίες μετά από καλλιέργεια

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Από τους παρακάτω ιστούς μπορούν να απομονωθούν αρχέγονα κύτταρα χωρίς να διαταραχθεί η αρχιτεκτονική των οργάνων που

περιέχονται και να χρησιμοποιηθούν στην πράξη

bull Βλαστοκύστεις

bull Έμβρυα

bull Αίμα ομφαλίου λώρου

bull Ιστό ομφαλίου λώρου

bull Πλακούντας

bull Αμνιακό Υγρό

bull Αμνιακή Μεμβράνη

bull Ενδομήτριο που αποπίπτει

bull Οδοντικός πολφός

bull Περιοδοντικοί σύνδεσμοι

bull Λιπώδης ιστός

bull Μυελός των οστών

bull Περιφερικό αίμα μετά από ενεργοποίηση

Διαφορές μεταξύ εμβρυικών και ενήλικων βλαστοκυττάρων

Εμβρυικά και επαγόμενα

(iPSCs)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μπορούν να δημιουργήσουν έμβρυα

bull Είναι ανοσολογικά ανώριμα και δεν απορρίπτονται από τον οργανισμό προτού να διαφοροποιηθούν

bull Θα μπορούσαν να αντικαταστήσουν ασθενή ή νεκρά κύτταρα

bull Θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση

bull Δημιουργούν όγκους (Τερατώματα)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα (μετά τηγέννηση)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μεταναστεύουν στην πάσχουσα περιοχή και συμβάλουν στην επούλωση

bull Δεν απορρίπτονται σε αυτόλογη χρήση

bull Υποστηρίζουν τα κύτταρα των ιστών με αυξητικούς παράγοντες για την αποκατάσταση της βλάβης

bull Αντικαθιστούν τα ασθενή ή νεκρά κύτταρα στην περιοχή της βλάβης

bull Έχουν ήδη χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση (τραχεία καρδιακές βαλβίδες)

bull Αποτελούν μέρος της φυσικής άμυνας του οργανισμού και δεν δημιουργούν όγκους

CFUs assays from the placental perfusion

A Erythroid (BFU-E)

B Granulocyte-macrophage (CFU-GM) colonies and

C Granulocyte-erythroid-macrophage-megakaryocyte (CFU-GEMM)

(Koliakos at al 2007 Cytotherapy V9 (7)654)

Αρχέγονα-Στελεχιαία-Πλειοδύναμα Αιμοποιητικά κύτταρα (CD34+)

Αιμοποιητικές αποικίες μετά από καλλιέργεια

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Διαφορές μεταξύ εμβρυικών και ενήλικων βλαστοκυττάρων

Εμβρυικά και επαγόμενα

(iPSCs)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μπορούν να δημιουργήσουν έμβρυα

bull Είναι ανοσολογικά ανώριμα και δεν απορρίπτονται από τον οργανισμό προτού να διαφοροποιηθούν

bull Θα μπορούσαν να αντικαταστήσουν ασθενή ή νεκρά κύτταρα

bull Θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση

bull Δημιουργούν όγκους (Τερατώματα)

Ενήλικα βλαστοκύτταρα (μετά τηγέννηση)

bull Μπορούν να διαφοροποιηθούν σε οποιοδήποτε άλλο κύτταρο

bull Μεταναστεύουν στην πάσχουσα περιοχή και συμβάλουν στην επούλωση

bull Δεν απορρίπτονται σε αυτόλογη χρήση

bull Υποστηρίζουν τα κύτταρα των ιστών με αυξητικούς παράγοντες για την αποκατάσταση της βλάβης

bull Αντικαθιστούν τα ασθενή ή νεκρά κύτταρα στην περιοχή της βλάβης

bull Έχουν ήδη χρησιμοποιηθεί για τη δημιουργία οργάνων προς μεταμόσχευση (τραχεία καρδιακές βαλβίδες)

bull Αποτελούν μέρος της φυσικής άμυνας του οργανισμού και δεν δημιουργούν όγκους

CFUs assays from the placental perfusion

A Erythroid (BFU-E)

B Granulocyte-macrophage (CFU-GM) colonies and

C Granulocyte-erythroid-macrophage-megakaryocyte (CFU-GEMM)

(Koliakos at al 2007 Cytotherapy V9 (7)654)

Αρχέγονα-Στελεχιαία-Πλειοδύναμα Αιμοποιητικά κύτταρα (CD34+)

Αιμοποιητικές αποικίες μετά από καλλιέργεια

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

CFUs assays from the placental perfusion

A Erythroid (BFU-E)

B Granulocyte-macrophage (CFU-GM) colonies and

C Granulocyte-erythroid-macrophage-megakaryocyte (CFU-GEMM)

(Koliakos at al 2007 Cytotherapy V9 (7)654)

Αρχέγονα-Στελεχιαία-Πλειοδύναμα Αιμοποιητικά κύτταρα (CD34+)

Αιμοποιητικές αποικίες μετά από καλλιέργεια

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Πολυδύναμα κύτταρα ΟΠΑ

Koliakos at al Transfusion 2011 V 51 976 Η παρουσία πολυδύναμων κυττάρων στο ΟΠΑ αναφέρθηκε επίσης από τους

Santourlidis at al 2011 Stem Cells Res 6(1)60 Greschats at all 2008 Stem Cell Devel 17 (2)221

Kogler at al 2004 Experimental HematologyVery Small Embryonic-Like Stem Cells Implications in Reproductive Biology Deepa Bhartiya at al BioMed

Research International Volume 2013 Article ID 682326

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Ανίχνευση εμβρυικών δεικτών Oct-4 Nanog και Sox2 στον μη

αιμοποιητικό πληθυσμό ΟΠΑ (VSELs)

Oct-4

Nanog

Oct-4

Sox2

mergedmerged

Gounari at al 2019

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Έλεγχος κλωνογενούς ικανότητας VSELs παρουσία και

απουσία MSCs σε μεθυλσελουλόζη

CFUs CFUCFU

CFUBFU BFUBFU

VSELs BM-VSELsWharton-VSELs

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

CD34

CD

45

VSELs Whartonrsquos Jelly MSCs-VSELsBM MSCs-VSELs

572 70712

Ανοσοφαινοτυπική διαφοροποίηση των VSELs μετά τη

συγκαλλιέργεια με MSCs

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Απομόνωση μονοπυρήνων από το περιφερικό αίμα με σκοπό τη δημιουργία πολυδύναμων κυττάρων μονοκυτταρικής προέλευσης

(MOMCs) μέσω χημειοταξίας στον SDF-1α

Koliakou I at all 2019 THERM in press

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

PCL solution

PCL-based νανοϊμένια

SiO2

nanotubes SrHA nanorods

νανοσωματίδια

MOMCs διαφοροποίηση προς ενδοθήλιο και οστό

Περιφερικό αίμα

Παραγωγή MOMCs ndash παρουσίαSDF-1a

PCL πολυμερές

Απομόνωση μονοπύρηνων

Πριν

Ενδοθήλιο

Οστό

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Μετατροπή μεσεγχυματικών κυττάρων σε χονδροκύτταρα

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

bull Καλλιέργεια σε ειδικές συνθήκες για διαφοροποίηση προς πρόδρομα χονδροκύτταρα

Επώαση με μείγμα αυξητικών παραγόντων TGFβ και BMPΟ IGF-1 (insulin-growth factor) θεωρείται επίσης παράγοντας που προάγει την διαφοροποίηση των μεσεγχυματικών σε χονδροκύτταρα

bull Απομόνωση RNA (mRNA extraction)

bull SYBR Green Universal Quantitative PCR για έλεγχο των mRNA επιπέδων για Αγκρεκάνη (Aggregan) Κολλαγόνο 1 (Col1a1)και Κολλαγόνο 2 (Col2a1)

Μετατροπή Μεσεγχυματικών σε Χονδροκύτταρα

Μέθοδος

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Col2a1πρώιμος δείκτης

χονδρογένεσης

Αγκρεκάνηπρωτεογλυκάνη παρούσα

στην εξωκυττάρια ουσία

του χόνδρου

Col1a1πρωτεΐνη του

συνδετικού ιστού και

του χόνδρου

Μέθοδος Επαλήθευσης

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Μέθοδος ΕπαλήθευσηςQuantitative PCR

Cyclin A Green for Col1a1 Col2a1 Aggregan and Actin GAPGH (as reference genes)

Biohellenika RampD unpublished data

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Απομόνωση βλαστοκυττάρων από τον πολφό των νεογιλών δοντιών

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 3 μήνες μετά τη διατομή

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Αναγέννηση περιφερικού νεύρου μετά την προσθήκη βλαστοκυττάρων του πολφού 6 μήνες

μετά τη διατομή

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Μυογράφημα υγιούς περιοχής

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Μυογράφημα περιοχής κάτω από τη διατομή μετά την προσθήκη των

κυττάρων

Spiridopolous at al 2015 J of Reconstructive Microsurgery

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

GFP-ADSC

GFP-ADSC GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Neuronal differentiation GFP-ADSC

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Νευρικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα

Koliakos et al unpublished data

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Μεταμοσχευμένα ASCs

(Α) στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

(Β) μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Α Β

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Μεταμοσχευμένα neuron-like ASCs

στην πλάγια κοιλία του εγκεφάλου

και μετά τη μετανάστευσή τους στο εγκεφαλικό παρέγχυμα

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Γενετικά τροποποιημένα μεσεγχυματικά

βλαστοκύτταρα λιπώδους ιστού σημασμένα

με την φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) ενιόμενα

σε χειρουργικούς κρημνούς επιβιώνουν 7

ημέρες

Karathanasis at al 2013 European j of Plastic Surgery

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

H GFP παράγεται από τα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα του λιπώδους

ιστού και ο σχηματισμός που παράγει μεταφέρεται επάνω κύτταρα που

παράγουν τον von Willebrand είτε μέσω επισκευής των υπαρχόντων

αγγείων είτε μέσω αγγειογένεσης (Koliakos et al 2012)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Αριστερά χωρίς την προσθήκη μεσεγχυματικών

βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού και δεξιά μετά την προσθήκη

βλαστοκυττάρων Karathanasis at al 2013)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)

Προσθήκη Μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων λιπώδους ιστού εντός ικριώματος υαλουρονικούοξέος (δεξιά)