Oι ΑΝΑΛΥΣΕΙΣ DNA ΣΤΗΝ ΕΓΚΛΗΜΑΤΟΛΟΓΙΑ: ΜΥΘΟΙ ΚΑΙ

ΔΙΕΥΘΥΝΣΗ ΕΓΚΛΗΜΑΤΟΛΟΓΙΚΩΝ ΕΡΕΥΝΩΝΔΙΕΥΘΥΝΣΗ ΕΓΚΛΗΜΑΤΟΛΟΓΙΚΩΝ ΕΡΕΥΝΩΝΤμήμα Ανάλυσης Βιολογικών ΥλικώνΤμήμα Ανάλυσης Βιολογικών Υλικών

OOι ΑΝΑΛΥΣΕΙΣ ι ΑΝΑΛΥΣΕΙΣ DNA DNA ΣΤΗΝ ΕΓΚΛΗΜΑΤΟΛΟΓΙΑ:ΣΤΗΝ ΕΓΚΛΗΜΑΤΟΛΟΓΙΑ:ΜΥΘΟΙΜΥΘΟΙ ΚΑΙ ΚΑΙ ΠΡΑΓΜΑΤΙΚΟΤΗΤΑ.ΠΡΑΓΜΑΤΙΚΟΤΗΤΑ.

ΤΑΪΡΗΣ Νικόλαος, ΤΑΪΡΗΣ Νικόλαος, B.Sc., Ph.D.B.Sc., Ph.D.Χημικός-ΒιοχημικόςΧημικός-Βιοχημικός

Αστυνόμος Α΄Αστυνόμος Α΄

66οο Συνέδριο Ιατροδικαστικής και Τοξικολογίας, Καλαμάτα Δεκ.2009 Συνέδριο Ιατροδικαστικής και Τοξικολογίας, Καλαμάτα Δεκ.2009

ΜΥΘΟΣ ΠρώτοςΜΥΘΟΣ Πρώτος

Η ανάλυση Η ανάλυση DNADNA στηνστην ΕγκληματολογίαΕγκληματολογία……

6ο Συνέδριο Ιατροδικαστικής και Τοξικολογίας, Καλαμάτα Δεκ.20096ο Συνέδριο Ιατροδικαστικής και Τοξικολογίας, Καλαμάτα Δεκ.2009

ΠΡΑΓΜΑΤΙΚΟΤΗΤΑΠΡΑΓΜΑΤΙΚΟΤΗΤΑΟι αναλύσειςΟι αναλύσεις DNA DNA στην Εγκληματολογίαστην Εγκληματολογία

Η ανάλυση πυρηνικού Η ανάλυση πυρηνικού DNADNAΠολυμορφισμοί μεγέθουςΠολυμορφισμοί μεγέθους Αυτοσωμικων Αυτοσωμικων STR STR ((short tandem repeats)short tandem repeats) Αυτοσωμικών Υ-Αυτοσωμικών Υ-STRSTR (Υ χρωμόσωμα) (Υ χρωμόσωμα)

Αυτοσωμικών Χ-Αυτοσωμικών Χ-STR (X STR (X χρωμόσωμαχρωμόσωμα))Πολυμορφισμοί σημείουΠολυμορφισμοί σημείου SNPsSNPs

Η ανάλυση μιτοχονδριακού Η ανάλυση μιτοχονδριακού DNADNA HV HV Ι , ΗΙ , ΗV II (Sequencing)V II (Sequencing) SNPsSNPs


Short Tandem Repeats (STRs)

• Repeat region is variable (polymorphic)– Each variant is referred to as an allele

• Flanking region is constant

KEY: Alleles are distinguished by length

7 repeats

8 repeats

AATG

~

~

~

~


ΜΥΘΟΣ ΔεύτεροςΜΥΘΟΣ Δεύτερος

Η ανάλυση Η ανάλυση DNADNA στην Εγκληματολογία… στην Εγκληματολογία…

είναι μια απλή και εύκολη διαδικασία!!!είναι μια απλή και εύκολη διαδικασία!!!


ΠΡΑΓΜΑΤΙΚΟΤΗΤΑΠΡΑΓΜΑΤΙΚΟΤΗΤΑ

Συλλογή ΠειστηρίωνΣυλλογή Πειστηρίων Μελέτη Εγγράφων ΥπόθεσηςΜελέτη Εγγράφων Υπόθεσης ΔειγματοληψίαΔειγματοληψία Απομόνωση Απομόνωση DNADNA Ποσοτικοποίηση Ποσοτικοποίηση DNADNA Πολλαπλασιασμός Πολλαπλασιασμός DNADNA Διαχωρισμός Διαχωρισμός DNADNA Ανάλυση και απόδοση πολυμορφισμώνΑνάλυση και απόδοση πολυμορφισμών ΣτατιστικήΣτατιστική Εξαγωγή ΣυμπερασμάτωνΕξαγωγή Συμπερασμάτων Συγγραφή Έκθεσης ΠραγματογνωμοσύνηςΣυγγραφή Έκθεσης Πραγματογνωμοσύνης


Μελέτη Εγγράφων ΥπόθεσηςΜελέτη Εγγράφων Υπόθεσης

Βασικό στοιχείο κατανόησης του είδους των βιολογικών Βασικό στοιχείο κατανόησης του είδους των βιολογικών υλικών που αναζητούνται.υλικών που αναζητούνται.

Καταγραφή των πειστηρίων και αξιολόγηση τουςΚαταγραφή των πειστηρίων και αξιολόγηση τους Καθορισμός του είδους και του αριθμού των δειγμάτωνΚαθορισμός του είδους και του αριθμού των δειγμάτων Πρώτη εντύπωση για την χρησιμοποίηση πρωτοκόλλων Πρώτη εντύπωση για την χρησιμοποίηση πρωτοκόλλων

απομόνωσης απομόνωσης DNA DNA και είδους ανάλυσης και είδους ανάλυσης DNA DNA που θα που θα απαιτηθείαπαιτηθεί..


ΔΕΙΓΜΑΤΟΛΗΨΙΑΔΕΙΓΜΑΤΟΛΗΨΙΑ

Σημαντικότερο στάδιοΣημαντικότερο στάδιο Αναγνωριστικά τεστ, Αίμα, Σπέρμα, Σάλιο,Αναγνωριστικά τεστ, Αίμα, Σπέρμα, Σάλιο, ΤρίχεςΤρίχες Άλλα βιολογικά υλικά, βλέννες κ.αΆλλα βιολογικά υλικά, βλέννες κ.α Επιλογή απομόνωσης Επιλογή απομόνωσης DNADNA


Απομόνωση Απομόνωση DNADNA

Στήλες Στήλες silica-basedsilica-based IQ (promega)IQ (promega) ChelexChelex Οργανικοί διαλυτές, φαινόληΟργανικοί διαλυτές, φαινόλη Differex (Promega) Differex (Promega) για βιασμούςγια βιασμούς


Ποσοτικοποίηση Ποσοτικοποίηση DNADNA

Dot-blotDot-blot, αναγνώριση με αντισώματα, αναγνώριση με αντισώματα-10ng-10ng RT-PCR RT-PCR με με κιτ κιτ ΑΒΙ, ΑΒΙ, Promega -10pgPromega -10pg Νανοφασματοσκοπια 1Νανοφασματοσκοπια 1ngng


Πολλαπλασιασμός Πολλαπλασιασμός DNADNA

Make copies (extend primers)

Starting DNA Template

5’

5’

3’

3’

5’

5’

3’

3’

Add primers (anneal) 5’3’

3’5’

Forward primer

Reverse primer

Separate strands (denature)

5’

5’3’

3’


Διαχωρισμός Διαχωρισμός DNADNA

Ηλεκτροφόρηση, Ηλεκτροφόρηση, CapillaryCapillary


Ανάλυση και απόδοση πολυμορφισμώνΑνάλυση και απόδοση πολυμορφισμών

PP16PP16

100 bp 500 bp200 bp 300 bp 400 bp 600 bp

TH01D3 D21 D18 Penta E

D5 D13 D7 D16 CSF Penta D

A vWA D8 TPOX FGA

100 500200 300 400 600


Allelic LadderAllelic Ladder


ProfilProfil


STR ProfilesM-FISys STR profile contains 16

elements: Amelogenin (Gender) 13 CoDIS Core Loci 2 PowerPlex Loci:

• Penta D• Penta E

Minimum Likelihood:

7.6 × 1015


ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ

Hardy-Weinberg proportionsHardy-Weinberg proportions::pp22 for homozygous alleles: p = frequency of allele for homozygous alleles: p = frequency of allele

2pq2pq for heterozygous alleles: p,q = frequency of each allele for heterozygous alleles: p,q = frequency of each allele

ΜΙΓΜΑΤΑΜΙΓΜΑΤΑ


Εξαγωγή ΣυμπερασμάτωνΕξαγωγή ΣυμπερασμάτωνΣυγγραφή Έκθεσης ΠραγματογνωμοσύνηςΣυγγραφή Έκθεσης Πραγματογνωμοσύνης


Μύθος ΤρίτοςΜύθος Τρίτος

Η ανάλυση Η ανάλυση DNA DNA είναι μια γρήγορη είναι μια γρήγορη διαδικασία που ολοκληρώνεται σε λίγες διαδικασία που ολοκληρώνεται σε λίγες ώρες!!!!ώρες!!!!

Τα παραπάνω δίνουν την απάντησηΤα παραπάνω δίνουν την απάντηση

ΟΧΙΟΧΙ


CSICSI

LAS VEGASLAS VEGAS MIAMIMIAMI LALA NEW YORKNEW YORK LAW AND ORDERLAW AND ORDER


ΜΥΘΟΣ ΤέταρτοςΜΥΘΟΣ Τέταρτος

Οι αναλύσεις Οι αναλύσεις DNA DNA παράγουν Ιατρικά παράγουν Ιατρικά δεδομέναδεδομένα..


Target Region for PCR

Chromosome

cell nucleus

double-stranded DNA molecule

Individual nucleotide

s



D16S539

D7S820

D13S317

D5S818

CSF1PO

TPOX

THO1 vWA Amelogenin

Amelogenin

Penta E D18S51

D21S11

D3S1358FGA

D8S1179

Penta D

ΠραγματικότηταΠραγματικότητα

Μη κωδικοποιημένες περιοχέςΜη κωδικοποιημένες περιοχές Επιλογή περιοχών που δεν σχετίζονταιΕπιλογή περιοχών που δεν σχετίζονται Κάθε εξέταση έχει την δικής της Κάθε εξέταση έχει την δικής της

τεχνογνωσία και τεχνολογία και τεχνογνωσία και τεχνολογία και τεχνοτροπία που είναι εύκολα τεχνοτροπία που είναι εύκολα αναγνωρίσιμη.αναγνωρίσιμη.

ΚΑΜΜΙΑ ΣΧΕΣΗΚΑΜΜΙΑ ΣΧΕΣΗ


ΜΥΘΟΣ ΠέμπτοςΜΥΘΟΣ Πέμπτος

Το Το DNA DNA χρησιμοποιείται μόνο για να χρησιμοποιείται μόνο για να καταδικάζει ?καταδικάζει ?


ΠραγματικότηταΠραγματικότητα

«Αθωώνει περισσότερους από όσους «Αθωώνει περισσότερους από όσους ενοχοποιεί»ενοχοποιεί»


ΜΥΘΟΣ ΈκτοςΜΥΘΟΣ Έκτος

Τι πατρότητα, τι Εγκληματολογικό Τι πατρότητα, τι Εγκληματολογικό DNADNA,,

όλα ιδία, όλοι μπορούν να τα φέρουν σε όλα ιδία, όλοι μπορούν να τα φέρουν σε πέρας.πέρας.



Άλλο πατρότητες, άλλο ΕγκληματολογίαΆλλο πατρότητες, άλλο Εγκληματολογία

Πείρα, τεχνικές, αποτελέσματα, στατιστικέςΠείρα, τεχνικές, αποτελέσματα, στατιστικές

Νομικά και πολλά άλλα είναι διαφορετικάΝομικά και πολλά άλλα είναι διαφορετικά


ΜΥΘΟΣ ΕΒΔΟΜΟΣΜΥΘΟΣ ΕΒΔΟΜΟΣ

Το Το DNA DNA από μόνο του θα λύσει το από μόνο του θα λύσει το πρόβλημαπρόβλημα



Οι αναλύσεις Οι αναλύσεις DNA DNA είναι ότι πιο σύγχρονο είναι ότι πιο σύγχρονο και αξιόπιστο εργαλείο που χρειάζεται: την και αξιόπιστο εργαλείο που χρειάζεται: την

σοβαρή και ικανή Προανάκριση σοβαρή και ικανή Προανάκριση και μαζί με τεχνικές όπως,και μαζί με τεχνικές όπως,

τα αποτυπώματα, την βαλλιστική και άλλες τα αποτυπώματα, την βαλλιστική και άλλες επιστήμες Ιατροδικαστική, Τοξικολογία επιστήμες Ιατροδικαστική, Τοξικολογία

κ.α. μπορεί πραγματικά να δώσει κ.α. μπορεί πραγματικά να δώσει αξιολογότατα αποτελέσματα και λύσεις αξιολογότατα αποτελέσματα και λύσεις

στην απόδοση της αλήθειας.στην απόδοση της αλήθειας.


Μύθος ΌγδοοςΜύθος Όγδοος

Η Βάση δεδομένων Η Βάση δεδομένων DNA DNA προσβάλλει τα προσβάλλει τα ατομικά δεδομένα του ανθρώπουατομικά δεδομένα του ανθρώπου

Και θα χρησιμοποιηθεί Και θα χρησιμοποιηθεί a priori a priori στην στην δημιουργία ενοχοποιητικών στοιχείων δημιουργία ενοχοποιητικών στοιχείων

ενάντια σε αθώους πολίτεςενάντια σε αθώους πολίτες



Ασφαλιστικές δικλίδες νομοθετημένεςΑσφαλιστικές δικλίδες νομοθετημένες Εμπειρία χρήσης από άλλες χώρεςΕμπειρία χρήσης από άλλες χώρες Υιοθέτηση από όλες τις Ε.Ε για Υιοθέτηση από όλες τις Ε.Ε για

ανταλλαγή δεδομένων (ανταλλαγή δεδομένων (PRUM)PRUM) Σοβαρός διάλογος με την κοινωνίαΣοβαρός διάλογος με την κοινωνία

ΔΕΙΧΝΟΥΝ ΑΚΡΙΒΩΣ ΤΟ ΑΝΤΙΘΕΤΟΔΕΙΧΝΟΥΝ ΑΚΡΙΒΩΣ ΤΟ ΑΝΤΙΘΕΤΟ

ΤΗΝ ΑΝΑΓΚΑΙΟΤΗΤΑ ΤΗΣΤΗΝ ΑΝΑΓΚΑΙΟΤΗΤΑ ΤΗΣ

Oι ΑΝΑΛΥΣΕΙΣ DNA ΣΤΗΝ ΕΓΚΛΗΜΑΤΟΛΟΓΙΑ: ΜΥΘΟΙ ΚΑΙ

Documents

Transcript of Oι ΑΝΑΛΥΣΕΙΣ DNA ΣΤΗΝ ΕΓΚΛΗΜΑΤΟΛΟΓΙΑ: ΜΥΘΟΙ ΚΑΙ