Παπαδοπούλου Χ Λευκοθέα Αναπληρώτρια Καθηγήτρια

Τμήματος Φαρμακευτικής ΑΠΘ

httpstemcellsnihgovinfobasicsbasics4asp

Hematopoietic and stromal stem cell differentiation

httpstemcellsnihgovinfobasicsbasics4asp

Hematopoietic and stromal stem cell differentiation

Κυτταρικά συστατικά της ανοσολογικής απόκρισης

bull Aντιγονοπαρουσιαστικά Κύτταρα (APCs) bull T κύτταρα

bull B κύτταρα πλασματοκύτταρα Παραγωγή αντισωμάτων

With kind permission from Nick Holmes

(see httpwwwhpaorgukinfectionstopics_azvaccinationtraining_menuhtm)

phagocytes granules contain destructive enzymes for killing infectious organism

inflammation (release histamine)

phagocytes

lack B-cell receptors and T-cell receptors They kill cells bound by antibody or lacking MHC-I molecules on their surface

(tissue)

(tissue)

httpwwwmerckmanualscomhomeimmune_disordersbiology_of_the_immune_systemoverview_of_the_immune_systemhtml

httpbiotechauagrBSC_COURSESbzanosologia_intropdf

APCs

httpsgatewaydiscoverygatecomxpharmservletrequesthandlerCommand=GetArticleampArticle_ID=327

Μοριακή και Κλινική Φαρμακολογία Τόμος Βrsquo ΑΣ Τσιφτσόγλου University Studio Press 2011

Tα παραπάνω στάδια ωρίμανσης των Β κυττάρων είναι ανεξάρτητα του αντιγόνου όταν ενεργοποιηθούν από κάποιο εξειδικευμένο ξένο αντίσωμα παρουσία και των βοηθητικών Τ-λεμφοκυττάρων (helper T cells) στα περιφερικά λεμφικά όργανα αυτά τα ώριμα Β κύτταρα (mature naiumlve B cells) πολλαπλασιάζονται και διαφοροποιούνται στα δραστικά Β κύτταρα ή στα Β κύτταρα μνήμης (effective or memory B cells) Molecular Biology of the Cell V Cells in Their Social Context 24 The Adaptive Immune System B Cells and Antibodies

Figure 24-22 The main stages in B cell development

Science 27 January 2012 Vol 335 no 6067 pp 408-409

a B cell extracts antigen from an antigen-presenting cell (APC) and delivers it to MIIC where antigen-derived peptides are generated These combine with MHC class II molecules which are delivered from the endoplasmic reticulum and are transported back to the plasma membrane (PM) to interact with cognate T follicular helper cells

plasma membrane

T helper cell

The Activation of B-cells in the IgM Immune Response

TCR

httpwwwbiopharminternationalcombiopharmarticlearticleDetailjspid=174494amppageID=3

Tα παραπάνω στάδια ωρίμανσης των Β κυττάρων είναι ανεξάρτητα του αντιγόνου όταν ενεργοποιηθούν από κάποιο εξειδικευμένο ξένο αντίσωμα παρουσία και των βοηθητικών Τ-λεμφοκυττάρων (helper T cells) στα περιφερικά λεμφικά όργανα αυτά τα ώριμα Β κύτταρα (mature naiumlve B cells) πολλαπλασιάζονται και διαφοροποιούνται στα δραστικά Β κύτταρα ή στα Β κύτταρα μνήμης (effective or memory B cells) Molecular Biology of the Cell V Cells in Their Social Context 24 The Adaptive Immune System B Cells and Antibodies

Figure 24-22 The main stages in B cell development

Science 27 January 2012 Vol 335 no 6067 pp 408-409

a B cell extracts antigen from an antigen-presenting cell (APC) and delivers it to MIIC where antigen-derived peptides are generated These combine with MHC class II molecules which are delivered from the endoplasmic reticulum and are transported back to the plasma membrane (PM) to interact with cognate T follicular helper cells

plasma membrane

T helper cell

The Activation of B-cells in the IgM Immune Response

TCR

httpwwwbiopharminternationalcombiopharmarticlearticleDetailjspid=174494amppageID=3

Science 27 January 2012 Vol 335 no 6067 pp 408-409

a B cell extracts antigen from an antigen-presenting cell (APC) and delivers it to MIIC where antigen-derived peptides are generated These combine with MHC class II molecules which are delivered from the endoplasmic reticulum and are transported back to the plasma membrane (PM) to interact with cognate T follicular helper cells

plasma membrane

T helper cell

The Activation of B-cells in the IgM Immune Response

TCR

httpwwwbiopharminternationalcombiopharmarticlearticleDetailjspid=174494amppageID=3

The Activation of B-cells in the IgM Immune Response

TCR

httpwwwbiopharminternationalcombiopharmarticlearticleDetailjspid=174494amppageID=3

Figure 3 The Activation of T-cells in the IgG Immune Response

The Activation of T-cells in the IgM Immune Response

httpwwwbiopharminternationalcombiopharmarticlearticleDetailjspid=174494amppageID=3

B cell activation and Humoral Immunity

httpwwwwhfreemancomimmunologyCH05figure05-15htm

Light chains in shades of gray heavy chains in shades of blue

Heavy chain γ μ α ε δ

Light chain κ λ

Δευτερογενής απόκριση

Πρωταρχική απόκριση Προστασία των

βλεννωδών μεμβρανών

Σε αλλεργικές αντιδράσεις

5 κατηγορίες ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ

βάσει της βαριάς (heavy) αλυσίδας

In humans 60 of the light chains are κ and 40 are λ whereas in mice 95 of the light chains are κ and only 5 are λ

Ανασυνδυασμός DNA

~ 3times1011 συνδυασμοί είναι πιθανοί

httpwwwncbinlmnihgovbooksNBK27140figureA440report=objectonly

Immunobiology The Immune System in Health and Disease 5th edition

httpwwwncbinlmnihgovbooksNBK27140figureA440report=objectonly

Immunobiology The Immune System in Health and Disease 5th edition

An antibody molecule

httpwwwaccessexcellenceorgABGGantiBD_molhtml

50kDa

25kDa

150kDa

Θέση αναγνώρισης

αντιγόνου

αντιγόνο

Αντίσωμα ΙgG

httpwwwaccessexcellenceorgABGGantiBD_molhtml

Fab

Fc

Θέση αναγνώρισης

αντιγόνου

αντιγόνο

httpwwwbiologyarizonaeduimmunology tutorialsantibodystructurehtml

Μεταβλητές περιοχές (Variable regions)

υποδιαιρούνται σε

τρείς (3) υπερμεταβλητές περιοχές

Complementarity

Determining Regions (CDRs)

που συμμετέχουν στην αναγνώριση του αντιγόνου

and

four (4) framework (FR) regions

Οι δομικές και λειτουργικές περιοχές ενός laquoγυμνούraquo IgG1 ανασυνδυασμένου mAb Η Fab περιοχή συνδέεται σε διαλυτά (A) ή μεμβρανικά αντιγόνα (B) και η Fc περιοχή προσελκύει (C) τα αποτελεσματικά-δραστικά (effector) κύτταρα μέσω των υποδοχέων FcγR και (D) C1q 1ο συστατικό του συστήματος του συμπληρώματος EC effector cell FcγR receptor for the Fc portion of IgG

Modified from Congy-Jolivet N Probst A Watier H Thibault G

Fab περιοχή

σύνδεση με το αντιγόνο

Fc περιοχή Προσέλκυση κυττάρων (NKCs) ή και συστατικών του συμπληρώματος για δράση

Αντισώματα εναντίων

παθογόνων

Figure 1417

Antibody-Dependent Cell Mediated Cytotoxicity (ADCC)

Complement Dependent Cytotoxicity (CDC)

MAC Membrane

Attack Complex

httpwwwmerckmanualscomprofessionalimmunology_allergic_disordersbiology_of_the_immune_systemcomplement_systemhtml

Figure 1417

Antibody-Dependent Cell Mediated Cytotoxicity (ADCC)

Complement Dependent Cytotoxicity (CDC)

MAC Membrane

Attack Complex

httpwwwmerckmanualscomprofessionalimmunology_allergic_disordersbiology_of_the_immune_systemcomplement_systemhtml

Complement Dependent Cytotoxicity (CDC)

MAC Membrane

Attack Complex

httpwwwmerckmanualscomprofessionalimmunology_allergic_disordersbiology_of_the_immune_systemcomplement_systemhtml

Παραγωγή

Αντισωμάτων

Πολυκλωνικά αντισώματα

Μονοκλωνικά αντισώματα

(Mabs)

Πολυκλωνικά αντισώματα

Το Χ αντιγόνο (πρωτεϊνη)

εγχύεται σε κάποιο άλλο είδος

(κουνέλι αιγοπρόβατο)

Πολυκλωνικά αντισώματα

έναντι διαφορετικών επιτοπίων

του ίδιου (Χ) αντιγόνου

Modified from httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt32115Slide 15

Μονοκλωνικά αντισώματα (mabs)

Χορήγηση του αντιγόνου Χ

σε ποντίκι

τεχνολογία υβριδώματος

KohlerMilstein Nature 1975 256 495-7

Πολυκλωνικά αντισώματα

Μονοκλωνικά αντισώματα

(Mabs)

Πολυκλωνικά αντισώματα

Το Χ αντιγόνο (πρωτεϊνη)

εγχύεται σε κάποιο άλλο είδος

(κουνέλι αιγοπρόβατο)

Πολυκλωνικά αντισώματα

έναντι διαφορετικών επιτοπίων

του ίδιου (Χ) αντιγόνου

Modified from httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt32115Slide 15

Μονοκλωνικά αντισώματα (mabs)

Χορήγηση του αντιγόνου Χ

σε ποντίκι

τεχνολογία υβριδώματος

KohlerMilstein Nature 1975 256 495-7

Πολυκλωνικά αντισώματα

Το Χ αντιγόνο (πρωτεϊνη)

εγχύεται σε κάποιο άλλο είδος

(κουνέλι αιγοπρόβατο)

Πολυκλωνικά αντισώματα

έναντι διαφορετικών επιτοπίων

του ίδιου (Χ) αντιγόνου

Modified from httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt32115Slide 15

Μονοκλωνικά αντισώματα (mabs)

Χορήγηση του αντιγόνου Χ

σε ποντίκι

τεχνολογία υβριδώματος

KohlerMilstein Nature 1975 256 495-7

Παραγωγή πολυκλωνικών αντισωμάτων

bull Επαναλαμβανόμενη χορήγηση του ίδιου αντιγόνου σε μεσοδιαστήματα μερικών εβδομάδων διεγείρει Β κύτταρα να παράγουν μεγάλες ποσότητες

αντισωμάτων έναντι του Χ αντιγόνου

bull Επειδή πολλά διαφορετικά Β κύτταρα διεγείρονται από το αντιγόνο Χ

στο αίμα ανευρίσκεται ποικιλία αντισωμάτων έναντι

διαφορετικών επιτοπίων του αντιγόνου Χ

Πολυκλωνικά αντισώματα έναντι του Χ αντιγόνου

Παραγωγή πολυκλωνικών αντισωμάτων

Το Χ αντιγόνο εγχύεται σε

κάποιο άλλο είδος (κουνέλι

αιγοπρόβατο)

δημιουργία ποικιλίας

αντισωμάτων από διαφορετικά

Β κύτταρα έναντι

διαφορετικών επιτοπίων

του αντιγόνου Χ Παραλαβή

αίματος από το αυτί του

ζώου

Παραλαβή του πλάσματος

εμπλουτισμένου στα αντισώματα

Πολυκλωνικά αντισώματα

έναντι διαφορετικών επιτοπίων

του Χ αντιγόνου

Modified by httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt32115Slide 15

ανοσολογική αντίδραση σε ανοσογόνο παράγοντα

bull Πρωταρχική ανοσολογική αντίδραση

bull Aναπτύσσεται εβδομάδες μετά την έκθεση ndash Κυρίως IgM αντισώματα

bull Δευτερογενής

ανοσολογική αντίδραση bull Aναπτύσσεται πολύ πιο

γρήγορα και είναι πιο ισχυρή

-- Κυρίως IgG αντισώματα

With kind permission from Nick Holmes

With kind permission from Nick Holmes

(see httpwwwhpaorgukinfectionstopics_azvaccinationtraining_menuhtm)

ΜΝΗΜΗ

bull Επαναλαμβανόμενη χορήγηση του ίδιου αντιγόνου σε μεσοδιαστήματα μερικών εβδομάδων διεγείρει Β κύτταρα να παράγουν μεγάλες ποσότητες

αντισωμάτων έναντι του Χ αντιγόνου

bull Επειδή πολλά διαφορετικά Β κύτταρα διεγείρονται από το αντιγόνο Χ

στο αίμα ανευρίσκεται ποικιλία αντισωμάτων έναντι

διαφορετικών επιτοπίων του αντιγόνου Χ

Πολυκλωνικά αντισώματα έναντι του Χ αντιγόνου

Παραγωγή πολυκλωνικών αντισωμάτων

Το Χ αντιγόνο εγχύεται σε

κάποιο άλλο είδος (κουνέλι

αιγοπρόβατο)

δημιουργία ποικιλίας

αντισωμάτων από διαφορετικά

Β κύτταρα έναντι

διαφορετικών επιτοπίων

του αντιγόνου Χ Παραλαβή

αίματος από το αυτί του

ζώου

Παραλαβή του πλάσματος

εμπλουτισμένου στα αντισώματα

Πολυκλωνικά αντισώματα

έναντι διαφορετικών επιτοπίων

του Χ αντιγόνου

Modified by httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt32115Slide 15

ανοσολογική αντίδραση σε ανοσογόνο παράγοντα

bull Πρωταρχική ανοσολογική αντίδραση

bull Aναπτύσσεται εβδομάδες μετά την έκθεση ndash Κυρίως IgM αντισώματα

bull Δευτερογενής

ανοσολογική αντίδραση bull Aναπτύσσεται πολύ πιο

γρήγορα και είναι πιο ισχυρή

-- Κυρίως IgG αντισώματα

With kind permission from Nick Holmes

With kind permission from Nick Holmes

(see httpwwwhpaorgukinfectionstopics_azvaccinationtraining_menuhtm)

ΜΝΗΜΗ

Παραγωγή πολυκλωνικών αντισωμάτων

Το Χ αντιγόνο εγχύεται σε

κάποιο άλλο είδος (κουνέλι

αιγοπρόβατο)

δημιουργία ποικιλίας

αντισωμάτων από διαφορετικά

Β κύτταρα έναντι

διαφορετικών επιτοπίων

του αντιγόνου Χ Παραλαβή

αίματος από το αυτί του

ζώου

Παραλαβή του πλάσματος

εμπλουτισμένου στα αντισώματα

Πολυκλωνικά αντισώματα

έναντι διαφορετικών επιτοπίων

του Χ αντιγόνου

Modified by httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt32115Slide 15

ανοσολογική αντίδραση σε ανοσογόνο παράγοντα

bull Πρωταρχική ανοσολογική αντίδραση

bull Aναπτύσσεται εβδομάδες μετά την έκθεση ndash Κυρίως IgM αντισώματα

bull Δευτερογενής

ανοσολογική αντίδραση bull Aναπτύσσεται πολύ πιο

γρήγορα και είναι πιο ισχυρή

-- Κυρίως IgG αντισώματα

With kind permission from Nick Holmes

With kind permission from Nick Holmes

(see httpwwwhpaorgukinfectionstopics_azvaccinationtraining_menuhtm)

ΜΝΗΜΗ

ανοσολογική αντίδραση σε ανοσογόνο παράγοντα

bull Πρωταρχική ανοσολογική αντίδραση

bull Aναπτύσσεται εβδομάδες μετά την έκθεση ndash Κυρίως IgM αντισώματα

bull Δευτερογενής

ανοσολογική αντίδραση bull Aναπτύσσεται πολύ πιο

γρήγορα και είναι πιο ισχυρή

-- Κυρίως IgG αντισώματα

With kind permission from Nick Holmes

With kind permission from Nick Holmes

(see httpwwwhpaorgukinfectionstopics_azvaccinationtraining_menuhtm)

ΜΝΗΜΗ

httphigheredmcgraw-hillcomolcdl120110micro43swf

Παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων

(Τεχνολογία υβριδώματος)

Σύντηξη των Β λεμφοκυττάρων με τα κύτταρα μυελώματος

Χορήγηση αντιγόνου Χ σε ποντίκι

Ανάπτυξη κυττάρων μυελώματος ποντικού

σε καλλιέργεια

Λήψη Β λεμφοκυττάρων από τη σπλήνα του ποντικιού

Παραγωγή αντισωμάτων από τα υβριδικά κύτταρα

Παρουσία Υποξανθίνης Αμινοπτερίνης Θυμιδίνης

Στερούνται του ενζύμου HGPRT Αδυναμία σύνθεσης νουκλεοτιδίων παρουσία αμινοπτερίνης

Έχουν το ένζυμο HGPRT αλλά περιορισμένο χρόνο ζωής

Modified from httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt30813Slide 13

Παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων

De novo and salvage pathways for nucleotide synthesis

Μοlecular Cell Biology 4th Edition 2000

(aminopterin)

(aminopterin)

lack HGPRT

Hypoxanthine Aminopterin Thymidine

have HGPRT but limited life span

Cell Fusion Not Mutual Study Proves

De novo and salvage pathways for nucleotide synthesis

Μοlecular Cell Biology 4th Edition 2000

(aminopterin)

(aminopterin)

lack HGPRT

Hypoxanthine Aminopterin Thymidine

have HGPRT but limited life span

Cell Fusion Not Mutual Study Proves

lack HGPRT

Hypoxanthine Aminopterin Thymidine

have HGPRT but limited life span

Cell Fusion Not Mutual Study Proves

Απεριόριστη προμήθεια αντισώματος

εξειδικευμένου έναντι ενός μοναδικού επιτοπίου

της πρωτεϊνης Χ

Επιλογή της καλλιέργειας παραγωγής

αντισώματος με την καλύτερη συγγένεια για

το αντιγόνο Χ

Έλεγχος για παραγωγή

αντισωμάτων

Επιλογή κυττάρων

υβριδώματος

Β λεμφοκύτταρα και κύτταρα μυελώματος

σύντηξη

Δημιουργία καλλιεργειών

κλώνων για παραγωγή συγκεκριμένου αντισώματος

httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt30813Slide 14

ΣΥΜΠΤΩΜΑΤΑ

ndash Διόγκωση αρθρώσεων ndash Ερυθήματα ndash Καταστροφή των χορηγούμενων αντισωμάτων ndash Νεφρική ανεπάρκεια

ndash Κίνδυνος για την ίδια τη ζωή του ασθενούς

Απόκριση ΗΑΜΑ

αναγνώριση των laquoποντικίσιωνraquo αντισωμάτων

ωςlaquoξένωνraquo από τον ανθρώπινο οργανισμό

και παραγωγή αντισωμάτων

Ηuman Αnti-Μouse Αntibodies (HAMA) RESPONSE

40-70 των

ασθενών

Αντισώματα για θεραπευτική εφαρμογή

httpwwwpathcamacuk~mrc7humanisationantibodieshtml

ximab

zumab umab

momab HAMA ~40-70 HACA ~20

HAHA ~7

ανθρωποποιημένα

χειμαιρικά laquoποντικίσιαraquo

laquoανθρώπιναraquo

ΣΥΜΠΤΩΜΑΤΑ

ndash Διόγκωση αρθρώσεων ndash Ερυθήματα ndash Καταστροφή των χορηγούμενων αντισωμάτων ndash Νεφρική ανεπάρκεια

ndash Κίνδυνος για την ίδια τη ζωή του ασθενούς

Απόκριση ΗΑΜΑ

αναγνώριση των laquoποντικίσιωνraquo αντισωμάτων

ωςlaquoξένωνraquo από τον ανθρώπινο οργανισμό

και παραγωγή αντισωμάτων

Ηuman Αnti-Μouse Αntibodies (HAMA) RESPONSE

40-70 των

ασθενών

Αντισώματα για θεραπευτική εφαρμογή

httpwwwpathcamacuk~mrc7humanisationantibodieshtml

ximab

zumab umab

momab HAMA ~40-70 HACA ~20

HAHA ~7

ανθρωποποιημένα

χειμαιρικά laquoποντικίσιαraquo

laquoανθρώπιναraquo

Αντισώματα για θεραπευτική εφαρμογή

httpwwwpathcamacuk~mrc7humanisationantibodieshtml

ximab

zumab umab

momab HAMA ~40-70 HACA ~20

HAHA ~7

ανθρωποποιημένα

χειμαιρικά laquoποντικίσιαraquo

laquoανθρώπιναraquo

Br J

Pha

rmac

ol 2

009

May

157

(2)

220ndash

233

Ther

apeu

tic a

ntib

odie

s s

ucce

sses

lim

itatio

ns a

nd h

opes

for t

he fu

ture

P

atric

k C

ham

es1 M

arc

Van

Reg

enm

orte

l2 Etie

nne

Wei

ss2 a

nd D

anie

l Bat

y1

ανθρωποποιημένα χειμαιρικά

Μονοκλωνικά αντισώματα μέσω της γενετικής μηχανικής

ΟΝΟΜΑΣΙΑ (ενδεικτικό πρόθεμα)

httpenwikipediaorgwikiImageInfliximab_structure2jpg

Το Infliximab (brand name Remicade)

χρησιμοποιείται έναντι αυτοάνοσων νοσημάτων ( autoimmune disorders )

laquoMπλοκάρειraquo τη δράση του πλειοτροπικού προφλεγμονώδους παράγοντα TNFα (tumour necrosis factor alpha)

κυτοκίνης που διεγείρει και διατηρεί τη φλεγμονώδη απόκριση

Χειμερικό mAb monoclonal antibody

httpenwikipediaorgwikiImageInfliximab_structure2jpg

Το Infliximab (brand name Remicade)

χρησιμοποιείται έναντι αυτοάνοσων νοσημάτων ( autoimmune disorders )

laquoMπλοκάρειraquo τη δράση του πλειοτροπικού προφλεγμονώδους παράγοντα TNFα (tumour necrosis factor alpha)

κυτοκίνης που διεγείρει και διατηρεί τη φλεγμονώδη απόκριση

Χειμερικό mAb monoclonal antibody

Antibody-Dependent Cell Mediated Cytotoxicity (ADCC)

Complement Dependent Cytotoxicity (CDC)

CELL LYSIS

CELL LYSIS

APOPTOSIS

Mab

B cell

Rituximab

Rituximab laquoαδειάζειraquo τα B κύτταρα

και χρησιμοποιείται σε ασθένειες που χαρακτηρίζονται από

πάρα πολλά Β κύτταρα υπερδραστήρια Β κύτταρα δυσλειτουργικά Β κύτταρα

httpwwwemeaeuropaeuhumandocsPDFsEPARMabtheraH-165-PI-elpdf

(ΜabThera) (χειμαιρικό)

Med

scap

e A

lerts

S

epte

mbe

r 11

200

8

Ritu

xan

Link

ed to

Fat

al p

rogr

essi

ve m

ultif

ocal

leuk

oenc

epha

lopa

thy

(PM

L) C

ase

Trastuzumab (Herceptin)

Ανθρωποποιημένο mAb

Δρα στον υποδοχέα HER2neu (erbB2)

Στη θεραπεία του καρκίνου του μαστού σε γυναίκες-ασθενείς που υπερεκφράζουν αυτόν τον υποδοχέα

httpenwikipediaorgwikiHerceptin

httpenwikipediaorgwikiOmalizumab

Xolair (Omalizumab)

ανθρωποποιημένο IgG1k mAb

Συνδέεται εκλεκτικά στην ανθρώπινη ανοσοσφαιρίνη Ε

( immunoglobulin E IgE)

η οποία συμμετέχει στην εμφάνιση των αλλεργικών αντιδράσεων

Bevacizumab (Avastin)

ανθρωποποιημένο mAb

Αρχικά χορηγήθηκε ως

αναστολέας της αγγειογένεσης (angiogenesis inhibitor)

Αναστέλει την ανάπτυξη του

όγκου εμποδίζοντας το σχηματισμό νέων αγγείων επειδή αναστέλλει τη δράση

μιας φυσικής πρωτεϊνης vascular endothelial growth

factor (VEGF)

httpenwikipediaorgwikiAvastin

single chain variable fragments (Engineered 25kDa)

Pharmaceutical Biotechnology

Ed By Daan JA Crommelin and Robert D Sindelar

παπαϊνη πεψίνη

3 CDRs complementarity determining regions

Br J

Pha

rmac

ol 2

009

May

157

(2)

220ndash

233

Ther

apeu

tic a

ntib

odie

s s

ucce

sses

lim

itatio

ns a

nd h

opes

for t

he fu

ture

P

atric

k C

ham

es1 M

arc

Van

Reg

enm

orte

l2 Etie

nne

Wei

ss2 a

nd D

anie

l Bat

y1

Br J

Pha

rmac

ol 2

009

May

157

(2)

220ndash

233

Ther

apeu

tic a

ntib

odie

s s

ucce

sses

lim

itatio

ns a

nd h

opes

for t

he fu

ture

P

atric

k C

ham

es1 M

arc

Van

Reg

enm

orte

l2 Etie

nne

Wei

ss2 a

nd D

anie

l Bat

y1

human antibodies laquoανθρώπιναraquo αντισώματα

Οι εταιρίες παρεμβαίνουν στο γενετικό υλικό των ποντικών ώστε να περιλαμβάνει τα ανθρώπινα γονίδια για τα

αντισώματα Όταν εγχύουν στα τρανσγονιδιακά αυτά ποντίκια τα

αντιγόνα τα ποντίκια παράγουν ανθρώπινα αντισώματα

bull XenoMouse mouse antibody producing genes being inactivated functionally replaced by 90 of human Ig gene loci in germline configuration

(Abgenix Fremont CA USA)

bull TransChromo mouse endogenous IgH IgG loci inactivated bull plus 2 human chromosome (214) fragments

containing whole Ig L - H chain loci

(Kirin Brewery Company Japan)

Mainly IgGs

Every sub-type of fully human Ig

(IGH) on chromosome 14 (IGK) on chromosome 2

Denosumab [(AMG 162) fully human mab]

Σχεδιασμένο για να στοχεύει το RANKL

RANK Ligand

Receptor Activator of Nuclear Factor kB Ligand

httpenwikipediaorgwikiDenosumab

httpwwwmedscapecomviewarticle734667_print

Υποδόρια ανά

εξάμηνο

httpwwwdddmagcombuilding-better-antibody-therapeuticsaspx

Denosumab an inhibitor of the RANKRANKL signaling pathway was developed using XenoMouse transgenic mouse technology

bull XenoMouse mouse antibody producing genes being inactivated functionally replaced by 90 of human Ig gene loci in germline configuration

(Abgenix Fremont CA USA)

bull TransChromo mouse endogenous IgH IgG loci inactivated bull plus 2 human chromosome (214) fragments

containing whole Ig L - H chain loci

(Kirin Brewery Company Japan)

Mainly IgGs

Every sub-type of fully human Ig

(IGH) on chromosome 14 (IGK) on chromosome 2

Denosumab [(AMG 162) fully human mab]

Σχεδιασμένο για να στοχεύει το RANKL

RANK Ligand

Receptor Activator of Nuclear Factor kB Ligand

httpenwikipediaorgwikiDenosumab

httpwwwmedscapecomviewarticle734667_print

Υποδόρια ανά

εξάμηνο

httpwwwdddmagcombuilding-better-antibody-therapeuticsaspx

Denosumab an inhibitor of the RANKRANKL signaling pathway was developed using XenoMouse transgenic mouse technology

Denosumab [(AMG 162) fully human mab]

Σχεδιασμένο για να στοχεύει το RANKL

RANK Ligand

Receptor Activator of Nuclear Factor kB Ligand

httpenwikipediaorgwikiDenosumab

httpwwwmedscapecomviewarticle734667_print

Υποδόρια ανά

εξάμηνο

httpwwwdddmagcombuilding-better-antibody-therapeuticsaspx

Denosumab an inhibitor of the RANKRANKL signaling pathway was developed using XenoMouse transgenic mouse technology

Antibody Directed Enzyme Prodrug Therapy

Αλληλεπιδράσεις αντισώματος με τα κύτταρα στόχους

httpenwikipediaorgwikiMonoclonal_antibody_therapycite_note-Stern-7

Foundation review the future of antibodies as cancer drugs 14 May 2013

bull ELIZA bull WESTERN

BLOT bull RIA bull IRMA bull

ELISA bull Ανοσολογική τεχνική Χρήση αντισωμάτων για την ανίχνευση

εξειδικευμένων μορίων στα δείγματα bull Ποιοτική μέθοδος bull Πολύ ευαίσθητη bull Εφαρμογή

Ιατρική Έρευνα

httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt3062What is ELISA

Substrate

Primary antibody

Secondary antibody

Different antigens in sample

Coloured product

The ELISA (Enzyme Linked Immuno-Absorbent Assay) Method

Μερικώς καθαρισθέντα αδρανοποιημένα αντιγόνα προ-επικολλημένα στα laquoπηγαδάκιαraquo

Ο ορός του ασθενούς που περιέχει τα αντισώματα (1ο αντίσωμα)

Αντι ndash ανθρώπινα (anti-human) IGs συζευγμένα με ένζυμο Πρόκειται για το 2ο αντίσωμα και συνδέεται με τα ανθρώπινα αντισώματα

Το χρωμογόνο (ουσία που αλλάζει χρώμα) μετά από ~1 ώρα επώαση με το ένζυμο το προσκολλημένο στο 2ο αντίσωμα

httpwwwbiologyarizonaeduimmunologyactivitieselisaelisa_introhtml

ELISA bull Ανοσολογική τεχνική Χρήση αντισωμάτων για την ανίχνευση

εξειδικευμένων μορίων στα δείγματα bull Ποιοτική μέθοδος bull Πολύ ευαίσθητη bull Εφαρμογή

Ιατρική Έρευνα

httpwww-sapsplantscicamacuksummer2007elisappt3062What is ELISA

Substrate

Primary antibody

Secondary antibody

Different antigens in sample

Coloured product

The ELISA (Enzyme Linked Immuno-Absorbent Assay) Method

Μερικώς καθαρισθέντα αδρανοποιημένα αντιγόνα προ-επικολλημένα στα laquoπηγαδάκιαraquo

Ο ορός του ασθενούς που περιέχει τα αντισώματα (1ο αντίσωμα)

Αντι ndash ανθρώπινα (anti-human) IGs συζευγμένα με ένζυμο Πρόκειται για το 2ο αντίσωμα και συνδέεται με τα ανθρώπινα αντισώματα

Το χρωμογόνο (ουσία που αλλάζει χρώμα) μετά από ~1 ώρα επώαση με το ένζυμο το προσκολλημένο στο 2ο αντίσωμα

httpwwwbiologyarizonaeduimmunologyactivitieselisaelisa_introhtml

Substrate

Primary antibody

Secondary antibody

Different antigens in sample

Coloured product

The ELISA (Enzyme Linked Immuno-Absorbent Assay) Method

Μερικώς καθαρισθέντα αδρανοποιημένα αντιγόνα προ-επικολλημένα στα laquoπηγαδάκιαraquo

Ο ορός του ασθενούς που περιέχει τα αντισώματα (1ο αντίσωμα)

Αντι ndash ανθρώπινα (anti-human) IGs συζευγμένα με ένζυμο Πρόκειται για το 2ο αντίσωμα και συνδέεται με τα ανθρώπινα αντισώματα

Το χρωμογόνο (ουσία που αλλάζει χρώμα) μετά από ~1 ώρα επώαση με το ένζυμο το προσκολλημένο στο 2ο αντίσωμα

httpwwwbiologyarizonaeduimmunologyactivitieselisaelisa_introhtml

The ELISA (Enzyme Linked Immuno-Absorbent Assay) Method

Μερικώς καθαρισθέντα αδρανοποιημένα αντιγόνα προ-επικολλημένα στα laquoπηγαδάκιαraquo

Ο ορός του ασθενούς που περιέχει τα αντισώματα (1ο αντίσωμα)

Αντι ndash ανθρώπινα (anti-human) IGs συζευγμένα με ένζυμο Πρόκειται για το 2ο αντίσωμα και συνδέεται με τα ανθρώπινα αντισώματα

Το χρωμογόνο (ουσία που αλλάζει χρώμα) μετά από ~1 ώρα επώαση με το ένζυμο το προσκολλημένο στο 2ο αντίσωμα

httpwwwbiologyarizonaeduimmunologyactivitieselisaelisa_introhtml

Positive ELISA Test Negative ELISA Test

An ELISA plate Modified from httpwwwbiologyarizonaeduimmunologyactivitieselisaelisa_introhtml

Αναγνώριση των προ-επικολλημένων στα laquoπηγαδάκιαraquo αντιγόνων από τα

αντισώματα του ασθενούς (1ο αντίσωμα) επιτρέπει τη μετέπειτα αναγνώριση

από το 2ο αντίσωμα που φέρει το ένζυμο για την αντίδραση με το χρωμογόνο

Ανάλυση των πρωτεϊνών σε γέλη ακρυλαμιδίου

(SDS-PAGE) και

μεταφορά σε μεμβράνη

νιτροκυτταρίνης ή νάϋλον (PVDF)

httpwwwbio-radcomLifeSciencedocsTR_Western_ELppt31012Mini Trans-Blot Transfer Cell

Modified from

Εξισορρόπηση της μεμβράνης - Προσθήκη του 1ου αντισώματος εξειδικευμένου για την πρωτεϊνη του ενδιαφέροντος Πλύση

Προσθήκη του 2ου αντισώματος συζευγμένου με το ένζυμο Πλύση

Προσθήκη υποστρώματος για το ένζυμο Ανάπτυξη χρώματος πάνω στη μεμβράνη στο σημείο που εντοπίζεται η πρωτεϊνη

1 Pharmaceutical Biotechnology 1997 (Edit by D JA Crommelin and RD Sindelar) 2 Immunobiology 5th Edition Janeway CA Travers P Walport M Schomchic M 3 Molecular Biology of the Cell (NCBI) 4 Molecular Cell Biology 5 Endocrinology An intergrated approach Nussey SS and Whitehead SA (NCBI)

• Slide Number 1
• Slide Number 2
• Κυτταρικά συστατικά της ανοσολογικής απόκρισης
• Slide Number 4
• Slide Number 5
• Slide Number 6
• Slide Number 7
• Slide Number 8
• Slide Number 9
• Slide Number 10
• Slide Number 11
• Slide Number 12
• Slide Number 13
• Slide Number 14
• Slide Number 15
• Slide Number 16
• Slide Number 17
• Slide Number 18
• Slide Number 19
• Slide Number 20
• Slide Number 21
• Slide Number 22
• Μονοκλωνικά αντισώματα (Mabs)
• Slide Number 24
• Slide Number 25
• Slide Number 27
• ανοσολογική αντίδραση σε ανοσογόνο παράγοντα
• Slide Number 29
• Slide Number 30
• Slide Number 31
• Slide Number 32
• Slide Number 33
• Slide Number 34
• Slide Number 35
• Slide Number 36
• Slide Number 37
• Slide Number 38
• Slide Number 39
• Slide Number 40
• Slide Number 41
• Slide Number 42
• Slide Number 43
• human antibodieslaquoανθρώπιναraquo αντισώματα
• Slide Number 45
• Slide Number 46
• Slide Number 47
• Slide Number 48
• Slide Number 49
• ELISA
• Slide Number 51
• Slide Number 52
• Slide Number 53
• Ανάλυση των πρωτεϊνών σε γέλη ακρυλαμιδίου(SDS-PAGE) και μεταφορά σε μεμβράνη νιτροκυτταρίνης ή νάϋλον (PVDF)
• Slide Number 55
• Slide Number 56
• Slide Number 57

Εξισορρόπηση της μεμβράνης - Προσθήκη του 1ου αντισώματος εξειδικευμένου για την πρωτεϊνη του ενδιαφέροντος Πλύση

Προσθήκη του 2ου αντισώματος συζευγμένου με το ένζυμο Πλύση

Προσθήκη υποστρώματος για το ένζυμο Ανάπτυξη χρώματος πάνω στη μεμβράνη στο σημείο που εντοπίζεται η πρωτεϊνη

1 Pharmaceutical Biotechnology 1997 (Edit by D JA Crommelin and RD Sindelar) 2 Immunobiology 5th Edition Janeway CA Travers P Walport M Schomchic M 3 Molecular Biology of the Cell (NCBI) 4 Molecular Cell Biology 5 Endocrinology An intergrated approach Nussey SS and Whitehead SA (NCBI)

• Slide Number 1
• Slide Number 2
• Κυτταρικά συστατικά της ανοσολογικής απόκρισης
• Slide Number 4
• Slide Number 5
• Slide Number 6
• Slide Number 7
• Slide Number 8
• Slide Number 9
• Slide Number 10
• Slide Number 11
• Slide Number 12
• Slide Number 13
• Slide Number 14
• Slide Number 15
• Slide Number 16
• Slide Number 17
• Slide Number 18
• Slide Number 19
• Slide Number 20
• Slide Number 21
• Slide Number 22
• Μονοκλωνικά αντισώματα (Mabs)
• Slide Number 24
• Slide Number 25
• Slide Number 27
• ανοσολογική αντίδραση σε ανοσογόνο παράγοντα
• Slide Number 29
• Slide Number 30
• Slide Number 31
• Slide Number 32
• Slide Number 33
• Slide Number 34
• Slide Number 35
• Slide Number 36
• Slide Number 37
• Slide Number 38
• Slide Number 39
• Slide Number 40
• Slide Number 41
• Slide Number 42
• Slide Number 43
• human antibodieslaquoανθρώπιναraquo αντισώματα
• Slide Number 45
• Slide Number 46
• Slide Number 47
• Slide Number 48
• Slide Number 49
• ELISA
• Slide Number 51
• Slide Number 52
• Slide Number 53
• Ανάλυση των πρωτεϊνών σε γέλη ακρυλαμιδίου(SDS-PAGE) και μεταφορά σε μεμβράνη νιτροκυτταρίνης ή νάϋλον (PVDF)
• Slide Number 55
• Slide Number 56
• Slide Number 57

1 Pharmaceutical Biotechnology 1997 (Edit by D JA Crommelin and RD Sindelar) 2 Immunobiology 5th Edition Janeway CA Travers P Walport M Schomchic M 3 Molecular Biology of the Cell (NCBI) 4 Molecular Cell Biology 5 Endocrinology An intergrated approach Nussey SS and Whitehead SA (NCBI)

• Slide Number 1
• Slide Number 2
• Κυτταρικά συστατικά της ανοσολογικής απόκρισης
• Slide Number 4
• Slide Number 5
• Slide Number 6
• Slide Number 7
• Slide Number 8
• Slide Number 9
• Slide Number 10
• Slide Number 11
• Slide Number 12
• Slide Number 13
• Slide Number 14
• Slide Number 15
• Slide Number 16
• Slide Number 17
• Slide Number 18
• Slide Number 19
• Slide Number 20
• Slide Number 21
• Slide Number 22
• Μονοκλωνικά αντισώματα (Mabs)
• Slide Number 24
• Slide Number 25
• Slide Number 27
• ανοσολογική αντίδραση σε ανοσογόνο παράγοντα
• Slide Number 29
• Slide Number 30
• Slide Number 31
• Slide Number 32
• Slide Number 33
• Slide Number 34
• Slide Number 35
• Slide Number 36
• Slide Number 37
• Slide Number 38
• Slide Number 39
• Slide Number 40
• Slide Number 41
• Slide Number 42
• Slide Number 43
• human antibodieslaquoανθρώπιναraquo αντισώματα
• Slide Number 45
• Slide Number 46
• Slide Number 47
• Slide Number 48
• Slide Number 49
• ELISA
• Slide Number 51
• Slide Number 52
• Slide Number 53
• Ανάλυση των πρωτεϊνών σε γέλη ακρυλαμιδίου(SDS-PAGE) και μεταφορά σε μεμβράνη νιτροκυτταρίνης ή νάϋλον (PVDF)
• Slide Number 55
• Slide Number 56
• Slide Number 57