Тема: Дослідити епітеліально-мезенхіміальний перехід та його

зв'язок з пухлинними клітинами, які експресують маркерні білки епітеліальних стовбурових клітин при прогресії раку

ротової порожнини.Назва етапу:

Дослідити експресію маркерних білків епітеліально- мезенхімального переходу у букальному епітелію та у

пухлині у хворих на плоскоклітинний рак та у осіб з групи ризику.

Мета роботи: Дослідженні експресії білків E-кадгерину та β-катеніну у плоскоклітинному раку слизової оболонки

порожнини рота.

Матеріал для дослідження Зразки операційного матеріалу (гістологічні парафінові блоки)

20 пацієнтів, хворих на рак слизової порожнини рота ІІ-ІІІ стадій, які не отримували спеціального лікування до операції (хіміотерапії та променевої терапії).

Методи дослідження: - морфологічний,

- імуногістохімічний (імуногістохімічне визначення експресії маркерних білків: бета-катеніну, Е-кадгерину, Кі-67).

Кількість позитивно забарвлених клітин визначали у відсотках – індекс мітки (ІМ, %). При значеннях ІМ < за медіану (Ме), експресію відповідного маркера вважали низькою, а при ІМ ≥ Ме – високою.

- статистичні методи.

Епітеліально-мезенхіміальний перехід - це процес , при якому

епітеліальні клітини втрачають притаманні їм властивості

(міжклітинну адгезію і апікально-базальну полярність) і набувають

властивості мезенхіміальних клітин (веретеновидна форма,

рухливість і синтез компонентів позаклітинного матриксу).

ЕМП може лежати в основі розвитку і прогресі ї багатьох

патологічних процесів і відображає адаптивні зміни в клітинах у відповідь

на пошкодження або зміну активності генів при пухлинному рості.

Вивчення молекулярних механізмів ЕМП відкриває можливості

розвитку таргетної терапії пухлинного захворювання, індивідуальної

оцінки ризику його розвитку.

Результати

E-катгерин і β-катенін є білками адгезії і релокалізація білка

β-катеніну із цитоплазми в ядро призводить до порушення його

зв'язку з E-катгерином, в результаті чого може відбуватися

руйнування міжклітинної адгезії, нами було проаналізована

експресія E-катгерину у пухлинах з низькою (ІМ < Ме) та

високою (ІМ ≥ Ме) ядерною експресією β-катеніну.

Група з високою експресією бета-катеніну - 50% дослідженого

матеріалу.

Рис.1 Експресія білка Е-катгерину у пухлинних клітинах слизової порожнини рота.

Імуногістохімічний метод, дофарбовано гематоксиліном Майєра. 1 - х1000; 2 - х400; 3 - х100.

Рис.2. Експресія білку β-катеніну у пухлинних клітинах слизової порожнини рота.

Імуногістохімічний метод, дофарбовано гематоксиліном Майєра. 1- х100; 2- х400; 3 - х1000.

30,2+ 2,366,8+ 6,474,3+ 5 6,3+ 1,5Груп а з ни з ьк ою експресієюβ-катенінуядерного (n-9)

43,2+ 3,563,8+ 5,169,8+ 3,9 10,6+ 2,8Група з високою експресієюβ-катенінуядерного (n=11)

Кі-67Е-кадгеріну

β -катенінуцитоплазма

т

β-катенінуядерного

Показники експресії маркерних білків (ІМ, %)Групи досліджуваних

блоків

Таблиця 1.Показники експресії маркерних білків гістологічних блоків пухлин пацієнтів, хворих на рак слизової порожнини рота.

Рис.1 Медіани експресії маркерних білків у досліджуваних групах

(синій - група з високим рівнем експресії ядерного, червоний - група з низькою експресією ядерного кадгерину).

1. медіана β-катеніну ядерного, 2. медіана β -катеніну цитоплазматичного,

3. медіана Е-кадгеріну, 4. медіана Кі-67

1 2 3 40

10

20

30

40

50

60

70

80

3161667,5 Медіана

5359502525811

435070201176 (77)

45,340603011488

Кі-67Е-кадгерінуβ -катенінуцитоплазматичного

β-катенінуядерного

Показники (ІМ) експресії маркерних білків (%)Гістологічні блоки

пацієнтів

Таблиця 2.Показники експресії маркерних білків з високим рівнем

експресії β-катеніну ядерного.

ВИСНОВКИ:

Встановлено гетерогенність клітинної популяції за експресією

та локалізацією білків адгезії E-катгерину і β-катеніну.

Показано , що пухлини з високою ядерною експресією

β-катеніну характеризуються низькою експресією E-катгери-

ну, високою проліферативною активністю, що асоціюється з

процесом епітеліально-мезенхімального переходу.

ДЯКУЄМО ЗА УВАГУ!