βακτήριαGram+ Gram- Acid Fast

IntraCellular

WallLess

Cocci Rod CocciRodSpiral

Staph. Strep. Non-spore Spore

StraightCurve

+O2 -O2+/-O2 Other

S. a.S. e.S. s.

ABPnVir

Fil Rod

A.i. C.d.L. m.

M.t.M.l.N.c.

+O2 -O2

B.a.B.c.

C.b.C.t.C.p.C.d.

TreponemaBorreliaLeptospira

NeisseriaMoraxella

P.a. Enteric Bact.

Resp. Zoo GU

Bordetella.H. influenzaeLegionella

YersiniaPasteurellaBrucellaFrancisellaStreptobacillus

H. ducreyiGardnerellaCalymmatobacterium

RickettsiaCoxiellaErlichiaChlamydia

Mycoplasma

VibrioCampylobacterHelicobacter

Διαφοροποίηση των Gram- βακτηρίων

• κόκκοι– Neisseria

• βάκιλλοι – Είδος της λοίμωξης– εντεροβακτηριακά Gram-

• API test

• καμπυλωτοί– Vibrio, Campylobacter,

Helicobacter

• σπειράλ Gram αρνητικοί– Spirochetes

Ίσιοι βάκιλλοι Καμπυλωτοί βάκιλλοι

λακτόζη+ λακτόζη- Campy blood agar42oC+ 25oC-

Campylobacter

TCBS agarκίτρινοοξειδάση+

Vibrio

κιτρικά+ κιτρικά- H2S+ H2S-

Klebsiella E. coli Salmonella Shigella

Gram αρνητικά

Η δοκιμασία της οξειδάσης

• Θετική δοκιμασία οξειδάσης αντικατοπτρίζει την ικανότητα του μικροοργανισμού να οξειδώνει ορισμένες αρωματικές αμίνες όπως η τετραμέθυλο-p-φαινυλενο διαμίνη (TPD), και να παράγει χρωματιστά προϊόντα. Αυτό οφείλεται στην δράση της κυτοχρωμικής οξειδάσης (οξειδάση της ινδοφαινόλης) παρουσία ατμοσφαιρικού οξυγόνου.

• Η χρήση της δοκιμασίας μας δίνει προκαταρτικά αποτελέσματα ταυτοποίησης των ειδών Neisseria και Moraxella, που είναι και τα δύο οξειδάση + gram- διπλόκοκκοι.

εντεροβακτηριακάεντεροβακτηριακά

Ε. Σκούλικα χειμ εξάμηνο 2007Ε. Σκούλικα χειμ εξάμηνο 2007

Οι αριθμοί δείχνουν ικανότητα υβριδοποίησης DNA/DNA

Συγγένεια μεταξύ των εντεροβακτηριακών

Το γαστρεντερικό σύστημα του ανθρώπου

Λοιμώξεις από εντεροβακτηριακά

Οικογένεια Enterobacteriaceae

• Ταξινόμηση – περισσότερα από 15 διαφορετικά γένη Γένος αρ ειδών

– Escherichia (παθογόνα στελέχη) 5– Shigella (ακίνητο παθογόνο) 4– Edwardsiella 4– Salmonella (παθογόνο) 7 υποομάδες– Citrobacter 4– Klebsiella (ακίνητο) 7– Enterobacter 13

Οικογένεια Enterobacteriaceae

– Hafnia 2– Serratia 10 – Proteus 4– Providencia 5– Morganella 2– Yersinia (παθογόνο) 11– Erwinia– Pectinobacterium

Γένος αρ ειδών

Enterobacteriaceae

• Μορφολογία και γενικά χαρακτηριστικά

– Gram-αρνητικοί, μη σπορογόνοι, βάκιλλοι– Οξειδάση αρνητικοί– Ζυμώνουν τη γλυκόζη (± παραγωγή αερίου)– Ανάγουν τα νιτρικά σε νιτρώδη (με μερικές

εξαιρέσεις)

Μεταβολισμός Ζυμώνουν την γλυκόζη-Συχνά παράγεται αέριο

θετικά στην καταλάση-αρνητικά στην οξειδάση-ανάγουν τα νιτρικά σε νιτρώδη

Ζυμώνουν την λακτόζη

(κόλιφορμς/coliforms)• Escherichia coli • Klebsiella pneumoniae

• Enterobacter aerogenes

Δεν ζυμώνουν την λακτόζη

• Salmonella typhi

• Shigella dysentariae

• Yersinia enterocolitica

• Serratia marcescens

• Proteus sp

Enterobacteriaceae

– Προαιρετικά αναερόβια– Η κίνηση γίνεται με μαστίγια με περίτριχη διάταξη– Πολλά ανήκουν στην φυσιολογική χλωρίδα του

εντέρου του ανθρώπου και των ζώων– Μερικά είναι εντερικά παθογόνα και άλλα παθογόνα

του ουροποιητικού ή του αναπνευστικού– Η ταξινόμηση βασίζεται σε βιοχημικές αντιδράσεις και

σε διαφορές στην αντιγονική δομή

Enterobacteriaceae

– Τα περισσότερα μεγαλώνουν εύκολα στα εργαστηριακά θρεπτικά (επιλεκτικά για την κατηγορία με ειδικά χρωμογόνα και χολικά άλατα που αναστέλλουν τα G+ και άλλα μη παθογόνα εντεροβακτηριακά )

– Μερικά διαφοροποιούνται ανάλογα με το αν ζυμώνουν τη λακτόζη και/ή παράγουν H2S.

Εργαστηριακές τεχνικές απομόνωσης

• Επιλεκτικά στερεά υλικά: Στο EMB, τα βακτήρια λακτόζη (+) εμφανίζονται με βαθύ κόκκινο χρώμα και μερικές φορές με μια μεταλλική πράσινη φωτεινότητα. Τα λακτόζη (-) βακτήρια εμφανίζονται ανοιχτόχρωμα και διαφανή.

• Στο MacConkey τα βακτήρια λακτόζη (+) έχουν βαθύ κόκκινο χρώμα συχνά με μια ζώνη ιζήματος γύρω από την αποικία. Τα λακτόζη (-) βακτήρια εμφανίζονται ανοιχτόχρωμα και διαφανή.

– Τα μη τοξιγόνα στελέχη E coli αποτελούν μέρος της χλωρίδας του εντέρου και πρέπει να διαφοροποιούνται από τα παθογόνα κατά την καλλιέργεια κοπράνων. Τα παθογόνα στελέχη E coli 0157:H7 είναι αρνητικά στην σορβιτόλη και εμφανίζονται ανοιχτόχρωμες αποικίες στο MacConkey με σορβιτόλη.

• Το SS agar είναι άκρως επιλεκτικό για τα γένη Salmonella και Shigella τα οποία σχηματίζουν άχρωμες αποικίες συχνά με ένα μαύρο σημάδι στο κέντρο, που δείχνει ότι παράγεται H2S.Οι περισσότεροι άλλοι μικροοργανισμοί δεν αναπτύσσονται σ’ αυτό το θρεπτικό υλικό. Οι λίγοι που αναπτύσσονται εμφανίζουν ανοιχτό ροζ χρώμα.

– Περιέχουν ποικίλα χρωμογόνα και άλατα χολής που επιτρέπουν την επιλεκτική ανάπτυξη των Gram- εντερικών βακτηρίων. Περιέχουν επίσης σάκχαρα (λακτόζη) και δείκτες του pH ώστε οι μικροοργανισμοί να διακρίνονται λόγω των μεταβολικών τους ιδιοτήτων.

Εργαστηριακές τεχνικές απομόνωσης

Salm Mac Salm SS Salm XLD

Shigella Mac Shigella XLD E coli XLD

•Επιλεκτικά στερεά υλικά: Στο EMB, τα βακτήρια λακτόζη (+) εμφανίζονται με βαθύ κόκκινο χρώμα και μερικές φορές με μια μεταλλική πράσινη φωτεινότητα. Τα λακτόζη (-) βακτήρια εμφανίζονται ανοιχτόχρωμα και διαφανή.

Enterobacteriaceae

– Στο CBA όλοι παράγουν παρόμοιες αποικίες σχετικά μεγάλες και θαμπές γκρίζες. ± αιμόλυση.

– Τα 3 πιο χρήσιμα θρεπτικά για την καλλιέργεια από κόπρανα είναι το TSI (3 σάκχαρα και σίδηρος), το LIA (λυσύνη-σίδηρος), και ουρία ή φαινυλαλανίνη άγαρ.

– Η αντιγονική δομή χρησιμοποιείται για την διαφοροποίηση των μικροοργανισμών σε είδη ή υποείδη. Τρία μεγάλες ομάδες αντιγόνων χρησιμοποιούνται:

Enterobacteriaceae3 είδη αντιγόνων

• Τα σωματικά αντιγόνα O – το πολυσακχαριδικό θερμοσταθερό τμήμα του λιποπολυσακχαρίτη. Η εναλλαγή από τη λεία στην αδρή μορφή αποικίας συνοδεύεται από απώλεια του αντογόνου Ο

• Το αντιγόνο H του μαστιγίου – είναι θερμοευαίσθητο.

• Τα αντογόνα K του ελύτρου ή του τοιχώματος– υπερκαλύπτουν τα επιφανειακά Ο και αναστέλλουν την συγκόλληση με τους ειδικούς αντι-O αντιορούς.

Βρασμός για 15 min θα καταστρέψει το αντιγόνο K και θα αποκαλύψει το αντιγόνο O. Tο αντιγόνο K στη Salmonella ονομάζεται αντιγόνο Vi (από το virulence).

αντιγονική δομή των Enterobacteriaceae

Κ ή

αντιγονική δομή των Enterobacteriaceae

S. typhi

O antigen side chain

(Fimbriae)

Enterobacteriaceae

• Escherichia coli– Φυσιολογικός αποικισμός του γαστρεντερικού. – Μερικά στελέχη προκαλούν διάφορες μορφές

γαστρεντερίτιδας.– Μείζων παράγοντας λοιμώξεων του ουροποιητικού,

και νεογνικής μηνιγγίτιδας ή σηψαιμίας.

Enterobacteriaceae

– Μερικές φορές έχουν έλυτρο.– Βιοχημεία

• Τα περισσότερα στελέχη είναι κινητά • Ένας μη παθογόνος ορότυπος δεν παράγει αέριο,

είναι λακτόζη αρνητικός και ακίνητος.• Μπορεί να είναι αιμολυτικά στο CBA – κυρίως τα

παθογόνα στελέχη.

E. coliE. coli

• Βιοχημικοί χαρακτήρες κλειδιά για τα τυπικά στελέχη:– TSI (triple sugar iron) is A/A + gas– LIA K/K– Ουρία –– Ινδόλη +– Κιτρικό –– κινητικότητα +

EnterobacteriaceaeEnterobacteriaceae

– Η αντιγονική δομή περιλαμβάνει αντιγόνα O, H, και K. K1 συνδέεται με την μηνιγγίτιδα των νεογνών.

– Παράγοντες παθογένειας• Τοξίνες

– εντεροτοξίνες – παράγονται από τα εντεροπαθογόνα στελέχη E. coli (ETEC). Προκαλούν καταιγιστική αποβολή νερού και ιόντων από τους ιστούς στον αυλό του εντέρου.

– Υπάρχουν 2 τύποι εντεροτοξινών:» LT – θερμοευαίσθητηπου δεσμεύεται σε ειδικά γανγγλιοσίδια

Gm1 των επιθηλιακών κυττάρων του λεπτού εντέρου προκαλεί ADP-ribosylates Gs με επακόλουθο την ενεργοποίηση της αδενυλοκυκλάσης και την παραγωγή cAMP.

» Αυξημένη παραγωγή cAMP τροποποιεί την λειτουργία των μεταφορέων Να+ και Cl- παράγοντας μια producing an ion imbalance that results in fluid transport into the bowel.

E. coli τοξίνες

» ST – είναι θερμοσταθερή και δεσμεύεται σε ειδικούς υποδοχείς για την ενεργοποίηση της παραγωγής cGMP με τα ίδια αποτελέσματα όπως η LT.

» Και οι δύο εντεροτοξίνες αποτελούνται από 5 υπομονάδες Β (υπεύθυνη για τη πρόσδεση) και 1 Α (με την τοξική ενζυματική ενεργότητα).

δράση LT vs ST

Υπομονάδες των τοξινών

E. coli– Η τοξίνη τύπου Shiga – ή verotoxin – τύπος 1 και 2.

Παράγεται από το εντεροαιμορραγικό στέλεχος E. coli (EHEC) – είναι κυτταροτοξική, εντεροτοξική, νευροτοξική, μπορεί να προκαλέσει διάρροια και έλκη του γαστρεντερικού. There are two types shiga-like toxin 1 and shiga-like toxin 2.

– εντεροσυσσωματωτική τοξίνη. Παράγεται από τα εντεροσυσσωματωτικά στελέχη E. coli (EAEC) – Προκαλεί υδαρή διάρροια.

– Αιμολυσίνες – δύο είδη:δεσμευμένη στην επιφάνεια και εκκρινόμενη. Λύουν ερυθρά και λευκά αιμοσφαίρια και ίσως βοηθούν στην αναστολή της φαγοκυττάρωσης.

– Ενδοτοξίνη

• Σύστημα απέκκρισης ΙΙΙ που εκκρίνει δραστικά μόρια απευθείας στα κύτταρα του ξενιστή. Συμμετέχει στην επαγωγή της διείσδυσης των EIEC και προσκόλλησης των EPEC στα κύτταρα του εντερικού επιθηλίου.

E. coli

• Προσκολητίνες: παράγοντες των ινιδλιων και των pili αλλά και άλλα μόρια του κυτταρικού τοιχώματος.

– Τουλάχιστον 21 διαφορετικά είδη

– Αντισώματα προστατεύουν από τον αποικισμό.

• Παράγοντες παθογένειας που προστατεύουν το βακτήριο από την άμυνα του ξενιστή.

– έλυτρο

– Ικανότητα δέσμευσης του σιδήρου (enterochelin)

• Πρωτεϊνες του τοιχώματος που προωθούν την προσκόληση

αλλά και την ενδοκυττάρωση.

Τύποι προσκόλλησης

Κλινική σημασία E. coli

Είναι ο κύριος παράγοντας λοιμώξεων του ουροποιητικού με συνέπεια την κυστίτιδα και την πυελονεφρίτιδα.

Λοιμώξεις από E. coli

• Νεογνική μηνιγγίτιδα και σηψαιμία με υψηλό ποσοστό θνησιμότητας. Συνήθως προκαλείται από στελέχη με αντιγόνο ελύτρου Κ1.

• Γαστρεντερίτιδες από διαφορετικούς τύπους: – εντεροτοξική E. coli (ETEC),

– εντεροδιεισδυτική E. coli (EIEC),

– εντεροπαθογόνα E. coli (EPEC) ,

– εντεροσυσσωματωτική E. coli (EAEC), και

– εντεροαιμορραγική E. coli (EHEC).

Διαφορετικοί τύποι E. coli

E. Coli γαστρεντερίτιδα

– Εντεροτοξιγόνος ETEC – κύριο αίτιο της διάρροιας των ταξιδιωτών προς τις αναπτυσσόμενες χώρες.

» το βακτήριο προσκολλάται στον εντερικό βλεννογόνο και ελευθερώνει εντεροτοξίνες.

» Η νόσος χαρακτηρίζεται από υδαρή διάρροια, ναυτία, κοιλιακό άλγος, και χαμηλό πυρετό για 1-5 ημέρες.

» Μετάδοση γίνεται από μολυσμένο νερό και τρόφιμα.• Εντεροπαθογόνος EPEC –Τα pili σε δεσμίδες (BFP) συμμετέχουν

για την προσκόλληση στον εντερικό βλεννογόνο. – Αλλαγή της κυτταρικής σηματοδότησης– Απάλειψη των λαχνών– Ενεργή απέκκριση βακτηριακών πρωτεϊνών στον ξενιστή μεσω του

συστήματος απέκκρισης ΙΙΙ– Στενή προσκόλληση μέσω μη ινιδικών προσκολητινών των ιντιμινών

(intimin) με τον «μετακινούμενο υποδοχέα της ιντιμίνης» (translocated intimin receptor Tir) .

– Διάρροια, με βλεννώδεις εκκρίσεις και αίμα ή πύο, έμμετοι, κακουχία και χαμηλός πυρετός.

BFP(bundle-forming pilli): ινίδια που έχουν τη τάση να ενώνονται μεταξύ τους

σε δεσμίδεςEAEC και EPEC

ΕντεροαιμορραγικήΕντεροαιμορραγική E. coliE. coli EHECEHEC

•συνήθως O157:H7

Transmission electron micrograph

μαστίγια

Ηλεκτρονική μικροφωτογραφία σάρωσης που δείχνει μικροαποικίες από EPEC σε κύτταρα HEp-2 με το χαρακτηριστικό τρόπο συσωμάτωσης και προσκόλλησης.

Σε μεγέθυνση φαίνονται οι δεσμίδες των ινιδίων .

EPEC

E. coli γαστρεντερίτιδα

– Εντεροδιεισδυτική EIEC – Ο μικροοργανισμός προσδένεται στον βλεννογόνο του εντέρου μέσω pili και οι πρωτεϊνες του τοιχώματος προωθούν την καταστροφή του βλεννογόνου και την διείσδυση των μικροβίων στα κύτταρα.

» Γίνεται κάθετη μετακίνηση του βακτηρίου από ένα κύτταρο στα γειτονικά.

» Πυρετός.δυνατό κοιλιακό άλγος,κακουχία, υδαρής διάρροια με αίμα, βλέννα και πύο.

– Εντεροσυσσωματωτική EAEC – » αυτοσυγκολλητική συσσώρευση των βακτηρίων,

επαγωγή παραγωγής βλέννης και παγίδευση των βακτηρίων σε biofilm στην επιφάνεια του επιθηλίου.

» Υδαρής διάρροια, εμετός και περιστασιακά κοιλιακό άλγος.

E. coli γαστρεντερίτιδα

– Εντεροαιμορραγική EHEC – Το βακτήριο προσκολλάται μέσω των ινιδίων στον εντερικό βλεννογόνο και εκκρίνει την τοξίνη τύπου Siga. Τα συμπτώματα αρχίζουν με υδαρή διάρροια και εξελίσσονται σε αιμορραγική χωρίς πύο, κοιλιακό άλγος και πυρετό.

» Η νόσος μπορεί να εξελιχθεί σε αιμολυτικό-ουρεμικό σύνδρομο, αιμολυτική αναιμία και νεφρική ανεπάρκεια.

» Προκαλείται κυρίως από τον ορότυπο O157:H7.» Αυτό το στέλεχος διαφοροποιείται από άλλα E. coli

από το ότι δεν ζυμώνει την σορβιτόλη σε 48 hours (άλλα στελέχη τη ζυμώνουν).

» Τρυβλίο με θρεπτικό σορβιτόλη-Mac (SMAC) χρησιμοποιείται για επιλεκτική απομόνωση αυτού του στελέχους.

» Με ορολογικές δοκιμασίες επιβεβαιώνεται η ύπαρξη E. coli O1547:H7 και η παραγωγή της τοξίνης τύπου Shiga

Στελέχη E.coli που προκαλούν γαστρεντερίτιδα

είδη Shigella

4 είδη που διαφέρουν αντιγονικά και λιγότερο βιοχημικά. Για ιστορικούς λόγους εξετάζεται χωριστά από την E. coli.

• S. dysenteriae (Group A)• S. flexneri (Group B)• S. boydii (Group C)• S. sonnei (Group D)

– Biochemistry• TSI K/A - αέριο• LIA K/A• ουρία –• κινητικότητα -• Όλα τα είδη εκτός S. dysenteriae ζυμώνουν την μαννιτόλη• Η S. sonnei μπορεί να εμφανίζει υστέρηση στην ζύμωση της

λακτόζης.

Αρνητικά στην λακτόζη όπως η Sigella εμφανίζονται ανοικτόχρωμα ή του ιδίου χρώματος όπως το θρεπτικό. Η παραγωγή H2S ανιχνεύεταιΑπό τα μαύρα στίγματα (Salmonella, Shigella).To Citrobacter spp από τα θετικά στην λακτόζη παράγει H2S.

Shigella species

– Αντιγονική δομή• Η διαφοροποίηση σε ομάδες (A, B, C, και D) βασίζεται στην

οροτυπία των αντιγόνων O. Τα αντιγόνα K μπορεί να έχουν διασταυρούμενες αντιδράσεις αλλά αδρανοποιούνται με θερμότητα.

• Τα αντιγόνα O μοιάζουν με της E. coli, γι αυτό πρέπει να ταυτοποιείται το στέλεχος ως προς το γένος.

– Παράγοντες παθογένειας• Τοξίνη Shiga – παράγεται από την S. dysenteriae και σε

μικρότερες ποσότητες από τις S. flexneri και S. sonnei. – Αναστέλλει την πρωτεϊνοσύνθεση απενεργοποιώντας τη 60S

ριβοσωμική υπομονάδα (καταστρέφει ένα γλυκοζιδικό δεσμό σε ένα από τα rRNA).

– Αυτό προκαλεί την εξέλκωση του εντερικού βλεννογόνου.

Shigella species

• Μεμβρανικές και εκκρινόμενες πρωτεΐνες – Εκφράζονται στην θερμοκρασία του σώματος και μετά

από επαφή με τα κύτταρα Μ του εντερικού βλεννογόνου( νησίδες του Peyer). Εκκρίνουν μέσω του συστήματος ΙΙΙ τις πρωτείνες Ipa A-D. Επάγουν φαγοκυττάρωση.

– Η Shigella διαρρηγνύει το φαγόσωμα και διαφεύγει στο κυτταρόπλασμα. Πολλαπλασιάζεται.

– Διασπείρεται κάθετα στα γειτονικά κύτταρα του επιθηλίου χρησιμοποιώντας πολυμερισμένη ακτίνη για προώθηση.

– Προκαλεί απόπτωση με αποτέλεσμα την παραγωγή IL-1β. Συρροή πολυμορφοπύρηνων. Αποσταθεροποίηση του ιστού.

Shigella προσκόλληση και διείσδυση

Shigella προσκόλληση

Shigella διείσδυση 1

Shigella διείσδυση 2

Shigella μόλυνση και διασπορά

Φλεγμονή

Νησίδες Peyer’s

Shigella

– Κλινική σημασία• Προκαλεί βακτηριακή δυσεντερία. • Μεταδίδεται από άνθρωπο σε άνθρωπο με

μολυσμένα χέρια.• Ο αριθμός των μικροβίων που μπορεί να προκαλέσει

έναρξη της λοίμωξης είναι χαμηλός(10-200 βακτήρια).• Επώαση 1-7 ημέρες, πυρετός, κοιλιακό άλγος, και

υδαρής διάρροια (οφείλεται στην τοξίνη)για 1-3 ημέρες.

• Το βακτήριο δεν διασπείρεται σε εν τω βάθη ιστούς και το αίμα

– Η S. dysenteria είναι πολύ παθογόνος, η S. flexneri, S. sonnei and S. boydii λιγότερο.

Shigella

– Αντιμικροβιακή θεραπεία• Στρεπτομυκίνη, τετρακυκλίνη, αμπικιλλίνη και

χλωραμφενικόλη.• Ανθεκτικά στελέχη εμφανίζονται άρα απαιτείται

αντιβιόγραμμα.

Salmonella προβληματική ταξινόμηση

• Υπάρχει ένα είδος S. enteritica και 7 υποείδη: 1, 2 ,3a ,3b ,4 ,5, και 6.

• Το υποείδος 1 προκαλεί κυρίως τις λοιμώξεις στον άνθρωπο.• Κλινικά αναφέρονται σαν ορότυποι σύμφωνα με την

ταξινόμηση κατά Kauffman-White. – Βασίζεται στα αντιγόνα O και H.– Τα αντιγόνα H βρίσκονται σε 2 φάσεις: την 1 και 2. Οι δύο

φάσεις δεν συνυπάρχουν.– Υπάρχουν πολυδύναμα αντισώματα (A, B, C1, C2, D, και E)– Η Salmonella typhi έχει επίσης το αντιγόνο του ελύτρου Vi.

Αλλαγή φάσεων στη Salmonella

Salmonella μόλυνση και διασπορά

Salmonella

– Βιοχημεία• TSI K/A + gas and H2S: S. typhi produces only a small

amount of H2S and no gas , and S. paratyphi A produces no H2S

• LIA K/K with H2S with S. paratyphi A giving K/A results• Urea –• Motility +• Citrate +/-• Indole -

– Παράγοντες παθογένειας• ενδοτοξίνη – μπορεί να παίζει ρόλο στην ενδοκυττάρια

επιβίωση • Έλυτρο (για τη S. typhi και μερικά στελέχη της S. paratyphi)• προσκολητίνες –μαστίγιου αλλά και μη-μαστίγιου.

Salmonella παράγοντες παθογένειας

• Σύστημα απέκκρισης ΙΙΙ και δραστικά μόρια – 2 συστήματα

1. Προώθηση εισόδου στο εντερικό επιθήλιο.

2. Ικανότητα επιβίωσης στα μακροφάγα.• Εξωτερικές πρωτεϊνες – συμμετέχουν στην

ικανότητα επιβίωσης στα μακροφάγα.• Μαστίγιο – κίνηση στον εντερικό βλεννογόνο• Εντεροτοξίνη- πρόκληση γαστρεντερίτιδας• Ικανότητα παγίδευσης σιδήρου

Salmonella

– Κλινική σημασία– προκαλεί 4 ειδών λοιμώξεις: • Ασυμπτωματική μόλυνση (κυρίως S. typhi και S.

paratyphi)• Εντερικός πρετός (τυφοειδής ή παρατυφοειδής)• Εντερίτιδα που χαρακτηρίζεται από πυρετό, ναυτία

εμετό, κοιλιακό άλγος και διάρροια.• Βακτηριαιμία (κυρίως λόγω S. typhi, S. paratyphi, S.

choleraesuis και S. enteritidis).Μετάδοση μέσω της κοπροστοματικής οδού (μολυσμένα χέρια) αλλά και από μολυσμένα

τρόφιμα.

Salmonella

• Ο μικροοργανισμός κινείται στον εντερικό σωλήνα και προσκολλάται στο επιθήλιο. Δραστικές πρωτεϊνες μέσω του SS III προωθούν αναδιάταξη του κυτταροσκελετού και φαγοκυττάρωση του βακτηρίου από τα κύτταρα Μ.

• Η Salmonella αναπαράγεται και δημιουργείται ισχυρή φλεγμονή που είναι υπεύθυνη για τα περισσότερα συμπτώματα της γαστρεντερίτιδας. Η φλεγμονή εμποδίζει την διασπορά του μικροβίου στους παρακείμενους ιστούς.

• Στον εντερικό πυρετό η Salmonella διασπείρεται πριν πολλαπλασιαστεί και παραχθεί φλεγμονή (ήπια συμπτώματα της έναρξης της λοίμωξης).

Salmonella προσβολή των επιθηλιακών κυττάρων

SalmonellaΤα βακτήρια κινούνται μέσω του λεμφικού συστήματος

και του κυκλοφορικού στο ήπαρ και τον σπλήνα όπου γίνεται η φαγοκυττάρωση και ο πολλαπλασιασμός.

» Τα βακτήρια ξανα-μπαίνουν στην κυκλοφορία του αίματος για να διασπαρούν σε άλλα όργανα. Προκαλείται πυρετός, πονοκέφαλος, μυαλγία και γαστρεντερίτιδα.

» Ερυθρά στίγματα μπορεί να εμφανιστούν στην κοιλιακή χώρα

» Σπάνια οστεομυελίτιδα, κυστίτιδα και χολοκυστίτιδα.» Τα συμπτώματα του παρατυφοειδούς πυρετού (που

οφείλονται στην S. paratyphi A, B, or C) είναι παρόμοια αν και ελαφρύτερα από αυτά του τυφοειδούς.

Salmonella

– Διάγνωση του τυφοειδούς πυρετού

» Αιμοκαλλιέργειες θετικές την 1η εβδομάδα και μετά τη 2η εβδομάδα

» Καλλιέργεια κοπράνων σε επιλεκτικά υλικά

» Η δοκιμασία Widal (αντισώματα έναντι Salmonella typhi). Σημαντικός τίτλος Η-1:80 και Ο-1:160.

» Το 10% των μολυσμένων εξελίσσονται σε φορείς (βραχυχρόνιοι) και < 10% μακροχρόνιοι λόγω της παραμονής του βακτηρίου στην χοληδόχο κύστη ή την ουροδόχο κύστη.

Salmonella

– Αντιμικροβιακή θεραπεία• Στον εντερικό πυρετό χρησιμοποιούμε

φλουοροκινολόνες, χλωραμφενικόλη ή άλλο αντιβιοτικό πάντα μετά από αντιβιόγραμμα.

• Στη γαστρεντερίτιδα δεν χορηγούμε αντιβίωση λόγω του φαινομένου της παράτασης της απέκκρισης των βακτηρίων μετά την ίαση.

• Φροντίζουμε για την ενυδάτωση.

σύγκριση μόλυνσης Salmonella vs Shigella

Klebsiella

– Παράγοντες παθογένειας• Έλυτρο• Προσκολητίνες• Ικανότητα παγίδευσης σιδήρου

– Κλινική σημασία• Προκαλεί πνευμονία, κυρίως στους

ανοσοκατεσταλμένους. – Μόνιμη βλάβη των πνευμόνων πιο συχνά από

άλλου τύπου πνευμονίες. – Μείζων παράγοντας ενδονοσοκομειακής

λοίμωξης (σηψαιμίας, μινιγγίτιδας)

Μπορούμε να ξεχωρίσουμε την Klebsiella από την βλεννώδη εμφάνιση των αποικιών λόγω της κάψας.

Klebsiella

K pneumoniae• Βρίσκεται στο αναπνευστικό και τα κόπρανα

στο 5% των υγιών• Μπορεί να προκαλέσει βακτηριακή πνευμονία• Προάγει εκτενή αιμορραγική νεκρωτική

σύντηξη των πνευμόνων• Βλεννώδεις αποικίες λόγω ελύτρου

• Ακίνητος οργανισμός

• ουρολοίμωξη και άλλες εντοπισμένες λοιμώξεις

• νοσοκομειακές λοιμώξειςΤο 10% των νοσοκομειακών λοιμώξεων οφείλονται σε στελέχη

Klebsiella τα οποία είναι συνήθως πολυανθεκτικά

K rhinoscleromatis προκαλεί ρινοσκλήρωμα (κοκκιωματώδης εξεργασία του ρινοφάρυγγα)

Λοιμώξεις από KlebsiellaK pneumoniae K oxytoca K rhinoscleromatis

Συχνότητα σηψαιμίας από εντεροβακτηριακά

άλλα

θεραπείαθεραπεία - -γεστρεντερίτιδαγεστρεντερίτιδα

• ενυδάτωσηενυδάτωση

• αντιβιοτικάαντιβιοτικά– συνήθως δεν χρησιμοποιούνται παρά σε συνήθως δεν χρησιμοποιούνται παρά σε

εξάπλωση της λοίμωξηςεξάπλωση της λοίμωξης – πχπχ αιμολυτικό-ουρεμικό σύνδρομοαιμολυτικό-ουρεμικό σύνδρομο

AMX TIC CF FOX

CTX AMC CAZ CFM

GM TM NET AN

SXT NA PEF CIP

φαινότυπος 1

φαινότυπος 2

φαινότυπος 3

φαινότυπος 4

AMX TIC CF FOX

CTX AMC CAZ CFM

GM TM NET AN

SXT NA PEF CIP

εργαστηριακή διερεύνηση τροφογενούς επιδημίας από E. coli

O157:H7

2-5: απομονώσεις από διάφορες πολιτείες των ΗΠΑ

6: στέλεχος από χάμπουργκερ που ενοχοποιήθηκε για την επιδημία

7,8: στελέχη από χάμπουργερ που δεν σχετίζονται με την επιδημία

επιδημιολογική διερεύνηση υδατογενούς επιδημίας από E. coli

O157:H7 Νέα Υόρκη 1999

2-9: κλινικά στελέχη

11-14: περιβαλλοντικά στελέχη

Πολλαπλό PCR για την ταυτοποίηση διαρριογενούς E.

coli

2: ETEC

3: STEC

4: EPEC

5: EIEC

6-11: δείγματα ασθενών

12-15: δείγματα τροφίμων

ειδικό PCR για 7 παθογόνους χαρακτήρες

Catalina López-Saucedo, et al Emerg Inf Dis • Vol. 9, No. 1, J 2003

ΗΜΕΡ ΑΡ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ

ΕΊΔΟΣ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ ΚΛΙΝΙΚΗ ΑΠΟΤΥΠΩΜΑ ΡΙΒΟΤΥΠΙΑΣEcorI/PstI/PvuII

ΑΠΟΤΥΠΩΜΑ PFGE XbaI

20/7/05 64467 ΚΡ ΡΕΥΜ Ε1/Ps1 Α

20/7/05 64476 ΚΡ ΕΝΔΟΚΡ Ε1/Ps1 Α

22/7/05 64481 ΚΡ Α’Π Ε1/Ps1 Α

20/7/05 64478 ΚΡ ΝΕΥΡ Ps1 Α

20/7/05 64479 ΚΡ ΔΕΡΜ Ε1/Ps1 Α

20/7/05 64487 ΚΡ ΜΑΙΕΥΤ Ε1/Ps1 Α

21/7/05 64502 ΚΡ ΜΕΠΚ E1/Ps1/Pv1 Α

21/7/05 64506 KP NEYP Ps1 A

21/7/05 64510 ΚΡ ΩΡΛ Ps1 Α

21/7/05 64617 ΚΡ ΠΑΙΔΟΑΙΜ Ps1

21/7/05 64514 ΚΡ ΠΑΙΔΟΑΙΜ Ps1/Pv1 Α

20/7/05 64423 ΚΡ ΤΕΠ ΠΑΘ Ε1/Ps1 Β

21/7/05 64558 ΚΡ ΓΑΣΤΡ Ε1/Ps1/Pv1 Α

21/7/05 64559 ΚΡ ΠΑΙΔΟΧΕΙΡ Ε1/Ps1 Α

21/7/05 64561 ΚΡ ΝΕΦΡ Ps1 Α

21/7/05 64592 ΚΡ ΠΑΙΔΙΑΤΡ Ps1/Pv1 Α

21/7/05 64593 ΚΡ ΠΑΘ ΟΓΚ Ε1/Ps1 Α

21/7/05 64594 ΚΡ ΠΑΘ ΟΓΚ Ps1 Α

21/7/05 64599 ΚΡ ΟΡΘΟΠ Ps1 Α

22/7/05 64623 ΚΡ ΠΝΕΥΜ Ps1 Α

22/7/05 64634 ΚΡ ΟΡΘΟΠ Ps1 Α

22/7/05 64641 ΚΡ ΑΙΜΑΤΟΛ Ps1/Pv1 Α

23/7/05 64769 ΚΡ Α’Π(προσωπ) Ps1/Pv1 Α

24/7/05 64783 KP NEΦΡ/ΚΗ Ps1

24/7/05 64793 ΚΡ ΜΕΘ ΠΑΙΔ Ps1/Pv1 Α

20/7/05 Α29432 ΑΙΜ ΚΑΡΔ E1/Ps1/Pv1 Α

21/7/05 Α29522 ΑΙΜ ΨΥΧ Ε1/Ps1 Α

21/7/05 ΑΝ29557 ΑΙΜ ΜΕΘ Ps1 Α

21/7/05 Α29560 ΑΙΜ Α’Π Ps1

22/7/05 64628 ΚΡ ΠΡΟΣΩΠ Ps1 Α

24/7/05 64800 ΚΡ ΠΡΟΣΩΠ Ps1/Pv1 Α

25/7/05 64819 KP ΠΑΙΔΟΑΙΜ Ps1

25/7/05 64888 ΚΡ ΓΑΣΤΡ/ΚΗ E1/Ps1

12/7/05 63880 ΚΡ ΜΙΚΡ E1/Ps2 Β

30/7/05 33962-1 ΤΡ ΤΥΡΙ ΜΙΚΡ ΤΡΟΦ E1/Ps1/Pv1 Α

30/7/05 33962-2 ΤΡ ΤΥΡΙ ΜΙΚΡ ΤΡΟΦ E1/Ps1/Pv1 Α

30/7/05 33949 ΤΡ ΤΥΡΙ ΜΙΚΡ ΤΡΟΦ E1/Ps1/Pv1 Α