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LCDA. HEFZI-BÁ RUTH JONES LUNA

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El microscopio (de micro-, μικρο, pequeño, y

scopio, σκοπεω, observar) es un instrumento

que permite observar objetos que son

demasiado pequeños para ser vistos a simple

vista.

Existen distintos tipos de microscopios, por

ende cada uno de ellos posee una función y

característica diferente. El tipo más común y el

primero que se inventó es el microscopio

óptico. Se trata de un instrumento óptico que

contiene una o varias lentes que permiten

obtener una imagen aumentada del objeto y

que funciona por refracción.

La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este

instrumento se llama microscopía.

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Historia del microscopio

En 1665 Hooke observó con un microscopio un delgado

corte de corcho y notó que el material era poroso. y con

poros, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a

modo de cajas a las que llamó células. Se trataba de la

primera observación de células muertas. Unos años más

tarde, Malpighi, anatomista y biólogo italiano, observó células

vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio.

El microscopio fue inventado hacia los años

1610, por Galileo Galilei, según los italianos, o

por Zacharias Janssen, en opinión de los

holandeses. La de William Harvey sobre la

circulación sanguínea al observar al

microscopio los capilares sanguíneos y Robert

Hooke publica su obra Micrographia. Galileo Galilei

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A mediados del siglo XVII un holandés, Anton Van Leeuwenhoek

utilizando microscopios simples de fabricación propia, describió por

primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. El

microscopista Leeuwenhoek, sin ninguna preparación científica, puede

considerarse el fundador de la bacteriología. Tallaba él mismo sus lupas

sobre pequeñas esferas de cristal, cuyos diámetros no alcanzaban el

milímetro (su campo de visión era muy limitado, de décimas de

milímetro). Con estas pequeñas distancias focales alcanzaba los 275

aumentos. Observó los glóbulos de la sangre, las bacterias y los

protozoos; examinó por primera vez los glóbulos rojos y descubrió que

el semen contiene espermatozoides

Van Leeuwenhoek

Glóbulos rojos

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Tipos de Microscopios:

Hoy en día hay varios tipos de microscopios, básicamente se pueden clasificar

por el tipo de iluminación que emplean. Pueden ser microscopios que utilizan

como fuente de iluminación "radiaciones de luz invisible" y microscopios que

utilizan como fuente de iluminación el "espectro de luz visible". Los microscopios

que funcionan con el espectro de luz visible son de dos tipos:

Microscópio simple presentado por James N. Logan en Octubre de 1871

El microscopio simple: que consiste simplemente en una lupa o, una lente

convergente, que puede ir montada de diferentes formas según la finalidad que

se le destine.

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El microscopio compuesto u óptico

es un instrumento óptico que tiene como misión aumentar el tamaño de los objetos

que son realmente muy pequeños y que no se pueden ver a simple vista, a su vez

puede ser "monocular" , "binocular", etc.

Microscopio óptico

Microscopio monocular

El microscopio monocular

Consta de un tubo ocular y se llama así porque la observación se hace con un solo

ojo.

El microscopio binocular

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El microscopio binocularLleva dos tubos oculares para poder observar con los dos ojos. Se compone de

dos objetivos y dos oculares, esto presenta ventajas tales como mejor

percepción de la imagen, más cómoda la observación y se perciben con mayor

nitidez los detalles. Se hace posible la visión tridimensional (microscopio

estereoscópico). Este microscopio tiene la ventaja que no invierte la imagen, es

fácil de enfocar y puede usarse para objetos opacos que no vayan montados

obre portaobjetos. El óptimo de visión estereoscópica se encuentra entre 2 y 40

X de aumento total del microscopio.

Microscopio binocular

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Microscopio de Campo Oscuro

Este microscopio está provisto de un condensador paraboloide, que

hace que los rayos luminosos no penetren directamente en el

objetivo, sino que iluminan oblicuamente la preparación. Los objetos

aparecen como puntos luminosos sobre un fondo oscuro.

Microscopio de fluorescencia

La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas sustancias de

emitir luz propia cuando inciden sobre ellos radiaciones energéticas.

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Microscopio Electrónico

En 1932, Bruche y Johnsson construyeron el primer microscopio electrónico a

base de lentes electrostáticas. Este, utiliza un flujo de electrones en lugar de luz,

consta fundamentalmente de un "tubo de rayos catódicos", en el cual debe

mantenerse el "vacío".

Los aumentos máximos conseguidos son del orden de 2.000.000 (dos millones)

de aumento. Este microscopio consta de:

Un filamento de tungsteno (cátodo) que emite electrones.

Condensador o lente electromagnético que concentra el haz de electrones.

Objetivo o lente electromagnético que amplía el cono de proyección del haz de

luz.

Ocular o lente electromagnético que aumenta la imagen.

Protector que amplía la imagen.

Pantalla fluorescente que recoge la imagen para hacerla visible al ojo humano.

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Con estos poderosos instrumentos, que utilizan flujo de

electrones y las radiaciones magnéticas así como la aplicación

de técnicas histoquímicas y bioquímicas se han logrado

grandes avances en la biología celular.

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¿Cómo está constituido un microscopio?

El microscopio está formado por tres partes que son:

Parte Mecánica: Son una serie de piezas donde se instalan los lentes y

posee mecanismos de movimiento controlado para el enfoque, las piezas

que forman este sistema son:

Resorte o eje de inclinación, tornillo fijo que une la columna al brazo y se

conoce también como "charnela", permite inclinar el microscopio y poder

observar con facilidad las preparaciones.

Pilar o columna, llamada también asa o brazo que sirve para mantener las

diversas partes, sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo

inferior se une a la base.

Soporte o brazo, une el tubo a la platina y sirve para tomar el microscopio

y trasladarlo de un lugar a otro.

Base o pie, estructura metálica en forma de U ó V , sirve de sostén y da

estabilidad.

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Tubo ocular: tiene forma cilíndrica y está

ennegrecido internamente para evitar las

molestias que ocasionan los reflejos de la

luz. En su parte superior se encuentra un

orificio donde se coloca el ocular y en la

parte inferior lleva el "revólver" que soporta

los objetivos

Tornillo macrométrico permite

realizar movimientos verticales

grandes, es decir mueve el tubo de

arriba hacia abajo permitiendo un

enfoque rápido, es un tornillo grande.

Tornillo micrométrico permite

realizar movimiento lentos, por lo

cual sirve para afinar y precisar el

enfoque, el tornillo es pequeño.

Partes del microscopio.

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Revólver: estructura circular giratoria

donde van enroscados los objetivos.

Permite la colocación en posición

correcta del objetivo que se va a usar.

Carro: dispositivo colocado sobre la platina

que permite deslizar la preparación de

derecha a izquierda y de atrás hacia delante.

Platina, se utiliza para colocar la preparación

u objeto que se va a observar, puede ser fija

o giratoria, tiene un hueco en el centro para

dejar pasar los rayos luminosos.

Pinzas del portaobjeto, sirven para sostener

la preparación.

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Parte Óptica: Está constituido por una serie de lentes que permiten

además de aumentar y dar nitidez a la imagen. Estos lentes son:

Oculares: están situados en el extremo superior del

tubo, cerca del ojo del observador. Tienen como función

multiplicar el aumento logrado por el objetivo, el aumento

que se logra con ellos se representa por un número entero

acompañado de una X, lo cual significa tantos números,

tenemos oculares de 4X, 6X, 8X, 9X, 10X, l2X, 15X, 20X.

Los secos, se denominan así porque no es necesario

añadirles ninguna sustancia para usarlos, entre ellos y

la preparación, sus aumentos pueden ser de 10X, 15X,

20X,43X, 45X, 60X. Los de inmersión, para usar estos

objetivos es necesario añadir una gota de aceite de

cedro entre la preparación y el objetivo, el aceite de

cedro permite que no se desvíe la luz y se pierda la

refracción, los aumentos suelen ser de 100X y se

distinguen de los secos por presentar en el borde del

extremo inferior una raya circular de color o la palabra

OIL.

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Parte de iluminación:está constituido por las partes del microscopio, cuya función está

relacionada con la entrada de luz a través del aparato que ilumina la

preparación. Está compuesto por:

El Espejo: se encuentra ubicado debajo del

condensador, su función es la de desviar los

rayos de luz hacia el objeto que se va a

observar, el espejo presenta dos caras, una

plana y otra cóncava. La cara plana se utiliza

para observar con luz artificial y la cóncava

para observar con luz natural. Los nuevos

modelos de microscopio no llevan espejo, sino

una lámpara que sustituye su función.

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Condensador: es una lente o sistema de

lentes que se encuentran colocado debajo de la

platina y su función es la de concentrar la luz

sobre el objeto que se va a observar.

Diafragma: disco horadado situado en la parte

inferior del condensador, que regula la cantidad de

luz que debe pasa a través de éste hacia la

platina.

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¿Cómo debemos trabajar con el microscopio?

Tomar el microscopio con las dos manos, una debajo de la base y la otra en

el asa, y colocarlo en un sitio plano donde vaya a trabajar.

Seleccionar la cara del espejo que se va a utilizar, según la concentración de

luz o en su defecto enchufarlo y encender la lámpara.

Mover el espejo y orientarlo hacia el foco de luz hasta que los rayos pasen

por el orificio de la platina, de tal manera que lleguen al tubo óptico; mirar por el

ocular para ver cuando el tubo quede iluminado por dentro.

Colocar el porta objetos sobre la platina, de forma que la preparación quede

sobre el orificio, fíjarlo con las pinzas.

Unidades de medida en un microscopio: Las unidades en el mundo ocular

son "la micra", "el nanómetro", y el "Angstron".1 cm = 0,4 pulgadas 1 milímetro=

1000 micra = 1/10 de cm1 micra o nanómetro = 1000 nanómetros= 1/10.000 de

cm1 nanómetro (nm)= 10 Angstron = 1/10.000.000 de cm1 Angstrom (A) = 1/

100.000.000 de cm.

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¿Cómo se calcula el aumento de una muestra?

Para calcular el aumento que experimenta una preparación al ser

observada a través de un microscopio, se realiza el siguiente cálculo:

Se multiplica el aumento que señala el ocular por el aumento del objetivo

dando como resultado el aumento total de la muestra. Este aumento total

representa el numero de veces en que el objeto se encuentra ampliado con

respecto a su tamaño original.

At: Aumento total

Aoc: Aumento del ocular

Aob: Aumento del objetivo

Si en un microscopio el ocular es de 20X y el objetivo es de 45 X. Y se

observa una muestra ¿Cuál será el aumento total de la muestra observada?

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Propiedades del microscopio

Poder de resolución: distancia mínima entre dos puntos próximos que

pueden verse separados. El ojo humano tiene un poder de resolución de

1/10 de milímetros, o sea, de 100 micras. El microscopio óptico tiene un

poder de resolución de 0,2 micras o 200 nanómetros o 2000 Angstrom,

mejoran la visión unas 500 veces a la del ojo humano.

Poder de ampliación, producto de la amplificación del objetivo y del ocular.

Poder de penetración, consiste en la capacidad que tiene el microscopio de

permitir la observación de diversos planos del objeto estudiado de manera

simultánea.

Capacidad para proporcionar imágenes de contornos netos, esta propiedad

depende de la calidad del lente.

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MICROSCOPIO Y SUS PARTES

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