1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

IV. ANALISIS STATISTIK

Data yang diperoleh selama penelitian dianalisa secara statistik dengan

mengenakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang tersusun secara faktorial dengan

berpedoman kepada rumus sebagai berikut:

Ybpn = μ + Bb + Gn + BbGn + ∑ (bgr)

Dimana :

Ybpn = variabel hasil pengamatan ke – n yang terjadi karena pengaruh dari

faktor B pada taraf ke – b dan faktor G pada taraf ke-n.

μ = rata-rata (nilai tengah)

Bb = Pengaruh faktor B pada taraf ke-b

Nn = Pengaruh faktor G pada taraf ke – n

BbGn = Pengaruh interaksi antara taraf ke-b faktor ke-B dan taraf ke-n

faktor ke-G

∑(bnn) = Pengaruh unit eksperimen ke-n dalam kombinasi perlakuan atau

pengaruh efek error kombinasi dari faktor B pada taraf ke-b dan faktor G pada taraf

ke-n

B = 0, 1, 2, 3 (BAP)

G = 0, 1, 2, 3 (Glukosa)

r = a, b, c (ulangan)

21

Tabel 2. Pengamatan Parameter

Perlakuan Faktor B Ulangan

Faktor GJumlah RerataG0 G1 G2 G3

B0123

Y001Y002Y003

Y011Y012Y013

Y021Y022Y023

Y031Y032Y033

Jumlah J00. J01. J02. J03. J0..Rerata Y00. Y01. Y02. Y03. Y0..

B1123

Y101Y102Y103

Y111Y112Y113

Y121Y122Y123

Y131Y132Y133

Jumlah J10. J11. J12. JI3. JI..Rerata Y10. Y11. Y12. Y13. YI..

B2123

Y201Y202Y203

Y211Y212Y213

Y221Y222Y223

Y231Y232Y233

Jumlah J20. J21. J22. J23. J2..Rerata Y20. Y21. Y22. Y23. Y2..

B3123

Y301Y302Y303

Y311Y312Y313

Y321Y322Y323

Y331Y332Y333

Jumlah J30. J31. J32. J33. J3..Rerata Y30. Y31. Y32. Y33. Y3..Jumlah J.0. J.1 J.2 J.3 J…Rerata Y.0. Y.1. Y.2. Y.3. Y…

Analisis Sidik Ragam

JKT = (Y001)2 + (Y031)2 + … + (Y333)2

FK =

JKB = - FK

JKG = - FK

JKBG = – FK – JKB – JKG

JKE = JKT – FK – JKB – JKG – JKBG

Keterangan :

22

JKT = Jumlah kuadrat tengah

FK = Faktor koreksi

JKB = Jumlah kuadrat untuk semua taraf faktor B

JKG = Jumlah kuadrat untuk semua taraf faktor G

JKBG = Jumlah kuadrat untuk semua interaksi faktor B dan G

JKE = Jumlah kuadrat error

Tabel 3. Analisa Sidik (Anova)

SV DB JK KT F. Hitung F. TabelRata-rata Perlakuan 1 - - - -

B 3 JKB JKB/3 KTB/KTF -G 3 JKG JKG/3 KTG/KTE -

BG 9 JKBG JKBG/9 KTBG/KTE -Error 32 JKF JKF/32 - -

Jumlah 48 JKT - - -

Keterangan :

JK = Jumlah kuadrat

DK = Derajat bebas

KT = Kuadrat tengah

Apabila hasil perhitungan yang didapat berbeda nyata maka untuk

mengetahui perbedaan masing-masing perlakuan. Perlakuan dilakukan uji lanjut

beda nyata jujur (BNJ) pada taraf 5%.Untuk mendapatkan perbedaan masing-masing

perlakuan maka dilakukan uji lanjut beda nyata jujur (BNJ) pada taraf 5%. Dengan

menggunakan rumus sebagai berikut :

1. Hitung nilai BNJ dengan rumus :

a. Hasil nilai pengembang untuk interaksi.

HSDBP = Q (t × DB error) ×

23

b. Harga nilai pembanding untuk faktor B

HSDB = Q (t × DB error) ×

c. Harga nilai pembanding untuk taraf N

HSDP = Q (t × DB error) ×

Dimana :

r = Ulangan

Q a/0,05 = Dilihat pada tabel Q (daftar E) pada taraf 5%

t = Jumlah perlakuan

2. Bandingkan antara perlakuan dengan nilai BNJ untuk mengetahui berbeda

tidaknya perlakuan.

24

V. ANGGARAN BIAYA

A. Bahan – Bahan

a) Jeruk Rp. 20.000,-

b) Agar-agar Rp. 8.000,-

c) Alkohol Rp. 50.000,-

d) Bahan kimia Rp. 700.000,-

e) Bayclin Rp. 10.000.-

f) Deterjen Rp. 5.000,-

g) Karet gelang Rp. 20.000,-

h) Plastik tahan panas Rp. 30.000,-

i) Aluminium foil Rp. 13.000,-

j) Kertas Label Rp. 6.000,-

B. Alat-Alat

a) Alat Tulis Rp. 6000,-

b) Alat Kultur Rp. 700.000,-

C. Biaya Lain-Lain

a) Transportasi Rp. 200.000,-

b) Biaya Proposal Rp. 150.000,-

c) Biaya Tak Terduga Rp. 350.000,-

Total Biaya Keseluruhan Rp.2.268.000,-

Terbilang : “Dua Juta Dua Ratus Enam Puluh Delapan Ribu Rupiah”

25

DAFTAR PUSTAKA

Beyl, B. 2002. Getting Started With Tissue Calture-Media Preparation, Sterile Tecnnigue and Laboratory Eguipment. London

Brault, malhias and Maldiney, regis. 1999. Mechanisms of Cytokinin Action. Laboratoire de Physiologi du Developpement des Plantes. Universite Pierre-et-marie-surie. Blochem

Dasuki, UA. 1991. Sistematik Tumbuhan Tinggi. Pusat Antar Universitas. Bidang Ilmu Hayati. ITB

Geogre,E.F. 1993. Plant Propagation by Tissue Culture. 2nd Edition. Exegetics Ltd. Edington Wilts. England

Gunawan,L.W. 1992. Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan. Pusat Antar Universitas Bioteknologi Institut Pertanian Bogor. Bogor

Gunawan,L.W. 1995. Teknik Kultur In Vitro Dalam Hortikultura. Penebar Swadaya. Jakarta

Hendaryono,D.P.S dan A.Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan Perbanyakan dan Petunjuk Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif. Kanius. Yogyakarta

Jumin,H. B. 1997. Perkembangan Baru Dalam Breeding Citrus Suatu Tinjauan Bioteknologi. UIR Press. Pekanbaru

Kieber, Joseph J. 2002. The Arabidiopsis Book: Cytokinins. American Society of Plant Biologists University of Worth Carolina, Biology Depertment : Carolina

Martasari, C dan Hardiyanto. 2003. Spesies Jeruk Komersial Sirkular. Inovasi Teknologi Jeruk. Balai Penelitian Jeruk dan Buah Subtropika

Rukmana, R dan Y. Yuniarsih. 2003. Usaha Tani Jeruk Keprok. Aneka Ilmu. Semarang

Surgiyato, M. 1966. Karakteristik Varietas Jeruk Harapan. Unpublish

Suryowinto,M. 1996. Pemuliaan Tanaman Secara In Vitro. Kanisius. Yogyakarta

Trigiano,R.N and D.J.Gray. 2000. Introduction to Plant Tissue Culture Concents on Laboratory Exerclses. CRC Press. London

Wattimena,G.A. 1992. Bioteknologi Tanaman PAU Institut Pertanian Bogor. Bogor

26

Wilson, H. D. 2006. Taxonomy of Flowering Plant. Lecture Notes

Yusnita. 2003. Kultur Jaringan Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisien. Agromedia Pustaka. Jakarta

Yuzami,dkk. 2005. Ensikiopedia Flora. Bogor : PT Kharisma Ilmu

Zulkarnaen. 2009. Kultur Jaringan Tanaman Solusi Perbanyak Tanaman Budidaya. Bumi Aksara. Jakarta

27

Lampiran 1. Jadwal Kegiatan Penelitian

No

.Kegiatan

Maret April Mei Juni

1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

1.Persiapan alat

dan bahanX

2. Sterilisasi Alat X

3.Pembuatan

MediaX

5.Persiapan

eksplanX

6.Sterilisasi biji

Jeruk sambalX

7.Kultur Biji Jeruk

SambalX

8.Pemberian

PerlakuanX

9.Penanaman

EksplanX

10. Pengamatan X X X X X X X

11. Hasil X

12. Laporan X

28

Lampiran 3. Komposisi Media Dasar Murashige dan Skoog (MS) dan Pengelompokan Senyawa Kimia dalam Pembuatan Larutan Stok

Nama Stok Senyawa dalam Larutan Stok

Konsentrasi dalam Media MS (mg/l)

Konsentrasi dalam Larutan Stok (mg/l)

Volume Larutan Stok yang dibutuhkan per liter Media (ml)

Makro(10 x)

Ca (100x)Mikro A (100x)

Mikro B

Fe (100x)

Vitamin (1000x)

Mio-Inositol (50x)

KNO3

NH4NO3

MgSO4.7H2OKH2PO4

CaCl2.2H2OMnSO4.4H2OZnSO4.7H2OH3BO4

KICuCO4.5H2ONaM0O2.6H2OCoCl2.6H2OFeSO4.7H2ONa2EDTANicotinamic AcidPyridoxin-HClThiamin-HClGlisinMio-Inositol

1900165037017044016,98,66,20,830,0250,250,02527,837,80,50,50,12,0100

1900016500370017004400016908606208302525025278037805005001002005000

100

1010

1

10

1

20

Sumber : Yusnita. 2003. Kultur Jaringan: Cara Memperbanyak Tanaman secara Efisien. Agromedia. Jakarta.

29

Lampiran 4. Skema Pembuatan Media Murashige dan Skoog (MS)

Proses kerja Pembuatan Media

Unsur Makro

500 ml

Stok Besi

Stok Mikro Mikro

Stok Mio - inositol

Stok Hormon

ZPT NAA dan BAPSesuai Perlakuan

Glukosa 30 g

Tambahkan Aquades sampai 1.000 ml

Ukur pH larutan 5,6-5.8

Masukkan Agar – agar powder 7gr dan panaskan hingga larut dan

mendidih sambil diaduk dengan pengaduk kaca

Tuangkan larutan ke dalam botol kultur 25 ml/botol ( 1 I/40 botol )

Tutup botol dengan plastic dan diikat dengan menggunakan karet gelang, lalu dsterilkan dalam autoclave

Label botol sesuai dengan perlakuan

Simpan di ruang penyimpananpenyimpanan

30

Lampiran 5. Lay Out di Lapangan Menurut Rancangan Acak Lengkap (RAL) Faktorial

U

S

B0G2 a

B3G3 b

B3G0 c

B0G1 a

B1G1 c

B2G2 c

B1G1 b

B2G0 b B3G2 c

B1G3 c

B0G2 b

B2G1 a

B3G2 b

B2G0 c

B2G2 b

B1G1 a

B2G0 a

B0G2 c

B3G0 a

B2G2 a

B3G1 a

B3G3 a

B3G2 a

B0G1 b

B2G1 c

B3G3 c

B1G3 a

B1G2 a

B0G3 bB1G2 b

B0G0 a

B2G1 b

B1G3 b

B1G0 b

B1G0 c

B3G0 b

B0G1 c B2G3 c B0G3 c

B1G2 c

B2G3 b

B3G1 bB1G0 a

B0G0 b

B2G3 a

B0G3 a

B0G0 c

B3G1 c

Keterangan :

B : BAP

G : Glukosa

0,1,2,3 : Taraf perlakuan

a, b, c : Ulangan