Analisis Vitamin
VitaminAnalisa vitamin A/ β-KarotenDapat diterapkan pada lemak dan bahan
pangan lainnya Prinsip ; Sampel disabunkan dan senyawa yg
tdk dapat disabunkan diekstrak dg dietil eter. Vitamin A kemudian dipisahkan dari karetinoid dgn kromatografi alumina, sedangkan β-Karoten dipisahkan dari karoten lainnya dengan kromatografi magnesia. Keduanya kemudian dianalisa secara spektrofotometri
Pereaksi nya; Potassium Hidroksida,KOH,NaOH, dll
Vitamin A dalam margarin• Prinsip• Bagian yg tdk tersabunkan diekstrak dg eter• Dilewatkan pd kolom berisi alumina aktif
alkali dan netral• Kolom bagian atas:terpisah Vit.A dari karoten
dan lain• Kolom bagian bawah;fluorescent +lampu UV
pengamatan pemisahan vit.A dlm kolom• Vit.A yg terpisahkeluar kolom diukur
adsorbansinya dgn spektrofotometer
• Kadar karoten
• (µg/gr)= A x 4,17/ w, w: berat sampel A = Absorbansi pada 450 nm
Vitamin A dalam minyak/ Lemak Metode Cepat Carr Price vit.A bereaksi dg
antimon triklorida memebentuk warna biru yg intensitasnya diukur dgn spektrofotometer
Analisis lainnya• Vit.A menggunakan HPLC• Total Karoten dalam Minuman diekstrak
dg kloroform,dikromatografi pada alumina dioksida,terpisah karoten dgn komponan lainnya,absorbansi diukur pada 450 nm
• Karoten dalam sayur dan buah karatenoid dipisahkan dgn kromatografi, pemisahan pigmen karoten secara biologis aktif,menggunakan adsorben tertentu yang mampu mengikat untuk masing2 pigmen yang berbeda. Contoh adsorben:magnesium oksida supercel dgn A=436 nm
Analisis Vitamin B• Vitamin B1• Metode manual I Tiamin diekstrak dgn asam
encer panas,diurai dgn fosfatase pada pH 4,5,lalu ekstrak dikromatografikan dgn silikat penukar basa, tiamin yg terelusi dioksidasi dgn ferisianida basa menjadi tiokrom yang kemudian diukur dgn fluorometri
• Metode manual II, untuk B1 serealia prinsip sama dgn metode I hanya saat diurai (digest) + pemanasan pada autoclaf dg P= 15 lb/in2 selama 30 menit
• Metode HPLC: diekstrak dari makanan dgn hidrolisa asam diberi perlakuan sebelum masuk kolom HPLC
Vitamin b2• Metode Manual I Riboflavin diekstrak dgn
asam.encer panas,pH 4,5.ekstrak disaring dihilangkan warna dgn potasium permanganat dan hidrogen peroksida, Fluorosensi ekstrak diukur dgn larutan ditionit sebelum dan sesudah reduksi, perbedaannya merupakan kadar riboflavin dlm sampel (dibuat perhitungannya)
• Metode manual II sama dgn I hanya ditionit diganti dgn sodium hidrosulfit
• Metode HPLC
Analisis Niasin• Reaksi antara niasin dgn sianogen
bromida membentuk senyawa piridinium, lalu berubah menjadi senyawa turunan yang berpasangan dgn amin aromatik membentuk senyawa berwarna, pada kondisi yang tepat, Warna senyawa sebanding dengan kadar niasin dan dapat diukur dgn spektrofotometer
Vitamin b6• Metode HPLC
• Metode Mikrobiologis diekstrak dgn asam,diencerkan, ditentukan secara nefelometrik
menggunakan pertumbuhan saccharomyces carisbergensis yang mempunyai pertumbuhan spesifik terhadap B6 total (piridoksin, piridoksol, piridoksamina)
• Nefelometrik turbidity unit (NTU)
• satuan ukuran untuk kekeruhan air. Pada dasarnya, ukuran kekeruhan air yang diukur oleh suatu nephelometer. Kekeruhan didasarkan pada jumlah cahaya yang tercermin dari partikel-partikel di dalam air.
Vitamin b12• Metode mikrobiologis
• Menggunakan lar.buffer asetat pH 4,5 kobalamin yg tdk stabil + sodium siamida menjadi sianokobalamin yg stabil. Lalu diencerkan, secara nefelometrik + Lactobacillus leichmanii ( spesifik untuk pertumbuhannya membutuhkan vitamin B12)
Vitamin c / asam askorbat
• Metode oksidimetri I
• Metode oksidimetri II
• Metode kolorimetri
• Total asam askorbat I dan II
• Dasar : Vitamin C dalam tablet dapat di tetapkan dengan titrasi iodometri , menggunakanindicator kanji.
• Pereaksi : – Lrutan iodium 0,1 N& alat - Indikator kanji- Erlenmeyer 250 ml- Buret
• Cara kerja :• Ditimbang contoh 1/5 x bobot stándar ,ke dalam
erlenmeyer 250 mlDilarutkan contoh dengan 40 ml air , lalu ditambahkan beberapa tetes indikator kanji.Di titrasi dengan larutan iodium 0,1 N hingga berwarna biru.1 ml iodium 0,1 N setara dengan 8,806 mg vitamin CPerhitungan :V x N x 8,806Kadar vitamin C = x 100 %100 x 0,1
• ` Keterangan :V = Volume penitarN = Normalitas iodium100 = 1/5 kandungan vitamin C dalam 1 tablet ( 500 mg)
Top Related