UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULODISCIPLINA DE INFECTOLOGIA

 

Análise dos níveis de Interleucina 6 (IL-6) e Fator de Necrose

Tumoral Alfa (TNF-α) no plasma de pacientes com tuberculose

pulmonar antes e pós-tratamento específico

Emerson Renato MartinsObtenção do título: Mestre em Ciências

Orientador: Prof.ª Dra. Denise do Socorro da Silva Rodrigues

 

SÃO PAULO2012

INTRODUÇÃO: Mycobacterium Gênero Mycobacterium : Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium bovis Mycobacterium avis, etc.

Fonte: PALOMINO, 2007

Ro bert Koch (1843-1910) Micobacterium tuberculosis

EPIDEMIOLOGIA

• Disseminação da tuberculose:

• áreas de grande concentração populacional

• precárias condições socioeconômicas ou

desigualdade social

• grandes movimentos migratórios

• HIV/AIDS

EPIDEMIOLOGIA: Mundo

Fonte: WHO, 2011

EPIDEMIOLOGIA

• 9 milhões de casos em 2011 (WHO).• 22 países onde ocorrem os maiores números

absolutos de casos (80%):• Índia, China, Indonésia, Nigéria, Bangladesh,

Paquistão, Etiópia, Filipinas, África do Sul, República Democrática do Congo, Rússia, Quênia, Vietnã, Tanzânia, Myanmar, Uganda, Zimbábue, Moçambique, Tailândia, Afeganistão, Camboja e Brasil.

EPIDEMIOLOGIA: Brasil

Casos de tuberculose por cada grupo de 100 mil habitantes notificados no Sinan. Fonte: Brasil. Ministério da Saúde, (2011).

CONTÁGIO: Tuberculose pulmonar

Reinfection

SINTOMAS SEQUELAS• Perda de peso• Febre baixa • Sudorese noturna• Fadiga • Anorexia • Tosse produtiva

• Dano residual do tecido pulmonar

• Graus de fibrose • Broncovascular • Enfisema • Bronquiectasias

RESPOSTA IMUNOLÓGICAMonócitos

Macrófagos

Neutrófilos

Células Dentríticas

TNF-α

TNF-α

TNF-α

TNF-α

TNF-α

IL-6

IFN-γ

IL-12

IL-4

IL-5

IFN-γ

IFN-γ

IFN-γ

IL-6

IL-6

IL-6

IL-6

IL-12 IL-12

IL-4

IL-4

IL-4

IL-5IL-5

Resposta de Fase Aguda- Leucócitos- Citocinas - Quimiocínas- Inflamação

RESPOSTA IMUNOLÓGICA ADAPTATIVA

LT. NAÍVE

LT. CD4+

LTh1

LTh2

CÉLULA DENTRÍTICA

NEUTRÓFILOS

MACRÓFAGO

LT. CD8+

LT. B

LTh17

LTyδ

LTreg

Ativa Ativa

Ativa

Ativa

Ativa

LT. NK

IFN-Y IFN-Y

IFN-Y

IFN-Y

IFN-Y

TNF-α

TNF-α

TNF-α

TNF-α

TNF-α

TNF-α

IL-6

IL-6

IL-6

IL-6

IL-6

GRANULOMA

IL-10

IL-10

IL-10

IL-10

IL-10

TGF-β

TGF-β TGF-β

TGF-β

TGF-β

IL-2

IL-4

IL-5

IL-12

CCL2

CCL3

CCL5

CCL7

CCL12CXCR3

CXCL2

CXCL9

CXCL10

CXCL11

IL-4

IL-4

IL-4

IL-5

IL-5

IL-5IL-2

IL-2

IL-2

IL-12

IL-12

IL-12

HIPÓTESES

• O aumento dos níveis de IL-6 e TNF-α em pacientes com TB pode estar relacionado com o grau de comprometimento tecidual pulmonar que ocorre durante a doença ativa

OBJETIVO

• Avaliar os níveis de IL-6 e TNF-α no plasma de pacientes com tuberculose pulmonar, comparando com os níveis destas citocinas antes e pós-tratamento específico

• Correlacionar os níveis de IL-6 e TNF-α encontrado no plasma com o grau de comprometimento pulmonar nos pacientes com tuberculose na fase aguda da doença

CASUÍSTICA E METODOLOGIA• 57 pacientes portadores de tuberculose pulmonar, antes do

tratamento específico

• 20 pacientes foram acompanhados após a terapia específica

• Idade entre 15 e 69 anos

• Gênero Masculino e Feminino

• Excluídos: Imunodeficiência, terapia antituberculosa previa e recusa em participar do estudo

ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO• IL-6 (57 pacientes antes do tratamento específico)• IL-6 E TNF-α (20 pacientes antes e pós-tratamento)

ANTES TRATAMENTO PÓS-TRATAMENTO

LAVAGEM

LEITURA ELISA

KIT - R&D SYSTEMS, MINNEAPOLIS, EUA

DIAGNÓSTICO POR IMAGENS• Foram solicitados RX simples de tórax na posição PA e perfil

sequencialmente antes do tratamento específico e avaliados por pneumologista com experiência na área de tisiologia

• Grau 1: Doença com o mínimo envolvimento em somente uma zona, sem cavitação.

• Grau 2: Envolvimento de duas ou três zonas ou uma zona com cavitação.

• Grau 3: Envolvimento grave em mais de três zonas com ou sem cavitação.

Fonte: Ramos et. al., 2006

DIAGNÓSTICO POR IMAGENSGraus de comprometimento radiológico em pacientes com tuberculose pulmonar.

Grau 1 - Paciente do sexo masculino, 24 anos, apresenta opacidade única homogênea na metade superior do pulmão direito, sem imagem cavitária.

Grau 2 - Paciente do sexo masculino, 56 anos, apresenta opacidade homogênea na metade superior do pulmão direito com cavitação.

Grau 3 - Paciente do sexo feminino, 27 anos, apresenta opacidade heterogêneas ocupando todo o pulmão direito com retração da traqueia e leve pinçamento pleuro-diafragmático.

ANÁLISES DOS RESULTADOS

• Grupado de acordo com idade, sexo, grau 1, 2 e 3 • IL-6 e TNF-α (antes e pós-tratamento específico)• Análise estatística (Programa GraphPad Prism)• p<0,05• Amostras pareadas – teste W de soma-classificação

de Wilcoxon• Amostras não pareadas – Kruskal Wallis• Correlação de Person

RESULTADOS: IL-6NÍVEIS DE IL-6 NO PLASMA DE PACIENTES COM TB ANTES E PÓS-TRATAMENTO ESPECÍFICO

Nº Pac. Valor Mín. Valor Max. Média Mediana Desvio

Padrão

Antes-Tratamento 20 0,32 44,56 15,76 17,08 12,87

Pós-Tratamento 20 0,00 7,44 1,63 0,23 2,27

Valores dos Níveis de IL-6 das amostras de pacientes com tuberculose.

- Idade entre 23 a 64 anos- 70% Masculino- 30% Feminino

RESULTADOS: TNF-αNÍVEIS DE TNF-ALFA NO PLASMA DE PACIENTES COM TB ANTES E PÓS-TRATAMENTO ESPECÍFICO

Nº Pac. Valor Mín. Valor Max. Média Mediana Desvio

Padrão

Antes-Tratamento 20 0,000 34,66 7,053 2,40 9,27

Pós-Tratamento 20 0,000 39,22 5,157 0,60 9,64

Valores dos níveis de TNF-α das amostras de pacientes com tuberculose.

- Idade entre 23 a 64 anos- 70% Masculino- 30% Feminino

RESULTADOSDISTRIBUIÇÃO DOS PACIENTES SEGUNDO O GRAU DE COMPROMETIMENTO RADIOLÓGICO

RESULTADOS:

Nº Pac. Valor Mín. Valor Max. Média Mediana Desvio

Padrão

GRAU 1 11 0,00 52,36 14,60 10,56 16,69

GRAU 2 30 0,00 103,40 19,01 9,66 25,77

GRAU 3 16 1,44 44,70 17,53 18,18 12,97

Comparação entre a os níveis de IL-6 na fase aguda da doença com o Grau I, II e III de comprometimento radiológico.

Valores da relação entre os níveis de IL-6 com o grau de comprometimento radiológico.

DISCUSSÃO

IL-6 e TNF-α IL-6 e TNF-α

Pacientes TB

Antes-tratamento Pós-tratamento

DISCUSSÃO

CONCLUSÃO1. A TB ativa é caracterizada por um aumento de IL-6 e TNF-α no plasma de pacientes.

2. Os níveis aumentados de IL-6 e TNF-α antes do início do tratamento sugere a participação dessas citocinas na imunopatogenese da doença.

3. Há ausência de correlação entre os níveis de IL-6 e o grau de comprometimento radiológico na TB pulmonar, mas os níveis diminuídos dessas citocinas após tratamento específico sugere que a IL-6 seja importante na resposta inflamatória específica, mas não pelo dano tecidual causado pela infecção pelo M. tuberculosis.

4. A dosagem dos níveis de IL-6 e TNF-α pode ser utilizado como um marcador de atividade de doença.

OBRIGADO

Agradecimentos:Disciplina de Infectologia – UNIFESPDra. Denise S. RodriguesDr. Reinaldo SalomãoDr. Ricardo Sobhie DiazDra. Milena K. C. BrunialtiDr. Luiz Francisco R. MediciDr. Paulo Sérgio MartinsDra. Martha Celle RiveroDra. Simone G. FonsecaAos companheiros e amigos (as) doLaboratório de Imunologia do InstitutoClemente Ferreira: Dra. Giselle, Nadijane, Priscilla e Lucas

OBRIGADO