1

Cell autonomous pre-BCR signaling

Onishi and MelchersNature Immunology

Sept 2003

2

Stadien der B-Zellreifung Stadien der B-Zellreifung

D JH VH DJH

Schwere Ig-Kette (H)

VL JL

Leichte Ig-Kette (L)

SpätePro-B-Zelle

SpätePrä-B-Zelle B-ZelleFrühe Prä-B-

Zelle

Stamm-zelle

FrühePro-B-Zelle

3

Immunoglobulin-RezeptorenImmunoglobulin-Rezeptoren

H

Ig/

H

Ig/

VpreB

5

Prä-B-Zellrezeptor B-Zellrezeptor

IgL

4

Structure of associated VpreB and λ5 protein as proposed by Kudo et al. (6), the Ig-like portions of VpreB (β-strands 1–6 in red) and λ5 (Cλ5, β-strands 1–7, amino terminal pair β7-strand in blue) are assumed to fold as Ig domains. The figure is modified from that published in ref. 6.

5

Initiierung von Prä-B-Zellrezeptorsignalen?? Initiierung von Prä-B-Zellrezeptorsignalen??

Konstitutiv vom ER

Konstitutiv von der Zelloberfläche nach Selbstligation

Stromazell-Liganden induziert

ER ER

cytoplasm ?

Ligand

cytoplasm

ER

cytoplasm ?

?

ER

?

Konstitutiv von der

Zelloberfläche

6

7

8

Region to be deleted5´ 3´5´

3´

3´

5´ 3´ 5´

2 getrennte PCRs5´ 3´

3´ 5`

5´ 3´

3´ 5`

Mix, Anneal5´ 3´

3´ 5`

2. PCR

Deletion durch overlap extension

9

10

11

Immunpräzipitation von Oberflächen Prä-BZRImmunpräzipitation von Oberflächen Prä-BZR

X-Tyr-P

Rat anti-mousepreBCR (Fab)SL156

Protein A-sepharose

Mouse anti-rat kappa(MAR18.5)

Pre-B line

12

13

14

15

16

Proliferative Signale während der Entwicklung Proliferative Signale während der Entwicklung früher B-lymphoider Zellen früher B-lymphoider Zellen

Pro

KM-Stromazelle

ProPro

PräSCFc-kit

IL7Prä-BZR

IL7-R

VCAM-1

VLA-4

Prä-BZR-Ligand???

Proliferative Expansion und Differenzierung