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95 VI. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Síntesis y purificación del poli (ácido-γ-glutámico) La producción del γ-PGA se llevó a cabo utilizando las condiciones descritas en la parte experimental. Se obtuvo un rendimiento promedio correspondiente a 15 g/L de polímero por litro de medio de cultivo, en la producción de polímero crudo. En la literatura se reporta una producción de γ-PGA igual a 13.5 g/L [70] y 14.2 g/L de polímero crudo [71] en medios de cultivo donde se utilizó Bacillus licheniformis. La cantidad de γ-PGA obtenida en este trabajo es ligeramente mayor a las encontradas en la literatura, lo cual es muy satisfactorio. Una vez obtenido el γ-PGA crudo se llevó a cabo un proceso de purificación mediante diálisis, donde se obtuvo un porcentaje de rendimiento correspondiente a 73.3 %, este porcentaje corresponde a 11.03 g de polímero puro (conocido como γ-PGA puro), recuperados de 15 g de polímero crudo que se utilizó para la purificación. Determinación de la masa molecular del poli (ácido-γ-glutámico) En estudios previos realizados para el poli (ácido-γ-glutámico), por investigadores del Departamento de Biopolímeros del Centro de Investigación de Química Aplicada, se determinó la masa molecular mediante análisis por GPC y la viscosidad relativa del γ-PGA hidrolizado. Con los datos obtenidos se obtuvo la curva de

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VI. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Síntesis y purificación del poli (ácido-γ-glutámico)

La producción del γ-PGA se llevó a cabo utilizando las condiciones descritas en

la parte experimental. Se obtuvo un rendimiento promedio correspondiente a 15 g/L de

polímero por litro de medio de cultivo, en la producción de polímero crudo. En la

literatura se reporta una producción de γ-PGA igual a 13.5 g/L [70] y 14.2 g/L de

polímero crudo [71] en medios de cultivo donde se utilizó Bacillus licheniformis. La

cantidad de γ-PGA obtenida en este trabajo es ligeramente mayor a las encontradas en

la literatura, lo cual es muy satisfactorio.

Una vez obtenido el γ-PGA crudo se llevó a cabo un proceso de purificación

mediante diálisis, donde se obtuvo un porcentaje de rendimiento correspondiente a 73.3

%, este porcentaje corresponde a 11.03 g de polímero puro (conocido como γ-PGA

puro), recuperados de 15 g de polímero crudo que se utilizó para la purificación.

Determinación de la masa molecular del poli (ácido-γ-glutámico)

En estudios previos realizados para el poli (ácido-γ-glutámico), por

investigadores del Departamento de Biopolímeros del Centro de Investigación de

Química Aplicada, se determinó la masa molecular mediante análisis por GPC y la

viscosidad relativa del γ-PGA hidrolizado. Con los datos obtenidos se obtuvo la curva de

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calibración que se muestra en la figura 22. En el presente estudio se utilizó esta curva de

calibración para determinar de manera indirecta la masa molecular de las fracciones del

γ-PGA hidrolizado, mediante los valores de viscosidad relativa obtenidos para cada una

de estas fracciones de γ-PGA.

La masa molecular del γ-PGA obtenida en este proceso correspondió a 165,000

g/mol. Una vez conocida la masa molecular del γ-PGA se prosiguió con la preparación

de las redes semi-IPN´s basadas en PAAm/ γ-PGA.

Fd

Figura 22. Cdeterminada

Correlación a mediante G

entre el ln GPC.

de la viscoosidad y la masa moleecular del γ-

97

-PGA

98

Síntesis de las redes semi-interpenetradas de PAAm/γ-PGA

Se obtuvieron satisfactoriamente hidrogeles de redes semi-interpenetradas de

PAAm/γ-PGA de composición 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, el proceso de

formación de las redes semi-IPN´s se representa de manera más grafica en la figura 23.

En este esquema podemos observar que para que se forme las redes de PAAm/γ-PGA, la

adición del persulfato de amonio (iniciador) y el TEMET (catalizador) es esencial. El

iniciador actúa atacando los dobles enlaces de la acrilamida y la metilenbisacrilamida

para dar origen a la formación de la red de PAAm en presencia de las cadenas lineales

del γ-PGA. Las cadenas del γ-PGA quedan interpenetradas dentro de la red formada por

la PAAm, lo que da origen a la formación de los hidrogeles de redes semi-interpenetrda

basadas en PAAm/ γ-PGA. Un esquema de la reacción de formación de las redes de

PAAm se representa en la figura 24.

En general, los hidrogeles presentaron una apariencia transparente y blanda,

adquirieron la forma circular del molde en que se llevo a cabo la reacción de

polimerización y gelación con un diámetro de 1.6 cm, y un espesor de 0.3 cm. En la

figura 25 se presenta una fotografía de los hidrogeles después de las 48 hrs de tiempo de

lavado, se observa que los hidrogeles presentan un diámetro mayor que el del tamaño

original, esto es debido a la propie-

F

Figura 23. SSíntesis de hhidrogeles dee semi-IPNs

de PAAm/ γγ -PGA.

99

100

Figura 24. Reacción de formación de redes de PAAm.

F

p

c

Figura 25.

proceso de

composicion

Fotografia

lavado en

n PAAm/γ-P

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nizada. A l

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la derecha

PAAm/γ-P

de cada ge

PGA despue

el se muest

101

es del

tra la

102

propiedad de los hidrogeles de absorber una gran cantidad de agua en su estructura sin

disolverse. Podemos observar que dependiendo de la composición entre PAAm/γ-PGA,

el tamaño del diámetro del hidrogel también varía, lo cual esta fuertemente relacionado

con la capacidad de hinchamiento de cada uno de los hidrogeles, es asi como los

hidrogeles con mayor contenido de γ-PGA presentan un mayor carater hidrofílico, por lo

que retienen una fracción de agua más representativa en su extructura y por tanto,

presentan un mayor diámetro.

Estudio de la interpenetración del Poli (ácido-γ-glutamico) dentro de la red semi-

interpenetrada, mediante microscopia óptica

Para llevar a cabo el análisis de las redes semi-IPN´s mediante microscopia

óptica, fue necesario la tinción previa de los hidrogeles con el colorante azul alcian. El

colorante azul de alcian, es un colorante catiónico que tiene la capacidad de unirse a

compuestos sulfonados o carboxilados, debido a que es una macromolecula cargada

positivamente por lo que presenta una gran afinidad a unirse a moleculas cargadas

negativamente [72]. Con base en lo anterior es de esperarse que la retención del

colorante en los hidrogeles de PAAm sometidos al proceso de tinción no se presente,

debido a que la poliacrilamida no tiene los grupos carboxilos requeridos para

interacionar con este colorante, en consecuencia con lo explicado, el hidrogel de PAAm

continuó incoloro en el ánalisis de tinción realizado. En contraste los hidrogeles de

103

PAAm/γ-PGA, tuvieron la capacidad de retener el colorante, por lo que se tiñeron de

color azul. Estos resultados se muestran en la figura 26. Podemos inferir que la retención

del colorante dentro del hidrogel con γ-PGA es atribuido a la atracción electrostática

que existe entre el colorante y γ-PGA, debido a las grupos carboxilos presentes en el γ-

PGA, como se muestra de manera simple en la figura 27.

104

Figura 26. Fotografia de los hidrogeles de PAAm y PAAm/ γ-PGA.

105

Figura 27. Representacion de la interaccion del γ-PGA con el colorante azul alcian.

106

Determinación de amoxicilina liberada por las redes semi-IPN´s con respecto al

tiempo

Para determinar la concentración del antibiótico liberado con respecto al tiempo,

se construyó una curva de calibración a partir de valores conocidos de soluciones

concentradas de amoxicilina, la cual se muestra en la figura 28. La recta de ajuste

presenta un valor de correlación de 0.9952, lo que nos indica una alta linealidad y

confiabilidad para la determinación de la cantidad de amoxicilina liberada durante los

estudios de cinética.

Efecto del pH sobre la cinética de liberación de amoxicilina

Las cinéticas de liberación en soluciones buffer a diferentes pH se realizaron

utilizando buffer´s de fosfato y citrato como se detalló en la parte experimental, los

pH´s en los que se realizó el estudio fueron 3 y 7.2 debido a que coincide con los pH

fisiológicos involucrados en el proceso digestivo. La absorción de fármacos o

antibióticos de administración vía oral ocurre principalmente en el intestino delgado el

cual presenta un pH 7.2. Una parte de los antibióticos también es metabolizada a través

del estómago, el cual posee un pH 3. Con el estudio en estos dos pH´s, tratamos de

igualar in vitro los lugares del cuerpo humano donde se inicia la liberación del

antibiótico.

F

o

Figura 28. C

onda.

Curva de callibración de amoxicilinaa en soluciónn acuosa. λ es la longitu

107

ud de

108

Liberación de amoxicilina a pH 3

En la gráfica de la figura 29, se muestran las cinéticas de liberación a pH 3 y

25°C de amoxicilina a partir de los hidrogeles con una composición de PAAm/γ-PGA

correspondiente a 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20. Se observa que a medida que

transcurre el tiempo de contacto con la solución buffer a pH 3 la rapidez de liberación

del antibiótico es mayor en los primeros minutos, haciéndose más lenta con forme

trascurre el tiempo hasta llegar al equilibrio alrededor de los 240 minutos. En la gráfica

también podemos observar claramente que este tipo de comportamiento se repite para

las 5 composiciones estudiadas sin embargo también es notorio que la cantidad del

antibiótico liberado varía con respecto a la composición del hidrogel quedando los

porcentajes de liberación de la siguiente manera: 32.7% para los hidrogeles de 100/0

PAAm/γ-PGA, este porcentaje corresponde a 311.52 mg del antibiótico, mientras que

los hidrogeles con 95/5 de composición, liberan el 39.46% que corresponde a 372.80

mg del antibiótico, los hidrogeles de 90/10 liberaron 44.32% de su contenido lo cual

corresponde a 418.82 mg de amoxicilina mientras que la liberación en los hidrogeles de

85/15 aumentó a un 48.98% que corresponden a 462.86 mg del antibiótico y por último

los hidrogeles con composición de 80/20 PAAm/γ-PGA liberaron 518.52 mg que

corresponden a un 54.87 % del contenido de amoxicilina, una gráfica mas ilustrativa de

estos porcentajes se muestra en la figura 30, en dicha figura es claro observar que a

medida que va

109

Figura 29. Cinéticas de liberación de amoxicilina correspondientes a hidrogeles de

PAAm/γ-PGA con composición de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, en soluciones

buffer a pH 3.

110

variando la composición, a favor del incremento de γ-PGA, la concentración de

amoxicilina liberada aumenta paulatinamente, esto también se observa de manera más

grafica en la figura 29, el aumento en la liberación con respecto al mayor contenido de

γ-PGA se puede explicar debido al carácter hidrofílico de este polímero, ya que en su

estructura posee grupos carboxilos altamente atrayentes de moléculas de agua, lo cual

resulta en un mayor grado de hidratación del hidrogel ó hinchamiento, y a la vez

ocasiona más libertad de movimiento en las cadenas que forman la red y por tanto una

mayor liberación del antibiótico que estaba retenido en la estructura del hidrogel.

Podemos deducir de estos resultados que aparentemente hasta este punto las redes con

una composición de 80/20 PAAm/γ-PGA presentan ventajas con respecto a las otras 4

composiciones, como una liberación más eficiente.

111

Figura 30. Porcentaje máximo en equilibrio de amoxicilina liberada por los hidrogeles

de PAAm/γ-PGA con diferentes composiciones a 25°C y pH 3.

112

Liberación de amoxicilina a pH 7.2

En la gráfica de la figura 31, se muestran las cinéticas de liberación a pH 7.2 de

las redes semi-IPN´s con composición de PAAm/γ-PGA 100/0, 95/5, 90/10, 85/15,

80/20, en dicha figura podemos observar un comportamiento muy similar al que se

presenta a pH 3 ya que a medida que transcurre el tiempo de contacto de los hidrogeles

con la solución buffer a pH 7.2 la cantidad de amoxicilina liberada aumenta

gradualmente, siendo mayor en los primeros minutos y haciéndose más lenta con forme

trascurre el tiempo hasta llegar al equilibrio alrededor de los 240 min. Este tipo de

comportamiento se repite para las 5 composiciones analizadas, también es notorio que la

cantidad final del antibiótico liberado varia con respecto a cada composición, quedando

los porcentajes de liberación de la siguiente manera, 40.61% para los hidrogeles de

100/0 PAAm/γ-PGA, este porcentaje corresponde a 390.14 mg de amoxicilina, 49.60%

para los hidrogeles de 95/5 que corresponden a una liberación de 468..81 mg de

amoxicilina, los hidrogeles de 90/10 liberaron 61.80% de su contenido lo cual

corresponde a 584.02 mg de amoxicilina, mientras que la liberación en los hidrogeles de

85/15 aumentó a un 65.21% que corresponden a 619.23 mg del antibiótico y por último

los hidrogeles con composición de 80/20 PAAm/γ-PGA liberaron 656.08 mg que

corresponden a un 70.17 % del contenido de amoxicilina, una grafica con los porcentajes

de amoxicilina liberada para cada uno de los hidrogeles se muestran en la figura 32, en

dicha grafica también se puede observar que a medida

113

Figura 31. Cinéticas de liberación de amoxicilina correspondientes a hidrogeles de

PAAm/γ-PGA con composición de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15 y 80/20, en soluciones

buffer a pH 7.2 a 25°C.

114

Figura 32. Porcentaje máximo en equilibrio de amoxicilina liberada por los hidrogeles

de PAAm/γ-PGA con composición de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20 a pH 7.2 y 25

°C.

115

que se incremento el contenido de γ-PGA, la concentración de amoxicilina liberada

también aumenta, este comportamiento también se puede comparar en la figura 31 que

nos muestra la liberación del antibiótico con respecto al tiempo, para cada uno de las

composiciones de hidrogeles. Podemos deducir de estos resultados que para este pH los

hidrogeles de composición 80/20 PAAm/γ-PGA son la mejor opción para la liberación

de amoxicilina, ya que muestran una liberación más eficiente.

Comparación de la liberación de amoxicilina a pH 3 y 7.2

En la figura 33 podemos observar una grafica de comparación entre ambos pH,

es notoria que a medida que aumenta el pH, se da una mayor liberación del antibiótico,

esto se puede explicar debido al carácter iónico del γ-PGA; a un mayor valor de pH los

grupos carboxilos que forman parte de la cadena del γ-PGA se encuentran ionizados

(cargados negativamente) lo que ocasiona una repulsión electrostáticas entre las cadenas

de γ-PGA, dando como resultado una mayor liberación de amoxicilina a pH 7.2 con

respecto pH 3.

116

Figura 33. Comparación de la liberación en condiciones de equilibrio de amoxicilina a

pH 3 y 7.2.

117

Efecto de la temperatura sobre las cinéticas de liberación de amoxicilina

Las cinéticas de liberación en soluciones buffer a pH 3 y 7.2, mostradas en los

resultados anteriores nos revelan que las mejores condiciones de liberación del

antibiótico con respecto a este parámetro es el pH de 7.2, por lo cual se decidió hacer el

análisis del efecto de la temperatura sobre la cinética de liberación a este pH, lo cual es

muy satisfactorio, ya que se pretende que la mayor liberación de amoxicilina se dé en el

intestino delgado, que es donde se lleva a cabo la absorción de la mayor parte de los

nutrientes y así mismo de los medicamentos, el intestino delgado presenta un pH 7.2.

Por estos dos motivos, para el estudio del efecto que tiene la temperatura en la liberación

de amoxicilina, se utilizó una solución buffer de pH 7.2 como medio de liberación,

encontrándose los siguientes resultados.

Cinéticas de liberación a temperatura de 25°C

El comportamiento de liberación de los hidrogeles con respecto al tiempo es

muy similar a lo que se presenta en el análisis de pH´s ya que la cantidad de amoxicilina

liberada aumenta rápidamente en los primeros minutos, volviéndose más lenta con

forme trascurre el tiempo hasta llegar al equilibrio alrededor de las 2 horas. En la gráfica

de la figura 31, se muestran las cinéticas de liberación a 25 °C y pH 7.2 de los hidrogeles

118

con composición de PAAm/γ-PGA 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, en dicha figura

podemos observar que este tipo de comportamiento se repite para las 5 composiciones

analizadas, también es notorio que la cantidad del antibiótico liberado varia con respecto

a cada composición, quedando los porcentajes de liberación de la siguiente manera,

40.61% para los hidrogeles de 100/0 PAAm/γ-PGA, este porcentaje corresponde a

390.14 mg de amoxicilina, 49.60% para los hidrogeles de 95/5 que corresponden a una

liberación de 468.81 mg de amoxicilina, los hidrogeles de 90/10 liberaron 61.80% de su

contenido lo cual corresponde a 584.02 mg de amoxicilina, mientras que la liberación en

los hidrogeles de 85/15 aumento a un 65.21% que corresponden a 619.23 mg del

antibiótico y por último los hidrogeles con composición de 80/20 PAAm/γ-PGA

liberaron 656.08 mg que corresponden a un 70.17 % del contenido de amoxicilina, una

grafica con los porcentajes liberados para cada composición de hidrogeles se muestra en

la figura 32, en dicha grafica también se puede observar que a medida que se incrementó

el contenido de γ-PGA, la concentración de amoxicilina liberada también aumenta, este

comportamiento también se puede comparar en la figura 31 que nos muestra la

liberación del antibiótico con respecto al tiempo, para cada uno de las composiciones de

hidrogeles.

119

Cinéticas de liberación a temperatura de 37 °C

El análisis de la liberación de amoxicilina a 37° C reveló datos muy interesantes

ya que el porcentaje de antibiótico liberado fue mucho mayor con respecto a la

cantidad liberada a 25° C, lo cual es muy satisfactorio debido a que esta temperatura

corresponde a la temperatura del cuerpo humano, que es el sitio donde se pretende

utilizar este sistema de liberación controlada, el comportamiento de liberación con

respecto al tiempo fue similar como el presentado a 25° C, para todos los hidrogeles,

este comportamiento se presenta en la figura 34, los porcentajes del antibiótico liberado

con respecto a cada composición del hidrogel se muestran en la figura 35, en dicha

figura podemos ver claramente que a medida que aumenta el contenido de γ-PGA

también aumenta el porcentaje de liberación, siendo los hidrogeles de composición

80/20 PAAm/γ-PGA los que muestran un mejor comportamiento liberando el 96.85%

de su contenido lo cual corresponde a 905.54 mg de amoxicilina, los hidrogeles de

composición 85/15 liberaron 838.22 mg, lo cual corresponde a un 89.65 % de su

contenido, las redes interpenetradas de composición 90/10 liberaron 83.65% de la

amoxicilina que contenía, lo cual corresponde a 790.42 mg mientras que los hidrogeles

de composición 95/5 liberaron el 78.56% de su contenido lo que corresponde a 742.39

mg del antibiótico que contenía y por último las redes con composición 100/0 PAAm/γ-

PGA liberaron solamente el 72.76% de su contenido que corresponde a 698.49 mg del

antibiótico, con estos porcentajes de liberación y su correspondiente en mg podemos

concluir que las redes interpenetradas con composición de 80/20 PAAm/γ-PGA son la

mejor

120

Figura 34. Cinéticas de liberación de amoxicilina correspondientes a hidrogeles de

PAAm/γ-PGA con composición de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, a 37 °C y pH 7.2.

121

Figura 35. Porcentaje máximo en equilibrio de amoxicilina liberada por los hidrogeles

de PAAm/γ-PGA con composición de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, a 37 ° y pH 7.2.

122

opción para la liberación del antibiótico, ya que liberan un mayor porcentaje de

contenido con respecto a las otras composiciones.

Cinéticas de liberación a temperatura de 45 °C

Las cinéticas de liberación del antibiótico a 45 °C, son muy similares a las que

encontramos a 37 °C para todas las composiciones analizadas. La cinética de liberación

para las composiciones PAAm/γ-PGA de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, se muestra

en la figura 36. Los porcentajes de fármaco liberado a 45 °C con respecto a cada

composición del hidrogel se muestran en la figura 37, en dicha figura podemos ver

claramente que a medida que aumenta el contenido de γ-PGA también aumenta el

porcentaje de liberación del antibiótico al igual que en los demás parámetros analizados,

la liberación con respecto a cada una de las composiciones queda de la siguiente manera:

los hidrogeles de composición 100/0 PAAm/γ-PGA liberaron 78.06% de su contenido

que corresponde a 725.95 mg del antibiótico, mientras que los geles con composición

95/5 liberaron el 83.06% de su contenido lo que corresponde a 772.45 mg del

antibiótico en su estructura, las redes con composición de 90/10 PAAm/γ-PGA

liberaron 87.52% de amoxicilina que corresponden a 813.93 mg, los hidrogeles de

composición 85/15 liberaron 94.64% que corresponde a 880.15 mg, mientras que los

hidrogeles que obtuvieron una mejor cinética de liberación fueron los geles de

composición 80/20, los cuales liberaron 98.23 % correspondientes a 923.53 mg.

123

Figura 36. Cinéticas de liberación de amoxicilina correspondientes a hidrogeles de

PAAm/γ-PGA con composición de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, a 45 °C y pH 7.2.

124

Figura 37. Porcentaje máximo en equilibrio de amoxicilina liberada por los hidrogeles

de PAAm/γ-PGA con composición de 100/0, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, a 25 °C y pH

7.2 a 45 °C.

125

De este resultado podemos corroborar que la mejor composicion de PAAm/γ-

PGA para la liberación de amoxicilina resulta ser la de 80/20, ya que es la que libero

casi la totalidad de su contenido.

Haciendo un análisis de comparación entre las tres temperaturas podemos

presentar la gráfica de la figura 38, donde podemos ver las curvas de liberación del

hidrogel de PAAm/γ-PGA con composición 80/20 a 25, 37 y 45°C, ya que en todas las

cinéticas de liberación estudiadas fue el hidrogel que mostró el mejor comportamiento,

en esta gráfica podemos observar claramente que al aumentar la temperatura de

liberación, aumenta la cantidad de amoxicilina liberada, además podemos concluir que

la mejor temperatura del medio de liberación es 45 °C, ya que a dicha temperatura se da

un mayor porcentaje de liberación, sin embargo el sistema de liberación controlada de

amoxicilina, basados en redes semi-interpenetradas de poli(acrilamida)/Poli(acido-γ-

glutámico) está diseñado para trabajar a las condiciones fisiológicas del cuerpo humano,

es decir pH 7.2 y 37 °C. Hemos demostrado en esta investigación que el pH optimo para

la liberación de este antibiótico es 7.2, y con respecto a la temperatura de 37 °C

comparada con la de 45 °C no se presenta mucha variación en la cantidad del porcentaje

liberado, ya que es prácticamente el mismo, la diferencia radica en la velocidad de

liberación, es decir el tiempo en el que los hidrogeles alcanzan el equilibrio, en el caso

de la temperatura de 37 °C el equilibrio se alcanza alrededor de 240 min, mientras

que a 45 °C el equilibrio se alcanza alrededor de 120 min, esto es la mitad del tiempo

como podemos observarlo en la figura 38. Este resultado también resulta ser favorable

ya que la amoxicilina es un antibiótico que actúa inhibiendo el

126

Figura 38. Liberación de amoxicilina de hidrogeles con la misma composición de

PAAm/γ-PGA de 80/20 a 25, 37, 45 °C a pH 7.2.

127

crecimiento de bacterias patógenas en alguna parte del organismo, por lo que al

presentarse una infección de este tipo, que generalmente viene acompañada de un

aumento de la temperatura corporal, podemos estar seguros que el fármaco, en este caso

el antibiótico comenzaría a actuar de manera más eficaz en un periodo de tiempo más

corto lo que ayudaría al cuerpo humano a combatir rápidamente ese aumento de

temperatura ocasionado por la invasión del microorganismo patógeno.

Estudios de biocompatibilidad

El estudio de biocompatibilidad de las redes semi-interpenetradas mostró que

para los hidrogeles de PAAm/γ-PGA con una composición de 80/20, en un lapso de 48

hrs los principales parámetros bioquímicos del suero humano como: Glucosa, Urea,

Creatinina, Acido Úrico, Colesterol y Triglicéridos no se ven afectados, lo cual es muy

satisfactorio ya que estos resultados nos indican que dicho sistema se puede utilizar para

la liberación controlada de amoxicilina a través de la vía oral. Los hidrogeles se

incubaron a una temperatura de 8°C y los datos del estudio son un promedio de las 5

muestras de suero con tres repeticiones por cada variable. Los valores obtenidos se

reportan en la Tabla 8, en dicha tabla encontramos una desviación estándar con respecto

al valor normal a un tiempo cero de permanencia de las muestras del hidrogel en

contacto con el suero sanguíneo, así como a las 24 y 48 hrs.

De la figura 39 a la 44 encontramos las graficas para cada parámetro bioquímico

con los valores obtenidos por cada una de las 5 muestras a un tiempo 0, 24, y 48 hrs de

contacto con el

128

Tabla 8. Resultados del estudio de biocompatibilidad de muestras de hidrogeles con

composición 80/20 PAAm/γ-PGA a un tiempo 0, 24 y 48 hrs de contacto con suero

humano.

F

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132

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133

Los cálculos de los parámetros cinéticos con base en el modelo citado

anteriormente se muestran en la tabla 9, de acuerdo a lo anterior, en la comparación de

pH 3 y 7.2 los valores de n se sitúan entre 0,41 y 0,49 lo cual indica que el proceso de

liberación del antibiótico es del tipo anómalo, es decir controlada por la difusión de la

amóxicilina desde las redes semi-IPN´s y la relajación de las cadenas poliméricas de los

hidrogeles. Los resultados obtenidos muestran que el hidrogel utilizado retarda la

liberación del antibiótico pues no se libera instantáneamente en medio acuoso, como se

muestra en la Figura 28 a pH 3 y en la figura 30 a pH 7.2, la amóxicilina difunde

completamente después de 240 min de inmersión. Esto sugiere que los hidrogeles de

PAAm/γ-PGA pueden ser usados como sistemas de liberación de amóxicilina en este

intervalo de tiempo. Al analizar los resultados de liberación de amóxicilina a diferentes

temperaturas, de acuerdo a este modelo, podemos presentar la tabla 10, ahí podemos ver

que los valores de n que nos indican el orden de liberación, están entre un intervalo de

0.41 y 0.44, lo cual sugiere que se trata de una difusión anómala debida a los dos

mecanismos antes mencionados.

El parámetro “k” se incrementa con el aumento de pH, la temperatura, y el

incremento de la cantidad relativa de γ-PGA en el hidrogel. Esto es consistente con la

discusión de las curvas de cinética de liberación a diferentes pH´s y temperaturas. Por

otra parte, el parámetro "n" varió en un rango de 0.41-0.49 y disminuyó a medida que el

pH se incrementó, mientras que no observa tendencia aparente con respecto a la

temperatura y la cantidad relativa de γ-PGA en los hidrogeles [74, 75].

Tabla 9. Valores de llos parámetrros de liberac

ción de amoxicilina a diferentes pH´

134

´s.

T

t

Tabla 10.

temperaturas

Valores de

s.

los parámmetros de liberación dde amoxicilina a difer

135

rentes