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  • Universidade de Braslia

    Faculdade de Medicina

    Programa de Ps Graduao em Patologia Molecular

    IELER FERREIRA RIBEIRO

    Avaliao das interaes entre a suplementao antioxidante com o leo de pequi (Caryocar brasiliense Camb.) e os polimorfismos nos genes da -actinina-3 (ACTN-3), eritropoetina (EPO) e seu receptor (EPOR) nos resultados do hemograma, marcadores bioqumicos e peroxidao lipdica, em corredores de rua

    Braslia-DF

    2013

  • IELER FERREIRA RIBEIRO

    Avaliao das interaes entre a suplementao antioxidante com o leo de pequi (Caryocar brasiliense Camb.) e os polimorfismos nos genes da -actinina-3 (ACTN-3), eritropoetina (EPO) e seu receptor (EPOR) nos resultados do hemograma, marcadores bioqumicos e peroxidao lipdica, em corredores de rua

    Orientador: Prof. Dr. Cesar Koppe Gisolia

    Coorientadora: Profa Dra.Ana Luisa Miranda-Vilela

    Braslia-DF

    2013

    Dissertao apresentada para obteno de ttulo de mestre pelo Programa de Ps-Graduao em Patologia Molecular da Faculdade de Medicina, Universidade de Braslia.

  • IELER FERREIRA RIBEIRO

    Avaliao das interaes entre a suplementao antioxidante com o leo de pequi (Caryocar brasiliense Camb.) e os polimorfismos nos genes da -actinina-3 (ACTN-3), eritropoetina (EPO) e seu receptor (EPOR) nos resultados do hemograma, marcadores bioqumicos e peroxidao lipdica, em corredores de rua

    BANCA EXAMINADORA:

    __________________________ Profo Dr. Luzitano Brando Ferreira

    Centro Universitrio de Braslia- UniCEUB

    ________________________ Profo Dr. Felipe Saldanha de Arajo

    Faculdade de Cincias da Sade Universidade de Braslia

    _________________________ Profo Dr. Cesar Koppe Grisolia

    Departamento de Gentica e Morfologia Universidade de Braslia

    Orientador

    Braslia

    2013

  • Dedico aos meus pais,

    exemplos de vida e unio.

  • AGRADECIMENTOS

    Universidade de Braslia, em especial ao Programa de Ps-Graduao em

    Patologia Molecular, pela oportunidade de ingressar-me no curso de mestrado.

    Ao CNPq pela bolsa de pesquisa concedida desde o incio do curso, o que me

    permitiu dedicao exclusiva ao trabalho.

    Aos professores do Programa de Ps-Graduao em Patologia Molecular,

    Faculdade de Medicina, Universidade de Braslia, e demais programas pelos

    ensinamentos.

    Ao Laboratrio de Gentica Humana, Universidade de Braslia, por todo o

    suporte material e fsico para realizao dos procedimentos de genotipagem, em

    especial professora Maria Nazar Klautau Guimares, que me deu toda liberdade

    para conduzir esta pesquisa.

    Ao Laboratrio de Estresse Oxidativo, Universidade de Braslia, pelo

    empenho e esclarecimentos quanto anlise do perfil antioxidante das amostras,

    especialmente aluna de mestrado Viviane Yllena e professora lida.

    Ao meu orientador Dr. Cesar Koppe Grisolia por ter acreditado em mim desde

    o primeiro momento, quando o procurei para estagiar (na poca da graduao), pelo

    carinho paterno, pacincia, amizade e ensinamentos durante todos esses anos de

    convivncia.

    A minha amiga e coorientadora Dra. Ana Luisa Miranda-Vilela por ter

    permitido e confiado que eu poderia dar continuidade aos estudos de genotipagem

    com os atletas, alm de ter dado total assistncia em todas as etapas da pesquisa.

    Muito obrigada por tudo, Aninha!

    Ao estatstico Alexandre, pelas valiosas explicaes para a compreenso dos

    diversos testes e dados estatsticos gerados neste trabalho.

    Aos muitos colaboradores do Departamento de Gentica e Morfologia

    (Adriana, Sr. Antnio, Sr. Gilberto, Janana, Silvinha, Dona Zlia, etc) pelo carinho e

    suporte logstico dirio.

    Aos meus amigos do Laboratrio de Gentica Toxicolgica, Universidade de

    Braslia (Blin, Franciele, Graciana, Igor, Ingrid Freire, Ingrid Reale, Jos Filho,

    Karina, Lilian Barbosa, Maria Luiza, Mariana Roll, Miguel, Paolin, Thas, Vincius

    Natan e Wnia) por permitirem os muitos momentos descontrao, pela ajudinha

  • na hora da dificuldade e pelos deliciosos lanchinhos ao trmino dos experimentos.

    Obrigada por tornarem o nosso ambiente de trabalho um lugar acolhedor e divertido!

    A minha amiga Blin, pela pacincia e empenho nessa fase final da

    dissertao e por me dar fora para continuar. Serei sempre grata, amiga.

    As minhas amigas Carinne, Graciana, Lilian, Ingrid, Paolin Maria Luiza e

    Mariana, pelo carinho, pelos conselhos por estarem sempre dispostas a me

    socorrerem nos momentos de sufoco.

    Aos meus amigos, em especial a Danielle Alexandre, Jos Renato e Leilah,

    por torcerem por mim.

    Ao Ricardo, pelo apoio e incentivo para que eu ingressasse no mestrado e

    pela amizade, compreenso e carinho que tem demonstrado por mim.

    Aos meus amados pais, dona Luzia e Seu Idelberto, e irmos, Juninho,

    Maninha e Ilber, por formarem essa famlia unida e por estarem comigo sempre,

    por me apoiarem e acreditarem nas minhas decises. Amo-os.

    Por todos aqueles que me ajudaram de alguma forma e no foram citados

    diretamente aqui.

    A DEUS, pelas lies e experincias vividas; por me guiar e proteger; por tudo

    que conquistei e por cada momento que recebo.

  • No tenha medo de pensar diferente dos outros,

    tenha medo de pensar igual e descobrir que todos esto errados!

    Ea de Queiroz

  • LISTA DAS FIGURAS

    Figura 1 Origem e respostas celulares s Espcies Reativas............................25

    Figura 2 Mecanismo de ao dos antioxidantes enzimticos SOD, catalase e

    GPx.............................................................................................................................27

    Figura 3 Principais reaes ocorridas durante o processo de peroxidao

    lipdica........................................................................................................................28

    Figura 4 Imagens do fruto pequi (Caryocar brasiliense Camb.)..........................31

    Figura 5 Esquema da organizao molecular da protena - actinina e a sua

    localizao..................................................................................................................34

    Figura 6 Estrutura das -actinina-2 e -actinina-3.............................................36

    Figura 7 Representao esquemtica da regulao da eritropoiese..................39

    Figura 8 Genotipagem PCR-RFLP do gene ACTN-3 em gel de poliacrilamida a

    10%............................................................................................................................50

    Figura 9 Distribuio das freqncias genotpicas dos genes da EPO e da

    ACTN-3 de acordo com o gnero do atleta...............................................................71

  • LISTA DE QUADRO

    Quadro 1 Composio lipdica do leo do pequi utilizado para produzir as

    cpsulas, pela anlise de cromatografia gasosa........................................................43

    Quadro 2 Concentraes dos reagentes para o preparo das reaes de

    amplificaes dos genes da EPO e ACTN-3, para um volume final 25 L por

    amostra.......................................................................................................................48

    Quadro 3 Programas adotados para amplificao dos genes da EPO e ACTN-3

    pelo termociclador MJ Research PTC-100 Programmable Thermal Cycler

    Control.....................................................................................................................49

    Quadro 4 Sequncias de primers (iniciadores) dos genes EPO, EPOR e ACTN-3

    adotados na amplificao...........................................................................................51

  • LISTA DE TABELA

    Tabela 1 Resultados do clculo do tamanho amostral mnimo dos dados

    quantitativos obtidos antes e aps o pequi para o grupo total, por sexo, faixa etria e

    distncia percorrida....................................................................................................56

    Tabela 2 Distribuio geral dos atletas de acordo com a faixa etria e percurso

    percorrido...................................................................................................................57

    Tabela 3 Distribuio dos atletas de acordo o gnero, faixa etria e percurso

    percorrido...................................................................................................................57

    Tabela 4 Valores totais de CK, AST, ALT, PCR, PCR-us e teste Tbars de acordo

    com o gnero dos corredores de rua do Distrito Federal antes e depois da

    suplementao com leo de pequi.............................................................................60

    Tabela 5 Hemograma total de acordo com o gnero dos corredores de rua do

    Distrito Federal antes e depois da suplementao com leo de pequi. (A)

    Eritrograma; (B) Leucograma; (C) Plaquetograma.....................................................61

    Tabela 6 Valores totais de CK, AST, ALT, PCR, PCR-us e teste Tbars dos

    atletas divididos em grupos por faixa etria antes e depois da suplementao com

    leo de pequi..............................................................................................................62

    Tabela 7 Hemograma por grupos etrios dos atletas antes e depois da

    suplementao com leo de pequi. (A) Eritrograma; (B) Leucograma; (C)

    Plaquetograma. .........................................................................................................63

    Tabela 8 Valores de CK, AST, ALT, PCR,