TESIS - digilib.uns.ac.id · kesempatan untuk mengikuti program Magister di Program Pascasarjana...

of 16/16
i PERBEDAAN DEKSMEDETOMIDIN DAN KLONIDIN TERHADAP KADAR SERUM TNF-α PADA TIKUS WISTAR DENGAN SEPSIS POLIMIKROBIAL TESIS Disusun untuk memenuhi sebagian persyaratan mencapai derajat Magister Program Studi Kedokteran Keluarga Oleh Henri Dumas S501102026 PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2015
  • date post

    03-Mar-2019
  • Category

    Documents

  • view

    215
  • download

    0

Embed Size (px)

Transcript of TESIS - digilib.uns.ac.id · kesempatan untuk mengikuti program Magister di Program Pascasarjana...

i

PERBEDAAN DEKSMEDETOMIDIN DAN KLONIDIN TERHADAP

KADAR SERUM TNF- PADA TIKUS WISTAR

DENGAN SEPSIS POLIMIKROBIAL

TESIS

Disusun untuk memenuhi sebagian persyaratan mencapai derajat Magister

Program Studi Kedokteran Keluarga

Oleh

Henri Dumas

S501102026

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

2015

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat TUHAN Yang Maha Esa atas petunjuk dan

rahmat serta karunia yang diberikan, sehingga penulis dapat menyelesaikan Tesis dengan

judul Perbedaan Deksmedetomidin dan Klonidin Terhadap Kadar Serum TNF- pada

Tikus Wistar dengan Sepsis Polimikrobial.

Penulis menyadari bahwa karya tulis ini jauh dari sempurna, oleh karena itu, penulis

mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun. Pada kesempatan ini dengan segala

kerendahan hati ijinkan penulis untuk mengucapkan terima kasih kepada seluruh pihak yang

telah banyak membantu dalam proses penyelesaian tesis ini,

1. Prof. Dr. Ravik Karsidi, Drs. MS selaku Rektor Universitas Sebelas Maret Surakarta.

2. Prof. Dr. M. Furqon Hidayatullah, M.Pd selaku Direktur Program Pascasarjana

Universitas Sebelas Maret Surakarta.

3. Prof. Dr. Hartono, dr, M.Si., selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas

Maret Surakarta.

4. Prof. Dr. A.A. Subijanto, dr., M.S, selaku Ketua Program Studi Kedokteran Keluarga

Minat Utama Ilmu Biomedik Universitas Sebelas Maret.

5. Dr. Sugiarto, dr.,Sp.PD, KEMD-FINASIM selaku pembimbing dan penguji, terima kasih

atas waktu dan bimbingan yang diberikan dalam rangka penyusunan tesis ini.

6. Heri Dwi Purnomo, dr., MKes.,Sp.An, selaku pembimbing dan penguji, terima kasih atas

waktu, bimbingan dan arahan yang diberikan dalam rangka penyusunan tesis ini.

7. Dr. Hari Wujoso, dr, Sp.F., MM, selaku pembimbing statistik dan penguji, terima kasih

atas waktu dan bimbingan yang diberikan dalam rangka penyusunan tesis ini.

8. Eko Setijanto, dr., M.Si.Med., SpAn, KIC, selaku penguji, terima kasih atas waktu,

bimbingan dan arahan yang diberikan dalam rangka penyusunan tesis ini.

9. Purwoko, dr, Sp.An., KAKV, KAO selaku Ketua Program Studi Pendidikan Dokter

Spesialis Anestesi dan Terapi Intensif FK UNS/RSDM. Terima kasih telah memberikan

kesempatan dan dukungan untuk mengikuti program Magister di Program Pascasarjana

Universitas Sebelas Maret.

10. Sugeng Budi Santosa dr, Sp.An., KMN selaku Kepala SMF Anestesi dan Terapi Intensif

FK UNS/RSDM dan selaku pembimbing substansi, atas kesediaannya meluangkan waktu

dan memberikan masukan dalam penyusunan tesis ini dan yang telah memberikan

v

kesempatan untuk mengikuti program Magister di Program Pascasarjana Universitas

Sebelas Maret

11. Guru-guruku yang tidak pernah lelah mengajari, dan memberi kesempatan penulis

untuk menimba ilmu di IK Anestesiologi dan Terapi Intensif FK UNS.

12. Kedua orang tua penulis, Bapak Suyitno dan Ibu Setia Rahayu yang sangat penulis

hormati dan sayangi yang selalu memberi dukungan, bantuan, dan perhatianya.

13. Istri tercinta, drg. Linda Diana, yang tak pernah lelah memberi dukungan, doa, cinta,

pengertian, dan perhatiannya, selama penulis menjalani pendidikan, serta anakku Rhein

Helena Hua dan Leon Nicholas Xia, yang menjadikan hidup lebih berwarna.

14. Teman-teman Residen Anestesiologi dan Terapi Intensif yang memberikan perhatian dan

bantuan pada penulis dalam menyelesaikan karya tulis ini.

Surakarta, September 2015

Penulis,

Henri Dumas

vi

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL.........................................................................................

LEMBAR PENGESAHAN PEMBIMBING...................................................

LEMBAR PENGESAHAN PENGUJI............................................................

PERNYATAAN KEASLIAN TULISAN............................................................

KATA PENGANTAR......................................................................................

DAFTAR ISI.....................................................................................................

DAFTAR GAMBAR........................................................................................

DAFTAR TABEL.

DAFTAR LAMPIRAN.

DAFTAR SINGKATAN..................................................................................

ABSTRAK

ABSTRACT

BAB I. PENDAHULUAN

A. Latar belakang masalah.............................................................................

B. Rumusan masalah.......................................................................................

C. Tujuan penelitian........................................................................................

D. Manfaat penelitian......................................................................................

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Kajian Teori................................................................................................

1. Sepsis.................................................................................

a. Definisi.............................................................

b. Etiologi.....................................................

c. Patogenesis.......................................

d. Jalur sinyal tranduksi TLR..............................................................

e. Manifestasi klinis.

2. Tumor Necrosis Alpha (TNF-)..........................................................

a. Definisi...............................................................

1) Efek TNF sebagai sitotoksik......................................................

2) Efek TNF- pada inflamasi........................................................

3) Efek TNF- pada hematopoeic..

4) Efek TNF- pada imunologi...

3. Deksmedetomidin...............................................................................

a. Fisiologi adrenoseptor -2..............................................................

b. Farmakokinetik...............................................................................

i

ii

iii

iv

v

vii

x

xi

xii

xiii

xv

xvi

1

1

3

3

4

5

5

5

5

6

6

8

9

10

10

13

13

14

14

14

15

17

vii

c. Farmakodinamik.............................................................................

d. Mekanisme aksi..............................................................................

4. Klonidin

a. Farmakologi.

b. Penggunaan di bidang anestesi

1) Analgesia

2) Medikasi pre anestesi.

3) Memperpanjang efek regional anestesi.

4) Perlindungan terhadap iskemia miokard perioperative

c. Efek terhadap system imun

5. Metode induksi sepsis

a. Cecal inoculum.

b. Cecal ligation and puncture..

c. Lipopolisakarida (LPS).

B. Penelitian Yang Relevan............................................................................

C. Kerangka Teori..........................................................................................

D. Kerangka Konsep...

E. Hipotesis....................................................................................................

BAB III. METODE PENELITIAN

A. Tempat dan waktu penelitian.....................................................................

B. Rancangan penelitian.................................................................................

C. Sampel Penelitian......................................................................................

1. Kriteria inklusi.......................................................................................

2. Kriteria eksklusi.....................................................................................

3. Drop out

4. Besar sampel..

5. Randomisasi..

D. Variabel dan Definisi Operasional............................................................

1. Variabel.................................................................................................

a. Variabel tergantung..........................................................................

b. Variabel bebas..................................................................................

c. Variable luaran.

2. Definisi Operasional..............................................................................

a. Tikus wistar dengan sepsis...

b. Deksmedetomidin............................................................................

c. Klonidin...........................................................................................

d. TNF-..

18

19

22

22

22

23

23

24

25

25

26

26

27

29

30

32

33

34

35

35

35

36

37

37

37

37

37

37

37

37

37

37

38

38

38

39

39

viii

E. Alat dan Bahan Penelitian..........................................................................

1. Bahan untuk perlakuan..........................................................................

2. Bahan dan alat untuk pemeriksaan TNF-...........................................

F. Pelaksanaan Penelitian...............................................................................

G. Alur Kerja..

H. Prosedur Pemeriksaan................................................................................

1. Pengambilan dan penyimpanan sampel.................................................

2. Assay Procedure...................................................................................

I. Pengumpulan dan analisis data.................................................................

1. Cara Pengumpulan Data..

2. Analisis Data

J. Etika Penelitian.........................................................................................

K. Jadwal penelitian.......................................................................................

BAB IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian.

B. Pembahasan..

C. Keterbatasan Penelitian.

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN.

A. Kesimpulan..

B. Saran

DAFTAR PUSTAKA......................................................................................

LAMPIRAN.

39

39

40

40

41

42

42

42

43

43

43

43

44

45

45

52

54

56

56

56

57

63

ix

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Struktur kimia deksmedetomidin.................................................

Gambar 2.2 Fisiologi reseptor -2 agonis.........................................................

Gambar 2.3 Mekanisme aksi dari adreseptor -2 agonis..................................

Gambar 2.4 Efek immunomodulator dari deksmedetomidin

Gambar 2.5 Rumus bangun klonidin................................................................

Gambar 2.6 Kerangka Teori..............................................................................

Gambar 2.7 Kerangka Konsep..........................................................................

Gambar 3.1 Alur kerja.......................................................................................

Gambar 4.1 Perbandingan Rerata kadar TNF- Pada Tiap Kelompok

Penelitian..

Gambar 4.2 Perbandingan Rerata kadar TNF- Pada kelompok kontrol

dengan kelompok deksmedetomidin.

Gambar 4.3 Perbandingan Rerata kadar TNF- Pada kelompok kontrol

dengan kelompok klonidin

Gambar 4.4 Perbandingan Rerata kadar TNF- pada kelompok

deksmedetomidin dengan kelompok klonidin

15

16

19

20

22

32

33

41

49

50

51

52

x

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Karakteristik Sampel Penelitian Berdasarkan Berat.

Tabel 4.2 Kesetaraan Karakteristik Sampel Penelitian Berdasarkan Berat.

Tabel 4.3 Deskripsi Data Penelitian..

Tabel 4.4 Hasil Uji Normalitas.

Tabel 4.5 Hasil Uji Homogenitas.

Tabel 4.6 Hasil Uji Kruskall Wallis.

Tabel 4.7 Perbedaan kadar TNF- pada kelompok kontrol dengan kelompok

deksmedetomidin..

Tabel 4.8 Perbedaan kadar TNF- pada kelompok kontrol dengan kelompok

klonidin..

Tabel 4.9 Perbedaan kadar TNF- pada kelompok deksmedetomidin dengan

kelompok klonidin.

46

46

47

47

48

48

49

50

51

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Hasil Perhitungan dengan SPSS.................................................

Lampiran 2 Dokumentasi perlakuan hewan coba

Lampiran 3 Ethical Clearance

63

68

73

xii

DAFTAR SINGKATAN

AP1 : Activator protein 1

APC : Antigen Precenting Cell

BSA : Body Surface Area

C.i : Cecal inoculum

C3 : Complement 3

C3a : Complement 3a

C5a : Complement 5a

cAMP : Cyclic Adenosine Monophosphate

CD11B : Cluster of Differentiation Molecule 11B

CD14 : Cluster of Differentiation Molecule 14

CD18 : Cluster of Differentiation Molecule 18

CD29L : Cluster of Differentiation Antigen 29L

CD40L : Cluster of Differentiation Antigen 40L

CLP : Cecal Ligation And Puncture

COX2 : Cyclooxygenase-2

CRT : Capillary Refill Time

CSF : Colony Stimulating Factor

D5W : Dextrose 5% in Water

DIC : Disseminated Intravascular Coagulation

ELISA : Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

FiO2 : Fraction of inspired oxygen

GM-CSM : Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor

HED : Human Equivalent Dose

HMGB-1 : High Mobility Group Box 1 protein

i.m : intramuscular

i.p : intraperitoneal

i.v : intravena

IFN- : Interferon-

IKK : IKB kinase

IL-1 : Interleukin-1

IL-6 : Interleukin- 6

xiii

iNOS : Inducible Nitric Oxide Synthase

INR : International Nrmalized Ratio

IRAKs : IL-1R-associated kinases (IRAKs)

IB : Inhibitor of nuclear factor B

LBP : Lipopolysaccharide binding protein

LPS : Lipopolysaccharide

MAC : Minimum Alveolar Concentration

MAP : Mean Arterial Pressure

MAPK : Mitogen-activated Protein Kinases

MHC : Major Histocompatibility Complex

MODS : Multiple Organ Dysfunction Syndromes

mRNA : Messenger Ribonucleic acid

MyD88 : Myeloid Differentiation primary-response protein 88

NaCl : Natrium Chloride

NF- B : Nuclear Factor Kappa beta

NK : Natural Killer

PAF : Platelet Activating Factor

PAMPs : Pathogen-Associated Molecular Patterns

PaO2 : Arterial Tention of Oxygen

ROI : Reactive oxygen intermediates

SBP : Systolic Blood Pressure

SD : Standart Deviation

SOAP : Sepsis Occurrence in Acute ill Patients

SSP : Sistem Saraf Pusat

TAB1 : TAK1-binding protein

TAK1 : Transforming growth factor (TGF)-Activated Kinase

TH1 : T helper cells type 1

TLR : Toll Like Receptors

TLR2 : Toll Like Receptors-2

TNF- : Tumor Necrosis Factor- alpha

TNF- : Tumor Necrosis Factor -

TRAF6 : TNF-receptor-associated factor 6

xiv

ABSTRAK

Henri Dumas, S501102026. 2015. Perbedaan Deksmedetomidin dan Klonidin Terhadap

Kadar Serum TNF- pada Tikus Wistar dengan Sepsis Polimikrobial. Pembimbing I:

Dr. Sugiarto, dr., Sp.PD, KEMD-FINASIM. Pembimbing II: Heri Dwi Purnomo, dr., MKes.,

Sp.An. Bagian Anestesiologi dan Terapi Intensif Fakultas Kedokteran. Program Studi

Magister Kedokteran Keluarga, Program Pascasarjana Universitas Sebelas Maret Surakarta.

Latar Belakang: Sampai saat ini sepsis masih merupakan penyebab mortalitas yang tinggi.

Pasien sepsis terkadang memerlukan sedasi di ICU. TNF- merupakan salah satu mediator

utama dari sindrom sepsis. Deksdemetomidin dan klonidin adalah agonis -2 yang diyakini

mempunyai kemampuan menurunkan kadar TNF- dan dapat digunakan untuk sedasi pada

pasien sepsis.

Tujuan: Mengetahui perbedaan deksmedetomidin dan klonidin terhadap kadar serum TNF-

pada tikus wistar dengan sepsis polimikrobial.

Metode: Penelitian ini termasuk eksperimental laboratorik dengan post test only control

group design. Terdapat 35 ekor tikus wistar diikutkan dalam penelitian, 33 ekor tikus

dinyatakan memenuhi kriteria sepsis setelah dilakukan cecal inoculum 200 mg/kg/hari selama

3 hari. Tikus dibagi menjadi 3 kelompok secara random, setiap kelompok masing-masing 11

ekor tikus. Kelompok kontrol, yaitu tikus sepsis dengan pemberian NaCl 0,9% 0,5 ml/6 jam

intravena. Kelompok deksmedetomidin yaitu tikus sepsis dengan pemberian

deksmedetomidin 10 mcg/kg/6 jam intravena. Sedangkan kelompok klonidin adalah tikus

sepsis dengan pemberian klonidin 15 mcg/kg/6 jam intravena. Setelah perlakuan selama 24

jam diambil darah sebanyak 2 ml untuk diukur kadar serum TNF-. Selama perlakuan

terdapat 4 ekor tikus yang mati, 2 ekor pada kelompok kontrol, 1 ekor pada kelompok

deksmedetomidin, dan 1 ekor pada kelompok klonidin. Analisa normalitas data dengan Uji

Shapiro-Wilk dan uji homogenisitas data dengan Levene Test. Analisa data dilanjutkan

dengan Kruskal Wallis test dan Mann Whitney test karena data tidak homogen. Perbedaan

dinyatakan signifikan bila p < 0,05.

Hasil: Perbandingan kadar serum TNF- pada kelompok deksmedetomidin (11,4934,490

pg/ml) dengan kelompok kontrol (49,85516,639 pg/ml) terdapat perbedaan bermakna

dengan p=0,001. Perbandingan kadar serum TNF- pada kelompok klonidin (13,7605,525

pg/ml) dengan kelompok kontrol (49,85516,639 pg/ml) terdapat perbedaan bermakna

dengan p=0,001. Tetapi, kadar serum TNF- pada kelompok deksmedetomidin

(11,4934,490 pg/ml) dengan kelompok klonidin (13,7605,525 pg/ml) tidak berbeda

bermakna dengan p=0,771.

Kesimpulan: Terdapat perbedaan yang signifikan kadar serum TNF- antara

deksmedetomidin dan kontrol maupun antara klonidin dengan kontrol, tetapi tidak ada

perbedaan yang signifikan antara deksmedetomidin dan klonidin pada tikus wistar dengan

sepsis polimikrobial.

Kata kunci: TNF-, deksmedetomidin, klonidin, sepsis polimikrobial, tikus wistar

xv

ABSTRACT

Henri Dumas, S501102026. 2015. The Difference of Dexmedetomidine and Clonidine on

TNF- serum level in Wistar Rat with Septic Polymicrobial Model. Supervisor I: Dr.

Sugiarto,dr., Sp.PD, KEMD-FINASIM. Supervisor II: Heri Dwi Purnomo, dr., MKes.,Sp.An.

Department of Anesthesiology and Intensive Therapy, Faculty of Medicine. Master of Family

Medicine, Post-Graduate Program of Sebelas Maret University, Surakarta.

Background: Sepsis is still a cause of high mortality worldwide. Sepsis patients sometimes

require sedation in the ICU. TNF- is one of the major mediator of sepsis syndromes.

Dexmedemetomidine and clonidine are -2 agonists that are believed to have the ability to

reduce levels of TNF- and can be used for sedation in patients with sepsis.

Objective: To analyze the difference of dexmedetomidine and clonidine on TNF- serum

level in wistar rats with septic polymicrobial model.

Methods: This research is categorized as laboratoric experimental with post test only control

group design. As many as 35 wistar rats were being adapted for 7 days and then performed

cecal inoculum of 200 mg/kg/day for 3 days but only 33 rats were found to fulfill the criteria

of sepsis then they randomly divided into three groups. The first group is a control group, this

group is septic rats which were given 0.5 ml of 0.9% NaCl intravenously every 6 hours. The

second group is septic rats which received 10 mcg/kg of dexmedetomidine intravenously

every 6 hours. The last group is septic rats which received 15 mcg/kg clonidine intravenously

every 6 hours. After 24 hours, 2 ml of the blood was drawned and then examined for TNF-

serum level. During the treatment, there was 4 rats that died, 2 rats in the control group, 1 rat

in dexmedetomidine the group, and 1 rat in clonidine group. Data abnormality was analyzed

with Shapiro Wilk and homogensity test was done with Levene test. Data analysis was

continued with Kruskal Wallis and Mann Whitney test. Significance level is p < 0,05.

Result: There was a significant difference of TNF- serum levels in dexmedetomidine group

(11.493 4.490 pg / ml) compared with the control group (49.855 16.639 pg/ml) with

p=0,001. There was a significant difference of TNF- serum levels in clonidine group

(13.760 5.525 pg/ml) compared with the control group (49.855 16.639 pg/ml) with

p=0,001. But, the dexmedetomidine (11.493 4.490 pg / ml) and clonidine groups (13.760

5.525 pg/ml) were not statistically different with p = 0.771.

Conclusion: There are significant differences in TNF- serum levels between

dexmedetomidine with control group and between clonidine with control group, but there is

no significant difference between dexmedetomidine and clonidine group in wistar rat with

septic polymicrobial model.

Keywords: TNF-, dexmedetomidine, clonidine, polymicrobial sepsis, wistar rat.

xvi