Schulung Mikroskopie I - hund.de · Geschichte der Mikroskopie • Naja: < 10000 v. Chr. we bring...

Gliederung

• Geschichte der Mikroskopie

• Die Lupe

• Das zusammengesetzte Mikroskop

we bring technologies together. optics – electronics – precision mechanics © Helmut Hund GmbH, 2008

• Das zusammengesetzte Mikroskop

• Hellfeld: Köhlersche Beleuchtung

Mikroskopie

µικροσµικροσµικροσµικροσ (mikros): klein

σκοπειν σκοπειν σκοπειν σκοπειν (skopein): schauen


σκοπειν σκοπειν σκοπειν σκοπειν (skopein): schauen

Geschichte der Mikroskopie

• Naja:

< 10000 v. Chr.



• Zacharias Janssen (1580 – 1638):

Erstes zusammengesetztes Mikroskop(1595)



• Cornelis Jacobszoon Drebbel (1572 – 1633):

1605: Experimente mit Linsen,Vergrößerungen


• Robert Hooke (1635 - 1703):

1. zweilinsiges Lichtmikroskop,Buch “Micrographia”, 1655


• Antoni van Leeuwenhoek (1632 – 1723):

Linsen hoher Qualität,270-fache Vergrößerung,Färbung von Präparaten



• Étienne-Louis Malus (1755 – 1812):

Arbeiten zur Lichtbrechung undPolarisation


• George Gabriel Stokes (1819 - 1903):

Entdeckung der Fluoreszenz,Arbeiten zur Absorption


• Ernst Abbe (1840 – 1905):

1866: Kooperation mit Carl Zeiss,1870: Formel Auflösungsvermögen,1889: Carl-Zeiss-Stiftung


1889: Carl-Zeiss-Stiftung

KondensorObjektiv NANAx

+=∆

λ


• Paul Ehrlich (1854 – 1915):

Weiterentwicklung von Färbe-methoden für die Immunologie


• Hans Christian Gram (1853 - 1938):

Gram-Färbung von Bakterien


• August Köhler (1866 – 1948):

1893: Promotion in Gießen,1894: Köhlersche Beleuchtung,1900: Start bei Carl Zeiss


1900: Start bei Carl Zeiss


• Frits Zernike (1888 – 1966):

1930: Erfindung Phasenkontrastmikroskop,1941: Industrielle Umsetzung (Wehrmacht),1953: Nobelpreis für Physik


1953: Nobelpreis für Physik


• Marvin Minsky (1927 – ):

1955: Konfokales Laser-Scanning-Mikroskop,

1956: Begriff “Künstliche Intelligenz”



• Stefan W. Hell (1962 – ):

2000: Erstveröffentlichung STED-Mikroskop,2002: MPI Biophys. Chemie, Göttingen2006: Deutscher Zukunftspreis


Leica TCS STED

Die Lupe

f

mmM

250=


M ≤ 3

Das zusammengesetzte Mikroskop

Skizze! Mikroskope nachDIN so konstruiert, daßAbstand AnschraubflächeObjektive – Auflagefläche Okulare = 160 mm(Mechanische Tubuslänge)


(Mechanische Tubuslänge)


• Gesamtvergrößerung:

Mges = Mobj x Mok

• Beispiel:


• Beispiel:Objektiv 100x, Okular 10x:Mges = 1000


Numerische Apertur (NA) eines Objektivs


NA = n · sinαααα


Numerische Apertur (NA) eines Objektivs:

• “Förderliche Vergrößerung”:Mförderlich = (500 … 1000) x NAM = 1250


Mförderlich, max = 1250

• Auflösungsvermögen (Abbe):

KondensorObjektiv NANAx

+=∆

λ


Vergrößerungen > Förderliche V.?

→ “Leere” Vergrößerung



Kennzeichnung Objektive (DIN 58878)



Kennzeichnung Objektive (DIN 58878)

Unendlich-Optik:

Paralleler Strahlenganghinter Objektiv.


hinter Objektiv.

Zusätzlich nötig:Tubuslinse, um wieder inalten Strahlengang zukommen.


Korrektionsarten Objektive

• Achromate/Apochromate:Korrektur der chromatischen Aberration



Korrektionsarten Objektive

• (Semi-) Planobjektive: Bildfeldebnung

Feld:18 mm

80 % Feld:15 mm


60 % Feld:11 mm


Beleuchtung: Komponenten

Kondensor


Kollektor


Beleuchtung: Strahlengang


Der Kollektor bildet die Glühwendel in die Ebene der Aperturblende ab.




Aperturblende im 2. Fokus des Kondensors. Strahlen von einem Punkt der Aperturblende: Parallelstrahlen.




Abstand Kondensor – Präparat so, daß Leuchtfeld-blende scharf in Objektebene.

Justierung nach Köhler

Erscheinungsbild Leuchtfeldblende

nichtzentriert

nichtzentriert zentriert offen



Köhlersche Beleuchtung: Wirkung



Köhlersche Beleuchtung: Komponenten

• Leuchtfeldblende

• Höhenverstellbarer Kondensor


• Aperturblende

“Grundlegende Anforderungen” IVDD!!!


Aperturblende (Kondensorblende)

• Wichtig für Köhlersche Beleuchtung

• Schließen: Kontrast ↑, Auflösung ↓


Aperturblende


Aperturblende (Kondensorblende)

• Schließen: Kontrast ↑, Auflösung ↓


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