Resultados de la restricción del plásmido

Nov, 2010

Std de peso molecular: Lambda HindIII Ladder

The λ HindIII DNA Ladder is prepared by restriction digestion of phage Lambda DNA to completion with HindIII, followed by heat inactivation of the enzyme.

The resulting 7 fragments range from 564 base pairs to 23.13 kilobases in size.

564, 2027, 2322, 4361, 6557, 9416, 23130 bp

Gel modelo

1. Std de peso molecular

2. Sin restringir3. Sin muestra4. Restringido con

2 enzimas5. Restringido con

2 enzimas e incubado toda la noche

6. Restringido 1 enzima

1 2 3 4 5 6

TVR

Inserto

P

T= topoisómeros; P= plásmido vacío; VR= vector+inserto

RNA

Comentarios

Sólo los geles del equipo 3 y 7 muestran bandas.

Para su discusión y reporte pueden usar estos dos geles y también el gel modelo.

Lo siento chicos.

Equipos 1 y 2

El mismo gel de la derecha, solo que inverti los colores y si se logran ver bandas de alto peso molecular. Aunque no hay mucha diferencia entre tratamientos

SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz

Equipos 4 y 3

En este gel al que le invertí los colores se logra ver una bandita tenue que marque con una flecha como posible inserto.

SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz

Solo se logran ver bandas en el gel del equipo 3, en el del cuatro parece que hay algo pero no es muy claro.

Equipos 6 y 5

Ya le moví la intensidad al gel y no se logra ver nada. Solo el std.

1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz

Equipo 7

Muy bien chicos, Se ve claramente que la

cantidad de topoisómeros disminuye cuando ponen 1 enzima y más cuando ponen 2 enzimas

En el gel sobrepuesto, invertí los colores y cambie la intensidad, se observan más claramente las bandas pero aún no se nota la banda del inserto.

Creó que lo que sucedió es que hay menos DNA en el carril de las dos enzimas, porque todas las bandas están más tenues.

Std SD 1Enz 2Enz