ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ)ΚΑΙ)ΓΕΝΕΤΙΚΗ...

Δρ. Xρήστος Παναγιωτίδης -‐ Tμήμα Φαρμακευτικής Δρ. Xρήστος Παναγιωτίδης -‐ Tμήμα Φαρμακευτικής

ΔIAΛEΞΗ 8

ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΚΑΙ ΓΕΝΕΤΙΚΗ ΠΟΙΚΙΛΟΤΗΤΑ ΣΤΑ ΒΑΚΤΗΡΙΑ

Δρ. Xρήστος Παναγιωτίδης -‐ Tμήμα Φαρμακευτικής

χρωµόσωµα

Ο ΔΙΠΛΑΣΙΑΣΜΟΣ ΤΩΝ ΒΑΚΤΗΡΙΑΚΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ


ΑΝΑΠΤΥΞΗ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ ΣΕ ΣΤΕΡΕΑ ΘΡΕΠΤΙΚΑ ΥΛΙΚΑ ΚΑΙ ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΑΡΙΘΜΟΥ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ

Αραίωση 1:100



0.05 ml (50 µl) επιστρώνεται στην επιφάνεια στερεοποιηµένου άγαρ που περιέχει και θρεπτικό υλικό σε ένα τρυβλίο Petri

109 E. coli ανά ml 103 E. coli ανά ml

~106 κύτταρα ανά αποικία

~50 αποικίες ανά τρυβλίο

Επώαση στους 37οC για ~12 ώρες


ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΚΑΙ ΦΥΣΙΚΗ ΕΠΙΛΟΓΗ ΣΕ ΕΝΑ ΠΛΗΘΥΣΜΟ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ

50 µl (1 σταγόνα)

Επώαση στους 37οC για ~12 ώρες

109 E. coli που είναι ανθεκτικά στην ριφαµπικίνη

109 E. coli ανα ml αναπτύχθηκαν από ένα και µόνο κύτταρο που ήταν ευαίσθητο στην

ριφαµπικίνη

Θρεπτικό υλικό που περιέχει ριφαµπικίνη


TA ΒΑΚΤΗΡΙΑΚΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΖΕΥΓΑΡΩΝΟΥΝ


ΣΧΗΜΑΤΙΚΗ ΑΠΟΔΟΣΗ ΤΗΣ ΒΑΚΤΗΡΙΑΚΗΣ ΣΥΖΕΥΞΗΣ

Φυλετικό ινίδιο

χρωµόσωµα

Πλασµίδιο F

γέφυρα

ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΟΤΗΣ

ΝΕΟ ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΟΤΗΣ

ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΟΤΗΣ

ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΕΚΤΗΣ

Σχηµατισµός γέφυρας

Αντιγραφή & µεταφορά του πλασµιδίου

Διαχωρισµός των κυττάρων


ΣΥΝΘΕΣΗ & ΜΕΤΑΦΟΡΑ ΤΟΥ DNA ΤΟΥ ΠΛΑΣΜΙΔΙΟΥ F

Πλασµίδιο F ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΟΤΗΣ ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΕΚΤΗΣ

ΣΠΑΣΙΜΟ ΤΟΥ ΕΝΟΣ ΚΛΩΝΟΥ ΤΟΥ DNA

ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΕΚΤΗΣ

ΜΕΤΑΦΟΡΑ ΤΟΥ ΕΝΟΣ ΚΛΩΝΟΥ ΣΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΕΚΤΗ ΚΑΙ ΣΥΝΘΕΣΗ DNA ΣΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΟΤΗ

ΣΥΝΘΕΣΗ DNA ΚΑΙ ΣΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΕΚΤΗ

ΟΛΟΚΛΗΡΩΣΗ ΤΗΣ ΣΥΝΘΕΣΗΣ ΤΟΥ DNA. ΔΙΑΧΩΡΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ


Κύτταρο E. coli ανθεκτικό στη ριφαµπικίνη (rifR) που φέρει ένα πλασµίδιο F

Πλασµίδιο F

rifR

rifR

rifR

ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΟΤΗΣ ΚΥΤΤΑΡΟ ΔΕΚΤΗΣ

Ενσωµάτωση του πλασµιδίου F στο βακτηριακό χρωµόσωµα

Σύξευξη µε ένα κύτταρο E. coli ευαίσθητο σε ριφαµπικίνη και µεταφορά του γονιδίου αντοχής στη ριφαµπικίνη

ΜΕΤΑΦΟΡΑ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΤΟΥ ΒΑΚΤΗΡΙΑΚΟΥ ΧΡΩΜΟΣΩΜΑΤΟΣ ΜΕΣΩ ΤΟΥ ΠΛΑΣΜΙΔΙΟΥ F


ΜΕΤΑΜΟΡΦΩΣΗ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ

ΛΥΣΗ ΚΑΙ ΚΑΤΑΤΜΗΣΗ ΤΟΥ

DNA

Θραύσµα DNA

Κύτταρο δέκτης

ΠΡΟΣΛΗΨΗ «ΓΥΜΝΟΥ» ΜΟΡΙΟΥ DNA


ΟΜΟΛΟΓΟΣ ΑΝΑΣΥΝΔΥΑΣΜΟΣ

Σηµείο επιχιασµού

Δύο οµόλογες δίκλωνες έλικες DNA

Μόρια DNA που έχουν επιχιασθεί


Ο ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΔΙΑΣΤΑΥΡΟΥΜΕΝΗΣ ΑΝΤΑΛΛΑΓΗΣ ΚΛΩΝΩΝ ΚΑΤΑ ΤΟΝ ΟΜΟΛΟΓΟ

ΑΝΑΣΥΝΔΥΑΣΜΟ

Δύο οµόλογες δίκλωνες έλικες DNA

Δύο µόρια DNA που συνδέονται µε µια δοµή ανταλλαγής διασταυρουµενων κλώνων

ΕΓΚΟΠΗ ΚΑΙ ΑΝΤΑΛΛΑΓΗ ΚΛΩΝΩΝ

ΕΓΚΟΠΗ ΚΑΙ ΑΝΤΑΛΛΑΓΗ ΚΛΩΝΩΝ

ΣΥΝΔΕΣΗ ΚΛΩΝΩΝ ΠΟΥ ΕΧΟΥΝ ΥΠΟΣΤΕΙ ΕΓΚΟΠΗ


ΜΟΝΤΕΛΟ ΟΜΟΛΟΓΟΥ ΑΝΑΣΥΝΔΥΑΣΜΟΥ


ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΟΜΙΚΡΟΓΡΑΦΙΑ ΜΙΑΣ ΑΝΤΑΛΛΑΓΗΣ ΔΙΑΣΤΑΥΡΟΥΜΕΝΩΝ ΚΛΩΝΩΝ -‐

ΣΥΝΔΕΣΗ ΤΟΥ HOLLIDAY


Ο ΟΜΟΛΟΓΟΣ ΑΝΑΣΥΝΔΥΑΣΜΟΣ ΟΔΗΓΕΙ ΕΙΤΕ ΣΕ ΑΝΤΑΛΛΑΓΗ DNA Η ΣΕ ΣΥΝΔΥΑΣΜΟ ΔΥΟ ΚΥΚΛΙΚΩΝ

ΜΟΡΙΩΝ DNA ΣΕ ΕΝΑ


Ο ΚΥΚΛΟΣ ΖΩΗΣ ΕΝΟΣ ΥΠΟΘΕΤΙΚΟΥ ΙΟΥ


Ο ΚΥΚΛΟΣ ΖΩΗΣ ΤΟΥ ΒΑΚΤΗΡΙΟΦΑΓΟΥ λ


ΜΕΤΑΦΟΡΑ ΤΟΥ DNA ΑΠΟ ΕΝΑ ΒΑΚΤΗΡΙΟ Σ’ ΕΝΑ ΑΛΛΟ ΜΕ ΜΕΤΑΒΙΒΑΣΗ

χρωµόσωµα

Ενσωµατωµένο DNA του φάγου λ

ΕΠΑΓΩΓΗ EΣΦΑΛΜΕΝΗ ΕΚΤΟΜΗ ΤΟΥ ΙΙΚΟΥ DNA

ΑΝΤΙΓΡΑΦΗ ΤΟΥ ΙΟΥ,

ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑ ΚΑΙΚΑΙ ΛΥΣΗ ΤΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΥ

Ο ΙΟΣ ΜΟΛΥΝΕΙ ΕΝΑ ΝΕΟ ΚΥΤΤΑΡΟ-ΞΕΝΙΣΤΗ

Ελεύθερα σωµατίδια του ιού που φέρουν και βακτηριακό DNA


ΤΡΑΝΣΠΟΖΟΝΙΑ


ΤΡΙΑ ΕΙΔΗ ΤΡΑΝΣΠΟΖΟΝΙΩΝ ΑΠΟ ΤΑ ΠΟΛΛΑ ΠΟΥ ΥΠΑΡΧΟΥΝ ΣΤΑ ΒΑΚΤΗΡΙΑ


ΔΥΟ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΙ ΜΕ ΤΟΥΣ ΟΠΟΙΟΥΣ ΜΕΤΑΤΙΘΕΝΤΑΙ ΤΑ ΤΡΑΝΣΠΟΖΟΝΙΑ -‐ 1


ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΣ ΜΕΤΑΘΕΣΗΣ ΕΝΟΣ ΤΡΑΝΣΠΟΖΟΝΙΟΥ

ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ)ΚΑΙ)ΓΕΝΕΤΙΚΗ...

Documents

Transcript of ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ)ΚΑΙ)ΓΕΝΕΤΙΚΗ...