LIMITATIONS OF THE PROCEDURE Konelab™ / T Series -HBDH.pdf · Page 1 D02009_04_Insert_HBDH_MU...

D02009_04_Insert_HBDH_MU

Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

EN

Konelab™ / T Series α-HBDH 981380 10 x 10 ml

For the in vitro quantitative determination of the α-hydroxybutyrate dehydrogenase activity in human serum on Konelab analyzers. All test results must be interpreted with regard to the clinical context.

SUMMARY (1, 2) α-Hydroxybutyrate dehydrogenase (α-HBDH) is an isoenzyme of lactate dehydrogenase (LDH), which uses α-hydroxybutyrate as an additional substrate. LDH is composed of four peptide chains of two types: M (muscle) and H (heart). The subunit compositions of the five isoenzymes are LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) and LD-5 (M4). α-HBDH, present in serum, represents the LDH activity mostly the LD-1 and LD-2 isoenzymes. Compared to other isoenzymes of LDH it occurs in higher levels in heart muscle tissue and therefore is somewhat more sensitive and more specific in the diagnosis of myocardial infarction.

PRINCIPLE OF THE PROCEDURE α-HBDH 2-Oxobutyrate + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hydroxybutyrate + NAD+

REAGENT INFORMATION Reagent A 10 x 8 ml Reagent B 1 x 20 ml

Concentrations Reagent A: Phosphate buffer, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oxobutyrate 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reagent B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Precautions For in vitro diagnostic use only. Exercise the normal precautions required for handling all laboratory reagents. The reagent contains sodium azide as preservative. Do not swallow. Avoid contact with skin and mucous membranes.

Preparation Add 2 ml of Reagent B to the bottle of Reagent A. Cap vial and mix. Note: Check that there are no bubbles in the bottleneck or on the surface of the reagent when you insert the reagent vials or vessels in the Konelab analyzer.

Storage and Stability Reagents in unopened vials are stable at 2…8 °C until the expiration date printed on the label, when protected from light. Refer to the Application Notes of your Konelab analyzer for the on board stability of reagents.

SPECIMEN COLLECTION

Sample Type Unhemolyzed serum can be used. Do not use heparin plasma.

Precautions Human samples should be handled and disposed of as if they were potentially infectious.

Storage (1) The sample may be stored for 1 to 3 days at room temperature (18…25 °C) and maximum for 7 days at 4…8 °C.

TEST PROCEDURE Refer to the Reference Manual and Application Notes for an automated procedure on your Konelab analyzer. Any application which has not been validated by Thermo Fisher Scientific Oy cannot be performance guaranteed and therefore must be evaluated by the user.

Materials provided Reagents as described above.

Materials required but not provided Controls as indicated below.

Calibration The response (dA/min) is converted to result units by a calculation factor.

Quality Control Use quality control samples at least once a day and every time a new bottle of reagent is used. Available controls: Nortrol, code: 981043 Abtrol, code: 981044 The Control intervals and limits must be adapted to the individual laboratory requirements. The results of the quality control samples should fall within the limits pre-set by the laboratory.

CALCULATION OF RESULTS The results are calculated automatically by the Konelab analyzer as follows: Activity in U/l = dA/min x Factor TV x 1000 Factor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P where: TV= Total reaction volume in ml SV= Sample volume in ml 6.3= Extinction coefficient of NADH at 340 nm P= Cuvette pathlength = 1 Conversion factor μkat/l = (U/l)/60

LIMITATIONS OF THE PROCEDURE

Interference Criterion: Recovery within + 10% of initial values. Bilirubin: No interference found up to 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Hemolysis: Do not use hemolyzed specimen. Lipemia: No interference found up to 3.4 mmol/l (300 mg/dl) of triglycerides. For other interfering substances, please refer to the reference 3.

EXPECTED VALUES (4) Adults: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) The quoted values should serve as a guide only. It is recommended that each laboratory verify this range or derives a reference interval for the population that it serves.

MEASURING RANGE (5) 8 - 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Extended measuring range after secondary dilution: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

PERFORMANCE CHARACTERISTICS (5)

Detection limit 4 U/l (0.07 μkat/l) The detection limit represents the lowest measurable concentration/activity that can be distinguished from zero. It is calculated as the concentration of zero sample + 3 SD (within run, n=24).

Imprecision Mean

154 U/l Mean

174 U/l Mean

402 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Within run 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Between day 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Total 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

A precision study was performed using Konelab 30 during 10 days, with the number of measurements being n = 40.

Method comparison A comparison between this α-HBDH reagent (y) and a commercially available test (x) gave following results: Linear regression (result unit U/l): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 The sample concentrations were between 37 and 374 U/l. The results obtained in individual laboratories may differ from the given performance data.

BIBLIOGRAPHY 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,

5th edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 362 - 366. 2. Thomas, L. (ed.), Clinical Laboratory Diagnostics; Use and Assessment of Clinical

Laboratory Results, 1st edition, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main, Germany, 1998, pp.89 - 94.

3. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Washington, D.C., 2000, 3-446 – 3-447.

4. Elliot BA and Wilkinson JH, The serum α-hydroxybutyrate dehydrogenase in diseases other than myocardial infarction, Clin Sci 1963, 24: 343-355.

5. Data on file at Thermo Fisher Scientific Oy.

MANUFACTURER Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Date of revision (yyyy-mm-dd) 2007-08-15

Changes from previous version Company name updated.

DE


ANWENDUNGSBEREICH Zur quantitativen In-vitro-Bestimmung der Aktivität von α-Hydroxybutyratdehydrogenase in Humanserum mit Konelab-Analysengeräten. Alle Testergebnisse müssen mit Bezug zum klinischen Zusammenhang interpretiert werden.

ZUSAMMENFASSUNG (1, 2) α-Hydroxybutyratdehydrogenase (α-HBDH) ist ein Isoenzym der Lactatdehydrogenase (LDH), das als zusätzliches Substrat α-Hydroxybutyrat verwendet. LDH setzt sich aus vier Peptidketten zusammen, die sich wiederum in zwei Typen (Untereinheiten) unterteilen lassen: M (Muskel) und H (Herz). Die fünf Isoenzyme lassen sich daher anhand der Untereinheiten wie folgt klassifizieren: LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) und LD-5 (M4). Die in Serum vorliegende α-HBDH stellt hauptsächlich die LDH-Aktivität der Isoenzyme LD-1 und LD-2 dar. Im Vergleich zu anderen Isoenzymen von LDH kommt α-HBDH besonders im Herzmuskel in höheren Konzentrationen vor und hat daher bei der Diagnose von Myokardinfarkten eine besondere Bedeutung.

DIESE PACKUNGSBEILAGE IST FÜR DEN GEBRAUCH AUSSERHALB DER USA VORGESEHEN. JEDER VERWEIS AUF KONELAB-SYSTEME BEINHALTET AUCH DIE T SERIES.

THIS PACKAGE INSERT IS APPLICABLE FOR USE OUTSIDE THE US. ANY REFERENCE TO THE KONELAB SYSTEMS ALSO REFERS TO THE T SERIES.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

TESTPRINZIP α-HBDH 2-Oxobutyrat + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hydroxybutyrat + NAD+

REAGENZDATEN Reagenz A 10 x 8 ml Reagenz B 1 x 20 ml

Konzentrationen Reagenz A: Phosphatpufferlösung, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oxobutyrat 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reagenz B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Sicherheitsmaßnahmen Nur zur In-vitro-Diagnose. Die üblichen Sicherheits-maßnahmen beim Umgang mit Laborreagenzien sind zu befolgen. Dieses Produkt enthält Natriumazid als Konservierungsmittel. Nicht verschlucken. Berührung mit Haut und Schleimhäuten vermeiden.

Vorbereitung 2 ml von Reagenz B in eine Flasche Reagenz A geben. Die Flasche verschließen und mischen. Hinweis: Darauf achten, dass sich im Flaschenhals oder an der Reagenzoberfläche keine Luftblasen befinden, wenn die Reagenzien in das Konelab-Analysengerät eingesetzt werden.

Lagerung und Haltbarkeit Die ungeöffneten Reagenzien sind bei 2…8 °C bis zum Ablauf des Verfallsdatums auf dem Etikett haltbar, wenn sie vor Lichteinwirkung geschützt werden. Die Haltbarkeit der Reagenzien nach Einsetzen in das Konelab-Analysengerät ist in den entsprechenden Hinweisen zur Anwendung enthalten.

UNTERSUCHUNGSMATERIAL

Probenart Es kann nicht hämolysiertes Serum verwendet werden. Kein Heparinplasma verwenden.

Sicherheitsmaßnahmen Proben humanen Ursprungs sind als potenziell infektiös zu betrachten und dementsprechend zu behandeln und zu entsorgen.

Lagerung (1) Die Probe kann bei Raumtemperatur (18...25 °C) 1 bis 3 Tage und bei 4…8 °C maximal 7 Tage gelagert werden.

TESTDURCHFÜHRUNG Angaben zur Automatisierung mit dem Konelab-Analysengerät dem Referenzhandbuch und den Hinweisen zur Anwendung entnehmen. Bei Verwendung von Applikationen, die nicht durch Thermo Fisher Scientific Oy validiert wurden, kann keine Garantie für die angegebenen Leistungsdaten übernommen werden. Für die Validierung derartiger Applikationen ist der Anwender daher selbst verantwortlich.

Lieferumfang Reagenzien wie oben beschrieben.

Erforderliche, jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien Kontrollen wie nachstehend angegeben.

Kalibrierung Die Reaktion (dE/min) wird durch einen Berechnungsfaktor in Ergebniseinheiten umgerechnet.

Qualitätskontrolle Mindestens einmal täglich und bei jeder Verwendung eines neuen Reagenzfläschchens eine Qualitätskontrolle durchführen. Lieferbare Kontrollen: Nortrol, Bestellnr.: 981043 Abtrol, Bestellnr.: 981044 Die Intervalle und Grenzen der Kontrolle müssen an die Anforderungen der einzelnen Laboratorien angepasst werden. Die Ergebnisse der Qualitätskontrollen sollten innerhalb der vom Labor vorgegebenen Grenzwerte liegen.

BERECHNUNG DER ERGEBNISSE Die Ergebnisse werden vom Konelab-Analysengerät automatisch wie folgt errechnet: Aktivität in U/l = dE/min x Faktor GV x 1000 Faktor = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x PV x OW wobei: GV = Gesamtes Reaktionsvolumen in ml PV = Probenvolumen in ml 6.3 = Extinktionskoeffizient von NADH bei 340 nm OW = Optische Weglänge durch die Küvette = 1 Konversionsfaktor μkat/l = (U/l)/60

GRENZEN DES VERFAHRENS

Störfaktoren Kriterium: Wiederfindung von + 10 % der Ausgangswerte. Bilirubin: Keine Interferenzen bei bis zu 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Hämolyse: Kein hämolysiertes Untersuchungsmaterial verwenden. Lipämie: Keine Interferenzen bei bis zu 3.4 mmol/l (300 mg/dl) Triglyceriden. Siehe Literaturhinweis 3 für weitere Substanzen, die Störfaktoren darstellen können.

REFERENZBEREICHE (4) Erwachsene: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Die angegebenen Werte gelten nur als Richtlinie. Es wird empfohlen, dass jedes Labor diesen Bereich überprüft oder ein Referenzintervall für die betroffene Population ableitet.

MESSBEREICH (5) 8 – 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Erweiterter Messbereich nach automatischer Verdünnung: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

LEISTUNGSDATEN (5)

Nachweisgrenze 4 U/l (0.07 μkat/l) Die Nachweisgrenze stellt die unterste messbare Konzentration/Aktivität dar, die von null unterschieden werden kann. Sie wird als Konzentration der Nullprobe + 3 SD (in der Serie, n=24) berechnet.

Impräzision Mittelwert

154 U/l Mittelwert 174 U/l

Mittelwert 402 U/l

SD % VK SD % VK SD % VK In der Serie 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Von Tag zu Tag 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9

Gesamtwert 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2 Mit dem Konelab 30 wurde über 10 Tage eine Präzisionsstudie durchgeführt, bei der die Anzahl der Messungen (n) 40 betrug.

Vergleich der Methoden Beim Vergleich des hier beschriebenen α-HBDH-Reagenzes (y) mit einem handelsüblichen Test (x) wurden die folgenden Ergebnisse erhalten: Lineare Regression (Ergebnisse in U/l): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Die in den Proben enthaltenen Konzentrationen lagen zwischen 37 und 374 U/l. Die Ergebnisse einzelner Laboratorien können von den angegebenen Leistungsdaten abweichen.

LITERATURHINWEISE 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Datenbestände der Thermo Fisher Scientific Oy.

HERSTELLER Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Datum der Überarbeitung (JJJJ-MM-TT) 2007-08-15

Änderungen gegenüber der vorherigen Fassung Name des Unternehmens aktualisiert.

FR

Konelab™ / Gamme T α-HBDH 981380 10 x 10 ml

UTILISATION Pour la détermination quantitative in vitro de l’activité de l’α-hydroxybutyrate déshydrogénase dans le sérum humains au moyen des analyseurs Konelab. Tous les résultats obtenus doivent être interprétés en tenant compte du contexte clinique.

RÉSUMÉ (1, 2) L’α-hydroxybutyrate déshydrogénase (α-HBDH) est une isoenzyme de la lactate déshydrogénase (LDH) qui utilise l’α-hydroxybutyrate en tant que substrat supplémentaire. La LDH est constituée de quatre chaînes peptidiques de deux types : M (musculaire) et H (cardiaque). Les sous-unités constitutives des cinq isoenzymes sont les suivantes : LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) et LD-5 (M4). L’α-HBDH présente dans le sérum est représentative de l’activité de la LDH, principalement de celle des isoenzymes LD-1 et LD-2. Comparée aux autres isoenzymes de la LDH, elle est présente à plus forte concentration au niveau du tissu musculaire cardiaque et est par conséquent un peu moins sensible et plus spécifique pour le diagnostic d’un infarctus du myocarde.

PRINCIPE DE LA PROCÉDURE α-HBDH 2-Oxobutyrate + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hydroxybutyrate + NAD+

INFORMATIONS SUR LE RÉACTIF Réactif A 10 x 8 ml Réactif B 1 x 20 ml

Concentrations Réactif A : Tampon phosphate, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oxobutyrate 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Réactif B : NADH > 0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

CETTE NOTICE EST VALABLE POUR UTILISATION EN DEHORS DES ÉTATS-UNIS. TOUTE RÉFÉRENCE AUX SYSTÈMES KONELAB FAIT ÉGALEMENT RÉFÉRENCE À LA GAMME T.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

Précautions Usage diagnostique in vitro uniquement. Respecter les précautions habituelles requises lors de la manipulation de tout réactif de laboratoire. Ce réactif contient de l’azide de sodium en tant que conservateur. Ne pas avaler. Éviter tout contact avec la peau et les muqueuses.

Préparation Ajouter 2 ml de réactif B dans le flacon de réactif A. Boucher le flacon et mélanger. Remarque : S’assurer de l’absence de bulles au niveau du goulot du flacon ou à la surface du réactif lors de la mise en place des flacons ou récipients de réactifs dans l’analyseur Konelab.

Conservation et stabilité Les réactifs contenus dans les flacons scellés sont stables à 2…8 °C jusqu’à la date de péremption figurant sur l’étiquette à condition d’être protégés de la lumière. Se référer à la fiche d’application de l’analyseur Konelab en ce qui concerne la stabilité des réactifs dans l’appareil.

PRÉLÈVEMENT DES ÉCHANTILLONS

Type d’échantillon On peut utiliser des échantillons de sérum non hémolysés. Ne pas utiliser de plasma prélevé sur héparine.

Précautions Les échantillons d’origine humaine doivent être manipulés et éliminés comme des matériaux potentiellement infectieux.

Conservation (1) Les échantillons peuvent être conservés pendant 1 à 3 jours à température ambiante (18…25 °C) ou pendant un maximum de 7 jours à 4…8 °C.

PROCÉDURE DE TEST Se référer au manuel de référence et à la fiche d’application pour une description de la procédure automatisée sur l’analyseur Konelab. Toute application n’ayant pas été validée par Thermo Fisher Scientific Oy ne peut pas être garantie en ce qui concerne ses performances et doit par conséquent être évaluée par l’utilisateur.

Matériel fourni Réactifs comme décrits ci-dessus.

Matériel requis mais non fourni Contrôles comme indiqué ci-dessous.

Calibrage La réponse (dA/min) est convertie en unités de résultat à l’aide d’un facteur de calcul.

Contrôle de qualité Utiliser les échantillons de contrôle de qualité au moins une fois par jour et chaque fois que l’on entame un nouveau flacon de réactif. Contrôles disponibles : Nortrol, code : 981043 Abtrol, code : 981044 Les intervalles et les limites de contrôle doivent être adaptés aux besoins de chaque laboratoire. Les résultats des échantillons de contrôle de qualité doivent se situer dans la fourchette de tolérance prédéfinie par le laboratoire.

CALCUL DES RÉSULTATS Les résultats sont calculés automatiquement par l’analyseur Konelab de la manière suivante : Activité en U/l = dA/min x facteur VT x 1000 Facteur = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x VE x L où : VT = Volume total de réaction en ml VE = Volume d’échantillon en ml 6.3 = Coefficient d’extinction du NADH à 340 nm L = Longueur du trajet de la cuvette = 1 Facteur de conversion µkat/l = (U/l)/60

LIMITES DE LA PROCÉDURE

Interférence Critère : Acceptation se situant dans les limites de ± 10 % des valeurs initiales. Bilirubine : Aucune interférence observée jusqu’à 980 µmol/l (57.3 mg/dl). Hémolyse : Ne pas utiliser un échantillon hémolysé. Lipémie : Aucune interférence observée jusqu’à 3.4 mmol/l (300 mg/dl) de triglycérides. Pour les autres substances interférentes, se reporter à la référence 3.

VALEURS ATTENDUES (4) Adultes : < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Les valeurs citées sont données à titre indicatif uniquement. Il est recommandé que chaque laboratoire établisse les valeurs physiologiques pour la population qui constitue sa clientèle.

PLAGE DE MESURE (5) 8 – 700 U/l (0.13 – 11.7 µkat/l) Domaine de mesure étendu après dilution secondaire : 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 µkat/l)

CARACTÉRISTIQUES EN MATIÈRE DE PERFORMANCES (5)

Limite de détection 4 U/l (0.07 µkat/l) La limite de détection représente la plus faible concentration/activité mesurable qu’il est possible de distinguer de zéro. Elle est calculée comme la concentration d’un échantillon zéro + 3 ET (répétabilité, n=24).

Imprécision Moyenne

154 U/l Moyenne 174 U/l

Moyenne 402 U/l

ET CV% ET CV% ET CV% Répétabilité 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Reproductibilité 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Total 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

L’étude de précision a eu lieu sur un analyseur Konelab 30 pendant 10 jours, le nombre de mesures étant de n=40.

Comparaison de méthodes Une comparaison entre ce réactif α-HBDH (y) et un test commercial (x) a fourni les résultats suivants : Régression linéaire (unités du résultat : U/l) : y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Les concentrations des échantillons se situaient entre 37 et 374 U/l.

Les résultats obtenus dans chaque laboratoire peuvent différer des données de performances indiquées.

BIBLIOGRAPHIE 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Données disponibles sur fichiers chez Thermo Fisher Scientific Oy.

FABRICANT Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tél. +358 9 329 100, télécopie +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Date de révision (aaaa-mm-jj) 2007-08-15

Modifications par rapport à la version précédente Mise à jour du nom de la société.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

CS

Konelab™ / Série T α-HBDH 981380 10 x 10 ml

URČENÉ POUŽITÍ Pro kvantitativní stanovení aktivity α-hydroxybutyrát dehydrogenázy in vitro v lidském séru na analyzátorech Konelab. Všechny výsledky testů musejí být interpretovány s ohledem na klinický kontext.

SHRNUTÍ (1,2) α-hydroxybutyrát dehydrogenáza (α-HBDH) je izoenzym laktát dehydrogenázy (LDH), který jako další substrát využívá α-hydroxybutyrát. LDH je složena ze čtyř peptidových řetězců dvou typů: M (svalový) a H (srdeční). Složení podjednotek pěti izoenzymů je LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) a LD-5 (M4). α-HBDH přítomná v séru reprezentuje aktivitu LDH většinou v izoenzymech LD-1 a LD-2. Ve srovnání s dalšími izoenzymy LDH se vyskytuje ve vyšších koncentracích ve tkáni srdečního svalu, a proto je poněkud citlivější a specifičtější při stanovení diagnózy infarktu myokardu.

PRINCIP POSTUPU α-HBDH 2-Oxobutyrát + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hydroxybutyrát + NAD+

INFORMACE O REGENCIÍCH Reagens A: 10 x 8 ml Reagens B: 1 x 20 ml

Koncentrace Reagens A: Fosfátový pufr, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oxobutyrát 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reagens B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Zvláštní opatření Určeno pouze pro diagnostické použití in vitro. Používejte běžná bezpečnostní opatření vyžadovaná pro manipulaci se všemi laboratorními reagencii. Reagens obsahuje jako konzervační látku azid sodný. Nepolykejte. Zabraňte kontaktu s kůží a sliznicemi.

Příprava Přidejte 2 ml reagens B do lahvičky s reagens A. Lahvičku uzavřete a obsah promíchejte. Poznámka: Překontrolujte, zda při vkládání lahviček nebo nádob s reagencii do analyzátoru Konelab nejsou v hrdle lahvičky nebo na povrchu reagens bubliny.

Uchovávání a stabilita Reagencie v neotevřených lahvičkách jsou stabilní při teplotě 2…8 °C, jsou-li uchovávány ve tmě, a to do data ukončení použitelnosti vytištěného na štítku. Údaje o stabilitě reagencií “on-board“ naleznete v aplikačních poznámkách svého analyzátoru Konelab.

ODBĚR VZORKŮ

Typ vzorků Lze použít nehemolyzované sérum. Nepoužívejte heparinizovanou plazmu.

Zvláštní opatření S lidskými vzorky je nutné nakládat a likvidovat je, jako kdyby byly potenciálně infekční.

Uchovávání (1) Vzorek může být uchováván po dobu 1…3 dnů při pokojové teplotě (18…25 °C) a nejvýše po dobu 7 dnů při teplotě 4…8 °C.

POSTUP TESTU Údaje o automatizovaném postupu práce na analyzátoru Konelab naleznete v referenčním manuálu a aplikačních poznámkách. Nelze zaručit provedení žádné aplikace, která nebyla validována společnosti Thermo Fisher Scientific Oy, a proto musí být taková aplikace hodnocena uživatelem.

Dodané materiály Reagencia uvedená výše.

Požadované materiály, které se nedodávají Kontrolní materiály uvedené dále.

Kalibrace Reakce (dA/min) je přepočtena pomocí faktoru výpočtu na výsledné jednotky.

Řízení jakosti Používejte vzorky pro řízení jakosti alespoň jednou denně a pokaždé, když použijete novou lahvičku reagens. Dostupné kontrolní materiály: Nortrol, kód: 981043 Abtrol, kód: 981044 Intervaly a limity kontrolních materiálů musejí být upraveny podle požadavků jednotlivých laboratoří. Výsledky vzorků pro řízení jakosti by měly vyhovovat limitním hodnotám přednastaveným laboratoří.

VÝPOČET VÝSLEDKŮ Výsledky jsou automaticky vypočteny analyzátorem Konelab, a to dále uvedeným způsobem: Aktivita v U/l = dA/min x Faktor TV x 1000 Faktor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P kde: TV= Celkový reakční objem v ml SV = Objem vzorku v ml 6.3 = Extinkční koeficient NADPH při 340 nm P= Optická tloušťka kyvety = 1 Faktor přepočtu μkat/l = (U/l)/60

OMEZENÍ POSTUPU

Interference Kritérium: Recovery v rozpětí + 10% počátečních hodnot. Bilirubin: Až do 980 μmol/l (57.3 mg/dl) nebyla zjištěna interference. Hemolýza: Nepoužívejte hemolyzovaný vzorek. Lipémie: Až do 3.4 mmol/l (300 mg/dl) triglyceridů nebyla zjištěna interference. Údaje o dalších interferujících látkách naleznete v odkazu č. 3.

PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY (4) Dospělí: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Uvedené hodnoty by měly sloužit pouze jako vodítko. Doporučuje se, aby každá laboratoř toto rozpětí ověřila nebo odvodila referenční interval pro populaci, jíž poskytuje služby.

ROZPĚTÍ MĚŘENÍ (5) 8 -700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Rozšířené rozpětí měření po sekundárním ředění: 8 – 4 200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

CHARAKTERISTIKY ÚČINNOSTI (5)

Limitní hodnoty detekce 4 U/l (0.07 μkat/l) Limitní hodnota detekce představuje nejnižší měřitelnou koncentraci/aktivitu, kterou lze odlišit od nulové hodnoty. Vypočítává se jako koncentrace nulového vzorku + 3 SD (v rámci série, n = 24).

Nepřesnost Střední hodnota

154 U/l Střední hodnota

174 U/l Střední hodnota

402 U/l SD CV % SD CV % SD CV % V rámci série 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Mezi dny 6.7 4.4 6.6 3.7 1 1.8 2.9 Celkem 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Byla provedena studie přesnosti pomocí analyzátoru Konelab 30. která trvala 10 dní; počet provedených měření byl n = 40.

Srovnání metod Srovnání mezi tímto reagens pro stanovení α-HBDH (y) a komerčně dostupným testem (x) poskytlo dále uvedené výsledky: Lineární regrese (jednotky výsledků U/l): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Koncentrace vzorků se pohybovaly v rozmezí 37 až 374 U/l. Výsledky získané v jednotlivých laboratořích se mohou od uvedených dat účinnosti lišit.

SEZNAM LITERATURY 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Údaje jsou k dispozici u společnosti Thermo Fisher Scientific Oy.

VÝROBCE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel.: +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Datum revize (rrrr-mm-dd) 2007-08-15

Změny oproti předchozí verzi Název společnosti byl aktualizován.

EL

Konelab™ / Σειρά T

α-HBDH 981380 10 x 10 ml

ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Για τον in vitro ποσοτικό προσδιορισμό της ενεργότητας της αφυδρογονάσης του α-υδροξυβουτυρικού στον ανθρώπινο ορό σε αναλυτές Konelab. Όλα τα αποτελέσματα της εξέτασης πρέπει να ερμηνεύονται σε σχέση με το κλινικό περιβάλλον.

ΠΕΡΙΛΗΠΤΙΚΑ (1, 2) Η αφυδρογονάση του α-υδροξυβουτυρικού (α-HBDH) είναι ένα ισοένζυμο της αφυδρογονάσης του γαλακτικού (LDH), η οποία χρησιμοποιεί το α-υδροξυβουτυρικό ως επιπλέον υπόστρωμα. Η LDH αποτελείται από τέσσερις πεπτιδικές αλυσίδες δύο τύπων: M (μυική) και H (καρδιακή). Η σύνθεση σε υπομονάδες των πέντε ισοενζύμων είναι LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) και LD-5 (M4). Η α-HBDH, που υπάρχει στον ορό, αντιπροσωπεύει την ενεργότητα LDH κυρίως των ισοενζύμων LD-1 και LD-2. Σε σύγκριση με άλλα ισοένζυμα LDH εμφανίζεται σε υψηλότερα επίπεδα σε ιστό καρδιακού μυός και γι’ αυτό είναι κάπως πιο ευαίσθητη και πιο ειδική στη διάγνωση εμφράγματος του μυοκαρδίου.

TENTO PŘÍBALOVÁ INFORMACE JE URČENA PRO POUŽITÍ MIMO ÚZEMÍ USA. KAŽDÁ ZMÍNKA O SYSTÉMECH KONELAB SE ROVNĚŽ TÝKÁ SÉRIE T.

ΑΥΤΟ ΤΟ ΕΝΘΕΤΟ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑΣ ΠΡΟΤΙΘΕΤΑΙ ΓΙΑ ΧΡΗΣΗ ΕΚΤΟΣ ΤΩΝ ΗΠΑ. ΟΠΟΙΑΔΗΠΟΤΕ ΑΝΑΦΟΡΑ ΣΤΑ ΣΥΣΤΗΜΑΤΑ KONELAB ΑΝΑΦΕΡΕΤΑΙ ΕΠΙΣΗΣ ΣΤΗ ΕΙΡΑ T.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ α-HBDH 2-οξοβουτυρικό + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-υδροξυβουτυρικό + NAD+

ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Αντιδραστήριο Α 10 x 8 ml Αντιδραστήριο Β 1 x 20 ml

Συγκεντρώσεις Αντιδραστήριο Α: Ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών, pH 7.5 64 mmol/l 2-Οξοβουτυρικό 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Αντιδραστήριο Β: NADH > 0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση μόνο. Εφαρμόζετε τις κανονικές προφυλάξεις που απαιτούνται για το χειρισμό όλων των εργαστηριακών αντιδραστηρίων. Το αντιδραστήριο περιέχει νατραζίδιο ως συντηρητικό. Μην καταπίνετε. Αποφύγετε την επαφή με το δέρμα και με τους βλεννογόνους.

Προετοιμασία Προσθέστε 2 ml του Αντιδραστηρίου B, στη φιάλη του Αντιδραστηρίου A. Κλείστε το πώμα του φιαλιδίου και αναμίξτε. Σημείωση: Ελέγξτε ότι δεν υπάρχουν φυσαλίδες στο λαιμό ή στην επιφάνεια του φιαλιδίου αντιδραστηρίου όταν εισάγετε τα φιαλίδια ή τα δοχεία αντιδραστηρίων στην αναλυτή Konelab.

Αποθήκευση και Σταθερότητα Τα αντιδραστήρια σε φιαλίδια που δεν έχουν ανοιχτεί είναι σταθερά στους 2... 8 °C μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα και εφόσον διατηρούνται μακριά από το φως. Ανατρέξτε στις Σημειώσεις Εφαρμογών του αναλυτή Konelab για την σταθερότητα των αντιδραστηρίων όταν αυτά είναι φορτωμένα στο μηχάνημα.

ΣΥΛΛΟΓΗ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ

Τύπος δείγματος Μπορεί να χρησιμοποιηθεί μη αιμολυμένος ορός. Μη χρησιμοποιείται ηπαρινισμένο πλάσμα.

Προφυλάξεις Τα ανθρώπινα δείγματα πρέπει να χρησιμοποιούνται και να απορρίπτονται σαν να ήταν δυνητικά μολυσματικά.

Αποθήκευση (1) Τα δείγματα μπορούν να αποθηκευτούν για 1 έως 3 ημέρες σε θερμοκρασία δωματίου (18…25 °C) και μέχρι 7 ημέρες στους 4…8 °C.

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΕΞΕΤΑΣΗΣ Ανατρέξτε στα φυλλάδια του Εγχειριδίου Αναφοράς και των Σημειώσεων Εφαρμογών για μια αυτόματη διαδικασία του αναλυτή σας Konelab. Η καλή λειτουργία οποιασδήποτε εφαρμογής που δεν έχει επικυρωθεί από την Thermo Fisher Scientific Oy, δεν μπορεί να έχει εγγύηση απόδοσης και επομένως πρέπει να εκτιμηθεί από το χρήστη.

Παρεχόμενα Υλικά Αντιδραστήρια όπως περιγράφονται παραπάνω.

Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται Υλικά ελέγχου όπως περιγράφεται παρακάτω.

Βαθμονόμηση Η απόκριση (dA/min) μετατρέπεται σε μονάδες αποτελέσματος από έναν παράγοντα υπολογισμού.

Ποιοτικός Έλεγχος Χρησιμοποιήστε δείγματα ποιοτικού ελέγχου τουλάχιστον μια φορά την ημέρα και κάθε φορά που χρησιμοποιείται καινούργια φιάλη αντιδραστηρίου. Διαθέσιμα υλικά ελέγχου: Nortrol, κωδικός: 981043 Abtrol, κωδικός: 981044 Τα διαστήματα και τα όρια των Υλικών ελέγχου πρέπει να προσαρμόζονται στις απαιτήσεις των ξεχωριστών εργαστηρίων. Τα αποτελέσματα των δειγμάτων ποιοτικού ελέγχου πρέπει να εμπίπτουν εντός των ορίων που έχει προκαθορίσει το εργαστήριο.

ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ Τα αποτελέσματα υπολογίζονται αυτομάτως από τον αναλυτή Konelab ως εξής: Ενεργότητα σε U/l = Παράγων x (dA/min) TV x 1000 Παράγοντας = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ 6.3 x SV x P όπου: TV= Ολικός όγκος αντίδρασης σε ml SV= Όγκος δείγματος σε ml 6.3= Συντελεστής εξασθένησης του NADH στα 340 nm P= Μήκος διαδρομής κυψελίδας = 1 Παράγων μετατροπής μkat/l = (U/l)/60

ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ

Παρεμβολές Κριτήριο: Ανάκτηση εντός + 10% των αρχικών τιμών. Χολερυθρίνη: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Αιμόλυση: Μη χρησιμοποιείτε αιμολυμένα δείγματα. Λιπαιμία: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 3.4 mmol/l (300 mg/dl) των τριγλυκεριδίων. Για άλλες παρεμβαλλόμενες ουσίες, παρακαλούμε να ανατρέξετε στην παραπομπή 3.

ΑΝΑΜΕΝΟΜΕΝΕΣ ΤΙΜΕΣ (4) Ενήλικες: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Οι προαναφερθείσες τιμές πρέπει να εκλαμβάνονται ως οδηγός μόνον. Συνιστάται το κάθε εργαστήριο να διεξάγει την επαλήθευση αυτού του εύρους τιμών ή να παράγει ένα διάστημα αναφοράς για τον πληθυσμό με τον οποίο ασχολείται.

ΕΥΡΟΣ ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΥ (5) 8 – 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Εκτεταμένο εύρος μέτρησης μετά από δευτερογενή αραίωση: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ (5)

Όριο ανίχνευσης 4 U/l (0.07 μkat/l) Το όριο ανίχνευσης αντιπροσωπεύει τη χαμηλότερη συγκέντρωση/ενεργότητα που μπορεί να μετρηθεί και να διακριθεί από το μηδέν. Υπολογίζεται ως η συγκέντρωση του δείγματος μηδέν + 3 SD (εντός της εκτέλεσης, n=24).

Ανακρίβεια Μέση τιμή

154 U/l. Μέση τιμή 174 U/l.

Μέση τιμή 402 U/l.

SD CV% SD CV% SD CV% Εντός της εκτέλεσης 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0

Μεταξύ ημερών 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Συνολικό 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2 Διεξάχθηκε μια μελέτη ακρίβειας με χρήση Konelab 30 σε διάρκεια 10 ημερών, με τον αριθμό των μετρήσεων να είναι n=40.

Σύγκριση μεθόδου Η σύγκριση μεταξύ αυτού του αντιδραστηρίου α-HBDH (y) και μιας εμπορικής δοκιμασίας (x) έδωσε τα εξής αποτελέσματα: Γραμμική παλινδρόμηση (μονάδα αποτελεσμάτων U/I): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Οι συγκεντρώσεις δείγματος ήταν μεταξύ 37 και 374 U/l. Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται σε ξεχωριστά εργαστήρια πιθανόν να διαφέρουν από τα δεδομένα απόδοσης.

ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Δεδομένα στο αρχείο της Thermo Fisher Scientific Oy.

ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗΣ Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01620 Vantaa Τηλ. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Ημερομηνία αναθεώρησης (εεεε-μμ-ηη) 2007-08-15

Αλλαγές από την προηγούμενη έκδοση Ενημερωμένο όνομα εταιρίας.

ES

Konelab™ / Serie T α-HBDH 981380 10 x 10 ml

INDICACIONES Determinación cuantitativa in vitro en analizadores Konelab de la actividad de la α-hidroxibutirato deshidrogenasa en suero humanos. Todos los resultados del test deben interpretarse en función del contexto clínico.

RESUMEN (1, 2) La α-hidroxibutirato deshidrogenasa (α-HBDH) es una isoenzima de lactato deshidrogenasa (LDH) que utiliza α-hidroxibutirato como sustrato adicional. La LDH se compone de cuatro cadenas de péptidos de dos tipos: M (músculo) y H (corazón). La composición de subunidades de las cinco isoenzimas es LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) y LD-5 (M4). La α-HBDH, presente en suero, representa la actividad de la LDH principalmente en las isoenzimas LD-1 y LD-2. En comparación con otras isoenzimas de LDH, se produce en niveles más elevados en el tejido del músculo cardiaco, por lo que en cierto modo es más sensible y más específica para el diagnóstico de infarto de miocardio.

PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO α-HBDH 2-Oxobutirato + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hidroxibutirato + NAD+

INFORMACIÓN SOBRE LOS REACTIVOS Reactivo A 10 x 8 ml Reactivo B 1 x 20 ml

Concentraciones Reactivo A: Tampón fosfato, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oxobutirato 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reactivo B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Precauciones Sólo para uso en diagnósticos in vitro. Adopte las medidas de precaución habituales para manipular reactivos de laboratorio.

ESTE PROSPECTO ES PARA USO FUERA DE EE. UU. TODAS LAS REFERENCIAS A LOS SISTEMAS KONELAB SE REFIEREN TAMBIÉN A LA SERIE T.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

El reactivo contiene azida sódica como conservante. No lo ingiera. Evite el contacto con la piel y las membranas mucosas.

Preparación Agregue 2 ml de reactivo B al frasco de reactivo A. Tape el vial y agítelo. Nota: Compruebe que no haya burbujas en el cuello de la botella ni en la superficie del reactivo cuando inserte los viales o recipientes en el analizador Konelab.

Almacenamiento y estabilidad Si se protegen de la luz, los reactivos contenidos en viales sin abrir permanecen estables a 2...8 °C hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. Consulte las notas de aplicación del analizador Konelab para determinar la estabilidad de los reactivos una vez abiertos y puestos en el analizador.

RECOGIDA DE MUESTRAS

Tipo de muestra Puede utilizarse suero no hemolizado. No utilice plasma de heparina.

Precauciones Las muestras de origen humano deben manejarse y desecharse como si se tratase de material potencialmente infeccioso.

Almacenamiento (1) La muestra puede almacenarse de 1 a 3 días a temperatura ambiente (18...25 °C) y un máximo de 7 días a 4...8 °C.

PROCEDIMIENTO DEL TEST Consulte el procedimiento automático para el analizador Konelab en el Manual del Analizador y las notas de la aplicación. No puede garantizarse la fiabilidad de ninguna aplicación no aprobada por Thermo Fisher Scientific Oy, por lo que deberá evaluarla el usuario.

Materiales suministrados Reactivos descritos anteriormente.

Materiales requeridos pero no suministrados Controles descritos a continuación.

Calibración La respuesta (dA/min) se convierte en unidades de resultado con un factor de cálculo.

Control de calidad Utilice muestras de control de calidad al menos una vez al día y cada vez que se utilice un nuevo frasco de reactivo. Controles disponibles: Nortrol, código: 981043 Abtrol, código: 981044 Los intervalos y límites de control deben adaptarse a los requisitos de cada laboratorio. Los resultados de las muestras de control de calidad deben estar dentro de los límites establecidos por el laboratorio.

CÁLCULO DE RESULTADOS El analizador Konelab calcula los resultados automáticamente de la manera siguiente: Actividad en U/l = dA/min x factor TV x 1000 Factor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P donde: TV= Total de volumen de reacción en ml SV= Volumen de muestra en ml 6.3= Coeficiente de extinción de NADH a 340 nm P= Longitud de recorrido de cubeta = 1 Factor de conversión μkat/l = (U/l)/60

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Interferencias Criterio: recuperación entre + 10% de los valores iniciales. Bilirrubina: sin interferencias encontradas hasta 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Hemólisis: no utilice muestras hemolizadas. Lipemia: sin interferencias encontradas hasta 3.4 mmol/l (300 mg/dl) de triglicéridos. Si desea información sobre la interferencia de otras sustancias, consulte la referencia 3.

VALORES PREVISTOS (4) Adultos: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Los valores mencionados sirven sólo como guía. Se recomienda que cada laboratorio verifique este rango o derive un intervalo de referencia para la población a la que atiende.

RANGO DE MEDIDA (5) 8 – 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Rango de medida aumentado después de la segunda dilución: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

CARACTERÍSTICAS DEL RESULTADO (5)

Límite de detección 4 U/l (0.07 μkat/l) El límite de detección representa la concentración/ actividad más baja mensurable que puede distinguirse de cero. Se calcula como la concentración de muestra cero + 3 SD (intraserie, n=24).

Imprecisión Media

154 U/l Media 174 U/l

Media 402 U/l

SD CV% SD CV% SD CV% Intraserie 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Interdiario 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Total 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Se realizó un estudio de precisión con Konelab 30 durante 10 días, siendo el número de medidas n = 40.

Comparación de métodos El estudio comparativo realizado entre este reactivo α-HBDH (y) y un test comercialmente disponible (x) dio los resultados siguientes: Regresión lineal (unidad de resultado U/l): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Las concentraciones de las muestras oscilaron entre 37 e 374 U/l. Los resultados obtenidos en cada laboratorio pueden diferir de los datos de resultados presentados.

BIBLIOGRAFÍA 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,


Laboratory Results, 1st edition, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main, Germany, 1998, pp. 89 - 94.



5. Datos de archivo de Thermo Fisher Scientific Oy.

FABRICANTE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Fecha de revisión (aaaa-mm-dd) 2007-08-15

Cambios desde la versión anterior Nombre de empresa actualizado.

ET

Konelab™ / T Seeria α-HBDH 981380 10 x 10 ml

SIHTOTSTARVE α-hüdroksüvõihappe dehüdrogenaasi aktiivsuse in vitro kvantitatiivne määramine inimese seerumis või plasmas Konelab analüsaatoritel. Katsetulemuste tõlgendamisel tuleb alati arvesse võtta kliinilist tausta.

KOKKUVÕTE (1, 2) α-hüdroksüvõihappe dehüdrogenaas (α-HBDH) on laktaadi dehüdrogenaasi (LDH) isoensüüm, mis kasutab täiendava substraadina α-hüdroksüvõihapet. LDH koosneb neljast peptiidahelast, mida on kaht, M (lihase) ja H (südame) tüüpi. Viis isoensüümi koosnevad alamühikutest järgmiselt: LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) ja LD-5 (M4). Seerumis olev α-HBDH annab selle LDH, põhiliselt isoensüümide LD-1 ja LD-2 aktiivsuse. Võrreldes LDH muude isoensüümidega leidub seda südame lihaskoes rohkem, seetõttu on see müokardi infarkteerumise diagnostikaks mõnevõrra tundlikum ja spetsiifilisem marker.

MEETODI PÕHIMÕTE α-HBDH 2-oksobutüraat + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-hüdroksübutüraat + NAD+

TEAVE REAKTIIVIDE KOHTA A-reaktiiv: 10 x 8 ml B-reaktiiv: 1 x 20 ml

Kontsentratsioonid A-reaktiiv: fosfaatpuhver, pH 7.5 64 mmol/l 2-oksobutüraat 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % B-reaktiiv: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Hoiatused Kasutamiseks ainult in vitro diagnostikas. Kõigi laborireaktiivide käsitsemisel tuleb rakendada tavapäraseid ettevaatusabinõusid. Reaktiiv sisaldab säilitusainena naatriumasiidi. Mitte neelata. Vältida kokkupuudet naha ja limaskestadega.

Ettevalmistamine A-reaktiivi pudelile lisatakse 2 ml B-reaktiivi. Viaal suletakse korgiga ja segatakse. Märkus. Enne reaktiiviviaalide või -nõude viimist Konelab analüsaatorisse tuleb kontrollida, et pudelikaelas ega reaktiivi pinnal ei oleks mulle.

Säilitamine ja stabiilsus Avamata viaalides püsivad reaktiivid temperatuuril 2…8 °C valguse eest kaitstuna stabiilsena sildile trükitud aegumistähtajani. Teave laetud reaktiivide stabiilsuse kohta on esitatud Konelab analüsaatori tehnilistes märkustes.

PROOVIDE VÕTMINE

Proovi tüüp Kasutatakse hemolüüsumata seerumit. Hepariiniga plasmaproove mitte kasutada.

Hoiatused Inimpäritolu proovid tuleb käsitsemisel ja kõrvaldamisel lugeda võimalikeks nakkusallikateks.

Säilitamine (1) Proovi võib temperatuuril 18…25 °C säilitada 1 kuni 2 päeva ja temperatuuril 4…8 °C kuni 7 päeva.

KATSEPROTSEDUUR Teave automaatse katseprotseduuri kasutamise kohta Konelab analüsaatoril on esitatud juhendis ja tehnilistes märkustes. Thermo Fisher Scientific Oy poolt valideerimata rakendusviiside sooritusnäitajaid tagada ei saa, seetõttu peab neid hindama lõppkasutaja.

PAKENDI INFOLEHT ON KOOSTATUD KASUTAMISEKS VÄLJASPOOL USA-D. KONELAB SYSTEMSI VIITED KEHTIVAD ÜHTLASI T SEERIA KOHTA.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

Kaasasolevad materjalid Eespool kirjeldatud reaktiivid.

Vajalikud materjalid, mida kaasas pole Allpool kirjeldatud kontrollid.

Kaliibrimine Vastus (dA/min) teisendatakse ühikuliseks tulemuseks vastava arvutusteguri abil.

Kvaliteedikontroll Kvaliteedikontrolliproove kasutatakse vähemalt kord päevas ja iga kord, kui kasutatakse uut reaktiivipudelit. Saadaval on järgmised kontrollproovid: Nortrol, koodiga 981043 Abtrol, koodiga 981044 Kontrollide vahemikud ja piirid tuleb kohaldada individuaalsete laborite vajadustele. Kvaliteedikontrolliproovide tulemused peavad jääma labori poolt seatud piiridesse.

TULEMUSTE ARVUTAMINE Tulemused arvutab Konelab analüsaator automaatselt järgmisel viisil: Aktiivsus (U/l) = dA/min x tegur TV x 1000 tegur = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P kus: TV= reaktsiooni kogumaht (ml) SV= proovi maht (ml) 6.3= NADH ekstinktsioonitegur lainepikkusel 340 nm P= küveti optiline teepikkus = 1 teisendustegur µkat/l = (U/l)/60

PROTSEDUURI PIIRANGUD

Segavad mõjud Tingimus: Saagis algväärtuse suhtes ±10%. Bilirubiin: kontsentratsioonini kuni 980 µmol/l (57.3 mg/dl) segavat mõju ei täheldatud. Hemolüüs: hemolüüsunud proove mitte kasutada. Lipeemia: triglütseriidide kontsentratsioonini kuni 3.4 mmol/l (300 mg/dl) segavat mõju ei täheldatud. Muid segavaid aineid on käsitletud viites 3.

OODATAVAD TULEMUSED (4) Täiskasvanutel: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Toodud väärtused on mõeldud suunitluslikena. Kõigil laboritel on soovitatav seda vahemikku kontrollida, või tuletada ise etalonvahemik teenindatava populatsiooni seas.

MÕÕTEPIIRKOND (5) 8 - 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Pikendatud mõõtepiirkond pärast sekundaarset lahjendust: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

SOORITUSNÄITAJAD (5)

Avastamispiir 4 U/l (0.07 μkat/l) Avastamispiir on madalaim mõõdetav kontsentratsioon/aktiivsus, mis on nullist eristatav. See leitakse kui nullproovi kontsentratsioon + 3 SD (katseseeriasisene, n=24).

Ebatäpsus Keskmine

154 U/l Keskmine

174 U/l Keskmine

402 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Katseseeriasisene 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Eri päevad 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Summarne 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Konelab 30 peal viidi 10 päeva jooksul läbi täpsusuuring, mõõtmiste arv uuringus oli vähemalt n = 40.

Meetodite võrdlus Võrdlevas uuringus käesoleva α-HBDH reaktiivi (y) ja müügiloleva analüüsi (x) vahel saadi järgmised tulemused: Lineaarne regressioon (tulemuse ühik U/l) y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Proovikontsentratsioonid jäid vahemikku 37–374 U/l. Individuaalsetes laborites saadavad tulemused võivad erineda esitatud sooritusnäitajatest.

KIRJANDUS 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Andmed on hoiul ettevõttes Thermo Fisher Scientific Oy.

TOOTJA Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finland Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Teksti läbivaatamise kuupäev (aaaa-kk-pp) 2007-08-15

Muudatused võrreldes eelmise versiooniga Ettevõtte nimi uuendatud.

HU

Konelab™ / T Sorozat α-HBDH 981380 10 x 10 ml

RENDELTETÉS Emberi szérum α-hidroxibutirát-dehidrogenáz aktivitásának in vitro kvantitatív meghatározásához Konelab analizátorokban. Minden vizsgálati eredményt a klinikai képpel összefüggésben kell értékelni.

ÖSSZEGZÉS (1, 2) αAz α-hidroxibutirát-dehidrogenáz (α-HBDH) a laktát-dehidrogenáz (LDH) egyik izoenzimje, amely az α-hidroxibutirátot kiegészítõ szubsztrátként használja fel. Az LDH négy peptidláncból épül fel, melyek két típusba sorolhatók: M (muscle – izom) és H (heart – szív). Az öt izoenzim alegységszerkezete a következõ: LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) és LD-5 (M4). Az α-HBDH, mely jelen van a szérumban, az LDH aktivitásért fõként az LD-1 és LD-2 izoenzimeken keresztül felel. Az LDH többi izoenzimjével összehasonlítva, az LDH nagyobb koncentrációban van jelen a szívizomszövetben, ezért valamelyest nagyobb szenzitivitást és nagyobb specificitást biztosít a miokardiális infarktus diagnosztizálásakor.

AZ ELJÁRÁS ALAPELVE α-HBDH 2-oxobutirát + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-hidroxibutirát + NAD+

REAGENSEK ADATAI A reagens 10 x 8 ml B reagens 1 x 20 ml Koncentrációk A reagens: Foszfátpuffer, pH 7.5 64 mmol/l 2-oxobutirát 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % B reagens: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Óvintézkedések Kizárólag in vitro diagnosztikus használatra. Tartsa be a laboratóriumi reagensek kezelésére vonatkozó szokásos elõírásokat. A reagens tartósítószerként nátrium-azidot tartalmaz. Ne nyelje le. Kerülje érintkezését a bõrrel és a nyálkahártyákkal.

Elõkészítés Adjon a B reagens üvegének tartalmából 2 ml-t az A reagenshez. Zárja le az üveget és keverje össze. Megjegyzés: Ellenõrizze, hogy nincs-e buborék az üveg nyakánál vagy a reagens felszínén, amikor reagenst tartalmazó üvegeket, illetve edényeket tesz a Konelab analizátorba.

Tárolás és stabilitás Felbontatlan üvegben, fénytõl védett helyen tárolt reagensek 2...8 °C között a címkén feltüntetett lejárati idõpontig stabilak. A reagensek elemzõkészüléken belüli stabilitásához olvassa el a Konelab analizátorhoz tartozó Alkalmazási tudnivalókat.

MINTAVÉTEL A minta típusa Használjon hemolizálatlan szérumot. Ne használjon heparinos plazmát.

Óvintézkedések Az emberi mintákat úgy kell kezelni és kidobni, mintha azok fertõzõek lennének.

Tárolás (1) A mintát szobahõmérsékleten (18...25°C-on) 1-3 napig, 4…8 °C-on 7 napig lehet tárolni.

A VIZSGÁLATI ELJÁRÁS Automatizált eljárás kivitelezéséhez olvassa el a Konelab analizátorhoz tartozó Használati kézikönyvet és Alkalmazási tudnivalókat. Nem garantálható semmilyen olyan alkalmazás eredménye, amelyet a Thermo Fisher Scientific Oy nem hagyott jóvá, ezért ezeket a felhasználónak kell értékelnie.

Szolgáltatott anyagok A fent leírt reagensek.

Szükséges, de nem szolgáltatott anyagok Az alább leírt kontrollminták.

Kalibrálás A válasz (dA/min) egy számítási tényezõ segítségével eredményegységekre átszámítva jelenik meg.

Minõségellenõrzés Használjon minõségellenõrzõ mintákat naponta legalább egyszer, illetve minden új üveg reagens felnyitásakor. Rendelkezésre álló kontrollminták: Nortrol, kód: 981043 Abtrol, kód: 981044 Az ellenõrzési intervallumokat és határértékeket az aktuális laboratóriumi követelményekhez kell igazítani. A minõségellenõrzõ minták eredményeinek a laboratórium által elõre beállított határértékek közé kell esniük.

AZ EREDMÉNYEK KISZÁMÍTÁSA Az eredményeket a Konelab analizátor automatikusan kiszámítja a következõk szerint: Aktivitás U/l = dA/min x faktor TV x 1000 Faktor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P ahol: TV = teljes reagáló térfogat ml-ben SV = minta térfogata ml-ben 6.3= a NADPH extinkciós együtthatója 340 nm-en P= küvetta úthossza = 1 Átváltási faktor μkat/l = (U/l)/60

EZ A TÁJÉKOZTATÓ AZ EGYESÜLT ÁLLAMOKON KÍVÜLI HASZNÁLATRA VONATKOZIK. A KONELAB RENDSZEREKRE TETT MINDEN UTALÁS A T SOROZATRA IS VONATKOZIK.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

AZ ELJÁRÁS KORLÁTAI

Interferencia Kritérium: Az értékek a kezdeti értékek ±10% án belül maradnak. Bilirubin: Nem észleltek interferenciát 980 μmol/l (57.3 mg/dl) értékig. Hemolízis: Ne használjon hemolizált mintát. Lipaemia: Nem észleltek interferenciát 3.4 mmol/l (300 mg/dl) triglicerid koncentrációig. Egyéb interferenciát okozó anyagok tekintetében lásd az 3. referenciát.

VÁRHATÓ ÉRTÉKEK (4) Felnõttek: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) A feltüntetett értékek kizárólag tájékoztató jellegûek. Minden laboratórium esetében ajánlott a normál tartomány megerõsítése, illetve a kiszolgált populációra jellemzõ referenciaintervallum kialakítása.

MÉRÉSI TARTOMÁNY (5) 8 -700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Kiterjesztett mérési tartomány másodlagos hígítás után: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

TELJESÍTMÉNYI JELLEMZÕK (5)

Detektálási határérték 4 U/l (0.07 μkat/l) A detektálási határérték az a legkisebb mérhetõ koncentráció/aktivitás, amely még megkülönböztethetõ a nullától. Kiszámítása a következõ: nulla minta koncentrációja + 3 SD (mérés közben n=24).

Pontatlanság Középérték

154 U/l Középérték


402 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Mérés közben 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Napok közt 6.7 4.4 6.6 3.7 1 1.8 2.9 Teljes 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Pontossági mérést végeztek Konelab 30 használatával 10 napon keresztül, 40-es mérésszámmal (n = 40).

Módszerösszehasonlítás Ezen α-HBDH reagens (y) és egy forgalomban lévõ teszt (x) összehasonlítása során a következõ eredmények születtek: Lineáris regresszió (eredmény egység U/l) y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 A mintakoncentrációk 37 és 374 U/l között voltak. Az egyes laboratóriumokban nyert értékek különbözhetnek a megadott teljesítmény adatoktól.

BIBLIOGRÁFIA 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. A Thermo Fisher Scientific Oy-nál nyilvántartott adatok

GYÁRTÓ Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Ellenõrzés idõpontja (éééé-hh-nn) 2007-08-15

Változtatások az elõzõ változathoz képest A cég neve frissítésre került.

IT

Konelab™ / Serie T α-HBDH 981380 10 x 10 ml

USO CONSIGLIATO Prodotto impiegato per la determinazione quantitativa in vitro dell’attività della α-idrossibutirrato deidrogenasi nel siero umani con analizzatori Konelab. Tutti i risultati del test devono essere interpretati in riferimento al contesto clinico specifico.

SOMMARIO (1, 2) L’α-idrossibutirrato deidrogenasi (α-HBDH) è un isoenzima della lattato deidrogenasi (LDH), che utilizza l’α-idrossibutirrato come substrato aggiuntivo. La LDH è composta da quattro catene polipeptidiche che si differenziano in due diversi tipi (subunità): M (muscolo) e H (heart, cuore). La composizione in subunità determina cinque isoenzimi denominati LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) e LD-5 (M4). L’α-HBDH presente nel siero, rappresenta l’attività dell’LDH, principalmente degli isoenzimi LD-1 e LD-2. Rispetto ad altri isoenzimi dell’LDH, è presente a livelli superiori nel tessuto del muscolo cardiaco e pertanto risulta in qualche modo più sensibile e specifica nella diagnosi di infarto cardiaco.

PRINCIPIO DELLA PROCEDURA α-HBDH 2-Ossobutirrato + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Idrossibutirrato + NAD+

INFORMAZIONI SUI REAGENTI Reagente A 10 x 8 ml Reagente B 1 x 20 ml

Concentrazioni Reagente A: Tampone fosfato, pH 7.5 64 mmol/l 2-Ossobutirrato 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reagente B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Precauzioni Solo per uso diagnostico in vitro. Rispettare le normali precauzioni previste per l’utilizzo di tutti i reagenti di laboratorio. Il reagente contiene sodio azide come conservante. Non ingerire. Evitare il contatto con la cute e le membrane mucose.

Preparazione Aggiungere 2 ml di reagente B al flacone di reagente A. Tappare il vial ed agitare. Nota: Controllare che non siano presenti bolle sul collo del flacone o sulla superficie del reagente durante l’inserimento di vial o recipienti di reagente nell'analizzatore Konelab.

Conservazione e stabilità I reagenti in vial intatti sono stabili fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, se conservati a una temperatura di 2…8 °C e al riparo dalla luce. Per la stabilità dei reagenti sullo strumento, fare riferimento alle note applicative dell'analizzatore Konelab in uso.

RACCOLTA DEL CAMPIONE

Tipo di campione È possibile utilizzare siero non emolizzato. Non usare plasma eparinizzato.

Precauzioni I campioni umani devono essere maneggiati e smaltiti come campioni potenzialmente infetti.

Conservazione (1) Il campione può essere conservato da 1 a 3 giorni a temperatura ambiente (18…25 °C) ed al massimo per 7 giorni a 4…8 °C.

PROCEDURA ANALITICA Per le procedure automatiche consultare il manuale d’uso e le note applicative dell'analizzatore Konelab. Tutte le applicazioni non esplicitamente approvate da Thermo Fisher Scientific Oy, non possono essere garantite in termini di prestazioni e dovranno pertanto essere valutate dall'utilizzatore.

Materiali inclusi nel kit I reagenti sopra descritti.

Materiali necessari ma non inclusi nel kit I controlli indicati di seguito.

Calibrazione La risposta (dA/min) è convertita nelle unità di misura del risultato per mezzo di un fattore di calcolo.

Controllo di qualità Utilizzare i campioni del controllo di qualità almeno una volta al giorno e ogni volta che si utilizza un nuovo flacone di reagente. Controlli disponibili: Nortrol, codice: 981043 Abtrol, codice: 981044 Gli intervalli e i limiti del controllo devono essere adattati ai requisiti dei singoli laboratori. I risultati dei campioni del controllo di qualità devono rientrare nei limiti di variabilità stabiliti a priori dal laboratorio.

CALCOLO DEI RISULTATI I risultati vengono calcolati automaticamente dall’analizzatore Konelab come segue: Attività in U/l = dA/min x Fattore TV x 1000 Fattore = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P dove: TV= Volume totale di reazione in ml SV= Volume del campione in ml 6.3= Coefficiente di estinzione del NADH a 340 nm P= Tracciato della cuvetta = 1 Fattore di conversione µkat/l = (U/l)/60

LIMITI DELLA PROCEDURA

Interferenze Criterio: Recupero entro ± 10% del valore iniziale. Bilirubina: Non sono state rilevate interferenze fino a 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Emolisi: Non usare campioni emolizzati. Lipemia: Non sono state rilevate interferenze fino a 3.4 mmol/l (300 mg/dl) di trigliceridi. Per le altre sostanze interferenti, fare riferimento alla voce bibliografica 3.

VALORI PREVISTI (4) Adulti: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) I valori citati dovranno servire esclusivamente come riferimento. Si raccomanda ad ogni laboratorio di verificare l'applicabilità di questo intervallo alla propria popolazione di pazienti e, se necessario, di determinare appositi intervalli di riferimento.

INTERVALLO DI MISURAZIONE (5) 8 – 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Intervallo di misurazione ampliato dopo la seconda diluizione: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI (5)

Limite di rilevamento 4 U/l (0.07 µkat/l) Il limite di rilevamento rappresenta la concentrazione/ attività misurabile più bassa che può essere distinta da zero. È calcolato come la concentrazione misurata nel campione zero + 3 DS (entro la serie, n=24).

IL PRESENTE INSERTO NELL’IMBALLO PUO’ ESSERE APPLICATO AL DI FUORI DEGLI STATI UNITI. EVENTUALI RIFERIMENTI A KONELAB SYSTEMS SI RIFERISCONO ANCHE ALLA SERIE T.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

Imprecisione Media

154 U/l Media 174 U/l

Media 402 U/l

DS CV% DS CV% DS CV% Entro la serie 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Fra la serie 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Totale 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

È stato eseguito uno studio di precisione utilizzando un analizzatore Konelab 30 per 10 giorni, con un numero di misurazioni pari a n=40.

Metodo di confronto Un confronto fra questo reagente α-HBDH (y) e un test comunemente disponibile in commercio (x) ha determinato i seguenti risultati: Regressione lineare (risultato espresso in U/I): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Prove eseguite con concentrazioni di campioni comprese fra 37 e 374 U/l. I risultati ottenuti nei singoli laboratori possono differire dai dati sulle prestazioni riportati. BIBLIOGRAFIA 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Dati in archivio presso Thermo Fisher Scientific Oy.

PRODUTTORE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Data della revisione (aaaa-mm-gg) 2007-08-15

Modifiche rispetto alla versione precedente Ragione sociale aggiornata.

LT


RENDELTETÉS Emberi szérum α-hidroxibutirát-dehidrogenáz aktivitásának in vitro kvantitatív meghatározásához Konelab analizátorokban. Minden vizsgálati eredményt a klinikai képpel összefüggésben kell értékelni.

ÖSSZEGZÉS (1, 2) αAz α-hidroxibutirát-dehidrogenáz (α-HBDH) a laktát-dehidrogenáz (LDH) egyik izoenzimje, amely az α-hidroxibutirátot kiegészítõ szubsztrátként használja fel. Az LDH négy peptidláncból épül fel, melyek két típusba sorolhatók: M (muscle – izom) és H (heart – szív). Az öt izoenzim alegységszerkezete a következõ: LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) és LD-5 (M4). Az α-HBDH, mely jelen van a szérumban, az LDH aktivitásért fõként az LD-1 és LD-2 izoenzimeken keresztül felel. Az LDH többi izoenzimjével összehasonlítva, az LDH nagyobb koncentrációban van jelen a szívizomszövetben, ezért valamelyest nagyobb szenzitivitást és nagyobb specificitást biztosít a miokardiális infarktus diagnosztizálásakor.

AZ ELJÁRÁS ALAPELVE α-HBDH 2-oxobutirát + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-hidroxibutirát + NAD+

REAGENSEK ADATAI A reagens 10 x 8 ml B reagens 1 x 20 ml

Koncentrációk A reagens: Foszfátpuffer, pH 7.5 64 mmol/l 2-oxobutirát 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % B reagens: NADH > 0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Óvintézkedések Kizárólag in vitro diagnosztikus használatra. Tartsa be a laboratóriumi reagensek kezelésére vonatkozó szokásos elõírásokat. A reagens tartósítószerként nátrium-azidot tartalmaz. Ne nyelje le. Kerülje érintkezését a bõrrel és a nyálkahártyákkal.

Elõkészítés Adjon a B reagens üvegének tartalmából 2 ml-t az A reagenshez. Zárja le az üveget és keverje össze. Megjegyzés: Ellenõrizze, hogy nincs-e buborék az üveg nyakánál vagy a reagens felszínén, amikor reagenst tartalmazó üvegeket, illetve edényeket tesz a Konelab analizátorba.

Tárolás és stabilitás Felbontatlan üvegben, fénytõl védett helyen tárolt reagensek 2...8 °C között a címkén feltüntetett lejárati idõpontig stabilak. A reagensek elemzõkészüléken belüli stabilitásához olvassa el a Konelab analizátorhoz tartozó Alkalmazási tudnivalókat.

MINTAVÉTEL

A minta típusa Használjon hemolizálatlan szérumot. Ne használjon heparinos plazmát.

Óvintézkedések Az emberi mintákat úgy kell kezelni és kidobni, mintha azok fertõzõek lennének.

Tárolás (1) A mintát szobahõmérsékleten (18...25 °C-on) 1-3 napig, 4…8 °C-on 7 napig lehet tárolni.

A VIZSGÁLATI ELJÁRÁS Automatizált eljárás kivitelezéséhez olvassa el a Konelab analizátorhoz tartozó Használati kézikönyvet és Alkalmazási tudnivalókat. Nem garantálható semmilyen olyan alkalmazás eredménye, amelyet a Thermo Fisher Scientific Oy nem hagyott jóvá, ezért ezeket a felhasználónak kell értékelnie.

Szolgáltatott anyagok A fent leírt reagensek.

Szükséges, de nem szolgáltatott anyagok Az alább leírt kontrollminták.

Kalibrálás A válasz (dA/min) egy számítási tényezõ segítségével eredményegységekre átszámítva jelenik meg.

Minõségellenõrzés Használjon minõségellenõrzõ mintákat naponta legalább egyszer, illetve minden új üveg reagens felnyitásakor. Rendelkezésre álló kontrollminták: Nortrol, kód: 981043 Abtrol, kód: 981044 Az ellenõrzési intervallumokat és határértékeket az aktuális laboratóriumi követelményekhez kell igazítani. A minõségellenõrzõ minták eredményeinek a laboratórium által elõre beállított határértékek közé kell esniük.

AZ EREDMÉNYEK KISZÁMÍTÁSA Az eredményeket a Konelab analizátor automatikusan kiszámítja a következõk szerint: Aktivitás U/l = dA/min x faktor TV x 1000 Faktor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P ahol: TV = teljes reagáló térfogat ml-ben SV = minta térfogata ml-ben 6.3= a NADPH extinkciós együtthatója 340 nm-en P= küvetta úthossza = 1 Átváltási faktor μkat/l = (U/l)/60

AZ ELJÁRÁS KORLÁTAI

Interferencia Kritérium: Az értékek a kezdeti értékek ±10% án belül maradnak. Bilirubin: Nem észleltek interferenciát 980 μmol/l (57.3 mg/dl) értékig. Hemolízis: Ne használjon hemolizált mintát. Lipaemia: Nem észleltek interferenciát 3.4 mmol/l (300 mg/dl) triglicerid koncentrációig. Egyéb interferenciát okozó anyagok tekintetében lásd az 3. referenciát.

VÁRHATÓ ÉRTÉKEK (4) Felnõttek: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) A feltüntetett értékek kizárólag tájékoztató jellegûek. Minden laboratórium esetében ajánlott a normál tartomány megerõsítése, illetve a kiszolgált populációra jellemzõ referenciaintervallum kialakítása.

MÉRÉSI TARTOMÁNY (5) 8 -700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Kiterjesztett mérési tartomány másodlagos hígítás után: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

TELJESÍTMÉNYI JELLEMZÕK (5)

Detektálási határérték 4 U/l (0.07 μkat/l) A detektálási határérték az a legkisebb mérhetõ koncentráció/aktivitás, amely még megkülönböztethetõ a nullától. Kiszámítása a következõ: nulla minta koncentrációja + 3 SD (mérés közben n=24).

Pontatlanság Középérték



402 U/l SD CV% SD CV% SD CV% Mérés közben 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Napok közt 6.7 4.4 6.6 3.7 1 1.8 2.9 Teljes 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Pontossági mérést végeztek Konelab 30 használatával 10 napon keresztül, 40-es mérésszámmal (n = 40).

Módszerösszehasonlítás Ezen α-HBDH reagens (y) és egy forgalomban lévõ teszt (x) összehasonlítása során a következõ eredmények születtek: Lineáris regresszió (eredmény egység U/l) y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 A mintakoncentrációk 37 és 374 U/l között voltak. Az egyes laboratóriumokban nyert értékek különbözhetnek a megadott teljesítmény adatoktól.

BIBLIOGRÁFIA 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,




ŠIOS PAKUOTĖS INFORMACINIS LAPELIS TINKAMAS NAUDOTI UŽ JAV RIBŲ. BET KOKIA NUORODA Į KONELAB SYSTEMS APIMA IR T PRODUKTŲ SERIJĄ.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.


5. Duomenys uzregistruoti Thermo Fisher Scientific Oy dokumentacijoje.

GYÁRTÓ Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finland Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Ellenõrzés idõpontja (éééé-hh-nn) 2007-08-15

Változtatások az elõzõ változathoz képest Atnaujintas kompanijos pavadinimas.

LV

Konelab™ / T Sērijas α-HBDH 981380 10 x 10 ml

LIETOŠANAS NOLŪKS In vitro α-hidroxubuturāta dehidrogenāzes aktivitātes noteikšanai cilvēka serumā ar Konelab analizatoriem. Visi testa rezultāti ir jāņem vērā, vadoties pēc klīniskā konteksta.

KOPSAVILKUMS (1, 2) αHidroxubuturāta dehidrogenāze (α-HBDH) laktāta dehidrogenāzes (LDH) izoenzīms, kas izmanto α-hidroxubuturātu kā papildus strubtātu. LDH sastāv no četrām divu veidu peptītu ķēdēm: M (muskuļu) un H (sirds). Apakšvienību kompozīcijas no pieciem izoenzīmiem ir LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) un LD-5 (M4). α-HBDH, kas atrodas serumā, pārstām LDH aktivitāti pārsvarā LD-1 un LD-2 izoenzīmos. Salīdzinot ar citiem LHD izoenzīmiem, tas augstākos līmeņos pastāv sirds muskuļa audos, un tādēļ tas ir daudz jūtīgāks un daudz specifiskāks miokarda infarkta diagnozē.

PROCEDŪRAS PRINCIPS α-HBDH 2-Oksobuturāts + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hidroksobuturāts + NAD+

REAĢENTU INFORMĀCIJA Reaģents A 10 x 8 ml Reaģents B 1 x 20 ml

Koncentrācijas Reaģents A: Fosfāta buferšķīdums, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oksobuturāts 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reaģents B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Piesardzības pasākumi Tikai in vitro diagnostikas vajadzībām. Nodrošiniet parastos piesardzības pasākumus, kas jāievēro attiecībā uz rīkošanos ar visiem laboratorijas reaģentiem. Reaģents satur nātrija azīdu kā konservantu. Nenorīt. Izvairieties no kontakta ar ādu un gļotādu.

Sagatavošana Pievienojiet 2 ml Reaģenta B Reaģenta A pudelei. Uzlieciet korķi un sajauciet. Piezīme: Ievietojot reaģenta pudelītes vai traukus Konelab analizatorā, pārliecinieties, ka pudelītes kakliņā vai uz reaģenta virsmas nav burbuļi.

Uzglabāšana un stabilitāte Reaģenti neatvērtās pudelītēs ir stabili 2…8 °C temperatūrā līdz uzglabāšanas laika, kas uzdrukāts uz etiķetes, beigām, ja tie tiek pasargāti no gaismas iedarbības. Vadieties pēc sava Konelab analizatora pielietojuma piezīmēm, lai iegūtu informāciju par ievietoto reaģentu stabilitāti.

PARAUGU IEGŪŠANA

Parauga tips Var izmantot nehemolizētu serumu. Neizmantojiet heparīna plazmu.

Piesardzības pasākumi Ar no cilvēkiem iegūtajiem paraugiem ir jārīkojas un no tiem jāatbrīvojas tā, it kā tie būtu iespējami infekciozi.

Uzglabāšana (1) Paraugu drīkst uzglabāt no 1 līdz 3 dienām istabas temperatūrā (18…25 °C) un maksimāli 7 pie 4…8 °C temperatūras.

PĀRBAUDES PROCEDŪRA Vadieties pēc Uzziņas Rokasgrāmatas un Pielietojuma Piezīmēm, lai iegūtu informāciju par sava Konelab analizatora automātisko procedūru. Jebkāds pielietojums, kuru nav apstiprinājis Thermo Fisher Scientific Oy, nevar sniegt garantētu rezultātu, tādēļ tas jāizvērtē pašam lietotājam.

Piegādātie materiāli Iepriekš aprakstītie reaģenti.

Nepieciešamie, taču nepiegādātie materiāli Kontroles, kas aprakstītas tālāk.

Kalibrēšana Atbilde (dA/min) tiek pārveidota rezultāta vienībās, izmantojot aprēķinu faktoru.

Kvalitātes Kontrole Izmantojiet kvalitātes kontroles paraugus vismaz reizi dienā un ikreiz, kad tiek izmantota jauna reaģenta pudele.

Pieejamās kontroles: Nortrol, kods: 981043 Abtrol, kods: 981044 Kontroles intervāli un ierobežojumi ir jāpiemēro individuālajām laboratorijas prasībām. Kvalitātes kontroles paraugu rezultātiem ir jāsakrīt ar laboratorijas iepriekš noteiktajiem limitiem.

REZULTĀTU APRĒĶINĀŠANA Konelab analizators sekojoši automātiski aprēķina rezultātus: Aktivitāte U/l = dA/min x Faktors TV x 1000 Faktors = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P kur: TV= Kopējais reakcijas daudzums ml SV= Parauga daudzums ml 6.3= NADPH zuduma koeficents pie 340 nm P= Kuvetes ceļš = 1 Konversijas faktors μkat/l = (U/l)/60

PROCEDŪRAS IEROBEŽOJUMI

Interference Kritērijs: Atjaunošana + 10% robežās no sākotnējām vērtībām. Bilirubīns: Līdz 980 μmol/l (57.3 mg/dl) interference nav novērota. Hemolīze: Neizmantot hemolizētu paraugu. Lipēmija: Līdz 3.4 mmol/l (300 mg/dl) triglicerīdu interference nav novērota. Lai iegūtu informāciju par citām interferējošām vielām, lūdzu vadieties pēc uzziņas materiāla 3.

VĒLAMĀS VĒRTĪBAS (4) Pieaugušie: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Pēdiņās ietvertās vērtības ir jāuztver tikai kā uzziņas vērtības. Ieteicams, lai katra laboratorija verificētu šo diapazonu vai izstrādātu uzziņas intervālu populācijai, kam tā darbojas.

MĒRĪŠANAS DIAPAZONS (5) 8 -700 U/l (0.13 –11.7 μkat/l) Paplašināts mērīšanas diapazons pēc sekundāras atšķaidīšanas: 8 -4200 U/l (0.13 –70.0 μkat/l)

VEIKTSPĒJAS RAKSTUROJUMS (5)

Uztveršanas robeža 4 U/l (0.07 μkat/l) Uztveršanas robeža ir zemākā izmērāmā koncentrācija/aktivitāte, ko var atšķirt no nulles. Tā tiek aprēķināta kā nulles parauga koncentrācija + 3 SD (darbības laikā, n=24).

Neprecizitāte Vidējais

154 U/l Vidējais 174 U/l

Vidējais 402 U/l

SD CV% SD CV% SD CV% Darbības laikā 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Ar dienas starpību 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Kopā 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Precizitātes izpēte tika veikta, izmantojot Konelab 30, 10 dienu laikā, ar mērījumu skaitu n = 40.

Metodes salīdzināšana Salīdzināšana starp šo α-HBDH reaģentu (y) un komerciāli pieejamu pārbaudi (x) sniedza sekojošus rezultātus: Lineārā regresija (rezultāta vienība U/l): y = 0.99 x –0.2 r = 0.999 n = 64 Paraugu koncentrācija bija starp 37 un 374 U/l. Rezultāti, kas iegūti atšķirīgās laboratorijās, var atšķirties no dotajiem veiktspējas datiem.

BIBLIOGRĀFIJA 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,



3. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press, Washington, D.C., 3-446 – 3-447, 2000.


5. Thermo Fisher Scientific Oy pieejamie dati.

RAŽOTĀJS Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Atjaunošanas datums (gggg-mm-dd) 2007-08-15

Izmaiņas no iepriekšējās versijas Atjaunināts uzņēmuma nosaukums.

ŠIS IEPAKOJUMA PIELIKUMS IR PIELIETOJAMS ĀRPUS ASV. JEBKURA ATSAUKSME UZ KONELAB SISTĒMU ATSAUCAS ARĪ UZ T SĒRIJU.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

PL

Konelab™ / Seria T α-HBDH 981380 10 x 10 ml

ZASTOSOWANIE Do ilościowego oznaczania in vitro aktywności dehydrogenazy α-hydroksymaślanowej w ludzkiej surowicy na analizatorach Konelab. Interpretacji wyników należy dokonać w kontekście klinicznym.

WPROWADZENIE (1, 2) Dehydrogenaza α-hydroksymaślanowa (α-HBDH) jest izoenzymem dehydrogenazy mleczanowej (LDH), która używa α-hydroksymaślan jako dodatkowy substrat. LDH jest złożony z czterech łańcuchów dwóch typów peptydu: M (muscle) i H (heart). Kompozycje pięciu podjednostek izoenzymów są następujące LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) i LD-5 (M4). α-HBDH obecny w surowicy reprezentuje aktywność LDH, głównie dwóch izoenzymów LD-1 i LD-2. W porównaniu do innych izoenzymów LDH ten zdarza się w wyższych poziomach w tkance mięśnia sercowego i dlatego jest nieco wrażliwszy i określany w zawale mięśnia sercowego.

ZASADA METODY α-HBDH 2-oksymaślan + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-hydroksymaślan + NAD+

INFORMACJA O ODCZYNNIKU Odczynnik A 10 x 8 ml Odczynnik B 1 x 20 ml

Stężenia Odczynnik A: Bufor fosforanowy, pH 7.5 64 mmol/l 2-oksymaślan 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Odczynnik B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Środki ostrożności Wyłącznie do diagnostyki in vitro. Zachować środki ostrożności wymagane dla odczynników laboratoryjnych. Odczynnik zawiera azydek sodu jako konserwant. Nie połykać. Unikać kontaktu ze skórą i błonami śluzowymi.

Przygotowanie Dodać 2 ml odczynnika B do butelki odczynnika A. Zamknij i zamieszaj. Uwaga: Sprawdź przed wstawieniem naczynia z odczynnikiem do analizatora Konelab, czy w fiolce i na powierzchni odczynnika nie znajdują się pęcherzyki powietrza.

Przechowywanie i stabilność Zamknięte odczynniki są trwałe w temperaturze 2…8 °C aż do daty ważności podanej na opakowaniu. Chroń przed światłem. Trwałość odczynników w analizatorze podana jest w aplikacji analizatora Konelab.

POBRANIE I PRZYGOTOWANIE PRÓBKI

Rodzaj próbki Niezhemolizowane próbki surowicy. Nie używaj osocza pobranego na heparynę.

Środki ostrożności Próbki badane powinny być traktowane jako potencjalnie zakaźne.

Przechowywanie (1) Próbki mogą być przechowywane przez 1 do 3 dni w temperaturze pokojowej (18…25 °C) i maksymalnie 7 dni w 4…8 °C.

POMIAR Należy odnieść się do instrukcji i aplikacji dla zautomatyzowanej procedury na analizatorze Konelab. Aplikacja, która nie została autoryzowana przez Thermo Fisher Scientific Oy nie może być gwarancją i musi zostać oceniona przez użytkownika.

Dostarczone materiały Odczynniki wymienione powyżej.

Materiały wymagane, nie należące do zestawu Kontrole wskazane poniżej.

Kalibracja Wynik otrzymujemy w jednostkach mnożąc odczyt (dA/min) przez współczynnik kalkulacyjny.

Kontrola jakości Zalecane jest wykonanie kontroli jakości co najmniej raz dziennie, po każdej kalibracji i zawsze przy użyciu nowej butelki odczynnika. Dostępne kontrole: Nortrol, numer 981043 Abtrol, numer 981044 Przedziały i limity kontroli muszą być dostosowane do indywidualnych wymagań laboratorium. Wyniki kontroli jakości powinny odpowiadać wartościom ustanowionym wstępnie przez laboratorium.

OBLICZANIE WYNIKÓW Wyniki obliczane są automatycznie przez analizator Konelab używając wzoru: Aktywność in U/l = dA/min x faktor TV x 1000 Faktor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P gdzie: TV= Objętość mieszaniny reakcyjnej w ml SV= Objętość próbki w ml 6.3= Współczynnik ekstynkcji NADH przy 340 nm P= Światło kuwety = 1

Współczynnik przeliczeniowy μkat/l = (U/l)/60

OGRANICZENIA PROCEDURY

Interferencje Kryterium: Zakres + 10% wartości początkowych. Bilirubina: Nie ma wpływu aż do 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Hemoliza: Nie używaj próbek zhemolizowanych. Lipemia: Nie ma wpływu aż do 3.4 mmol/l (300 mg/dl) triglicerydów. Dla innych interferujących substancji, odnieś się do pozycji 3.

WARTOŚCI OCZEKIWANE (4) Dorośli: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Podane wartości powinny służyć tylko jako wytyczne. Zaleca się, aby każde laboratorium zweryfikowało ten zakres, lub wprowadziło zmiany dla danej populacji.

ZAKRES POMIARU (5) 8 - 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Rozszerzony zakres pomiaru po rozcieńczeniu: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

CHARAKTERYSTYKA PRACY (5)

Granica wykrywalności 4 U/l (0.07 μkat/l) Granica wykrywalności to najniższe wymierne stężenie/aktywność, które może zostać odróżnione od zera. Obliczane jest jako stężenie próbki zerowej + 3 SD (wewnątrz serii, n =24).

Nieprecyzyjność Średnia

154 U/l Średnia 174 U/l

Średnia 402 U/l

SD CV% SD CV% SD CV% Wewnątrz oznaczenia 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Pomiędzy oznaczeniami 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Całkowita 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Precyzja została wykonana używając Konelab 30 przez 10 dni z ilością pomiarów n = 40.

Metoda porównawcza Porównanie pomiędzy tym odczynnikiem α-HBDH (y) i powszechnie dostępną metodą (x) dało następujące wyniki: Regresja liniowa (wyniki w jednostkach U/l): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Stężenia próbek znajdowały się między 37 i 374 U/l. Rezultaty w indywidualnych laboratoriach mogą różnić się dla podanych precyzji oraz danych dla metod porównawczych.

PIŚMIENNICTWO 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Dane dostępne w Thermo Fisher Scientific Oy.

PRODUCENT Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Ostatnia zmiana (rrrr-mm-dd) 2007-08-15

Zmiany od poprzedniej wersji Zaktualizowano nazwę firmy.

PT

Konelab™ / Série T α-HBDH 981380 10 x 10 ml

USO PRETENDIDO Para a determinação quantitativa in vitro da actividade da α-hidroxibutirato desidrogenase no soro humanos, nos analisadores Konelab. Todos os resultados dos testes têm de ser interpretados no contexto clínico.

SUMÁRIO (1, 2) A α-hidroxibutirato desidrogenase (α-HBDH) é uma isoenzima da lactato desidrogenase (LDH), que utiliza o α-hidroxibutirato como substrato adicional. A LDH é constituída por quatro cadeias péptidas de dois tipos: M (músculos) e H (coração). As composições das subunidades das cinco isoenzimas são LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) e LD-5 (M4). A α-HBDH, presente no soro, representa a actividade da LDH, principalmente das isoenzimas LD-1 e LD-2. Em comparação com outras isoenzimas da LDH, ocorre em níveis mais elevados no tecido do músculo cardíaco sendo, por essa razão, um pouco mais sensível e mais específica no diagnóstico de enfartes do miocárdio.

NINIEJSZA ULOTKA OPAKOWANIA PRZEZNACZONA JEST DO STOSOWANIA POZA GRANICAMI USA. WSZELKIE ODNIESIENIA DO SYSTEMÓW KONELAB ODNOSZĄ SIĘ RÓWNIEŻ DO SERII T.

ESTE FOLHETO INFORMATIVO É APLICÁVEL PARA USO FORA DOS E.U.A. QUALQUER REFERÊNCIA AOS SISTEMAS KONELAB TAMBÉM SE REFERE À SÉRIE T.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

PRINCÍPIO DO PROCEDIMENTO α-HBDH 2-Oxobutirato + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hidroxibutirato + NAD+

INFORMAÇÕES DOS REAGENTES Reagente A 10 x 8 ml Reagente B 1 x 20 ml

Concentrações Reagente A: Tampão fosfato, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oxobutirato 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reagente B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Precauções Só para uso diagnóstico in vitro. Adopte as precauções habitualmente requeridas para o manuseamento dos reagentes de laboratório. O reagente contém azida de sódio como conservante. Não ingira. Evite o contacto com a pele e com as membranas mucosas.

Preparação Adicione 2 ml de Reagente B ao frasco de Reagente A. Feche o frasco e agite. Nota: Certifique-se de que não há nenhuma bolha no gargalo do frasco ou na superfície do reagente quando inserir os frascos ou as ampolas do reagente no analisador Konelab.

Armazenamento e estabilidade Os reagentes que se encontram em frascos fechados permanecem estáveis até à data indicada no rótulo, desde que mantidos a 2...8 °C e protegidos da luz. Consulte as Notas de aplicação do analisador Konelab para obter mais informações sobre a estabilidade dos reagentes quando inseridos no analisador.

COLHEITA DA AMOSTRA

Tipo de amostra Pode utilizar soro não hemolisado. Não use plasma de heparina.

Precauções As amostras humanas devem ser manuseadas e eliminadas como se fossem potencialmente infecciosas.

Armazenamento (1) A amostra pode ser armazenada durante 1 a 3 dias à temperatura ambiente (18…25 °C) e no máximo durante 7 dias a 4...8 °C.

PROCEDIMENTO Consulte o Manual de referência e as Notas de aplicação para obter mais informações sobre o procedimento automático do analisador Konelab. Qualquer aplicação não validada pela Thermo Fisher Scientific Oy não pode ter o desempenho garantido e, por isso, tem de ser avaliada pelo utilizador.

Materiais fornecidos Reagentes conforme descrito acima.

Materiais necessários mas não incluídos Controlos conforme indicado abaixo.

Calibragem A resposta (dA/min) é convertida para unidades de resultado através de um factor de cálculo.

Controlo de qualidade Utilize amostras de controlo de qualidade pelo menos uma vez por dia e sempre que usar um novo frasco de reagente. Controlos disponíveis: Nortrol, código: 981043 Abtrol, código: 981044 Os intervalos e limites do Controlo devem ser adaptados aos requisitos individuais de cada laboratório. Os resultados das amostras de controlo de qualidade devem ficar dentro dos limites predefinidos pelo laboratório.

CÁLCULO DE RESULTADOS Os resultados são automaticamente calculados pelo analisador Konelab da seguinte forma: Actividade em U/l = dA/min x Factor TV x 1000 Factor = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯ 6.3 x SV x P sendo que: TV= Volume total da reacção em ml SV= Volume da amostra em ml 6.3= Coeficiente de extinção do NADH a 340 nm P= Comprimento do percurso da cuvette = 1 Factor de conversão μkat/l = (U/l)/60

LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO

Interferência Critério: Recuperação dentro de + 10% dos valores iniciais. Bilirrubina: Nenhuma interferência detectada até 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Hemólise: Não utilize amostras hemolisadas. Lipemia: Nenhuma interferência detectada até 3.4 mmol/l (300 mg/dl) de triglicéridos. Para obter informações sobre outras substâncias interferentes, consulte a referência 3.

VALORES DE REFERÊNCIA (4) Adultos: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Os valores indicados devem servir apenas como uma referência. Recomendamos que cada laboratório verifique este intervalo ou obtenha um intervalo de referência para a população que serve.

INTERVALO DE MEDIÇÃO (5) 8 – 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Intervalo de medição alargado depois da diluição secundária: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO (5)

Limite de detecção 4 U/l (0.07 μkat/l) O limite de detecção representa a concentração/actividade mensurável mais baixa passível de ser distinguida de zero. É calculada como a concentração da amostra de zero + 3 DS (ensaio, n=24).

Imprecisão Média

154 U/l Média 174 U/l

Média 402 U/l

DS CV% DS CV% DS CV% Ensaio 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Vários dias 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Total 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

Efectuou-se um estudo de precisão mediante a utilização de um analisador Konelab 30 durante 10 dias, com um número de medições equivalente a n = 40.

Comparação de métodos Uma comparação entre este reagente α-HBDH (y) e um teste disponível comercialmente (x) forneceu os resultados seguintes: Regressão linear (unidade do resultado U/l): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Concentrações das amostras entre 37 e 374 U/l. Os resultados obtidos em laboratórios individuais podem diferir dos dados de desempenho fornecidos.

BIBLIOGRAFIA 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Dados arquivados na Thermo Fisher Scientific Oy.

FABRICANTE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Data da revisão (aaaa-mm-dd) 2007-08-15

Alterações em relação à versão anterior Nome da empresa actualizado.

SK

Konelab™ / Séria T α-HBDH 981380 10 x 10 ml

POUŽITIE Na kvantitatívne in vitro stanovenie aktivity α-hydroxybutyrát dehydrogenázy v ľudskom sére v analyzátoroch Konelab. Všetky výsledky testov musia byť interpretované s ohľadom na klinický kontext.

ZHRNUTIE (1,2) α-hydroxybutyrát dehydrogenáza (α-HBDH) je izoenzým laktát dehydrogenázy (LDH), ktorá využíva α-hydroxybutyrát ako doplnkový substrát. LDH sa skladá zo štyroch peptidových reťazcov dvoch typov: M (sval) a H (srdce). Podjednotky piatich izoenzýmov sú LD-1(H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) a LD-5 (M4). α-HBDH, prítomná v sére reprezentuje aktivitu LDH najmä v izoenzýmoch LD-1 a LD-2. V porovnaní s inými izoenzýmami LDH sa vyskytuje vo vyšších hladinách v srdcovom svale a preto je o trochu viac senzitívna a špecifická v diagnostike infarktu myokardu.

PRINCÍP METÓDY α-HBDH 2-oxobutyrate + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-hydroxybutyrát + NAD+

INFORMÁCIE O ČINIDLÁCH Činidlo A 10 x 8 ml Činidlo B 1 x 20 ml

Koncentrácie Činidlo A: Fosfátový pufer, pH 7.5 64 mmol/l 2-oxobutyrát 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Činidlo B NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Varovanie Len na in vitro diagnostiku. Dodržujte zvyčajné bezpečnostné opatrenia, ktoré sú nevyhnutné pri manipulácii so všetkými laboratórnymi činidlami. Činidlo obsahuje azid sodný ako konzervačnú látku. Neprehĺtajte/nepožívajte. Zabráňte styku s pokožkou a sliznicami.

Príprava Pridajte 2 ml činidla B do nádoby s činidlom A. Nádobu zavrite a pretrepte. Poznámka: Pred vložením nádobiek do analyzátora Konelab skontrolujte, či sa v hrdle nádobky, alebo na povrchu činidla nenachádzajú bubliny.

TENTO PRÍBALOVÝ LETÁK JE URČENÝ PRE KRAJINY MIMO USA. AKÁKOĽVEK ZMIENKA SYSTÉMOV KONELAB SA VZŤAHUJE AJ NA SÉRIU T.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

Uskladnenie a trvanlivosť Činidlá v neotvorených nádobách sú stabilné pri 2…8 °C až do exspiračnej doby vytlačenej na štítku, ak sú chránené pred svetlom. Informácie o stabilite činidiel nájdete v Používateľskej príručke vášho analyzátora Konelab.

ODBER VZORIEK

Typ vzorky Môžete používať nehemolyzované sérum. Nepoužívajte heparinizovanú plazmu.

Varovanie Manipulujte s ľudskými vzorkami a znehodnocujte ich ako potenciálne infekčný materiál.

Uskladnenie (1) Vzorka sa môže skladovať 1 až 3 dni pri izbovej teplote (18...25 °C) a maximálne 7 dní pri 4…8 °C.

TESTOVACÍ POSTUP Automatický postup použitia analyzátora Konelab nájdete v manuáli a Používateľskej príručke. Meranie postupom, ktorý nie je validizovaný firmou Thermo Fisher Scientific Oy nie je garantované a musí byť vyhodnotené užívateľom.

Poskytnuté materiály Činidlá popísané vyššie.

Materiály potrebné, ale neposkytované Kontroly uvedené nižšie.

Kalibrácia Výsledok (dA/min) sa konvertuje na výsledné jednotky pomocou prepočtového koeficientu.

Kontrola kvality Používajte vzorky na kontrolu kvality aspoň raz denne a vždy, keď použijete novú fľašku s činidlom. Dostupné kontroly: Nortrol, kód: 981043 Abtrol, kód: 981044 Intervaly a rozmedzia kontrolných hodnôt sa musia prispôsobiť individuálnym požiadavkám laboratória. Výsledné hodnoty kontrolných vzoriek by mali byť v rozmedzí referenčných hodnôt laboratória.

VÝPOČET VÝSLEDKOV Výsledky sa automaticky vypočítajú analyzátorom Konelab nasledovne: Aktivita v U/l = dA/min x faktor TV x 1000 faktor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P kde: TV= celkový reagujúci objem v ml SV= Objem vzorky v ml 6.3= Extinkčný koeficient NADPH pri 340 nm P = Veľkosť kyvety = 1 Konverzný pomer (kat/l = (U/l)/60

OBMEDZENIA METODIKY

Interferencie Kritérium: Návrat k východziemu stavu ± 10% počiatočných hodnôt. Bilirubín: Bez interferencie do 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Hemolýza: Nepoužívajte hemolyzované vzorky. Lipémia: Bez interferencie do 3.4 mmol/l (300 mg/dl) triglyceridov. Ďalšie interferujúce substancie nájdete v Bibliografii č.3.

OČAKÁVANÉ HODNOTY (4) Dospelí: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Tieto hodnoty slúžia len ako smernica. Odporúča sa, aby si každé laboratórium prispôsobilo rozsah referenčných hodnôt na konkrétnu populáciu.

MERACÍ ROZSAH (5) 8 - 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Rozšírený merací rozsah po sekundárnom rozriedení: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

PREVÁDZKOVÉ CHARAKTERISTIKY (5)

Hranica citlivosti detekcie 4 U/l (0.07 μkat/l) Hranica citlivosti detekcie predstavuje najnižšiu merateľnú koncentráciu/aktivitu, ktorá sa dá odlíšiť od nuly. Vypočíta sa ako koncentrácia nulovej vzorky + 3 SD (počas procesu, n=24).

Nepresnosti Priemer

154 U/l Priemer 174 U/l

Priemer 402 U/l

SD CV% SD CV% SD CV% Počas procesu 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Medzi jednotlivými dňami

6.7 4.4 6.6 3.7 1 1.8 2.9

Celkovo 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2 Vykonala sa štúdia presnosti s prístrojom Konelab 30 počas 10 dní, s počtom meraní n=40.

Porovnanie metódy Porovnanie medzi týmto α-HBDH činidlom (y) a komerčne dostupným testom (x) prinieslo nasledujúce výsledky: Lineárna regresia (výsledok v jednotkách U/I): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Koncentrácie vzoriek sa pohybovali medzi 37 a 374 U/I. Výsledky získané v iných laboratóriách sa môžu líšiť od daných prevádzkových dát.

BIBLIOGRAFIA 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,


Laboratory Results, 1st edition, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main, Germany, 1998, pp.89-94.



5. Dáta sú k dispozícii v spoločnosti Thermo Fisher Scientific Oy.

VÝROBCA Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Dátum revízie (RRRR-MM-DD) 2007-08-15

Zmeny od predchádzajúcej verzie Meno spoločnosti aktualizované.

SV

Konelab™ / T serien α-HBDH 981380 10 x 10 ml

AVSEDD ANVÄNDNING För kvantitativ bestämning in vitro av α-hydroxybutyratdehydrogenas aktivitet i humant serum på Konelab-analysatorer. Alla testresultat måste tolkas med hänsyn till det kliniska sammanhanget.

SAMMANFATTNING (1, 2) α-hydroxybutyratdehydrogenas (α-HBDH) är ett isoenzym av laktatdehydrogenas (LDH), som använder α-hydroxybutyrat som ytterligare substrat. LDH består av fyra peptidkedjor av två typer: M (muskel) och H (hjärta). Sammansättning av delenheter för de fem isoenzymerna är LD-1 (H4), LD-2 (H3M), LD-3 (H2M2), LD-4 (HM3) och LD-5 (M4). α-HBDH, som finns i serum, representerar LDH aktivitet, främst LD-1 och LD-2 isoenzymer. Jämfört med andra isoenzymer i LDH förekommer α-HBDH i högre nivå i hjärtmuskelvävnad och är därför något mer känsligt och mer specifikt för diagnos av hjärtinfarkt.

TESTPRINCIP α-HBDH 2-Oxobutyrat + NADH + H+ ←⎯⎯→ 2-Hydroxybutyrat + NAD+

REAGENSINNEHÅLL Reagens A 10 x 8 ml Reagens B 1 x 20 ml

Koncentrationer Reagens A: Fosfatbuffert, pH 7.5 64 mmol/l 2-Oxobutyrat 3.85 mmol/l NaN3 < 0.1 % Reagens B: NADH >0.9 mmol/l NaN3 < 0.1 %

Försiktighetsåtgärder Endast för in vitro-diagnostik. Vidta normala försiktighetsåtgärder som vid all hantering av laboratoriereagenser. Reagensen innehåller natriumazid som konserveringsmedel. Får ej sväljas. Undvik kontakt med hud och slemhinnor.

Beredning Tillsätt 2 ml reagens B i flaskan med reagens A. Tillslut flaskan och blanda. Obs: Kontrollera att det ej finns bubblor i flaskhalsen eller på ytan av reagensen då behållarna placeras i Konelab-analysatorn.

Förvaring och hållbarhet Reagens i oöppnade flaskor är hållbar till på etiketten angivet utgångsdatum, vid 2…8 °C, om reagensen skyddas mot ljus. Se Application Notes för aktuell Konelab-analysator för information om reagensernas hållbarhet i instrumentet.

PROVTAGNING

Provmaterial Ohemolyserat serum kan användas. Använd inte heparinplasma.

Försiktighetsåtgärder Humana prover ska behandlas som potentiellt smittförande, både vid hantering och kassering.

Förvaring (1) Provet kan förvaras i 1 till 3 dagar vid rumstemperatur (18…25 °C) och i högst 7 dagar vid 4…8 °C.

TESTUTFÖRANDE Se Handhavandemanualen och Application Notes för automatiskt utförande på aktuell Konelab-analysator. Varje applikation som ej har validerats av Thermo Fisher Scientific Oy, kan ej garanteras vad gäller prestanda och måste därför utvärderas av användaren.

Bifogat material Reagenser enligt ovan.

Erforderligt material som ej medföljer Kontroller enligt nedan.

Kalibrering Svaret (dA/min) omvandlas till resultatenheter med en omräkningsfaktor.

Kvalitetskontroll Använd kvalitetskontrollprover minst en gång om dagen och varje gång en ny reagensflaska används. Tillgängliga kontroller: Nortrol, artikelnr.: 981043 Abtrol, artikelnr.: 981044 Kontrollens intervall och gränser måste anpassas till laboratoriets egna krav. Resultaten från kvalitetskontrollproven bör ligga inom de av laboratoriet fastställda gränserna.

DENNA BIPACKSEDEL GÄLLER UTOM USA. EVENTUELLA HÄNVISNINGAR TILL KONELAB SYSTEMS AVSER ÄVEN T SERIEN.


Tem

plat

e: D

0116

2_4

©

200

7 Th

erm

o Fi

sher

Sci

entif

ic In

c. A

ll rig

hts

rese

rved

.

RESULTATBERÄKNING Resultaten beräknas automatiskt av Konelab-analysatorn enligt följande: Aktivitet i U/l = dA/min x Faktor TV x 1000 Faktor = ⎯⎯⎯⎯⎯- 6.3 x SV x P där: TV= Total reaktionsvolym i ml SV= Provvolym i ml 6.3= Utplåningskoefficient för NADH vid 340 nm P= Kyvettväglängd = 1 Omvandlingsfaktor μkat/l = (U/l)/60

BEGRÄNSNINGAR I UTFÖRANDET

Interferens Kriterium: Utbyte inom +10 % av initialvärdena. Bilirubin: Ingen interferens har konstaterats upp till 980 μmol/l (57.3 mg/dl). Hemolys: Använd ej hemolyserade prover. Lipemi: Ingen interferens har konstaterats upp till 3.4 mmol/l (300 mg/dl) triglycerider. För andra interfererande ämnen, se referens 3.

REFERENSOMRÅDE (4) Vuxna: < 182 U/l (< 3.03 μkat/l) Angivna värden är endast avsedda som vägledning. Vi rekommenderar att varje laboratorium verifierar detta område eller fastställer ett referensintervall för populationen som betjänas.

MÄTOMRÅDE (5) 8 – 700 U/l (0.13 – 11.7 μkat/l) Utökat mätområde efter sekundär spädning: 8 – 4200 U/l (0.13 – 70.0 μkat/l)

UTFÖRANDETS KARAKTERISTIKA (5)

Detektionsgräns 4 U/l (0.07 μkat/l) Detektionsgränsen representerar lägsta mätbara koncentration/aktivitet som kan skiljas från noll. Den beräknas som koncentrationen av nollprov + 3 SD (standardavvikelser) (inom serien, n=24).

Imprecision Medel

154 U/l Medel 174 U/l

Medel 402 U/l

SD CV% SD CV% SD CV% Inom serie 3.3 2.2 3.5 2.0 3.8 1.0 Mellandags 6.7 4.4 6.6 3.7 11.8 2.9 Totalt 8.0 5.3 7.7 4.4 12.8 3.2

En precisionsstudie har utförts med Konelab 30 under 10 dagar. Antalet mätningar var n=40.

Metodjämförelse En jämförelse mellan detta α-HBDH reagens (y) och ett kommersiellt tillgängligt test (x) gav följande resultat: Linjär regression (resultatenhet U/l): y = 0.99 x – 0.2 r = 0.999 n = 64 Provens koncentration låg mellan 37 och 374 U/l. Resultaten som erhålls vid varje enskilt laboratorium kan skilja sig från angivna data för prestanda.

REFERENSER 1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,





5. Data finns på fil hos Thermo Fisher Scientific Oy. TILLVERKARE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Revisionsdatum (åååå-mm-dd) 2007-08-15

Ändringar från tidigare utgåva Företagsnamnet är uppdaterat.

LIMITATIONS OF THE PROCEDURE Konelab™ / T Series -HBDH.pdf · Page 1 D02009_04_Insert_HBDH_MU...

Documents

Transcript of LIMITATIONS OF THE PROCEDURE Konelab™ / T Series -HBDH.pdf · Page 1 D02009_04_Insert_HBDH_MU...