Ley de Lambert-Beer (Espectrofotometría)

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Análisis espectrofotométricos
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    14-Jun-2015
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Resumen rápido sobre los fundamentos de la espectrofotometría de absorción, y de la ley de Lambert-Beer, y su aplicación. (Esta presentación no es de mi autoría, pero la publico para su uso)

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  • 1. Anlisis espectrofotomtricos

2. 1. Caractersticas de una onda electromagntica La radiacin electromagntica es una onda, caracterizada por sus propiedades: Longitud de onda Frecuencia Amplitud A 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 2 3. 2. Ley de Lambert y Beer La cantidad de luz absorbida depende de: El tipo de sustancia por la que atraviesa la luz La distancia que recorre la luz La concentracin de la sustancia 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 3 4. 2. Ley de Lambert y Beer Transmitancia % transmitancia % T = (I/Io) 100 Absorbancia: se relaciona con la Transmitancia por medio de la ecuacin: A = -log T = -log(I/Io) = log(Io/I) A = C d donde: : Coeficiente de absortividad C: Concentracin de la sustancia en anlisis d: distancia que recorre la luz 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 4 5. 3. Espectro electromagntico 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 5 6. 4. Efectos de la radiacin UV y visible sobre las molculas La radiacin UV y visible al actuar sobre las molculas puede producir excitaciones electrnicas sobre determinados grupos funcionales, que en el caso de la luz visible se llaman grupos cromforos, porque son responsables del color. 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 6 7. Grupos cromforos: son grupos funcionales responsables de la absorcin de la radiacin Principalmente son: Metales de transicin Dobles y triples enlaces C-C, sistemas aromticos, grupo carbonilo, imino -C=N, nitro y enlaces C-Y donde Y es un tomo con pares libres. 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 7 Grupo hemo de la hemoglobina Minerales 8. 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 8 Grupos auxocromos: son grupos sustituyentes del cromforo y alteran la max. Son auxocromos los halgenos, grupos metilo, grupos hidroxi, alcohoxi, amino. Efecto de los grupos auxocromos sobre los cromforos: Desplazamiento batocrmico.- La absorcin del cromforo se desplaza hacia mayores longitudes de onda Desplazamiento hipsocrmico.- La absorcin del cromforo se desplaza hacia menores longitudes de onda Efecto hipsocrmico.- la banda presenta mayor intensidad Efecto hipocrmico.- la banda presenta menor intensidad 9. Grupos cromforos: Grupos orgnicos con dobles enlaces conjugados Grupos orgnicos con estructuras aromticas 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 9 -caroteno Antocianos 10. Absorbe una parte de la energa del espectro visible la sustancia aparece del color complementario 11. 5. Espectro visible Un colorante puede absorber la luz visible y el color que aparece es el color que se refleja. Por eso un colorante que absorbe la luz roja, aparecer de color azul. 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 11 12. Espectrofotmetro 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 12 13. Espectrofotmetro 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 13 14. 7. Cuantificacin de sustancias con ayuda de la espectrofotometra Se debe realizar primero el espectro caracterstico de la sustancia, para encontrar la longitud de mxima aborbancia (). 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 14 15. 7. Cuantificacin de sustancias con ayuda de la espectrofotometra Una vez determinada max se procede a trabajar a esta longitud de onda para construir la curva de calibracin de la sustancia, preparando diferentes concentraciones de la misma. 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 15 16. 7. Cuantificacin de sustancias con ayuda de la espectrofotometra 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 16 Curva de calibracin k = d 17. 8. Estructura de algunos colorantes 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 17 Azul de metileno Anaranjado de metilo 18. 8. Estructura de algunos colorantes 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 18 Rojo de metilo Rojo congo 19. 09/25/13 Free Template from www.brainybetty.com 19 PREGUNTAS?