KLASSISCHE UND

MOLEKULARE ZYTOGENETIK

Tagungsbericht

10. INTERNATIONALE TAGUNG

DER SEKTION ZYTOGENETIK

DER GESELLSCHAFT FÜR

ANTHROPOLOGIE UND HUMANGENETIK

HOMBURG/SAAR 17.-20. J u n i 1987

Herausgeber Κ.D. Zang

unter M i t a r b e i t von N. B l i n , G. Unteregger, und C. Wollenberg

Ann.Univ.Sarav.Med. - Supplement 7/1987 - ISSN 0173-6973 ISBN 3-923818-05-X Suppl.7

V e r z e i c h n i s der Beiträge

S. Adolph, C. K l e t t , P.G. S t r a u s s , Η. Hameister, Ulm und München DIE PHYSIKALISCHE GENKARTE DES CHROMOSOMS 15 DER MAUS

S. Adolph, C. K l e t t , B. Henglein, M. Lipp, G.W. Bornkamm, H. Hameister, Ulm, F r e i b u r g und München BRUCHPUNKTBESTIMMUNG IN VERSCHIEDENEN VARIANTEN t ( 2 ; 8 ) TRANSLOKATIONEN DES BURKITT LYMPHOMS

P.F. Ambros, I . S c h r a t t e r , Wien DIE VERWENDUNG VON NICHT-AUTORADIOGRAPHISCHEN IN SITU HYBRIDISIERUNGSMETHODEN IN DER TUMORZYTOGENETIK

P.F. Ambros, D. Schweizer, Wien NON-RADIOACTIVE IN SITU HYBRIDIZATION AND CHROMOSOME BANDING: METHODS AND APPLICATIONS

J . Arnemann, S. Kahler, L.P. Berg, S. Jakubiczka, U. U. Sauermann, J.Τ. Epplen, J . Schmidtke, Göttingen und Fr e i b u r g MOLECULAR STRUCTURE AND EVOLUTION OF A Yp DERIVED HUMAN COSMID CLONE COS 36

G. Barb i , M. D j a l a l i , Μ. Wolf, Ulm MOSAIKE MIT AUSSCHLIEßLICH STRUKTURELLER CHROMOSOMEN­VERÄNDERUNG - ERFAHRUNGEN IM ZYTOGENETIK-ROUTINELABOR

H. A. Baumann, U. Claussen, Η. Drewitz, Ε. Greiner, G. Senger, R. Ulmer, F.W. Zahn, Erlangen LANGZEITKULTIVIERUNG VON CHORIONZOTTEN MIT DEM ZIEL EINER SCHNELLEN KARYOTYPISIERUNG

F. Beermann, E. Hummler, I . Hansmann, Göttingen UNTERSUCHUNG EINES INJIZIERTEN C-MYC ONKOGENS IN TRANSGENEN MÄUSEN

N. B l i n , C. Welter, Homburg A SECONDARY STRUCTURE CHANGES THE ELECTROPHORETIC MOBILITY OF A RESTRICTION FRAGMENT IN HUMAN MITOCHONDRIAL DNA

U. Blochmann, G. Dudin, Μ. Hausmann, Η.-J. Bühring, Τ. Cremer, C. Cremer, Heidelberg IN SITU HYBRIDIZATION OF CHROMOSOMES WITH BIOTINYLATED DNA AFTER 1G SEDIMENTATION

B. B o l d y r e f f , A. Weith, L. Purmann, H. Winking, w. Traut, Lübeck VARIABLE SEGMENTGRENZEN DER AMPLIFIKATIONSEINHEIT IN EINER KEIMBAHN HSR DER MAUS

S. Borgmann, B. Eiben, I . Schübbe, I . Hansmann, Göttingen HÄUFIGKEIT, ART UND HERKUNFT VON CHROMOSOMENANOMALIEN IN FRÜHEN SPONTANABORTEN

E.M. Bühler, N.J. Malik, Η. Brocas, G. Wassart, M. Alkan, B a s e l und Brüssel EXCLUSION OF Α TERMINAL 8q DELETION IN LANGER-GIEDION SYNDROME BY MOLECULAR GENETIC METHODS

J . B u l l e r d i e k , S. B a r t n i t z k e , K. Meyer, R. C h i l l a , W. Schloot, Bremen TUMORZYTOGENETISCHE UNTERSUCHUNGEN AN 35 PLEOMORPHEN ADENOMEN DER MENSCHLICHEN GLANDULA PAROTIS

J . B u l l e r d i e k , S. B a r t n i t z k e , Bremen DIE BEDEUTUNG VON STRUKTURELLEN CHROMOSOMENABERRATIONEN FÜR DIE ENTSTEHUNG VON PLEOMORPHEN ADENOMEN DER GLANDULA PAROTIS

H. C h r i s t i a n s e n , F. Franke, N.M. Paulsen, F. Berthold, F. Lambert, Gießen und Köln CYTOGENETIC AND DNA STUDIES IN 22 PATIENTS WITH NEUROBLASTOMA OF DIFFERENT CLINICAL STAGES I . Chudoba, J . Rüschoff, P. K a i s e r , Tübingen und Marburg IMMUNHISTOCHEMISCHE UND ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNGEN AN ZELLEN DES CHORIONGEWEBES

U. Claussen, M. Hansmann, R. Terinde, Erlangen, Bonn und Ulm SCHNELLE KARYOTYPISIERUNG IN DER SPÄTSCHWANGERSCHAFT

W. Coerdt, J . Kyburg, Η. Rehder, Lübeck DARSTELLUNG EMBRYOPATHOLOGISCHER UNTERSUCHUNGSVERFAHREN NACH CVS UND AN FRÜHEN SPONTANABORTEN B. C o r e l l , B. Z o l l , Göttingen UNTERSUCHUNG DER RFLPs INNERHALB DES HA-RAS-GENS VON TUMORPATIENTEN UND KONTROLLPERSONEN T. Cremer, P. Emmerich, P. L i c h t e r , Heidelberg/New Haven GIBT ES EINE ZELLTTF-SPEZIFISCHE ANORDNUNG DES CHROMATINS IN SÄUGER-ZELLKERNEN? - ARGUMENTE VON UNGLÄUBIGEN, AGNOSTIKERN UND GLÄUBIGEN -

M. Digweed, Κ. Sp e r l i n g , B e r l i n TEMPORARY CORRECTION OF DEFECTIVE DNA REPAIR PROCESSES AFTER MICROINJECTION OF FIBROBLASTS WITH mRNA FRACTIONS M. D j a l a l i , S. Adolph, P. Steinbach, Η. Hameister, Ulm VERGLEICHENDE KARTIERUNG FRAGILER STELLEN BEI MENSCH UND MAUS

M. Dominguez-Steglich, G. Du Bois, P. Ka i s e r , Tübingen A CASE OF Α "DE NOVO" ACCESSORY der(15) CHROMOSOME

G. Dudin, M. Hausmann, W. Renz, J . Aten, C. Cremer, Heidelberg und Amsterdam FLUORESCENCE HYBRIDIZATION OF ISOLATED METAPHASE CHROMOSOMES IN SUSPENSION FOR FLOW CYTOMETRIC ANALYSIS

D. E c k a r t , Η. Zankl, H.D. Hiersehe, K a i s e r s l a u t e r n CYTOGENETISCHE UNTERSUCHUNGEN AN LANGZEITGEZÜCHTETEN BLASENMOLENZELLEN

B. Eiben, M. L e i p o l d t , I . Hansmann, Göttingen CHROMOSOMENANALYSE NACH CHORIONBIOPSIE IM I I . UND I I I . TRIMENON

XIX Ε. F i e d l e r , Β. Müller, Η. Zankl, K a i s e r s l a u t e r n 91 A NEW METHOD FOR CYTOGENETIC STUDIES OF EPITHELIAL TUMOR CELLS IN PRIMARY CULTURE

W. F o e r s t e r , H.-M. Jung, F. Netz, Gießen 95 DOWN-SYNDROM MIT ALOPEZIE UND TERMINALER CHROMOSOMEN­FUSION 46,XX,psu d i c ( 2 1 ) t e r rea(21q21q)

C. Fonatsch, LÜBECK 98 TUMORZYTOGENETIK, WOZU?

U. F r o s t e r - I s k e n i u s , D. Wilhelm, E. Schwinger, Lübeck 99 EINFLUSS VON BrdU AUF DIE FRA(X)-EXPRESSION BEI HEMIZYGOTEN UND HETEROZYGOTEN PATIENTEN MIT MARKER-X-SYNDROM

E. Gebhart, S. D i s t l e r , Erlangen 102 MIKRONUCLEUS- UND POLYPLOIDIERATEN IN TRANSFORMATIONS­EXPERIMENTEN AN MENSCHLICHEN FIBROBLASTENKULTUREN

E. Gebhart, J . Feldner, W. Schmidt, Erlangen 106 CHROMOSOMENINSTABILITÄT UND MIKRONUCLEI IN MENSCHLICHEN CARCINOMZELLEN

G. Gillessen-Kaesbach, >. Schmidt, Essen 110 INTERSTITIAL DELETION 7q

P. Goetz, Ε. S t e j s k a l o v a , Μ. Weinreb, Α. Peträkovä, 111 J . KouteckY, Prag CYTOGENETIC ANALYSIS IN CHILDREN WITH NON-HODGKIN'S LYMPHOMAS G Gradl, c. Fonatsch, G. Schwieder, Τ. Wagner, Lübeck 112 REARRANGEMENT VON C - s i s IN EINEM FALL VON CML MIT VARIANTER Ph'-TRANSLOKATION

U. Graeven, R. Becher, D. Kühn, C G . Schmidt, Essen 113 INVERSION 16 UND DELETION 16 BEI AKUTER MYELOMONOZYTÄRER LEUKÄMIE (FAB M4)

V. Greger, H.J. Barnert, W. Hopping, Ε. Passarge, 117 Β. Horsthemke, Essen CHARACTERIZATION OF CHROMOSOMAL MUTATIONS INVOLVED IN RETINOBLASTOMA

Κ. Gripp, Β. Schlegelberger, W. Grote, K i e l 121 STUDY OF RARE AND COMMON FRAGILE SITES IN COUPLES WITH RECURRENT SPONTANEOUS ABORTIONS

M. Guttenbach, T. Haaf, W. F e i c h t i n g e r , C R . Müller, 125 Μ. Schmid, Würzburg NACHWEIS VON Y-HETEROCHROMATIN DURCH BERENIL-BEHANDLUNG VON ZELLKULTUREN UND IN SITU HYBRIDISIERUNG MIT Y-SPEZIFISCHEN DNA-PROBEN

Τ. Haaf, W. F e i c h t i n g e r , G. Ott, M. Schmid, Würzburg 128 AUTOSOMALE FRAGILE STELLEN IN DEN CHROMOSOMEN DES MENSCHEN UND ANDERER SÄUGETIERE

M. Habedank, Aachen Ί36 MONOSOMIE 5p UND TRISOMIE 9p IN KOMBINATION BEI PATERNALER REZIPROKER TRANSLOKATION t(5;9)(p13;p13)

XX J . Harbott, Η. Riehm, F. Lampert, Gießen und Hannover 140 CHROMOSOMALE ABERRATIONEN BEI AKUTEN LYMPHOBLASTIΞ CHEN LEUKÄMIEN IM KINDESALTER - BEDEUTUNG FÜR DIAGNOSTIK UND PROGNOSE -

W. Henn, A. van der Hout, H. Sch e f f e r , G. Unteregger, 145 H. F i s c h e r , C.H.C.M. Buys, Ν. B l i n , K.D. Zang, Homburg, Groningen und Heidelberg HIGH RESOLUTION ANALYSIS OF A MARKER CHROMOSOME FROM A GLIOBLASTOMA CELL LINE

Μ. Hentemann, F. Beermann, Ε. Hummler, I . D. Adler, 149 I . Hansmann, Göttingen LETALITÄT VON TRIPLE X BEI DER MAUS Μ. Hentemann, D. Rating, I . Hansmann, Gottingen 150 MOSAIK-TRISOMIE 14 BEI EINEM 2 JÄHRIGEN MÄDCHEN

C. Höfers, I . Hansmann, Göttingen 151 ZYTOGENETISCHE, IMMUNZYTOGENETISCHE UND MOLEKULARE CHARAKTERISIERUNG EINES MIKROCHROMOSOMS

T.W.J. Hustinx, J.M.J.C. Scheres, J.H.M. Bo l l e n , 152 R.D.F.M. Taalman, R. van Eyk, C.M.R. Weemaes, Nijmegen, Hpogeven und Sneek CLINICAL VARIABILITY IN FANCONI'S ANAEMIA: EXAMPLES OF THE EXTREMES

G. Johannsen, Wetzlar 155 EINE NEUE GENERATION VON BILDANALYSATOREN FÜR DIE MEDIZINISCHE ROUTINEDIAGNOSTIK

W. Johannson, W. Grote, K i e l 160 SEQUENTIELLE FÄRBUNG VON KNOCHENMARKMITOSEN ZUR ZYTOGENETISCHEN DIAGNOSTIK (NACH KNOCHENMARK TRANSPLANTATION UND BEI LEUKOSEN)

H. K a r l i c , Wien 162 EINE EINFACHE ROUTINEMETHODE ZUR MORPHOLOGISCHEN UND ZYTOGENETISCHEN UNTERSUCHUNG VON UNBEFRUCHTETEN EIZELLEN IN EINEM IN-VITRO-FERTILISATIONSPROGRAMM

H. K a r l i c , P. Ambros, J . Huber, W. Gebhart, Wien 166 NACHWEIS DER LOKALISATION UND EXPRESSION VIRALER SEQUENZEN IN PARAFFINSCHNITTEN MITTELS IN-SITU-HYBRIDISIERUNG

E. Kartzewski, E. Gebhart, Erlangen 168 ANTICLASTOGENE WIRKUNG VON N-ACETYLCYSTEIN AN MENSCHLICHEN LYMPHOCYTEN IN VITRO

K. Kausch, T. Bettecken, G.A. D a n i e l i , T. Haaf, G. Meng, 172 M. Schmid, C R . Müller, Würzburg und Padua INTERSTITIELLE DELETION VON Xp21.1 BEI EINEM PATIENTEN MIT MUSKELDYSTROPHIE DUCHENNE

XXI

Κ. Rausch, Τ. Haaf, J . Köhler, Μ. Schmid, Würzburg 175 PARTIELLE TRISOMIE 8q24.2 -> qter und 15pter -> q14 ALS FOLGE EINER MATERNALEN CHROMOSOMEN-TRANSLOKATION: 46,XX,t(8;15)

M.A. Kim, R. Happle, H. Pullman, Η. Traupe, Münster und 177 Lüdenscheid ANGIOMA SERPIGINOSUM: NACHWEIS EINER FRAGILEN STELLE AUF CHROMOSOM 16q22

J . Koch, S. Kolvraa, N. Gregersen, K.B. Petersen, 182 L. Bolund, Aarhus BIOTINYLATED DNA PROBES FOR HYBRIDIZATION ANALYSIS OF DNA ON MEMBRANES AND IN SITU

G. Kosztolänyi, Pecs 186 ISODICENTRIC CHROMOSOME 21 FORMED BY q TERMINAL FUSION OF THE TWO HOMOLOGUES: 46,XX,ter r e a (21 ; 2 1 ) ( q t e r ; q t e r )

A. K r e s s , H.-D. Probeck, U. H i l l i g , Κ.-P. Herberg, Marburg 189 und K a s s e l GIBT ES FRAGILE STELLEN FÜR DAS RETT-SYNDROM (z.B. f r a Χ p22)?

P.M. K r o i s e l , W. Rosenkranz, Graz 190 G-BAND REPLIKATIONSMUSTER DURCH DIREKTE GIEMSAFÄRBUNG

R. Kunzmann, F. H o l z e l , Hamburg 194 ALTERATIONS OF CHROMOSOMAL ABERRATION PATTERNS IN OVARIAN CARCINOMA CELLS DURING LONG-TERM CULTIVATION

Η. L i n d i n g e r , W. Mosgöller, G. P i e h s l i n g e r , 198 tf.G. schwarzacher, Wien NUCLEOLI MIT RESERVE-FUNKTION IN NICHT-AKTIVEN LYMPHOZYTEN

Ε. Meese, J . Fontaine, J . Maurer, G. B a s t e r t , 202 Ν. B l i n , Homburg A SECOND erbA2 ONCOGENE ON HUMAN CHROMOSOME 17?

Κ. Mehnert, P. Steinbach, W. Vogel, Ulm 206 CHARAKTERISIERUNG DES CHROMOSOMS 9 VON ELLOBIUS LUTESCENS

R. Metzdorf, E. Meese, E. Göttert, K.D. Zang, N. B l i n , 210 Homburg ANALYSIS OF CHROMOSOME 22 IN MENINGIOMA

Κ. M i l l e r , Hannover 214 PROLIFERATIONSKINETIK MITOGEN STIMULIERTER HOCHGEREINIGTER MENSCHLICHER Β UND Τ LYMPHOCYTEN

P. Miny, S. Basaran, I.H. Pawlowitzki, J . Horst, 218 W. Holzgreve, Münster CHROMOSOMENANALYSEN NACH TRANSABDOMINALEN PLAZENTA­PUNKTIONEN IM I I . UND I I I . SCHWANGERSCHAFTSTRIMENON

G. Müller, W. Schempp, D. Hayman, Fr e i b u r g und Adelaide 222 REPLIKATIONSSTUDIEN AN CHROMOSOMEN VON SMINTHOPSIS CRASSICAUDATA (MARSUPIALIA)

Μ. Münke, U. Francke, New Haven COMPARATIVE MAPPING OF THE HOMOCYSTINURIA GENE IN MAN AND MOUSE

B. Pabst, I . Hansmann, Göttingen DER EINFLUSS VON GONADOTROPINEN AUF DIE ENTSTEHUNG VON ANEUPLOIDIEN UND DIE KINETIK DER MEIOSE

H.D. Probeck, H. Koeppler, K.H. Pflueger, Marburg KARYOTYPE VARIATION OF THREE PERMANENT HUMAN LEUKEMIA-CELL LINES PRODUCING IMMUNO-REACTIVE CALCITONIN (ihCT)

J . Rademacher, C. Fonatsch, H.H. K i r c h e r , B. BrüggenJürgen, Lübeck und Hannover CHROMOSOMALE ABERRATIONEN IN LYMPHOBLASTOIDEN ZELLINIEN (LCL's) VON MORBUS HODGKIN-PATIENTEN NACH ZYTOSTATIKA-BEHANDLUNG

J . R i t t e r b a c h , J . Harbott, G. Schellong, F. Lampert, Gießen und Münster CHROMOSOMALE ABERRATIONEN BEI AKUTEN NICHT-LYMPHOBLASTISCHEN LEUKÄMIEN (ANLL) IM KINDESALTER

A. Rodewald, U. F r o s t e r - I s k e n i u s , E. Käb, U. Langenbeck, A. S c h i n z e l , A. Schmidt, E. Schwinger, P. Steinbach, Η. Veenema, R. Wegner, A. Wirtz, H. Zankl, M. Zankl, Hamburg, Lübeck, Göttingen, Zürich, Essen, Leiden, B e r l i n , München, K a i s e r s l a u t e r n , Homburg KARYOTYP-PHÄNOTYP-KORRELATION BEIM FRA-X-SYNDROM: ZUSAMMENHANG ZWISCHEN DER EXPRESSION DER FRA-X-STELLE UND DEM GRAD DER DERMATOCLΥPHJSCHEN SIGMATISIERUNG

W. Rosenkranz, U. P f e i f e r , Graz PRAKTISCHE ERFAHRUNGEN MIT DEM METAPHASESUCHER MIAMED VON LEITZ B. Rudolph, F. Berthold, F. Lampert, Gießen und Köln THERAPIE-INDUZIERTE CHROMOSOMENBRÜCHIGKEIT: ABERRATIONEN AM CHROMOSOM 1 BEI ZWEI KINDERN MIT NEUROBLASTOM

M. Schardin, H.D. Hager, Heidelberg IN SITU HYBRIDIZATION OF THE HUMAN SATELLITE I I I DNA FRAGMENT DESCRIBES Α NEW HETEROMORPHISM OF CHROMOSOME 1

W. Schempp, B. Weber, Fr e i b u r g HOMOLOGIE DER GESCHLECHTSCHROMOSOMEN BEI HÖHEREN PRIMATEN G. Scherer, F r e i b u r g FEHLEN Y-SPEZIFISCHER DNA-SEQUENZEN BEI ECHTEM HERMAPHRODITISMUS MIT DEM KARYOTYP 46,XX D. Sch i n d l e r , H. Seyschab, A. S c h i n z e l , Η. Hoehn, Würzburg und Zürich ANALYSIS OF LYMPHOCYTE ACTIVATION AND PROLIFERATION IN ATAXIA TELEANGIECTASIA BY BRDU/HOECHST FLOW CYTOMETRY

A. S c h i n z e l , Zürich SPEZIFISCHE BEHINDERUNGS- UND VERHALTENSPROFILE BEI AUTOSOMALEN CHROMOSOMENABERRATIONEN

Β. Schlegelberger, W. Grote, K i e l A CASE OF ANGIOIMMUNOBLASTIC LYMPHADENOPATHY (AILD) WITH FOUR UNRELATED CLONES, INCLUDING ONE WITH AN INVERSION 14(q11q32) B. Schlegelberger, E. Goedde-Salz, C. v. S c h i l l i n g , A. F e l l e r , W. Grote, K i e l PROGNOSTISCHE BEDEUTUNG VON ZYTOGENETISCHEN BEFUNDEN BEI PRÄMALIGNEN ERKRANKUNGEN AM BEISPIEL DER ANGIOIMMUNOBLASTISCHEN LYMPHADENOPATHIE (AILD)

E. S c h l e s i n g e r , E. Gebhart, Erlangen PROLIFERATIONSKONTROLLE IN MENSCHLICHEN TUMORZELLINIEN UND FIBROBLASTENKULTUREN MITTELS VORZEITIGER CHROMOSOMENKONDENSATION (PCC)

A. Schmidt, G. Gill e s s e n - K a e s b a c h , Essen DUPLICATION 7ρ. Α PROBLEM IN KARYOTYPE-PHENOTYPE CORRELATION

S. S c h n i t t g e r , C. Höfers, F. Beermann, P. Heidemann, I . Hansmann, Göttingen ZYTOGENETISCHE UND MOLEKULARGENETISCHE CHARAKTERISIERUNG EINER MONOSOMIE 20p

B. Schwäger, G. Dudin, H. Zankl, C. Cremer, K a i s e r s l a u t e r n und Heidelberg A CYTOGENETIC METHOD TO ANALYSE CHROMOSOME FRACTIONS AFTER 1G-SEDIMENTATION

Η. Schwaiger, Η. Werrich, Μ. Hirsch-Kauffmann, M. Schweiger, Innsbruck UNEXPECTED REPAIR DEFICIENCY OF BLEOMYCIN INDUCED LESIONS IN PRENATAL CELLS

G. Schwanitz, K. Z e r r e s , Bonn KLINISCHE VARIABILITÄT BEI GESCHWISTERN MIT GLEICHEN ERBLICHEN CHROMOSOMENSTÖRUNGEN D. Schweizer, M. Tohidast-Akrad, S. S t r e h l , 0. Dann, Wien und Er l a n g e n DIVERSE FLUORESCENT STAINING OF HUMAN HETEROCHROMATIN BY THE ISOMERIC DAPI DERIVATIVES D288/45 AND D288/48

Ε. Schwinger, Lübeck CHROMOSOMENDIAGNOSTIK NACH CHORIONZOTTENPUNKTION

H. S e i d e l , A. Wirtz, J . Murken, München ROBERTSON'SCHE DOPPELTRANSLOKATION IN DER D-GRUPPE: 44,XX,t(13q14q)(13q15q)

S. Singh, Κ. Voss, I . W i l l e r s , A. Koeppen, H.W. Goedde, Hamburg und Albany EXAMINATION OF CYTOGENETIC HYPERSENSITIVITY TO MUTAGENS IN CULTURED LYMPHOCYTES OF PATIENTS WITH FRIEDREICHS ATAXIA D. Smeets, A. Verhagen, T. Hustinx, Nijmegen FRAGILE SITE EXPRESSION WITHIN THE MEMBERS OF ONE FAMILY

G. S p e i t , C. Lücke-Huhle, Ulm und K a r l s r u h e CHROMOSOMAL CHANGES ASSOCIATED WITH METHOTREXATE-INDUCED GENE AMPLIFICATION IN ATAXIA TELANGIECTASIA CELLS

XXIV Κ. S p e r l i n g , Α. Dörries, R. Plätke, Ε. Struck, Μ. Gänge, 305 R.-D. Wegner, B e r l i n JANUAR 1987: HÄUFUNG VON TRISOMIE 21 FÄLLEN UNTER DEN NEUGEBORENEN BERLINS

K. S p e r l i n g , B e r l i n 307 GEMEINSCHAFTSSTUDIE ZUR SAISONALEN UND REGIONALEN HÄUFIGKEIT PRÄNATAL DIAGNOSTIZIERTER CHROMOSOMEN­ANOMALIEN FÜR DIE BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND EINSCHL. BERLINS IM JAHRE 1986

S. Stengel-Rutkowski, München 314 RISIKOABSCHÄTZUNG BEI 53 REZIPROKEN TRANSLOKATIONEN DER DATENSAMMLUNG IM RAHMEN DES SCHWERPUNKPROGRAMMS "PRÄNATALE DIAGNOSE GENETISCH BEDINGTER DEFEKTE" DER DEUTSCHEN FORSCHUNGSGEMEINSCHAFT

C. S u t t e r , D. Kubier, H. Horn, Μ. Volm, Heidelberg 317 DOUBLE MINUTES (dmin) BEI ADRIAMYCIN-RESISTENTEN HELA-ZELLEN

G.J. t e Meerman, C. Wollenberg, Groningen und Homburg 321 RECOVERY OF INTERCHROMOSOME DISTANCES WITH MULTIDIMENSIONAL SCALING, A SIMULTATION STUDY

Η. T i t t e l b a c h , S. Brüderlein, Ε. Gebhart, Erlangen 325 CLASTOGEN-, ANTICLASTOGEN- UND REPAIRINHIBITORAKTIVITÄT AM INTERPHASECHROMATIN

Η. T i t t e l b a c h , E. Gebhart, H. D i e t z f e l b i n g e r , Erlangen 329 und Fürth TRISOMIE 8 UND ISOCHROMOSOM 17 IN DER CHRONISCHEN PHASE EINER PH' + CML

G. Unteregger, T.W.J. Hustinx, J.M.J.C. Scheres, Homburg 331 und Nijmegen CHANGES IN THE NUCLEAR PROTEIN PATTERN IN FIBROBLASTS FROM PATIENTS WITH PREMATURE CENTROMERE DIVISION (PCD)

Μ. Westphal, M. Hansel, R. Kunzman'n, H.D. Herrmann, 335 F. H o l z e l , Hamburg CYTOGENETIC CHARACTERIZATION AND COMPARISON OF TWO CELL LINES DERIVED FROM HUMAN GLIOSARCOMA AND GLIOBLASTOMA

H. Winking, B. Boldyreff, A. Weith, W. Traut, Lübeck 339 MEIOTISCHES PAARUNGSVERHALTEN VON KEIMBAHN-HSRs DER MAUS

C. Wollenberg, G.J. te Meerman, Homburg 340 RECOVERING SPATIAL INFORMATION FROM METAPHASE POSITIONS OF HUMAN CHROMOSOMES, USING MULTIDIMENSIONAL SCALING

K. Z e r r e s , G. Schwanitz, M.-C. Völpel, J . Schaper, 344 R. Waldherr, Bonn, Regensburg und Heidelberg ZYSTISCHE NIERENVERÄNDERUNGEN IM RAHMEN VON CHROMOSOMEN­STÖRUNGEN

THOMAS CREMER 1» 2, PATRICIA EMMERICH2, PETER LICHTER3

Μ Yale U n i v e r s i t y , School of Medicine,Section of Neuropathology, New Haven CT 06510, U.S.A.

2) I n s t i t u t für Anthropologie und Humangenetik der Universität Heidelberg, Im Neuenheirner Feld 328, D-6900 Heidelberg

3) Yale U n i v e r s i t y , School of Medicine,Dept. of Human Genetics

GIBT ES EINE ZELLTYPSPEZIFISCHE ANORDNUNG DES CHROMATINS IN SÄUGERZELLKERNEN? ARGUMENTE VON UNGLÄUBIGEN, AGNOSTIKERN UND GLAUBIGEN

Zum Problem der Chromosomenanordnung i n Zellkernen hört man unter Genetikern und Z e l l b i o l o g e n heute n i c h t selten folgende Auffassung: Das Problem e x i s t i e r t s e i t 1885. Damals hat Carl Rabl seine Theorie der Chromosomenkontinuität im Interphasekern f o r m u l i e r t und die als Rabl-Orientierung bekannte Chromosomen­anordnung beschrieben (1,2). Neuere Untersuchungen haben inzwischen Rabis Auf­fassung bestätigt, daß die Chromosomen im Interphasekern d i s t i n k t e T e r r i t o r i e n einnehmen (3,4,5). Abgesehen von der bei einigen Z e l l typen beobachteten Rabl-O r i e n t i e r u n g ( 6 , 7 ) , d i e als Folge der Anaphase-Telophasebewegungen der Chromo­somen zu verstehen i s t , erwies sich die Anordnung der Chromosomen jedoch a l s (weitgehend) zufällig ( 6 ) . Es i s t daher n i c h t zu erwarten, daß weitere und methodisch immer aufwendigere Untersuchungen zu p r i n z i p i e l l neuen Erkenntnis­sen führen, d i e unser Verständnis von der S t r u k t u r und Funktion des Säugerge­noms wesentlich bereichern könnten.

Wir wollen diese Auffassung a l s Hypothese der "Ungläubigen" bezeichnen und uns im Folgenden m i t i h r e r Tragfähigkeit auseinandersetzen. Die Auffassung von "Agnostikern" i n dieser Fragestellung könnte man dagegen folgendermaßen zusam­menfassen: Die bisl a n g p u b l i z i e r t e n Untersuchungen zur Chromosomentopographie im Z e l l k e r n sind methodisch unzulänglich, widersprüchlich und insgesamt unzu­reichend, um eine denkbare f u n k t i o n e l l e Bedeutung der Chromosomentopographie auszuschließen oder p o s i t i v zu belegen. Schließlich i s t noch eine k l e i n e Gruppe von "Gläubigen" zu nennen, die einen hohen Grad von f u n k t i o n e l l bedeut­samer, z e l l t y p s p e z i f i s c h e r Ordnung der Chromosomen im Z e l l k e r n p o s t u l i e r e n . Ein extremes Beis p i e l dafür i s t die 1985 a u f g e s t e l l t e "gene-gating" Hypothese von Günter Blobel ( 8 ) . Danach s o l l jede Z e l l e eine z e l l t y p s p e z i f i s c h e , d r e i ­dimensionale Anordnung ihres Genoms besitzen. Diese j e w e i l s diskreten 3D-Strukturen s o l l e n s i c h im Verlauf von Entwicklung und Di f f e r e n z i e r u n g aus einer omnipotenten 3D-Struktur des Genoms der Zygote entwickeln. In dieser von Blobel vorgebrachten extremen Form kann d i e Idee nicht-zufälliger 3D-Struktu-ren des Genoms durch die inzwischen vorliegenden Befunde als w i d e r l e g t g e l ­t e n . Eine ausgeprägte Variabilität i n der Anordnung bestimmter bislan g unter­suchter Chromosomen bei bestimmten i n v i t r o k u l t i v i e r t e n Z e l l t y p e n (siehe unten) beweist aber natürlich n i c h t s gegen die Möglichkeit, daß im Hi n b l i c k auf andere Chromosomen bzw. andere unten aufgeführte Untersuchungskriterien der Chromosomentopographie eine f u n k t i o n e l l bedeutsame und möglicherweise zel 1 t y p s p e z i f i s c h e Ordnung e x i s t i e r t , d i e w i r bislang aus mentalen Gründen (Fehlen e i n e r geeigneten Theorie) und wegen methodischer Unzulänglichkeiten n i c h t sehen können. Ebensowenig schließen d e r a r t i g e Befunde schon aus, daß andere Z e l l t y p e n sich im Hi n b l i c k auf das j e w e i l s untersuchte Anordnungskrite­rium anders ve r h a l t e n . Dazu werden w i r unten ei n i g e B e i s p i e l e anführen.

Um das Problem der Chromosomentopographie i n einem umfassenden Sinne wissen­s c h a f t l i c h b e f r i e d i g e n d zu klären, benötigt man vergleichende Untersuchungen an u n t e r s c h i e d l i c h d i f f e r e n z i e r t e n Z e l l typen eines Organismus ebenso wie

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vergleichende Untersuchungen der entsprechend d i f f e r e n z i e r t e n Z e l l typen ver-schiedener Spezies (9,10). Die zu klärenden Fragen b e t r e f f e n a) die S t r u k t u r und Ausdehnung i n d i v i d u e l l e r Chromosomen während Interphase

und Mitose (11-15), b) s p e z i f i s c h e oder n i c h t - s p e z i f i s c h e Anheftungsorte der Chromosomen an die

Kernhülle bzw. an eine nukleare Matrix (16,17), c) die Möglichkeit einer spezifischen O r i e n t i e r u n g und Faltung i n d i v i d u e l l e r

Chromosomen (16,18), d) Chromatinbewegungen während des Z e l l z y k l u s (19) und während der terminalen

D i f f e r e n z i e r u n g p o s t m i t o t i s c h e r Zellen (9,20), e) die räumliche Anordung a k t i v e r und n i c h t - a k t i v e r Gene i n i n d i v i d u e l l e n

Interphasechromosomen (21) und schließlich f ) die r e l a t i v e Anordnung homologer und nicht-homologer Chromosomen im Z e l l ­

kern (22,23,24).

Der k r i t i s c h e Leser wir d beim Studium der z i t i e r t e n L i t e r a t u r b e i s p i e l e und einschlägiger U b e r s i c h t s a r t i k e l (17,25) f i n d e n , daß auf a l l e diese Fragen bis l a n g keine d e f i n i t i v e n Antworten gegeben werden können. Selbst die ver­gleichsweise simple Frage, ob homologe Chromosomen im Z e l l k e r n somatischer Zellen benachbart sind oder n i c h t , w i r d nach wie vor kontrovers beantwortet (6,26). Nahezu a l l e Befunde, m i t denen die "Ungläubigen" i h r e Hypothese heute stützen, stammen von i n v i t r o k u l t i v i e r t e n Zellen (z.B. PHA-stimulierte Lym­phozyten, Fibroblasten usw.). Da i n d i v i d u e l l e Chromosomen mit wenigen Ausnah­men b i s l a n g n i c h t d i r e k t im Z e l l k e r n d a r g e s t e l l t werden konnten (4,5,16,18), wurden Untersuchungen zur Chromosomenanordnung überwiegend an Metaphaseplatten durchgeführt (27,28,29) unter der Annahme, daß diese Anordnung d i e Interphase-anordnung i n einem gewissen Umfang w i d e r s p i e g e l t (30). Trotz einer ausgepräg­ten Variabilität der Chromosomenanordnung zeigten diese Untersuchungen doch auch c h a r a k t e r i s t i s c h e Abweichungen bestimmter Chromosomen von einer zufälli­gen V e r t e i l u n g . Auch andere Verfahren zur Analyse der Interphasekernordnung, wie Lasermikrobestrahlung von Zellkernen (3,7,22,30), die Analyse von Chroma­t i d t r a n s l o k a t i o n e n (Interchanges) (23) und d i e Technik der v o r z e i t i g e n Chromo­somenkondensation (PCO (6,7) konnten bislan g nur bei i n v i t r o k u l t i v i e r t e n Zellen eingesetzt werden.

Wie fragwürdig eine Generalisierung dieser Befunde i s t , w i r d - ganz abgesehen von den unterschiedlichen methodischen Problemen der genannten Ansätze - durch neue Befunde während der D i f f e r e n z i e r u n g von Neuronen i n vivo d e u t l i c h . Sie zeigen, daß i n den post-mitotischen Zellkernen von Neuronen Chromatinbewegun­gen s t a t t f i n d e n (20) und daß die D i f f e r e n z i e r u n g bestimmter Neuronen z e i t l i c h m i t bestimmten Veränderungen i h r e r Chromosomenanordnung a s s o z i i e r t i s t ( 9 ) . Ein weiteres eindrucksvolles B e i s p i e l für die Bedeutung s p e z i f i s c h e r Chroma­t i nbewegungen i n n i c h t mehr teilungsfähigen Zellen b e t r i f f t die Spermiohisto-genese bei unterschiedlichen Tierklassen wie Vögeln und Amphibien. In den postmitotischen Zellkernen der Spermatiden finden Chromatinbewegungen s t a t t , durch die ein bestimmter Heterochromatinblock, das acrosomale Chromocenter, zur Spitze des späteren Spermakerns hin p o s i t i o n i e r t w i r d (31,32). Bei der Maus konnte während der Reifung der Spermatiden eine paarweise Assoziation von Zentromerregionen nicht-homologer Chromosomen beobachtet werden (10). Die mögliche biolog i s c h e Bedeutung dieser Phänomene i s t ungeklärt. Die Be i s p i e l e zeigen jedoch m i t Bestimmtheit, daß Chromosomenpositionen i n h o c h d i f f e r e n z i e r ­ten Zellen i n vivo n i c h t ausschließlich a l s das Resultat vorausgehender Ana-phase-Telophasebewegungen i n t e r p r e t i e r t werden können.

Die Technik der i n s i t u H y b r i d i s i e r u n g mit chromosomenspezifischen DNA-Proben ersch e i n t heute als a u s s i c h t s r e i c h s t e Methode, um die Frage einer z e l l t y p s p e -z i f i s c h e n Anordnung des Chromatins w e i t e r zu klären (9,24,33). Verschiedene

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Möglichkeiten einer n i c h t - r a d i o a k t i v e n Markierung von DNA-Proben i n Verbindung m i t u n t e r s c h i e d l i c h e n fluoreszenzoptischen und col orimetrisehen Nachweisver­fahren erlauben es inzwischen, s p e z i f i s c h e Regionen verschiedener Chromosomen im Z e l l k e r n g l e i c h z e i t i g d a r z u s t e l l e n (34,35,36). Geeignete F i x a t i o n s v e r f a h -ren, die die dreidimensionale S t r u k t u r der Zellkerne während der i n s i t u H y b r i d i s i e r u n g hervorragend e r h a l t e n , sind e b e n f a l l s verfügbar (9; Laura Manuelidis, persönliche M i t t e i l u n g ) . Für eine q u a n t i t a t i v e Beschreibung der Chromatinanordnung kann d i e Technik der n i c h t - r a d i o a k t i v e n i n s i t u H y b r i d i s i e ­rung m i t Verfahren der d i g i t a l e n Bildanalyse zur zweidimensionalen und d r e i ­dimensionalen Rekonstruktion von Zellkernen und gegebenenfalls m i t neuen lichtmikroskopischen Verfahren, wie der konfokalen Laser-Scanning Mikroskopie, kombiniert werden (18,37-40). Ein w e i t e r e r , vielversprechender Ansatz besteht i n der Analyse der V e r t e i l u n g von Antigenen im Z e l l k e r n m it H i l f e von A n t i ­körpern gegen Zentromerantigene, RNA-Proteinkomplexe und verschiedene andere Makromoleküle (41).

In der Heidelberger Arbeitsgruppe (T.Cremer) wurden i n Zusammenarbeit mit der Leidener Arbeitsgruppe um M. van der Ploeg Doppelhybridisierungsexperimente mit b i o t i n y l i e r t e n und merkurierten chromosomenspezifischen DNA-Proben durch­geführt. Diese Proben erlauben eine s p e z i f i s c h e Darstellung des k o n s t i t u t i v e n Heterochromatins der Chromosomen 1, 15, 18, X und Y im Z e l l k e r n von Lymphozy­ten , F i b r o b l a s t e n und Fruchtwasserzellen. Die Ergebnisse bestätigen die be­kannte Assoziation NOR-tragender Chromosomen ( h i e r Chromosom 15) - eine im H i n b l i c k auf d i e Tragfähigkeit der neuen Verfahren w i c h t i g e K o n t r o l l e . Darüber hinaus zeigen s ie eine ausgeprägte Variabilität i n der Anordnung der unter­suchten homologen und nicht-homologen Chromosomen (Emmerich e t a l . , i n Vor­b e r e i t u n g ) . In Yale e n t w i c k e l t e Techniken zur n i c h t - r a d i o a k t i v e n i n s i t u H y b r i d i s i e r u n g an Gewebeschnitten (9; Laura Manuelidis, unveröffentlichte Befunde) ermöglichen es i n Zukunft, die Technik der Doppel h y b r i d i s i e r u n g chromosomenspezifischer DNA-Proben auch für vergleichende Untersuchungen der Chromosomentopographie h o c h d i f f e r e n z i e r t e r Zellen i n Geweben einzusetzen. Dabei darf erwartet werden, daß d e r z e i t bestehende Grenzen im Hin b l i c k auf die Anzahl der im Z e l l k e r n simultan d a r s t e l l b a r e n Chromosomenregionen i n naher Zukunft wesentlich e r w e i t e r t werden. Dies g i l t insbesondere auch für die Zahl der zur Verfügung stehenden chromosomenspezifischen Proben. Dabei i s t neben den bisher vorhandenen Proben zur Darstellung chromosomenspezifischer r e p e t i -t i v e r DNA auch an eine Kombination von "single-copy" Sequenzen zu denken, die i n einem darzustellenden Chromsomen bzw. einer chromosomalen Subregion vorkom­men. Es i s t zu erwarten, daß auf diesem Wege schließlich jedes gewünschte Chromosom insgesamt und jede gewünschte chromosomale Subregion s p e z i f i s c h d a r g e s t e l l t werden kann, eine Entwicklung die auch für die cytogenetische Diagnostik großen Nutzen haben w i r d (50).

Am Ende unserer Argumentationskette fassen w i r unsere eigene Auffassung zusam­men. Es g i b t b i s l a n g keine überzeugende Theorie, die eine f u n k t i o n e l l bedeut­same, z e l l t y p s p e z i f i s c h e Anordnung von Chromosomen im Z e l l k e r n m i t s p e z i f i s c h testbaren Vorhersagen fordern würde. Eine solche Theorie wi r d v i e l l e i c h t auch nie benötigt werden, sofern d i e Gruppe der "Ungläubigen" mit i h r e r wissen­s c h a f t l i c h l e g i t i m e n Sichtweise im Verlauf der weiteren Untersuchungen recht behält. Zwingende experimentelle Argumente für oder gegen diese Sichtweise sind b i s heute i n der wissenschaftlichen L i t e r a t u r n i c h t vorgebracht worden. Auf dem A r b e i t s g e b i e t der Zellkerntopographie, im weitesten Sinne einer Ana­lyse der räumlichen Anordnung von DNA, RNA und Proteinen, muß auch heute noch zunächst r e i n phänomenologisch vorgegangen werden. Präzise Fragen zur Z e l l -kerntopographie werden schon s e i t langem g e s t e l l t (42,43,44). Es f e h l t e an geeigneten, u n i v e r s e l l einsetzbaren Methoden zu i h r e r Beantwortung. Hier zeichnet sich ein dramatischer Umschwung ab: diese Fragen können i n Zukunft

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systematisch angegangen und, wie w i r erwarten, überzeugend beantwortet wer­den. Die i n Yale (Laura Manuelidis und David Ward), Heidelberg, Leiden und einigen wenigen anderen Orten (17,33,40,41) vorangetriebene Entwicklung zur q u a n t i t a t i v e n , dreidimensionalen Darstellung s p e z i f i s c h e r Kernstrukturen, läßt sich ebenso auf Pflanzenzellkerne anwenden, bei denen die gleichen Kontrover­sen im H i n b l i c k auf die Frage einer nicht-zufälligen Chromosomenanordnung bestehen wie bei Säugerzellkernen (45-49). Ob w i r selbst uns bei dieser Ent­wicklung aus "Agnostikern 1 1 zu "Gläubigen" oder "Ungläubigen" wandeln müssen, i s t n i c h t vorhersehbar. Wer heute prognostizieren möchte, daß vergleichende Analysen der Chromosomenanordnung keinen oder j e d e n f a l l s im H i n b l i c k auf Auf­wand und Ergebnis der Untersuchungen nur geringen Erkenntniswert besitzen, s o l l t e sich aufmerksam mit den Anomalien im Sinne von Thomas Kuhn beschäftigen ( 2 ) , d i e seiner Auffassung entgegenstehen. Zwei Beispiele für solche Anomalien (Spermiohistogenese, D i f f e r e n z i e r u n g von Neuronen) haben w i r z i t i e r t . Sie werfen die Frage auf, durch welche Mechanismen solche spezifischen, unerklär­ten Positionsveränderungen von Chromatin i n Zellkernen der Keimbahn und i n somatischen Zellkernen zustande kommen? V i e l l e i c h t handelt es sich h i e r nur um "Ausnahmen" und w i r räumen gerne e i n , daß die "Ungläubigen" mit i h r e r S i c h t ­weise am Ende im Großen und Ganzen recht behalten mögen. Denn die eigenen bislang an i n v i t r o k u l t i v i e r t e n Zellen durchgeführten Untersuchungen sprechen nachdrücklich gegen die Vo r s t e l l u n g einer generellen, von Z e l l k e r n zu Z e l l k e r n s t a r r f e s t g e l e g t e n Ordnung der Chromosomen. Die Frage, die uns a n t r e i b t i s t aber, ob es i n dieser Variabilität dennoch eine z e l l t y p s p e z i f i s c h e Ordnung im Hi n b l i c k auf eines oder mehrere der oben genannten K r i t e r i e n g i b t . Um diese Frage zu klären, darf man den methodischen Aufwand n i c h t scheuen, der mit der Herstellung s p e z i f i s c h e r Probenkombinationen zur Darstellung i n d i v i d u e l l e r Chromosomen einschließlich a k t i v e r und n i c h t - a k t i v e r Genorte im Z e l l k e r n ver­bunden i s t , e i n Aufwand der a l l e r d i n g s auch für v i e l e andere Fragestellungen lohnend er s c h e i n t (David Ward, persönliche M i t t e i l u n g ) . Wir wollen zunächst n i c h t mehr (aber auch n i c h t weniger) als eine möglichst einwandfreie, phänome­nologische Beschreibung der Chromatinanordnung i n ausgewählten Z e l l t y p e n verschiedener Gewebe erreichen und uns dabei von dem durch den wissenschaft­l i c h e n Prozeß verursachten, wachsenden Zwang experimenteller Argumente für oder gegen eine z e l l t y p s p e z i f i s c h e Anordnung von Chromatin l e i t e n lassen. V i e l l e i c h t w i r d sich dabei h e r a u s s t e l l e n , daß die r e l a t i v e n Positionen ver­schiedener Chromosomen im Großen und Ganzen ohne f u n k t i o n e l l e Bedeutung sind und eine f u n k t i o n e l l w i c h t i g e Ebene der Chromatinanordnung eher i n der Anord­nung von f u n k t i o n e l l aktiven und n i c h t - a k t i v e n DNA-Sequenzen i n i n d i v i d u e l l e n Chromosomendomänen zu suchen i s t (15,21). Die weitere Aufklärung des Problems der Zel lkerntopographie gehört unseres Erachtens ebenso zur umfassenden Ana­lyse des Säugergenoms wie die angestrebte t o t a l e Sequenzierung eines solchen Genoms.

Wir danken Laura Manuelidis und David Ward für za h l r e i c h e Diskussionen und der Deutschen Forschungsgemeinschaft für die Gewährung eines Heisenberg-Stipen­diums an T. Cremer.

LITERATUR

1 Rabl, Morphologisches Jahrbuch 10:214-330 (1885) 2 Cremer, Von der Z e l l e n l e h r e zur Chromosomentheorie, Springer-Verlag (1985) 3 Zorn e t a l . , Exp Cell Res 124:111-119 (1979) 4 Schardin et a l . , Hum Genet 71:281-285 (1985) 5 Manuelidis, Hum Genet 71:288-293 (1985) 6 Sperling & Lüdtke, Chromosoma 83:541-553 (1981) 7 Cremer e t a l . , Hum Genet 60:46-56 (1982a)

70

8 B l o b e l , PNAS 82:8527-8529 (1985) 9 Manuelidis, PNAS 81:3123-3127 (1984) 10 B r i n k l e y e t a l . , Chromosoma 94:309-317 (1986) 11 Laemmli e t a l . , Cold Spring Harbor Symp Quant Biol 42:109-118 (1978) 12 Hancock, Biol Cell 46:105-122 (1982) 13 Pienta & Coffey, J Cell Sei Suppl 1:123-135 (1984) 14 M u l l i n g e r & Johnson, J Cell Sei 87:55-69 (1987) 15 Gasser & Laemmli, TIG 3:16-22 (1987) 16 Hochstrasser e t a l . , J Cell B i o l 102:112-123 (1986) 17 Hubert & Bourgeois, Hum Genet 74:1-15 (1986) 18 Mathog e t a l . , Nature 308:414-421 (1984) 19 Manuelidis, Ann NY Acad Sei 450:205-221 (1985) 20 De Boni & Mintz, Science 234:863-866 (1986) 21 Hutchison & Weintraub, Cell 43:471-482 (1985) 22 Cremer e t a l . , Hum Genet 62:201-209 (1982b) 23 Hager e t a l . , Hum Genet 61:342-356 (1982) 24 Rappold e t a l . , Hum Genet 67:317-325 (1984) 25 Comings, Hum Genet 53:131-143 (1980) 26 Hadlaczky e t a l . , Exp Cell Res 167:1-15 (1986) 27 Wollenberg e t a l . , Hum Genet 60:239-248 (1982a) 28 Wollenberg e t a l . , Hum Genet 62:310-315 (1982b) 29 Hens e t a l . , Human Genet 60:249-256 30 Cremer e t a l . , Chromosomes today VIII:203-212 (1984) 31 Schmid, Ein acrosomales Chromozentrum i n der Spermiohistogenese der Amphi­

bien, D i s s e r t a t i o n , Ulm (1978) 32 Klemm e t a l . , 7. JCHG Abstracts 11:597, B e r l i n (1986) 33 Wachtier e t a l . , Exp Cell Res 167:227-240 (1986) 34 Langer-Safer e t a l . , PNAS 79:4381-4385 (1982) 35 Landegent e t a l . , Exp Cell Res 253:61-72 (1984) 36 Hopman e t a l . , Histochemistry 85:1-4 (1986) 37 Agard, Ann Rev Bioeng 13:191-219 (1984) 38 Inoue & Inoue, Ann NY Acad Sei 483:392-404 (1986) 39 Brakenhoff e t a l . , Ann NY Sei 483:405-426 (1986) 40 Pinkel e t a l . , Cold Spring Harbor Symp Quant Bio 51:151-157 (1986) 41 Ringertz e t a l . , J Cell Sei Suppl 4:11-28 (1986) 42 Lacadena e t a l . , Kew Chromosome Conference 11:81-90 (1983) 43 Comings, Am J Hum Genet 20:440-460 (1968) 44 Vogel & Schroeder, Humangenetik 25:265-297 (1974) 45 Fussel, Chromosoma 50:201-210 (1975) 46 A v i v i & Feldman, Hum Genet 55:281-295 (1980) 47 Ashley & Pocock, Genetica 55:161-169 (1981) 48 Benett, Chromosomens today VIII-.190-202 (1984) 49 Therman & Denniston, PI Syst Evol 147:289-297 (1984) 50 Cremer e t a l . , Hum Genet 74:346-352 (1986)

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