Genul Staphylococcus 2014 (1)

51
Genul Staphylococcus

description

Staphylococcus

Transcript of Genul Staphylococcus 2014 (1)

  • Genul Staphylococcus

  • Obiective Denumire Taxonomie Definitie, generalitati Habitat Caractere

    morfologice de cultura metabolice de patogenitate

    Rezistenta la agenti fizici, chimici, biologici Aspecte clinice Imunitate Epidemiologie Profilaxie, tratament Diagnostic de laborator

  • Strugure (rom.) = (gr.)

  • TAXONOMIE este o disciplin tiinific care se ocup cu stabilirea

    unor legi de clasificare i sistematizare a unor domeniireale, caracterizate printr-o structur complex.

    n contextul tiinelor biologice, este o disciplin a clasificrilor speciilor de vieuitoare de pe Pmnt.

    gr. taxis ordine gr. nomos lege

    TAXON (Taxa la plural) = unitate de clasificare (Ex. domeniu, philum, regn, clasa, ordin, familie, gen, specie, subspecie)

  • Taxonomie bacterian Sec XIX 2 regnuri : animal si vegetal 1937 procariote si eucariote (ME) 1990 - Carl Woesse 3 regnuri: Archaea,

    Bacteria si Eucariota

    PROCARIOTE (precursoare ale celulelor cu nucleu) Archaebacterii bacterii extreme (primitive)

    (nepatogene pt om) Eubacterii bacterii adevarate

    EUCARIOTE (celule cu nucleu)

  • Eubacteria 30 diviziuni (phyla)

    Phylum Firmicutes Clasa Bacilli (Firmibacteria)

    Ordin Bacillales

    - Familia StaphylococcaceaeGenuri: Staphylococcus

    JeotgalicoccusMacrococcusNosocomiicoccusSalinicoccus

  • TaxonomieFamilia: Staphylococcaceae

    (Schleifer and Bell 2010)Genul: Staphylococcus

    (Rosenbach 1884)47 specii si 24 subspecii

    (Euzeby J.P., 2012)Specia tip: Staphylococcus aureus

    (Rosenbach 1884)Cele mai recent descrise:

    - Staphylococcus agnetis(Taponen et al.2012, sp.nov)

    - Staphylococcus stepanovicii(Hauschild et al. 2012, sp. Nov)

    Metode: Hibridizare ADN ARN ribosomal (rRNA) Hibridizare ADN-ADN Analiza comparativa a oligonucleotidelor 16S rRNA

  • Definitie Coci Gram pozitivi Imobili Nesporulati Dispusi in gramezi neregulate (staphylo),

    izolati sau in perechi Aerobi, facultativ anaerobi Oxidaza negativi, catalaza pozitivi Mezofili (se dezvolt ntre 10-42C), cu

    dezvoltare optim la 37C

    diviziunea celular - se produce n trei planuri perpendiculare i nu permite separarea complet a celulelor fiice

  • Generalitati patogeni pt om si animale (S. aureus) Un procent important din populatie sunt

    purtatori de S. aureus pe termen lung (tegument si vestibul nazal)

    conditionat patogeni restulex. S. epidermidis, S. saprophyticus,

    S haemolyticus, S simulans, S cohnii, S warneri and S lugdunensis, S. schleiferi

  • PERETE BACTERIANla bacteriile Gram pozitive

    Gros, omogen, retea tridimensionala vezi schita Se asociaza cu :

    - acizi teichoici (a.t.) 50% din greutatea uscata- a.t. de perete- a.t. de membrana

    Polimeri de ribitol sau glicerol fosfati Stabilizeaza peretele Leaga ionii de Mg si permite functionare enzimelor

    membranei celulare Antigene majore de S- acizi teichuronici (contin acid uric si polizaharide neutre) antigenici, subtipare streptococi si lactobacili- lipoglicani (glicolipide)

  • Structura schematica a peretelui

  • Structura stratul bazal de murein, caracteristic bacteriilor gram pozitive de

    care sunt legai la exterior acizii teichoici la suprafaa lor o enzim legat, denumit clumping factor sau

    coagulaz legat, care transform fibrinogenul n fibrin. Nu trebuie confundat de coagulaza liber, secretat n exteriorul celulei bacteriene i care este caracteristic speciei S. aureus

    la majoritatea tulpinilor de S. aureus, peptidoglicanul este acoperit de proteina A. Aceasta are proprietatea de a lega n mod nespecific anticorpii prin fragmentul Fc, ceea ce confer stafilococilor proprieti antiopsonizante

    Unele tulpini sunt ncapsulate ceea ce crete proprietile antifagocitare ale stafilococilor

  • Structura schematica a peretelui

    L-Lys

    Gly

  • Habitat ubiqvitari (tegumente, mucoase, aer,

    suprafete obiecte) vestibul nazal permanent tegumente, mucoase pasager portaj 10-40% in populatia generala, pana

    la 70% personal din mediul spitalicesc infectii: cutanate, profunde, septicemii

  • Caractere morfologice coci Gram +, 1 mm diam, gramezi

    (staphylo)(diviziune in planuriperpendiculare cultura in bulion), izolatisau perechi (in produse biologice)

  • Caractere de cultura in aerobioza facultativ anaerobioza, 35-37oC, medii cu

    NaCl 7,5% mediu lichid (bulion simplu, bulion tripticaz soia,

    Chapman, tulbura uniform cu depozit la fundul tubului medii solide: nepretentiosi

    colonii S, 1-3 mm diam, marg regulate, suprafata lucioasa(exista si col M si R)

    pigment auriu, galben sau alb GELOZA SIMPLA, IN AEROBIOZA

    hemoliza totala sau partiala (cald rece) GELOZA SANGE mediu cu NaCl 7,5% (Chapman solid) sensibil la novobiocin (geloza simpla, Mueller Hinton) colonii negre (Baird Parker) screening pt izolare si numarare S.

    aureus din produse alimentare

  • Caractere biochimice, metabolice

    catalaza pozitivi oxidaza negativi fermenteaza glucoza, manita (S. aureus) cresc in cond de pres osmotica ridicata

    (NaCL 7,5%)

  • Staphylococcus aureusse deosebete de ali stafilococi prin:

    caracterele de cultura colonii pigmentate galben-auriu, spre deosebire de S.

    epidermidis i S. saprophyticus care prezint pigment alb

    produce pe agar snge o hemoliz clar spre deosebire de restul speciilor, care produc o hemoliz incomplet

    prezena coagulazei enzim care are proprietatea de a coagula plasma

    oxalatat. Restul stafilococilor sunt denumii SCN prezena dezoxiribonucleazei

    (termonucleazei) prezena proteinei A n structura peretelui

    celular

  • Rezistenta la uscaciune luni la caldura umeda 62oC 30 min (enterotoxina rezista 30 min la fierbere) la alcool 70oC 1 ora la fenol 2% - 30 min novobiocin dif S. aureus si epidermidis

    (sensibili) de S. saprophyticus (rezistent) alte antibiotice variaza vezi tabel

  • Rezistenta la antibiotice

  • Sensibilitatea la chimioterapice antiinfecioase

    natural sensibil la aproape totalitatea familiilor de antibiotice natural rezistent la polimixine (colistin) quinolone de generaia nti (acid

    nalidixic) Rezisten

    secreia beta-lactamazelor - codificate plasmidic (inhibate de inhibitorii de -lactamaze acid clavulanic = augmentin, sulbactam, tazobactam care le inactiveaz)

    prin modificarea tintei (tulpini meticilino-rezistente MRSA sau Meti-R). apariia unei PBP adiionale i se manifest fa de toate beta-

    lactaminele (peniciline, cefalosporine, carbapenem). Singurele antibiotice active fa de aceste tulpini sunt glicopeptidele (vancomicina). Dar i fa de acestea au aprut tulpini rezistente.

    !!! Antibiograma este obligatorie

  • Caractere de patogenitate Virulenta

    capsula la unii protectie fata de fagocite proteina A, ac teichoici (specificitate de specie) Enzime:

    - coagulaza libera si legata (clumping factor):- Stafilococ coagulaza pozitiv (S. aureus) - Stafilococi coagulaza negativi (SCN)

    - DNA-za- stafilolizina (fibrinolizina)- lipaze- hialuronidaza- fosfataza

    Toxinogeneza hemolizine (alfa, beta, gamma, delta)

    alfa caldura, si formol anatoxina alfa hemoliza totala, beta hemoliza cald-rece

    leucocidine TSST1 toxina exfoliativa Enterotoxina (A - E)

  • Catalazaenzim protectiv care catalizeaz conversia peroxidului de hidrogen toxic, acumulat n cursul metabolismului bacterian, sau eliberat prin fagocitoz, n ap i oxigen molecular

  • Coagulaza: 2 coagulaze

    coagulaza legat (clumping factor): legat de peretele celular al stafilococului i acioneaz asupra fibrinogenului transformndu-l n fibrin insolubil, rezultnd aglutinarea stafilococului.

    coagulaza liber are acelai efect, dar numai n urma reaciei cu un factor globulinic din plasm (CRF=coagulase reacting factor), formeaz trombin-like factor, sau stafilotrombina, care la rndul ei catalizeaz conversia fibrinogenului n fibrin insolubil. Coagulaza liber este utilizat ca marker taxonomic i de virulen pentru S.aureus.

    S. aureusCoagulaza +

    S. C. N. Coagulaza -

  • Coagulaza

  • Hemolizine Sunt n numr de 4 ( , , , ), mai importante n patologia uman fiind

    alfa-toxina (hemolizin) care produce o liz eritrocitelor i lezeaz trombocitele i beta-toxina care degradeaz sfingomielina fiind toxic pentru eritrocite dar i pentru alte tipuri de celule

    Leucocidine Lizeaz PMN i macrofagele. Bacteriile care produc aceast toxin au o

    rezisten crescut la fagocitoz. Este deseori secretat de ctre tulpinile izolate din furuncule.

    Hialuronidaza Depolimerizeaz substana fundamental a esutului conjunctiv,

    facilitnd astfel diseminarea infeciei

    Lipaza - 100% SA, 30% SCN Rol n hidroliza lipidelor, fapt esenial n supravieuirea stafilococului

    la nivelul glandelor sebacee Responsabile de invazia stafilococului la nivelul esuturilor cutanate

    i subcutanate, fiind implicate n patogenia furunculelor i carbunculelor.

  • Exfoliantina - 5% din tulpinile de S.aureus toxin dermolitic rspunztoare de producerea sindromului

    pielii oprite tropism cutanat, producnd pe plan histologic o decolare

    intra-epidermic, iar pe plan clinic leziuni buloase Enterotoxine - 50% din tulpinile de S. aureus proteine solubile, termostabile (30 de minute la 100C) rezistente la aciunea enzimelor digestive 6 tipuri antigenice de enterotoxine (A-E). tipurile A i B - asociate cu producerea de bolii tipurile C i D sunt asociate cu contaminarea produselor

    lactate, iar enterotoxina B cu enterocolita pseudomembranoas postantibioterapie

    lizeaz PMN i macrofagele

    Toxina ocului toxic 1 (TSST-1) -2% din S.a. stimuleaz macrofagele, care vor elibera cantiti mari de

    mediatori chimici, cauz a sindromului ocului toxic

  • -lactamazele numeroase tulpini inactivarea -lactaminelor reprezint unul din cele mai importante mecanisme

    de rezisten la aceste antibiotice

  • Aspecte clinice

  • Aspecte clinice

  • S. aureus

    A. Infectii purulente localizate sau generalizate:

    B. Toxiinfectii

  • Infectii localizate Foliculite: infecii piogene la nivelul foliculilor piloi. La pleoape - orjelet. Furuncule: extinderea infeciei la glandele sebacee, colecie

    apreciabil de puroi, nsoit de esuturi necrozate, durere Carbuncule: rezultat al extinderii infeciei la mai multe glande

    pilosebacee i la nivelul esuturilor subcutanate profunde. Impetigo: infecie superficial la nivelul feei i membrelor,

    care afecteaz mai ales copilul mic. macule, vezicule, pustule, pe fond eritematos, cruste. asocierea S.aureus cu streptococul de grup A (n 20% din

    cazuri).

  • Infectii localizate Hidrosadenita: infecie a glandelor sudoripare cu

    localizare la nivel axilar, perineal, sau n zonele genitale Mastita: infecie a glandei mamare

    1-3% din femeile care alpteaz nodul eritematos i formarea unui abces canalicular.

    Infecii ale plgilor: post traumatic chirurgical, edem i eritem local, durere i acumulare de

    puroi.

  • Bacteriemia i endocardita:- 50% dobndite n mediul spitalicesc- dup proceduri chirurgicale - utilizare de catetere intravenoase contaminate- se asociaz frecvent cu diseminare septic secundar de

    obicei la nivelul endocardului i apariia endocarditelor acute, infecii severe, cu o mortalitate de cca 50%.

    Infectii generalizate

  • Pneumonia i empiemul pulmonar: frecvent la vrstele extreme

    Osteomielita i artrita septic: rezultat al diseminrii septice secundare unor infecii stafilococice cu alte localizri, sau postraumatic la copii la nivelul zonelor metafizare ale oaselor lungi la aduli, localizarea este mult mai frecvent la nivel

    vertebral artrite septice dup infiltraii intraarticulare,

  • B. Toxiinfectii

    1. Toxiinfecii alimentare consumul de alimente contaminate cu enterotoxine

    stafiococice ( carne de porc in saramur, unc, salate de cartofi, ngheate)

    frecvent n sezoanele calde (iulie-august). rezultat al contaminrii produsului alimentar de ctre

    purttorii sntoi. nclzirea sau fierberea ulterioar a alimentului distruge

    bacteria dar nu inactiveaz toxina. Alimentul contaminat nu are aspectul sau gustul alterat

    Incubaia - 4 ore, debutul este brusc, evoluia rapid, 24 de ore, caracterizat prin: diaree apoas, greuri, vrsturi, dureri abdominale, cefalee.

  • 2. Dermatita exfoliativ(sindromul pielii oprite, maladia Ritter sau impetigo bulos)

    la copiii cu vrsta sub 1 lun eritem perioral, care n decurs de 2 zile cuprinde ntreg

    corpul formarea de vezicule (cu lichid clar, germeni microbieni

    i leucocite absente, datorit faptului c patogenitatea este determinat de toxina bacterian

    descuamarea epiteliului. Refacerea epiteliului are loc n 7-10 zile, cnd apar anticorpii protectori.

  • 3. Sindromul socului toxic

    1978 stafilococii productori de TSST-1 - febr, hipotensiune - eritem scarlatiniform

    - evolutia poate fi fatal- la femei tinere, care au utilizat tampoane intravaginale.

    Acestea au a afinitate crescut pentru Mg2+. Scderea concentraiei acestora n secreiile vaginale este favorabil nmulirii stafilococilor i secreiei n cantiti mari a TSST-1. Aceast toxin se absoarbe i stimuleaz macrofagele care vor secreta interleukin-1, prostaglandine i TNF- (tumor necrosis factor). Aceste citokine sunt reponsabile de manifestrile clinice.

  • Infectiile nosocomiale S.aureus rezistent la meticilin (MRSA) Transmiterea se face mai ales prin contact

    direct, prin intermediul purttorilor sntoi de germeni (portaj nazal, prin mini contaminate, etc

    localizri: cutanat, respiratorie, renal, digestiv, osoas, articular, generalizate.

  • Stafilococii coagulazo-negativi (SCN) Endocardita

    valvulele cardiace (lezate prin malformaii cardiace, reumatism articular acut

    cauz major a endocarditelor valvulare artificiale.

    introdus n organism n timpul tehnicilor de chirurgie cardiovascular

    debutul lent, la aproximativ 1 an de la intervenia chirurgical

    debuteaz la nivelul suturii valvulei de esutul cardiac

    formarea abceselor cardiace i separarea valvulelor la nivelul liniilor de sutur, cu tulburri de dinamic cardiac. Prognosticul este rezervat.

  • Infectii ale materialelor de implant 20-65% din infeciile secundare implanturilor de

    dispozitive, catetere, sunturi, tuburi de dren sunt cauzate de SCN (mai frecvent S.schleiferi i S.lugdunensis).

    SCN - capsula polizaharidica asigur ataarea la nivelul dispozitivelor sintetice, protejndu-i astfel de aciunea antibioticelor i a celulelor antiinflamatoare.

  • Infecii ale protezelor articulare frecvente la nivelul oldului

    Infecii ale tractului urinar S. saprophyticus la femeia tnr, activ sexual

    Alte infecii abcese cerebrale meningite, infecii vasculare peritonite, septicemii majoritatea cu caracter nosocomial pot fi produse de specii

    de SCN

  • Imunitate Slaba Posibila reinfectie Ac anti toxici

    Sursa purtatori sanatosi si bolnavi Calea de transmitere: direct maini, pic Pflugge,

    obiecte, instrumentar Receptivitate: la imunocompromisi, nou nascuti

    infectii nosocomiale, toxiinfectii alimentare, infectii de cateter

    Epidemiologie

  • Tratament Chirurgical evacuare puroi Antiseptice Antibiotice dupa antibiograma Exista rezistenta la peniciline (OXA,

    Cefoxitin pt determinareaMeticilinorezistentei) MRSA

    standarde CLSI si EUCAST (SFR) Vaccin stafilococic, Anatoxina si

    autovaccin

  • Diagnostic de laborator (la LP) DIRECT (BACTERIOLOGIC)

    RECOLTARE TRANSPORT EX. MACROSCOPIC alb galbui cremos ex micro izolati, perechi, lanturi scurte, PMN IZOLARE IDENTIFICARE ANTIBIOGRAMA