Familia Enterobacteriaceae

Familia Familia EnterobacteriaceaEnterobacteriacea

eeLP2LP2

GENUL GENUL EscherichiaEscherichia

Caractere generale:Caractere generale: bacterii mobile (bacterii mobile (E. coliE. coli inactiv – imobil) inactiv – imobil) fermenteaza glucoza cu producere de fermenteaza glucoza cu producere de

gazgaz fermenteaza lactoza - lactozo (+)fermenteaza lactoza - lactozo (+) produc prompt produc prompt ββ – galactozidaza, – galactozidaza, produc indolproduc indol lizindecarboxilaza (+) – in mare partelizindecarboxilaza (+) – in mare parte


Caractere generale:Caractere generale: utilizeaza acetatul de Na. (ca unica sursa utilizeaza acetatul de Na. (ca unica sursa

de C.)de C.) nu cresc pe medii cu citrat (mediul nu cresc pe medii cu citrat (mediul

Simmons)Simmons) nu produc Hnu produc H22SS nu produc ureazanu produc ureaza fenilalanindezaminaza (-)fenilalanindezaminaza (-) nu lichefiaza gelatinanu lichefiaza gelatina


7 SPECII:7 SPECII: E. coli E. coli E. coli E. coli inactivinactiv E. fergusoniiE. fergusonii E. hermaniiE. hermanii E. vulnerisE. vulneris


Habitat:Habitat: Componente ale microbiotei Componente ale microbiotei

intestinale a omului si animalelor cu intestinale a omului si animalelor cu sange caldsange cald

Exceptie: Exceptie: E. blattae – E. blattae – izolata numai izolata numai la insecte (gandaci de bucatarie)la insecte (gandaci de bucatarie)


Patogenitate:Patogenitate: E. coli – E. coli – bacteria cel mai frecvent bacteria cel mai frecvent

implicata in patologia infectioasa implicata in patologia infectioasa modernamoderna

E. hermaniiE. hermanii E. fergusoniiE. fergusonii E. vulnerisE. vulneris

implicare ocazionala in diferite infectiiimplicare ocazionala in diferite infectii

Escherichia coliEscherichia coli

enterobacterie conditionat – patogena cu enterobacterie conditionat – patogena cu numeroase fenotipuri patogene numeroase fenotipuri patogene (patotipuri)(patotipuri)

gene cromosomale, dar mai ales gene cromosomale, dar mai ales reasortarea a variati factori de reasortarea a variati factori de patogenitate prin transfer plasmidic si patogenitate prin transfer plasmidic si conversie lizogena determina la aceasta conversie lizogena determina la aceasta bacterie conditionat – patogena bacterie conditionat – patogena constituirea numeroaselor sale patotipuri constituirea numeroaselor sale patotipuri diareigene si uropatogene.diareigene si uropatogene.

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigenePatotipuri diareigene

1. ETEC – 1. ETEC – E. coli E. coli enteroxigenenteroxigen

2. EHEC - 2. EHEC - E. coli E. coli enterohemoragicenterohemoragic

3. EIEC - 3. EIEC - E. coli E. coli enteroinvaziventeroinvaziv

4. EAggEC - 4. EAggEC - E. coli E. coli enteroagregativenteroagregativ

5. EPEC - 5. EPEC - E. coli E. coli enteropatogenenteropatogen

6. DAEC - 6. DAEC - E. coli E. coli enteroaderent difuzenteroaderent difuz


Modalitatile prin care este alterat Modalitatile prin care este alterat transportul de electroliti la nivelul transportul de electroliti la nivelul intestinului pot fi determinate de:intestinului pot fi determinate de: toxine: ETEC, EHEC, EAggECtoxine: ETEC, EHEC, EAggEC aderenta la celulele epiteliale aderenta la celulele epiteliale

intestinale: EPEC, DAECintestinale: EPEC, DAEC invazia celulelor epiteliale: EIECinvazia celulelor epiteliale: EIEC combinarea acestor factoricombinarea acestor factori


EIEC – are mecanism identic de EIEC – are mecanism identic de invazie cu invazie cu ShigellaShigella

celelalte patotipuri de celelalte patotipuri de E. coliE. coli au o au o faza initiala de adeziune la epiteliul faza initiala de adeziune la epiteliul intestinal, urmata sau nu de intestinal, urmata sau nu de colonizarea intestinuluicolonizarea intestinului

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigene: ETECPatotipuri diareigene: ETEC agentul frecvent al unui sdr. diareic holeriform agentul frecvent al unui sdr. diareic holeriform

la copii in tarile subdezvoltate si la copii in tarile subdezvoltate si determina “diareea calatorilor”, boala determina “diareea calatorilor”, boala

cunoscuta la adultii din tarile economic cunoscuta la adultii din tarile economic dezvoltate care calatoresc in ariile endemice dezvoltate care calatoresc in ariile endemice ale acestui patotip.ale acestui patotip.

la om cele 2 tipuri de enterotoxine: la om cele 2 tipuri de enterotoxine: LT I – termolabila, imunogenaLT I – termolabila, imunogena STa – termostabila, neimunogenaSTa – termostabila, neimunogena

induc o secretie activa de lichid in lumenul induc o secretie activa de lichid in lumenul intestinal, fara ca enterocitul sa sufere alterari intestinal, fara ca enterocitul sa sufere alterari morfologice vizibile.morfologice vizibile.

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigene: ETECPatotipuri diareigene: ETEC

tipuri antigenice: O6, 8, 12, 15, 20, 25, 27, tipuri antigenice: O6, 8, 12, 15, 20, 25, 27, 63, 78, 80, 85, 92, 128, 148, 153, 159, 16763, 78, 80, 85, 92, 128, 148, 153, 159, 167

numeroase teste pentru evidentierea numeroase teste pentru evidentierea enterotoxinelor si a enterotoxigenezei, atat enterotoxinelor si a enterotoxigenezei, atat LT I, cat si STa LT I, cat si STa

imunogenicitatea ridicata a LT I – determina imunogenicitatea ridicata a LT I – determina dezvoltarea metodelor imunoradiometrice, dezvoltarea metodelor imunoradiometrice, imunoenzimatice, latexaglutinante si imunoenzimatice, latexaglutinante si coaglutinantecoaglutinante

dezvoltarea metodelor ELISA pentru LT I a dezvoltarea metodelor ELISA pentru LT I a dus la abandonarea modelelor dus la abandonarea modelelor in vivoin vivo (testul (testul ansei ligaturate la iepure).ansei ligaturate la iepure).

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigene: Patotipuri diareigene:

EHECEHEC

produce, prin conversie lizogena, toxinele SLT I produce, prin conversie lizogena, toxinele SLT I si SLT II, structural asemanatoare toxinei Shiga si SLT II, structural asemanatoare toxinei Shiga (de unde si denumirea (de unde si denumirea Shiga – like – toxins = Shiga – like – toxins = SLT)SLT)

dupa activitatea patogena asupra celulelor dupa activitatea patogena asupra celulelor VERO, mai sunt numite si Verotoxine (VT).VERO, mai sunt numite si Verotoxine (VT).

toxina SLT II este produsa singura sau in toxina SLT II este produsa singura sau in asociere cu SLT I de 97% dintre tulpinile EHEC.asociere cu SLT I de 97% dintre tulpinile EHEC.


EHECEHEC identificarea: identificarea:

incadrarea in serogrupul O157H7 (H7+/-)incadrarea in serogrupul O157H7 (H7+/-) uneori: O26, O111 uneori: O26, O111 determinarea capacitatii citotoxice asupra determinarea capacitatii citotoxice asupra

celulelor VEROcelulelor VERO determinarea genelor care codifica SLT I si determinarea genelor care codifica SLT I si

SLT IISLT II determinarea genei eae A care codifica determinarea genei eae A care codifica

intimina (proteina responsabila de adeziunea intimina (proteina responsabila de adeziunea celulara)celulara)

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigene: EIECPatotipuri diareigene: EIEC

determina un Sdr. diareic determina un Sdr. diareic dizenteriformdizenteriform

capacitatea invaziva a enterocitelor capacitatea invaziva a enterocitelor – codificata plasmidic– codificata plasmidic

serogrupe “O”: O28, 29, 112, 124, serogrupe “O”: O28, 29, 112, 124, 136, 143, 144, 152, 164, 167, 173136, 143, 144, 152, 164, 167, 173


procesul invaziei, ca si la procesul invaziei, ca si la Shigella, Shigella, are 4 faze:are 4 faze: penetrarea EIEC in celulele M din mucoasa colonuluipenetrarea EIEC in celulele M din mucoasa colonului captate din aceste celule de catre macrofage, captate din aceste celule de catre macrofage,

bacteriile se elibereaza subepitelial si se ataseaza de bacteriile se elibereaza subepitelial si se ataseaza de suprafata bazolaterala a celulei intestinale, care le suprafata bazolaterala a celulei intestinale, care le endociteazaendociteaza

bacteriile se multiplica activ intra- si intercelular si bacteriile se multiplica activ intra- si intercelular si sunt larg raspandite in submucoasa prin intermediul sunt larg raspandite in submucoasa prin intermediul fagocitelor in care supravietuiescfagocitelor in care supravietuiesc

moartea celulelor intestinale, ca urmare a blocarii moartea celulelor intestinale, ca urmare a blocarii sintezei proteice si subsecvent a leziunilor sintezei proteice si subsecvent a leziunilor citoplasmatice ireversibile determina ulceratiile citoplasmatice ireversibile determina ulceratiile tipice pe fond inflamatortipice pe fond inflamator


Identificarea EIEC se poate face Identificarea EIEC se poate face in vivo in vivo si si in vitro:in vitro: in vivo in vivo – testul Sérény (testul – testul Sérény (testul

keratoconjunctivitei la cobai): inocularea unei keratoconjunctivitei la cobai): inocularea unei cantitati mari de bacterii cantitati mari de bacterii

(~10 e9 UFC)(~10 e9 UFC) in vitro – in vitro – incadrarea intr-una din grupele incadrarea intr-una din grupele

serologice cu ajutorul serurilor imune specificeserologice cu ajutorul serurilor imune specifice

- detectarea genei ipa H cu ajutorul - detectarea genei ipa H cu ajutorul PCR PCR


EAggECEAggEC particularitate: se leaga “agregativ” de particularitate: se leaga “agregativ” de

enterociteenterocite serogrupuri “O”: O1, 3, 5, 15, 44, 77, 78, serogrupuri “O”: O1, 3, 5, 15, 44, 77, 78,

86, 91, 92, 111, 113, 126, 141, 14686, 91, 92, 111, 113, 126, 141, 146 determinism plasmidic: gena agg, care determinism plasmidic: gena agg, care

codifica AAF/I (codifica AAF/I (Aggregative Adherence Aggregative Adherence Fimbriae IFimbriae I), poate fi depistata prin reactie ), poate fi depistata prin reactie de amplificare genica.de amplificare genica.

enterotoxina termolabila – EALT, antigenic enterotoxina termolabila – EALT, antigenic inrudita cu hemolizina inrudita cu hemolizina E. coli,E. coli, dar fara dar fara activitate hemolitica.activitate hemolitica.

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigene: EPECPatotipuri diareigene: EPEC pusee epidemice de diaree maligna la pusee epidemice de diaree maligna la

copii < 1 an in perioada 1940 – 1960.copii < 1 an in perioada 1940 – 1960. etiologie de varf in diareea copilului etiologie de varf in diareea copilului

mic in tarile in curs de dezvoltaremic in tarile in curs de dezvoltare serogrupe “O”: O26, 55, 86, 111, 114, serogrupe “O”: O26, 55, 86, 111, 114,

119, 125, 126, 127, 128, 142, 158119, 125, 126, 127, 128, 142, 158 nu produce toxinanu produce toxina

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigene: EPECPatotipuri diareigene: EPEC leziunile caracteristice asupra celulelor leziunile caracteristice asupra celulelor

intestinale sunt de tip A – E (Aderence – intestinale sunt de tip A – E (Aderence – Effacement): aderenta – stergere, Effacement): aderenta – stergere, respectiv aderarea ferma in unele arii la respectiv aderarea ferma in unele arii la suprafata celulelor, colonizarea intestinala suprafata celulelor, colonizarea intestinala si apoi “stergerea microvililor”si apoi “stergerea microvililor”

sdr. diareic poate fi explicat cel putin prin sdr. diareic poate fi explicat cel putin prin disparitia microvililor, fapt ce reduce disparitia microvililor, fapt ce reduce capacitatea de retroresorbtie a mucoasei.capacitatea de retroresorbtie a mucoasei.

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri diareigene: EPECPatotipuri diareigene: EPEC

identificarea antigenica a identificarea antigenica a serogrupelorserogrupelor

detectarea prezentei genei eae A detectarea prezentei genei eae A prin PCRprin PCR


DAECDAEC

rol diareigen controversat intrucat singurul rol diareigen controversat intrucat singurul factor de virulenta cunoscut la acest patotip este factor de virulenta cunoscut la acest patotip este aderarea difuza de celulele HeLa si de celule aderarea difuza de celulele HeLa si de celule intestinale in culturi.intestinale in culturi.

aderenta difuza si invazia celulara ar sta la aderenta difuza si invazia celulara ar sta la originea sdr. diareic produs de acest patotiporiginea sdr. diareic produs de acest patotip

determinarea fenomenului de aderenta difuza pe determinarea fenomenului de aderenta difuza pe culturi de celule nediferentiate HeLaculturi de celule nediferentiate HeLa

determinarea prezentei grupului de gene afa prin determinarea prezentei grupului de gene afa prin PCRPCR

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri urinarePatotipuri urinare

cel mai frecvent agent etiologic (>80%) al cel mai frecvent agent etiologic (>80%) al infectiilor tractusului urinar (ITU)infectiilor tractusului urinar (ITU)

conditia gazdei: factorul primordial ce conditia gazdei: factorul primordial ce contribuie la instalarea ITUcontribuie la instalarea ITU

DZDZ imunodeficiente constitutive sau dobanditeimunodeficiente constitutive sau dobandite malformatiile colonuluimalformatiile colonului uropatii obstructiveuropatii obstructive reflux vezico – ureteralreflux vezico – ureteral sarcinasarcina

cresc receptivitatea gazdeicresc receptivitatea gazdei

Escherichia coliEscherichia coliPatotipuri urinarePatotipuri urinare

Factori de uropatogenitate recunoscuti la Factori de uropatogenitate recunoscuti la E.coli:E.coli: Adezinele: Adezinele: fimbriile Pap (Pili associated with fimbriile Pap (Pili associated with

pyelonephritis)pyelonephritis) – numite si pili P – numite si pili P Hemolizina– prevalentala tulpinile izolate din ITU Hemolizina– prevalentala tulpinile izolate din ITU

superior si actioneaza ca citotoxina Ca – dependentasuperior si actioneaza ca citotoxina Ca – dependenta Aerobactina – chelator de Fe; permite multiplicarea Aerobactina – chelator de Fe; permite multiplicarea

E.coliE.coli in conditiile feriprive ale tractusului urinar sau ale in conditiile feriprive ale tractusului urinar sau ale mediului internmediului intern

Factorul citotoxic necrozant (Factorul citotoxic necrozant (CNF I) – CNF I) – poate facilita poate facilita raspandirea bilaterala a tulpinilor uropatogene: din raspandirea bilaterala a tulpinilor uropatogene: din tractusul urinar spre si din torentul circulatortractusul urinar spre si din torentul circulator

Antigenele “O” - 8 serotipuri uropatogene: O1, 2, 4, 6, 7, Antigenele “O” - 8 serotipuri uropatogene: O1, 2, 4, 6, 7, 16, 18, 75 – cresc persistenta bacteriilor in tractusul 16, 18, 75 – cresc persistenta bacteriilor in tractusul urinarurinar

Antigenele capsulare “K”: K1, 2, 5, 13, 51; tulpinile Antigenele capsulare “K”: K1, 2, 5, 13, 51; tulpinile nefritogene produc mai mult antigen K, fapt ce imprima nefritogene produc mai mult antigen K, fapt ce imprima infectiei o severitate mai mare.infectiei o severitate mai mare.

TEMA PENTRU TEMA PENTRU STUDENTISTUDENTI

Caz clinic: pacienta de sex feminin, Caz clinic: pacienta de sex feminin, varsta 30 ani, prezinta dureri varsta 30 ani, prezinta dureri abdominale, febra, varsaturi, scaune abdominale, febra, varsaturi, scaune diareice, simptome care au aparut dupa diareice, simptome care au aparut dupa 12 ore de la ingerarea unor produse 12 ore de la ingerarea unor produse culinare pe baza de carne.culinare pe baza de carne.

Care ar fi diagnosticul clinic?Care ar fi diagnosticul clinic? Care este produsul patologic pe care il Care este produsul patologic pe care il

recomanda medicul de familie pentru recomanda medicul de familie pentru analiza?analiza?


Cum se recolteaza produsul patologic? Cum se recolteaza produsul patologic? Ce conditii trebuie sa respecte pacientul?Ce conditii trebuie sa respecte pacientul?

Cum se transporta produsul patologic la Cum se transporta produsul patologic la laborator?laborator?

Ce medii de cultura va folosi medicul Ce medii de cultura va folosi medicul microbiolog pentru izolarea bacteriilor microbiolog pentru izolarea bacteriilor patogene?patogene?

Cum se insamanteaza produsul Cum se insamanteaza produsul patologic?patologic?

Ce conditii de incubare se vor folosi?Ce conditii de incubare se vor folosi?


Care sunt etapele diagnosticului de Care sunt etapele diagnosticului de laborator?laborator?

Cum se instituie tratamentul Cum se instituie tratamentul antibiotic?antibiotic?

Familia Enterobacteriaceae

Documents

Transcript of Familia Enterobacteriaceae