CARBAPENEMASAS HIGA Pte Perón Sofia Abel Sergio Cutufia.

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CARBAPENEMASAS HIGA Pte Perón Sofia Abel Sergio Cutufia
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  • CARBAPENEMASASHIGA Pte Pern Sofia Abel Sergio Cutufia

  • Clasificacin de los antibiticos -lactmicosPENICILINAS

    - Penicilinas naturales:Penicilina G, Penicilina G sdica, Penicilina V- Penicilinas resistentes a las penicilinasas:Meticilina, Nafcilina, Oxacilinas- Aminopenicilinas:Ampicilina, Amoxicilina- Carboxipenicilinas:Carbenicilina, Ticarcilina- Aciluredopenicilinas:Piperacilina, Mezlocilina, Azlocilina

  • Clasificacin de los antibiticos -lactmicosCEFALOSPORINAS

    - Cefalosp. de 1 generacin:Cefalotina, Cefaloridina, Cefalexina, Cefradina, Cefazolina- Cefalosp. de 2 generacin:Cefaclor, Cefuroxima, Cefamandol- Cefalosp. de 3 generacin:Cefotaxima, Ceftriaxona, Ceftacidima, Ceftizoxima, Cefoperazona- Cefalosp. de 4 generacin:Cefepime, Cefpirome- Cefamicinas:Cefoxitina, Cefotetan

  • Clasificacin de los antibiticos -lactmicosMONOBACTAMASAztreonam

    INHIBIDORES DE -LACTAMASAScido clavulnicoSulbactamTazobactam

    CARBAPENEMESImipenemMeropenemErtapenem

  • Derivados semisintticos de la tienamicina, un carbapeneme natural qumicamente inestable, producido por el Streptomyces cattleya.Su caracterstica estructural ms importante es la sustitucin del tomo de azufre del anillo principal de la mayora de los betalactmicos, por un grupo metileno (-CH2-), que aumenta su afinidad por las PBP (penicillin binding proteins)La cadena hidroxietlica unida al anillo betalactmico en posicin trans lo protege efectivamente del ataque de las betalactamas bacterianas.El imipenem es metabolizado en rin, por lo que, para que aparezca en orina, debe agregrsele cistatina, que inhibe la enzima responsable.En el meropenem el metilo en C1 lo protege de la degradacin renal, mientras que la alteracin en la cadena lateral en C2 aumenta su actividad frente a Pseudomona spp. y otras BGN.En los BGN, los carbapenemes penetran fcilmente a travs de los canales pornicos de su membrana externa gracias a su bajo peso molecular y estructura compacta, hidrfila.

    CarbapenemesGeneralidades

  • Accin de los carbapenemesComo todos los betalactmicos, su accin se basa en la unin covalente de su molcula con las PBP bacterianas.Las PBP son principalmente transpeptidasas y transcarboxilasas, necesarias para la sntesis del peptidoglicano de la pared bacteriana.Existen muchas PBP, pero solo algunas son esenciales para la bacteria, como son las PBP 1, 2 y 3. Estas son el blanco principal de los betalactmicos.La unin del ATB con las PBP produce un efecto ltico sobre las bacterias por 2 mecanismos:Inhibe la traspeptidacin y entrecruzamiento de la pared bacteriana debilitandola y exponiendo a la bacteria al medio.Desregulan a las autolisinas de la pared celular.

  • Son el principal tratamiento en infecciones nosocomiales por BGN multirresistentes y muchos veces el ltimo recurso teraputico disponible.

    -lactmico de amplio espectro y alta potencia.

    Inhibe el desarrollo del 90% de las bacterias de importancia clnica.

    Efecto inhibitorio postantibitico DosificacinEspectro de actividad antibacteriana

  • Espectro de actividad antibacterianaBacterias aerobias: Gram (+) : a) Muy susceptibles: S. pneumoniae., estreptococos A y B, S. aureus b) Sensibilidad variable: E. faecium resistente, E. faecalis sensible c) Resistentes: S. aureus meticilino resistente. Gram (-) : Neisseria meningitidis, gonorreae y H.influenzae Enterobacterias: Mayoria Sensibles Pseudomona aeruginosa Acinetobacter resistencia en aumento (carbapenemasa) S. maltophilia y B. cepacia resistentesAnaerobios: Excelente actividad contra anaerobios estrictos Bacteroides fragilis y otros bacteroidesSensibles Fusobacterium y cocos anaerobios Gram (+) C. perfringes

    C. dificcile Resistente

  • Tipos de Resistencia a ATBResistencia Natural o intrnseca: Caracterstico de genero y especie. Esta determinado por el genoma bacteriano

    Resistencia natural en Enterobacterias: Penicilina, oxazoilpenicilinas, clindamicina, lincosamina, macrlidos

    Resistencia natural de distintas especies a determinados tipos de ATB:

    Polimixina B y Colistina: Proteus spp, Morganella morganii, Providencia spp, Cedecea sppNitrofuranos: Proteus spp, Morganella morganii, Providencia spp, Serratia marcescens.

  • Tipos de Resistencia a ATBResistencia Adquirida:

    Mutacin y seleccin: Se dan al azar y espontneamente

    Adquisicin de genes de resistencia a partir de ADN forneoSe transmite por:PlsmidosTransposones: Son secuencias de ADN capaces de moverse de un fragmento de ADN a otro.Integrones: No se movilizan por si solos, poseen elementos claves, un sitio de recombinacin, un sitio que codifica una integrasa y un promotor.

  • Tipos de Resistencia a ATBMecanismos de transferencia:

    Conjugacin: Proceso por el cual ADN plasmdico se transfiere de una bacteria donante a una receptora. Implica contacto real entre ambas clulas.

    Transduccin: Transferencia del material gentico de una bacteria a otra usando como factor un bacterifago.

    Transformacin: Permite la adquisicin e incorporacin de ADN desnudo.

  • Tipos de Resistencia a ATBExpresin:

    Constitutiva: Producida por exposicin al estimulo o sin l.

    Inducible: Producida solo despus de la exposicin al estimulo.

    Constitutiva-Inducible: Producida a bajo nivel sin estimulo, produccin enormemente aumentada despus del estmulo.

  • Mecanismos de Resistencia a ATBInterferencia del transporte de drogas a travs de la membrana o de su acumulacin citoplasmtica:

    Impermeabilidad

    Eflujo

  • Impermeabilidad

  • Bomba de Eflujo

  • Mecanismo de Resistencia a ATBCambios relacionados con sitio de accin de los antimicrobianos

    PBP: Pueden sufrir alteraciones que disminuyen su afinidad por los -lactmicos y pueden sintetizar el peptidoglicano a concentraciones de droga txicas para PBP normales.

    RemodelacinNuevas PBPHiperproduccinCantidad Relativa

  • Resistencia mediada por PBP

  • Mecanismos de resistencia a ATBInactivacin enzimtica del antimicrobiano

    Betalactamasas

    Enzimas capaces de hidrolizar el anillo -lactmicoBacterias Gram - : Localizadas en espacio periplsmicoBacterias Gram +: Secretadas al medio

    Codificadas por genes cromosmicos y plasmdicos.

    Expresin constitutiva o inducible por exposicin al ATB.

  • Deteccin y caracterizacin de -lactamasasPara su clasificacin se estudia:

    Patrn fenotpico de resistencia

    Punto Isoelctrico

    Parmetros Cinticos

    Caracterizacin por PCR con primers especficos

  • Criterios para la clasificacin de -lactamasasActividad: Sustratos e Inhibidores

    Propiedades fsicas: pI, PM

    Localizacin gentica del gen codificante: Plasmidico, CromosmicoCaractersticas Inmunolgicas

    Estructura

  • Clasificacin de -lactamasasAmbler (1980): Clasifica las enzimas en cuatro clases segn su estructura molecular (A, B, C, D)

    A, C y D son enzimas cuyo centro activo es una serina SerinoproteasasB son metaloenzimas, los tomos de Zn2+ interactan con un residuo de cisteina y tres residuos de histidina en el sitio activo.

    Bush, Jacoby y Medeiros (1995): Tienen en cuenta la localizacin gentica, perfil de sustratos, la sensibilidad a inhibidores y algunas caractersticas fsicas como pI, PM y la clase molecular.

  • BetalactamasasClasificacin por sustratoPenicilinasas: penicilinasa de Staphylococcus aureusCefalosporinasas: AMP-C de enterobacterias y Pseudomona aeruginosaLEA: actividad sobre penicilinas y cefalo 1 gLEE: hidrolizan tambin a las cefalo 3 y 4 gOxacilinasas: mayor actividad frente a oxacilinasLact resistentes a InhibidoresCarbapenemasas

  • Resistencia a carbapenemesen enterobacteriasAlteracin de las PBP (Proteus mirabilis)

    Disminucin de la permeabilidad (alteracin de porinas) en combinacin con produccin de lactamasas

    Produccin de carbapenemasas

  • Clasificacin de las CarbapenemasasSerinoenzimas: 1, 2d, 2f2d: OXA, ARI-2, SON-12f: IMI-1, GES-2, IMI-2, KPNSon carbapenemasas no estructurales, inhibibles por clavulnico y tazobactam, NO por EDTA.Metaloenzimas: 3a, 3b, 3c.3a: IMP-1 a 16, VIM-1 a 113b: ASA-1, IMI-S3c: FEZ-1, L1, GOB-1Son inhibibles por EDTA y NO por clavulnico.

  • Deteccin del mecanismo de resistenciaBsqueda de carbapenemasas en enterobacterias:

    Probar Imipenem y MeropenemAumento del punto de cortePrueba con PTZ (piperacilina-tazobactam) y/o AMC (amoxicilina-clavulanico), se busca efecto huevoPruebas confirmatorias

  • Carbapenemasas enEnterobacterias

  • Bsqueda de carbapenemasas con AMC

  • Pruebas confirmatoriasMtodos microbiolgicos

    Mtodo de Hodge:

    1) Hisopar E. coli ATCC 25922 en MH2) Realizar Estra con la cepa sospechosa desde el centro a la periferia3) Colocar disco Imipenem en el centro.4) Incubar ON e interpretar.

  • Pruebas confirmatoriasMtodos microbiolgicos:

    Mtodo de Masuda: Tcnica1) Preparar un cultivo bacteriano de la cepa en estudio en 10 ml de caldo BHI/TSA.2) Incubar 18 hs a 37 con agitacin.3) Centrifugar 20 min y resuspender en 300l de buffer fosfato 10 mM, pH 7.4) Someter a congelado-descongelado 10 veces o bien sonicar (2 pulsos durante 40 seg, potencia 40% separados por intervalos de 30 seg)5) Centrifugar 10 min, separar el sobrenadante que se utilizar en el ensayo.6) Gotear 10 l del sobrenadante en discos de papel de filtro previamente esterilizados.

  • Pruebas confirmatoriasMtodos microbiolgicos:

    Mtodo de Masuda: Ensayo

    1) Hisopar E. coli ATCC 25922 en MH2) Colocar disco de IMP en el centro.3) Colocar discos con extracto por dentro de la zona de inhibicin esperada. Usar control + y control -4) Incubar ON e interpretar.

  • Pruebas confirmatoriasHodge + Masuda Hodsuda Hodsuda:

    1)Hisopar E. coli ATCC 25922 en MH.2)Colocar disco de IMP en el centro.3)Estriar cepa problema dentro del halo de inhibicin esperado.4)Incubar ON e interpretar.

  • Hodsuda

  • Hodsuda

  • Carbapenemasas enEnterobacterias

  • Importancia de la deteccin de carbapenemasasGrmenes multiresistentesLimitadas opciones de tratamiento .Alta probabilidad de falla en el tratamiento con lactmicos.Mayor mortalidad asociada a la infeccinPersistencia en el ambiente hospitalarioAlta capacidad de diseminacin entre BGN

  • Agradecimientos

    Dra Adelaida Rossetti, Jefa del Sector de Bacteriologia del HIGA Pte Pern.

    Dra Mabel Straccia, Bacteriloga del HIGA Pte Pern.

    Dra Celia Sala Crist, Instructora de Residentes, Residencia del HIGA Pte Pern.

  • Muchas Gracias