BUDAPESTI MŰSZAKI ÉS GAZDASÁGTUDOMÁNYI EGYETEM

BUDAPESTI MŰSZAKI ÉS GAZDASÁGTUDOMÁNYI EGYETEM

Diasztereomerek elválasztása normálfázisú folyadékkromatográfiával

Készítette: Oláh Erzsébet

Témavezető: Dr. Fekete Jenő

Tesztvegyület: β-cipermetrin

• Chrysanthemum cinerarisaefolium virágból vonják ki

• Piretroidok:ciklopropán vázat tartalmazó karbonsavak különböző észterei

• -cipermetrin 3 sztereocentrumot tartalmaz

Fordított fázisú folyadékkromatográfiás mérések

Purospher RP18-as kolonna

Acetonitril: víz 70: 30

Chromsil C30-as kolonna

Acetonitril: víz 70: 30

Normál fázisú folyadékkromatográfiás folyadékkromatográfiás mérésekmérések

Vizsgált állófázisok:

Szilikagél állófázisok:

• felületen szabad -OH csoportok

• mechanikailag stabil

• vízre érzékeny

• Pl.:Silica1, Silica2, Nova Pak Silica, Purospher Star

Aluminium-oxid állófázisok:

• gyengébb adszorpciós kölcsönhatás, mint a szilikagélek esetén

• alakszelektivitás

• vízre érzékeny

• Pl.: Alumina, Aluspher

Kémiailag módosított állófázisok

• a szilanol csoportokat poláris végcsoporttal rendelkező vegyületekkel módosítják

• a töltet kevesebb aktív helyet tartalmaz

• Pl.: Nitril

Normál fázisú folyadékkromatográfiás mérések

Vizsgált mozgófázisok

• Oldószer elegyet használunk

• Az elegy fő alkotója egy apoláris vegyület, valamint mellék alkotóként poláris modifikátort tartalmaz

• A poláris anyag megkötődik az állófázis felületén, ezáltal csökkenti a mérendő anyag retencióját

Az elválasztást jellemző mennyiségek:

Visszatartási tényező:

M

MR

t

ttk

Csúcsfelbontás:

12

122ww

ttR RRS

Visszatartási tényező vizsgálata oldószer k(1) k(2) k(3) k(4)

Novapak

20%DKM 7,82 8,70 11,52 12,86

0,5 % EtAc 7,58 9,25 11,39 13,51

2,5% TBME 2,00 2,49 2,86 3,44

4% DiPe 2,49 3,04 3,60 4,27

2% ACN 2,20 2,60 2,71 3,07

2,7% ACN 2,02 2,37 2,54 2,83

Purospher Star

0,5% EtAc 7,65 8,73 11,46 13,05

2,5% TBME 1,89 2,26 2,70 3,18

4% DiPe 2,62 3,02 3,86 4,45

2% ACN 2,46 2,87 3,04 3,41

2,7% ACN 2,36 2,74 2,93 3,25

Silica1 2,5% TBME 2,64 3,15 3,70 4,38

Silica2

2,5% TBME 2,39 2,86 3,39 3,99

4% DiPe 2,81 3,28 4,10 4,77

2% ACN 3,70 4,34 4,59 5,14

2,7% ACN 3,21 3,79 4,12 4,61

Alumina 20%DKM 2,53 3,30 4,24 5,03

Aluspher 20%DKM 5,89 8,27 10,78 12,85

Nitril 2,7% ACN 2,53 2,97 3,16 3,54

Normál fázisú folyadékkromatográfiás mérések eredményei I.

1,5<Rs<2

Silica 1 Silica 2 Novapak

Rs(1-2) Rs(2-3) Rs(3-4) Rs(1-2) Rs(2-3) Rs(3-4) Rs(1-2) Rs(2-3) Rs(3-4)

20% DM

1,56 4,35 1,83

0,5% EtAc

2,5% TBME

2,08 1,73 1,79 1,95 1,82 1,93 2,45 1,61 2,24

4% DiPE

1,75 2,59 1,85

2,7% ACN

3,47 1,56 2,7

Normál fázisú folyadékkromatográfiás mérések eredményei II.

2< RS

Alumina Novapak Purospher Star

Rs(1-2) Rs(2-3) Rs(3-4) Rs(1-2) Rs(2-3) Rs(3-4) Rs(1-2) Rs(2-3) Rs(3-4)

20% DM

6,09 5,04 4,88

0,5% EtAc

3,31 3,43 2,84 3,19 6,6 3,18

2,5% TBME

2,79 3,24 3,09

4% DiPE 2,49 2,23 2,4 2,67 5 3,11

2,7% ACN

Mérési eredmények

Csúcsfelbontás alakulása:

1 2 3

2,7% ACN

0,5% EtAC

2,5% TBME

0

1

2

3

4

5

Rs

Novapak oszlop vizsgálata

2,7% ACN

4% DiPe

0,5% EtAC

20% DCM

2,5% TBME

Acetonitril eltérő viselkedésének magyarázata

Kromatogramok

a) 2,7% acetonitrilb) 4% diizopropil-éterc) 0,5% etil-acetátd) 20% diklór-metáne) 2,5% terc-butil-metil-

éterf) 0,625% dioxán

β-cipermetrin kimutatása vízből

• Vízminta vétele

• A vízmintákhoz metil-alkoholt adtunk (10%-os metanol tartalom)

• β-cipermetrint addícionáltattunk a mintákhoz

• Az oldatokat durva szűrőn átszűrtük

• C18-as Sep-Pakokon átszívattuk a vizet

• 20 percen át levegőt szivattunk keresztül a Sep-Pakon

• Diklór-metánnal leoldottuk a β-cipermetrint

• Novapak oszlopon 4% di-izopropil-éterrrel mértünk

Kalibráció készítése

2.csúcs kalibrációs egyenese y = 12803x + 3226,1

R2 = 0,9914

0

10000

20000

30000

40000

50000

60000

0 1 2 3 4 5

c (ppm)

Are

a (m V

*s)

Kalibráció készítése

4.csúcs kalibrációs egyenesey = 13052x + 4920,3

R2 = 0,9927

0100002000030000400005000060000700008000090000

0 1 2 3 4 5 6 7

c (ppm)

Are

a (m

V*s

)

A víz szilárd szennyezőin történő adszorpció vizsgálata

minta: Kalibrációból számolt

koncentráció 2.csúcs (ppm)


csúcsterület 2. csúcs


2. csúcs 4.csúcs

0,1994 0,2991 36679 35962 0,0261 0,0238

0,3988 0,5983 42865 38919 0,0310 0,0260

1,9800 2,9700 129522 158382 0,0986 0,1176

β-cipermetrin addíció előtt szűrt mintákkal kapott eredmények

β-cipermetrin addíció után szűrt mintákkal kapott eredmények

minta: Kalibrációból számolt





2. csúcs 4.csúcs

0,043 0,064 3518 7349 0,0002 0,0019

0,1994 0,2991 27516 26972 0,0190 0,0169

0,3988 0,5983 29262 37927 0,0203 0,0253

Értékelés

• Adott műszerek érzékenysége laborról-laborra változik.

• Vizsgáló szervezetek bevezették az AL-t (action limit)

• Bizonyos anyagok esetén nem lehetséges mennyiségi meghatározást végezni

• Cipermetrin oldhatóságára vonatkozó irodalmi adatok nincsenek ( benz(a)pirin lgP= 6,48; cipermetrin lgP= 6,09)

Összefoglalva az Összefoglalva az elmondottakat:elmondottakat:

• Normál fázisú folyadékkromatográfiás oszlopok közül a Novapak Silica oszlop Normál fázisú folyadékkromatográfiás oszlopok közül a Novapak Silica oszlop bizonyult a legjobbnakbizonyult a legjobbnak

• Az acetonitril másképp viselkedik, mint a többi poláris modifikátor. (Más Az acetonitril másképp viselkedik, mint a többi poláris modifikátor. (Más poruskitöltés)poruskitöltés)

• Legjobb felbontást a di-izopropil-éterrel lehet elérni (mind visszatartás, Legjobb felbontást a di-izopropil-éterrel lehet elérni (mind visszatartás, mind Rmind Rss értékek szempontjából) értékek szempontjából)

• Diasztereomerek elválasztása fordított fázisú folyadékkromatográfiával nem megoldható

• Sikerült kifejleszteni egy módszert, ami vízmintákból Sikerült kifejleszteni egy módszert, ami vízmintákból ββ-cipermetrin -cipermetrin kvantitatív meghatározására szolgálkvantitatív meghatározására szolgál

Köszönöm a figyelmet!

BUDAPESTI MŰSZAKI ÉS GAZDASÁGTUDOMÁNYI EGYETEM

Documents

Transcript of BUDAPESTI MŰSZAKI ÉS GAZDASÁGTUDOMÁNYI EGYETEM