Ac corregido

ANTICUERPOS

COMPOSICIÓN QUÍMICA Y CARGA ELECTROSTÁTICA

GLUCOPROTEÍNAS CATIÓNICAS (+)

g-globulinas b-globulinas

Ánodo

(+)

Cátodo

(-)

α1 α2 β1 β2 g

Albúminas Globulinas

INMUNOGLOBULINAS

Estructura de las Inmunoglobulinas

Cadenas pesadas (H) y livianas (L)

Puentes disulfuro

Región en bisagra

Bucles

Región Fab y región Fc

Regiones constantes y variables de cadenas H y L

Regiones hipervariables y sitios de unión de Ag

Cadenas pesadas

(H)

Cadenas livianas

(L)

N terminal

C terminal

g μ a ε d

k lPuentes

disulfuro

“Bucle”

Región en

bisagra

C terminal

Fragmentos Fab

Papaína

Fragmento FcHidratos de carbono

Fijación del

complemento

Unión al antígeno

H

L

HN terminal

H

L

N terminal

C terminal

VH

VL

CL

CH1

CH2

CH3

Región

VARIABLE

Región

CONSTANTE

Sitio de unión a Ag o

PARATOPE

Segmentos

HIPERVARIABLES

VARIACIÓN EN LOS DOMINIOS SEGÚN LA CLASE DE Ig

Ig G Ig MIg A

Ig D

Ig E

Estructura

pentamérica

de la Ig M

Estructura

dimérica de la Ig A

Cadena

J

Cadena

J

Componente

secretor

Formación de la IgA2

Estructura del Anticuerpo:

• En la región V hay:

– 3 CDR: Regiones Determinantes de la Complementariedad. Son hipervariables.

– 4 FR: Regiones de armazón o entramado.

• El PARATOPE es una porción de las CDR (Regiones Fab).

• Las regiones Fc intervienen en la fijación del complemento o la unión a tejidos.

Linfocitos B

• Los Linfocitos B seleccionados se

diferencian a:

• Células plasmáticas

• correceptores CD19/CD21 y CD81

• Células de Memoria

• CD40

Inmunoglobulinas

Conc

suero

Vida

media

Fijac

Comp

Placent

a

Mucosas Alergia

s

Estruc

IgG 13.5 21 1 a 3 + + - - Mono

IgM 1.5 10 3+ - - - Pentá

mero

IgA 3.55 6 - - + - Dímero

IgD 0.03 3 - - - - Mono

IgE 0.00005 2 - - - + mono

IgGFijación de Complemento

IgG12+

Atraviesa placenta y es una Opsonina

IgG21+

IgG33+

Atraviesa placenta y es una Opsonina

IgG4Negativo

Atraviesa placenta

Clases de Inmunoglobulinas: características

gg-bg-bbgMovimiento

electroforético

7S8S11S19S7SCoeficiente de

sedimentación

180.000200.000360.000900.000180.000

monómeromonómerodímero (monómero)

pentámeromonómeroEstructura

Ig DIg EIg AIg MIg G

PM (Da)

IgDIgEIgAIgMIgG

k-lk-lk-lk-lk-lCadena liviana

Bazo

G. linfáticosVías digestivas y respiratorias

Vías digestivas y respiratorias

Bazo

G. linfáticos

Méd. ósea

Bazo

G. linfáticos

Méd. ósea

Principal lugar

de síntesis

13119112,9% Hidratos de

Carbono

deamgCadena pesada

RUMIANTES EQUINO

PORCINO

CARNÍVOROS

SUERO Ig G Ig G Ig G

CALOSTRO Ig G Ig G Ig G

LECHE Ig G Ig A Ig A

DISTRIBUCIÓN EN SUERO, CALOSTRO Y LECHE

Inmunoglobulinas predominantes

VALENCIA DE UNIÓN AL ANTÍGENO

(cantidad de sitios de unión )

IgG IgM IgA IgE IgD

2 5 (10) 2 ó 4 2 2

UNIÓN a Ag

Setiembre 2005

RESPUESTA PRIMARIA Y SECUNDARIA

Setiembre 2005

Principales características respuesta primaria y secundaria

Componente Respuesta primaria Respuesta secundaria

Células B

Tiempo respuesta

Duración respuesta

Isotipo anticuerpo

Afinidad del anticerpo

No preactivadas

(vírgenes)

Generalmente 5-10 días

Corta

Predominante IgM

Baja

Memoria

Generalmente 1-5 días

Largo periodo

Predominante IgG

Alta

Producción de Ig en respuesta primaria y secundaria

Concentración

Ig en suero Total

Total

10 15 20 25 / 3 10 15 30

IgG

IgG

IgMIgMAg Ag

Latencia Latencia

días

PRIMARIA SECUNDARIA

Latencia Larga Corta

Síntesis Ig Lenta Rápida

Persistencia AC Baja Alta

Ig predominante Ig M Ig G

Título máximo AC Bajo Alto

Dosis de inmunógeno

necesaria

Alta Baja

Funciones efectoras

IgG IgM IgA IgE IgDAglutinación + +++ + - -

Precipitación +++ + + + -

Fijación de

complemento+ +++ - - -

Neutralización + ++ + - -

Opsonización ++ +++ - - -

Citotoxicidad Ac

dependiente++ - - + -

Inmunidad en

mucosas- - ++ - -

Traspaso por

placenta++ - - - -

Célula Plasmática

NÚCLEO

Cadena H

Péptido

Adicional

Vesícula secretora

o de Russell

Hemimolécula

Carbohidratos

Aparato

de Golgi

Líquido

Extracelular

R.E.R.

Ribosoma Cadena L

Síntesis de inmunoglobulinas

SÍNTESIS DE Ig A secretoria (Ig AS)

Luz intestinal

Célula plasmática

submucosaIg A dimérica

Receptor de Ig

polimérica (pIgR)

Ig AsComponente secretor

Enterocito

Degradación de Ig

21-30 díasVIDA MEDIA

70%Sistema retículoendotelial

(S.R.E.)

30%Hepática

DEGRADACIÓN

Clases de anticuerpos: IgG:

• Monómero

• Dos zonas de unión al antígeno (dos fragmentos Fab)

• Cuatro subclases (Ig1, Ig2, Ig3, Ig4)

• La Ig más abundante en el plasma (80%).

• Bajo Pm Difunde bien a otros líquidos corporales y atraviesa la barrera placentaria.

Clases de anticuerpos: IgG:• Neutraliza toxinas

bacterianas

• Activa el complemento

• Sensibiliza y agrega microorganismos para estimular su fagocitosis (opsonización).

• Activa el complemento.

• Es la Ig más importante en la respuesta inmunitaria secundaria (linfocitos B2 de memoria).

Subclase de IgG

nº de puentes S-S

concentración en suero (en

mg/ml)

opsoninas

Activación del

complemento

IgG1 2 9 +++ ++

IgG2 4 3 +/- +

IgG3 11 1 +++ +++

IgG4 4 0.5 - -

http://www.ugr.es/~eianez/inmuno/cap_05.htm

Algunos datos sobre las subclases de IgG



Clases de anticuerpos: IgM• Elevado Pm (“macroglobulina”)

• Pentámero de Ig

• Los 5 monómeros están unidos por puentes disulfuro y la “proteína j”

• 10 fragmentos fab para unión al Ag

• Confinada al espacio intravascular

• Eficaz en la aglutinación y citolisis de microorganismos

• Respuesta inmunitaria primaria: Papel predominante (aparición temprana)

Clases de anticuerpos: IgADos subclases:

• IgA1: Monomérica. En plasma (poco abundante).

• IgA2: Dimérica. Predominante en secreciones externas (saliva, lagrimal, nasal, leche materna, etc).

• Monomeros unidos por puentes disulfuro y proteína j

• Tiene otra cadena polipeptídica denominada COMPONENTE SECRETOR (sIgA), producida por las células de las mucosas que la protege de la proteolisis enzimática y facilita su transporte.

Clases de anticuerpos: IgA

• Inhibe la adherencia de los microorganismos a la superficie de las células de las mucosas, por lo que es una primera línea de defensa frente a las infecciones.

• También es importante en el procesamiento de los antígenos alimentarios en el intestino.

Clases de anticuerpos: IgD

• Monómero

• Poco abundante en plasma

• Se encuentra en la superficie de algunos linfocitos B sanguíneos

Clases de anticuerpos: IgE• Monómero

• Baja concentración en plasma.

• Se encuentra en la superficie de los mastocitos y los basófilos

• Es la mediadora de las reacciones de hipersensibilidad inmediata (alergias).

• Confiere protección local frente a ciertos patógenos grandes, como helmintos: sirve para reclutar células plasmáticas a través de una reacción de inflamación aguda.

• Está aumentada en infecciones parasitarias.

UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

• Métodos y Técnicas de Estudio en Biología Celular



• Inmunoblotting (western blot), Dot/slot blot

• Inmunocitoquímica

• Inmunofluorescencia

• Inmunoprecipitación

• ELISA/EIA/RIA

• Cromatografía de inmunoafinidad

• Microscopia electrónica (morfología)


Estructura de los anticuerpos

Tipos de Anticuerpos

Anticuerpos monoclonales

1. Inmunización del ratón2. Extracción del bazo3. Preparación de

hibridomas (mieloma+B)

4. Selección de los clones5. Producción y uso de

anticuerpos

Anticuerpos policlonales

1. Inmunización del conejo2. Recuerdos3. Extracción de sangre4. Preparación del suero5. Purificación del anticuerpo

(métodos opcionales)6. Caracterización del

antisuero

Anticuerpos policlonales

Ac corregido

Education

Transcript of Ac corregido