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219 ARTÍCULO DE REVISIÓN Defectos en la síntesis de cadena ζ en el linfocito T, generando señales intracelulares equivocadas, responsables de lupus eritematoso sistémico Defects in the synthesis of ζ chain in T lymphocytes, generating wrong intracellular signals, responsible for systemic lupus erythematosus Heber Siachoque M. 1 , Federico Rondón 2 , José Félix Restrepo 3 , Ruth Pérez 4 , Antonio Iglesias 3 Todos los hombres son aptos para perpetuar la especie; la naturaleza forma y escoge aquellos que son dignos de perpetuar la idea. José María Vargas Vila Resumen La expresión anormal de moléculas claves en señalización y la función defectuosa de los linfocitos T cumplen un papel significativo en la patogénesis de la enfermedad autoinmune. Las células T muestran numerosas anormalidades en la señalización del complejo TCRζ 1 , estas aberraciones resultan en la altera- ción de la expresión de citoquinas. Mientras algunas de estas anormalidades explican el aumento de la actividad de células B por células T con incremento de los anticuerpos, la disminución en la producción de IL-2 resulta en un aumento en la susceptibilidad a las infecciones, reducción en la activación de las células T, inducción de la muerte celular y prolongada sobrevida de las células T autorreactivas 2. Palabras clave: lupus, TCRζ, CTLA-4, Elf-1, FcγR, LES, ITAM, UTR, CaMKIV. Summary The abnormal expression of key molecules in signaling and the malfunction of the T cell T have a significant activity in the pathogenesis of the autoimmune disease. The cells T exhibit numerous abnormalities in the signaling of the complex TCR 1 , these aberrations result in the alteration of the citoquines. While some of these abnormalities explain the increase of the activity of cells B for cells T with increment of the antibodies production, the decrease in the production of IL-2 induces an increase in the susceptibility to the infections, diminishing in the activation of the cells T, and expansion of the lifespan of the autorreactive cells 2 . Key words: lupus, TCRζ, CTLA-4, Elf-1, FcγR, LES, ITAM, UTR, CaMKIV. 1. MSc, Coordinador de la unidad de Inmunología, Facultad de Medicina, Universidad del Rosario. 2. MD, Profesor Asociado, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia. 3. MD, Profesor titular, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia. 4. MSc, Profesor asistente, Facultad de Medicina, Universidad del Rosario. Correspondencia: Heber Siachoche: [email protected] Recibido: 16 de marzo de 2010. Aceptado: 14 de octubre de 2010. REVISTA COLOMBIANA DE REUMATOLOGÍA VOL. 17 No. 4, Diciembre 2010, pp. 219-230 © 2010, Asociación Colombiana de Reumatología

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DEFECTOS EN LA SÍNTESIS DE CADENA ζζζζζ EN EL LINFOCITO TVOL. 17 No. 4 - 2010

ARTÍCULO DE REVISIÓN

Defectos en la síntesis de cadena ζen el linfocito T, generando señales

intracelulares equivocadas, responsablesde lupus eritematoso sistémico

Defects in the synthesis of ζ chain in T lymphocytes,

generating wrong intracellular signals, responsible

for systemic lupus erythematosus

Heber Siachoque M.1, Federico Rondón2, José Félix Restrepo3,Ruth Pérez4, Antonio Iglesias3

Todos los hombres son aptos para perpetuar la especie;

la naturaleza forma y escoge aquellos que son dignos de perpetuar la idea.

José María Vargas Vila

Resumen

La expresión anormal de moléculas claves en señalización y la función defectuosa de los linfocitos Tcumplen un papel significativo en la patogénesis de la enfermedad autoinmune. Las células T muestrannumerosas anormalidades en la señalización del complejo TCRζ1, estas aberraciones resultan en la altera-ción de la expresión de citoquinas. Mientras algunas de estas anormalidades explican el aumento de laactividad de células B por células T con incremento de los anticuerpos, la disminución en la producción deIL-2 resulta en un aumento en la susceptibilidad a las infecciones, reducción en la activación de las célulasT, inducción de la muerte celular y prolongada sobrevida de las células T autorreactivas2.

Palabras clave: lupus, TCRζ, CTLA-4, Elf-1, FcγR, LES, ITAM, UTR, CaMKIV.

Summary

The abnormal expression of key molecules in signaling and the malfunction of the T cell T have a significantactivity in the pathogenesis of the autoimmune disease. The cells T exhibit numerous abnormalities in thesignaling of the complex TCR1, these aberrations result in the alteration of the citoquines. While some ofthese abnormalities explain the increase of the activity of cells B for cells T with increment of the antibodiesproduction, the decrease in the production of IL-2 induces an increase in the susceptibility to the infections,diminishing in the activation of the cells T, and expansion of the lifespan of the autorreactive cells2.

Key words: lupus, TCRζ, CTLA-4, Elf-1, FcγR, LES, ITAM, UTR, CaMKIV.

1. MSc, Coordinador de la unidad de Inmunología, Facultad de Medicina,Universidad del Rosario.

2. MD, Profesor Asociado, Facultad de Medicina, Universidad Nacional deColombia.

3. MD, Profesor titular, Facultad de Medicina, Universidad Nacional deColombia.

4. MSc, Profesor asistente, Facultad de Medicina, Universidad del Rosario.

Correspondencia: Heber Siachoche: [email protected]

Recibido: 16 de marzo de 2010.Aceptado: 14 de octubre de 2010.

REVISTA COLOMBIANA DE REUMATOLOGÍAVOL. 17 No. 4, Diciembre 2010, pp. 219-230© 2010, Asociación Colombiana de Reumatología

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1. Papel de los linfocitos en la síntesisde anticuerpos y su importancia

en el desencadenamiento dela enfermedad autoinmune

Los autoanticuerpos se pueden encontrar enpersonas sanas sin causar daño y pueden jugarun papel protector. Los autoanticuerpos pato-génicos en pacientes con enfermedades autoin-munes (EAI) tienen propiedades particulares quepermiten causar la enfermedad; investigación clí-nica y estudios en laboratorio con modelosmurinos demuestran que anticuerpos IgG de altaafinidad que se unen a DNA de doble cadenacausan más daño tisular que los anticuerpos dela clase IgM. La producción de estos anticuerposIgG de alta afinidad es dirigida por antígenos, eltérmino “dirigido por el antígeno” se refiere alproceso en el cual el antígeno se une a la inmuno-globulina sobre la superficie del linfocito B, porconsiguiente estimula a las células a proliferar.En presencia de estímulo antigénico hay una con-tinua presión selectiva favoreciendo a las células

B que muestran sobre su superficie inmuno-globulinas con alta afinidad antigénica. En ge-neral este proceso dirigido por el antígeno puedeocurrir únicamente en linfocitos B que son esti-mulados inicialmente por linfocitos T como porel antígeno. Este proceso es conocido como Tdependiente3-5.

El concepto de linfocito T ayudador es críticoen el entendimiento de la patogénesis del lupus,cada célula T transporta una molécula receptorade superficie con la habilidad de interactuar conun antígeno particular el cual es presentado alreceptor de la célula T en un complejo con unamolécula MHC sobre la superficie de la célulapresentadora de antígeno. Como se muestra enla Figura1, la célula presentadora de antígenopuede hacer una segunda interacción molecularcon el linfocito T a través de una coestimulación.

Hay diferentes coestimuladores molecularespares, incluyendo CD40-CD40L y CD28-B7, loscuales pueden generar la segunda señal requeri-da para la activación del linfocito T. Agentes que

Figura 1. Reconocimiento y presentación antigénica. Célula presen-tadora de antígeno uniendo fracción peptídica a una molécula del com-plejo mayor de histocompatibilidad (CMH) en la superficie celular. Elreconocimiento es realizado por el receptor de la célula (TCR). La acciónefectora de la célula T depende de la interacción entre moléculas sobre lasuperficie de las dos células. Dos de estas interacciones alternativas sonnombradas B7-CD28, con acción estimuladora y B7-CTLA-4 con accióninhibidora. Tomado y modificado de N Engl J Med 2008;358:929-939.

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bloquean la coestimulación pueden inhibir la res-puesta inmune dependiente de Linfocitos Tayudadores. Puesto que la célula T ayudadoraes crítica en lupus, tanto el antiCD40 ligandocomo la proteína 4 IgG1 asociada al linfocito Tcitotóxico (CTLA-4 Ig), una molécula que bloqueala interacción CD28-B7, son potenciales trata-miento para lupus6,7.

Las citoquinas de la célula T afectan a lacélula B estimulando la división celular, el swit-ch de clase para la producción de anticuerposde la clase IgM e IgG y promoviendo un cam-bio en la secuencia molecular de los anticuerpossecretados; así la célula T ayuda para hacer po-sible la producción de autoanticuerpos de altaafinidad; esta clase de anticuerpos está estre-chamente relacionado con daño tisular en LES.Las células B y T específicas para autoantígenosque interactúan para producir autoanticuerposperjudiciales están ausentes en personas sanas.

La Figura 2 muestra una célula B y una célula Tinteractuando y estimulando una a la otra. Va-rios mecanismos podrían ser considerados enla alteración de la respuesta inmune y en el des-encadenamiento de la enfermedad autoinmune,uno de ellos incluye la ausencia de células Treguladoras o la deleción de poblaciones cla-ves en el control de la respuesta; algunas célu-las podrían estar presentes pero podríanpermanecer anérgicas.

Algunos autores proponen que los cambios enla región variable en las cadenas livianas y pe-sadas de los anticuerpos, expresados por un lin-focito B autorreactivo, podrían ser la explicaciónde la patología autoinmune8.

El uso de ciertos genes, de cadenas livianasde poblaciones de células B de pacientes conlupus, difiere del repertorio de cadenas livianasde personas sanas; esta diferencia podría ser de-bida a la edición aberrante del receptor (TCR).

Figura 2. Interacción entre células T y B. Presentación de antígenopor parte de la célula B, coestimulación obtenida a través de la interacciónentre CD40 y CD40L. Esta interacción estimula la célula T a producir unnúmero de citoquinas, algunas de las cuales actúan sobre células B parapromover la producción de anticuerpos. MHC: complejo mayor dehistocompatibilidad, TCR: receptor de células T, TNF: factor de necrosistumoral. Tomado y modificado de N Engl J Med 2008;358:929-939.

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Figura 3. Receptor de célula T (TCR). Grupode moléculas monomórficas de membrana llama-do colectivamente CD3. Asociadas a dos cade-nas polipeptídicas polimórficas (alfa y beta ogamma y delta) que constituyen las dos variantesdel TCR, se encuentra un grupo de moléculas, quese relacionan con las cadenas ζζ formando asíel complejo ζζTCR/CD3. Tomado y modificadode Allende LM, Corell A, A. Regueiro, PachecoJR & Arnaiz-Villena A. Inmunología-online.

2. Características estructuralesdel complejo ζζζζζζζζζζ TCR/CD3

El complejo ζζ TCR/CD3 está compuesto deseis diferentes cadenas polipeptídicas, la especi-ficidad de unión al ligando es dirigida por el re-ceptor clonotípico constituido por cadenas alfa ybeta (αβ) en el 95% de las células T o por cade-nas gama y delta (γδ) en el 5% de ellas, siendo elresultado de rearreglos genéticos, generandomillones de receptores diferentes, del orden de109. El heterodímero αβ une directamente apéptidos asociados al CMH. Las moléculas ac-cesorias al receptor heterodimérico TCR son elcomplejo CD3 y el homodímero ζζ. El complejoCD3 está constituido por tres tipos de cadenas γ,δ y ε, rearregladas por la proteína omega (ω),responsable del ensamblaje y de la expresión ensuperficie. El homodímero ζζ está involucradoen la transducción de la señal en el linfocito T,activando una cascada de cinasas citoplasmá-ticas las cuales intervienen en la síntesis deinterleucina 2 (IL-2)9.

Los mecanismos de reconocimiento de célu-las T difieren de los de las células B; las célulasT reconocen antígenos asociados a moléculasCMH clase I o clase II, los cuales son reconoci-dos por cadenas polipeptídicas polimórficas(alfa y beta o gamma y delta) que conformanlas dos variantes del TCR, el complejo CD3 for-ma un trímero constituido por cadenas γ, δ, ε,las cuales se organizan en tres dímeros γε, δε yζζ llamados colectivamente CD3, formando asíel complejo TCR/CD3; cada cadena de CD3contiene motivos ITAM (inmunorreceptor detirosinas): uno en cada cadena γ, δ, y ε, y tres encada cadena ζ. Cuando tiene lugar el reconoci-miento antigénico entre el TCR y la moléculaCMH que contiene el antígeno, se genera unacascada de reacciones bioquímicas en el cito-plasma del linfocito T, dando así lugar al proce-so de activación (Figura 3)9,10.

3. Activación de células T. Víade señalización

Los linfocitos T circulantes, que expresan re-ceptores tipo II, alfa-beta, se asocian con elhomodímero ζζ, aunque es posible encontrar for-

mas alternas ζη presentes en un porcentaje re-ducido de células T. La estructura del homodí-mero ζζ es distinta de los otros péptidos delcomplejo CD3, ya que su dominio intracelulares de mucho menor tamaño que el extracelularconteniendo tres regiones ITAM (motivos asocia-dos al inmunoreceptor de tirosinas) que sefosforilan cuando el receptor de la célula T seactiva. La fosforilación de los ITAM es un eventoprioritario en la activación de las células T, elsegmento transmembrana de la cadena ζ tieneuna gran homología con la subunidad γ del re-ceptor Fc de la IgG (FcγR), y es requerido tantopara su expresión como para la transducción deseñal11 (Figura 4).

La secuencia de eventos de señalización ge-nerada por el reconocimiento antigénico de cé-lulas T, previa presentación por MHC, lleva a la

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activación de células T y la consecuente transcrip-ción del gen de IL-2. La secuencia de eventos seinicia con la fosforilación proximal del complejoζζTCR CD3; la región intracitoplasmática de lassubunidades de CD3 se fosforila por tirosinaskinasas de la familia Src, Lck y Fyn, llevando a lamovilización y activación de kinasas de la fami-lia Zap-70 y Syk. Las kinasas Zap-70 y Syk acti-vadas fosforilan regiones intracitoplasmáticas condominios ITAM de los homodímeros ζζ o Fcγ res-pectivamente, así como de moléculas adapta-doras SLP-76 y LAT, las cuales forman parte delandamiaje molecular. Las moléculas adapta-doras intervienen en el reclutamiento de interme-diarios adicionales que continúan con laactivación de pequeñas proteínas que unen GTPcomo lo son las proteínas Ras, Rac y Rho, llevan-do a la activación de MAP kinasas, incluyendo aErk 1/2, JNK y p3812-14.

Un evento importante en la activación de cé-lulas T, sumado a lo anterior, es el aumento del

flujo de calcio y la activación de la proteínacinasa C, con un efecto sobre las vías de las MAPkinasas las cuales promueven la translocación ymovilización de factores de transcripción15. Estacascada de eventos establece las conexionesmoleculares que culminan en la activación defactores de transcripción en el núcleo y la reor-ganización del citoesqueleto, facilitando el con-tacto de la célula T con la célula presentadorade antígeno (CPA).

4. Mecanismos moleculares implicados

en la mala regulación de las cadenas

ζζζζζζζζζζ del complejo ζζζζζζζζζζTCRCD3 y señal

anormal en células T de pacientes

con enfermedades autoinmunes

Expresión anormal de TCRζLa expresión anormal de moléculas claves en

señalización y la función defectuosa en los linfoci-tos T juegan un papel preponderante en la

Figura 4. Activación de linfocito T. Cascada de eventos que parten del recono-cimiento antigénico por parte del receptor (TCR) y continúa con el desplazamientode la señal hacia el interior de la célula. Tomado y modificado de L. M. Allende, A.Corell, A. Pacheco, J. R. Regueiro y A. Arnaiz Villena, Inmunología-online.

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patogenia de las enfermedades autoinmunes y sonaltamente estudiadas en pacientes con lupus eri-tematoso sistémico (LES). Dentro del repertorio degenes que pueden predisponer al LES se encuen-tra la expresión defectuosa de cadena ζ, observa-da en la mayoría de los pacientes. El gen TCRζestá localizado en el cromosoma 1q23.1. (Figura5). Los estudios genómicos realizados reciente-mente han encontrado cierta asociación entre elcromosoma 1 y la susceptibilidad al LES. Las cé-lulas T de pacientes con LES expresan una mar-cada disminución de transcritos mRNA paracadena ζ al igual que defectos en la proteínaexpresada; sin embargo, los eventos de señali-zación iniciados por ζζTCRCD3 se incrementancomparados con células T normales16-20.

Figura 5. Estructura molecular de cadena zeta (ζζζζζ) humana. DNAgenómico de cadena zeta asociada al receptor de la célula T (TCR), mRNA yregión promotora. El DNA genómico para cadena TCRζ está localizado en elbrazo largo del cromosoma 1 y está compuesto de 8 exones separados poruna distancia de 0,7 a 8 Kb. La región separada de m RNA de 1472 kb esproducto del splicing de 8 exones que tienen una región codificante de 492pares de bases (pb) y una región no traducida de 906 pb localizada corrienteabajo. La región promotora es de 358 pb y contiene dos sitios de unión parael factor de transcripción Elf-1. El splicing alternativo del mRNA para TCRζ esgenerado con pérdida de una región entre los nucleótidos 672 a 1233. Tomadoy modificado de Journal of Biological Chemistry 2008;280:18959-18966.

Los mecanismos patológicos precisos desen-cadenantes de la función anormal de las célulasT en pacientes con LES no han sido esclarecidos;la identificación de eventos genéticos fundamen-tales así como los mecanismos bioquímicospueden contribuir al entendimiento de la etio-patogénesis del lupus, además de proveer nue-vos blancos terapéuticos para una futuraintervención farmacológica. En vista de este sig-nificativo esfuerzo por descubrir la alteración enla expresión de algunos genes que pueden pre-disponer la aberrante respuesta a autoantígenosy la causa patológica de la producción deautoanticuerpos, se descubrió que la cadena ζasociada al receptor de la célula T es una molé-cula vital en señalización, que es crítica para el

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desarrollo y la función de la célula T; su defectoen la gran mayoría de pacientes con LES y enotras enfermedades autoinmunes la podrían ubi-car como la causa más importante del desenca-denamiento de la enfermedad autoinmune21-22.

Defectos en la expresión de cadena TCRζ en pacientes con LES

La cadena ζ del TCR es considerada un factordeterminante entre las ocho subunidades del re-ceptor T (αβ, γε, δε and ζζ), es importante en elensamblaje, transporte y expresión en superficiey es crucial en la señalización del TCR. El gen quecodifica para cadena ζ está localizado en el bra-zo largo del cromosoma 1q23; se ha sugeridoque los defectos en la expresión contribuirían enla predisposición genética al LES23-25. El gen quecodifica para cadena ζ está localizado en la mis-ma región de los genes para FcγRI, FcγRII y FcγRIII,un locus candidato en la susceptibilidad genéticaal desarrollo de enfermedades autoinmunes26. Laidentificación de la deficiencia de cadena ζ enpacientes con LES fue realizada inicialmente poranálisis de fosforilación de tirosinas en TCR/CD3,los cuales revelaron disminución en la expresiónde la proteína en células T de pacientes con LES,la cual fue identificada como cadena ζ. El déficiten la expresión de cadena ζ ha sido reportadopor varios grupos de investigación, sugiriendo queno está restringido a un grupo poblacional27-29. Laprevalencia de la deficiencia de cadena ζ enpacientes con LES entre individuos de diferentesgrupos raciales, con diferentes niveles de activi-dad de la enfermedad determinados por el índicede SLEDAI, muestra una prevalencia del 78%, sien-do de gran relevancia en la inmunopatogénesisdel LES30.

Aspectos moleculares relacionados conuna baja expresión de cadena ζ en pa-cientes con LES

La cadena ζ del complejo receptor T ζTCRCD3juega un papel crítico en el ensamblaje y trans-porte del complejo a la superficie celular y en latransducción de señal a través de la activacióninicial TCR-péptido. El entrecruzamiento del com-plejo receptor lleva a un incremento de los nive-les de calcio intracitoplasmático y fosforilaciónde tirosinas de proteínas citosólicas31; esta

sobreexcitabilidad de las células T de pacientescon LES puede ser atribuida a la pérdida de laexpresión de cadena TCR ζ, la cual es reempla-zada por la cadena FcγR con agregación en los“lipid rafts32” en la membrana celular. El reem-plazo de la cadena ζ causa aberraciones en lacascada de señalización, lo cual podría generardefectos en la síntesis de IL-2; es claro que la dis-minución en la expresión de ζ es el evento centralmás relevante en el desencadenamiento de laenfermedad33.

Aunque los mecanismos moleculares que de-terminan la disminución en los transcritos delmRNA para cadena ζ y de la proteína en célulasT de los pacientes con LES no han sido esclare-cidos, los avances en biología molecular hanpermitido identificar una región de 31Kb en elRNA que contiene la información de la proteí-na, el transcrito generado como producto delsplicing alternativo está formado por ochoexones separados por distancias que oscilanentre 0,7 y 8 Kb34,35 (Figura 6). Análisis de se-cuencia de nucleótidos del gen TCRζ muestra unincremento en la frecuencia de splicing alterna-tivo con pérdida de varios exones en células Tde pacientes con LES36. Análisis de la región notraducida UTR en el extremo 3’ muestran unapérdida de secuencia entre los nucleótidos 672al 1233 del exón VIII en el mRNA que codificapara cadena ζ37.

Contribución de las células T y B en lainmunopatogénesis del LES

Aunque el LES es reconocido primariamentecomo una enfermedad de células B con una altaproducción de anticuerpos patogénicos, el apor-te de las células T en la inmunopatología no escuestionable. Las células T activadas expresan CD40 ligando (CD40L) y apoyan a las células B adiferenciarse en células plasmáticas a través delcontacto con CD40 presente en la superficie ce-lular38,39.

Las células T de pacientes con LES muestranun fenotipo de linfocitos de memoria con un por-centaje relativamente bajo de células T naive.Las poblaciones de células T reguladoras se en-cuentran disminuidas en pacientes con LES40,41.El interferón gama (INF-γ) y la IL-2 también se

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encuentran disminuidos, mientras que la IL-6 yla IL-10 se encuentran aumentadas. Una dismi-nución en los niveles de IL-2 reduce la activa-ción de células T induciendo muerte celular(AICD) y la persistencia de autorreactividad asícomo un incremento en el número de células Tde memoria.

La cadena ζ es única en lo que se refiere a lapresencia de sitos de fosforilación (ITAM), más queel complejo CD3, y es considerada crítica en latransmisión de señales al interior de la célula.La disminución en la expresión de ζ ha sido ob-servada en linfocitos T de sangre periférica en pa-cientes con enfermedades autoinmunes como:artritis, escleroderma y lupus42,43. Varios mecanis-mos contribuyen a la disminución en la expresiónde ζ en células T de pacientes con LES. Estos in-cluyen disminución de la actividad del promotorde ζ, disminución de la estabilidad del mRNA yaumento de la degradación de la proteína.

El más importante factor de transcripción parala regulación de la expresión de cadena ζ en cé-

lulas de pacientes con LES es Elf-1. Tsockos y cols.investigaron dos grupos de pacientes con LES condiferentes anormalidades en la expresión yfunción de Elf-1; en el primer grupo encontra-ron que las células T no producen la forma de 98Kd que se une al DNA, y en el segundo grupo depacientes la forma de 98 Kd de Elf-1 encontradaen células T de pacientes con LES no logró unirseal DNA por lo que no está apropiadamentefosforilada44-46. Las células T de pacientes con LESmuestran un significativo aumento de los nivelesde mRNA con splicing alternativo en la región 3’,con la región UTR no traducida, resultado de lapérdida de los nucleótidos 672 a 1233 deltranscrito ζ. La estabilidad del mRNA para ζ esbaja en pacientes con LES comparada con eltranscrito mRNA para ζ tipo silvestre.

En células T de pacientes con LES la disminu-ción de TCRζ es reemplazada por cadenas FCRγ(receptor Fc de cadena ζ), las cuales no se ex-presan en células T normales47. FCRγ se asociacon CD3ε y la cinasa Syk, la cual no se expresa

Figura 6. Secuencia de la proteína TCRζ normal, producto del splicing alternativo,formado por 8 exones separados por distancias que oscilan entre 0,7 y 8 Kb. NambiarM P, Fisher Yuang TJ, Sandeep K, Tsokos GC. International Reviews of Immunology

2004;23:1-19.

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regularmente en las células T. La pérdida deTCRζ involucra también la pérdida de la proteí-na zap-70; sin embargo, el complejo TCR es re-agrupado como FCRγ-Syk reemplazando aζ-Zap-70. Esta conmutación genera una mayoractivación calculada en más de cien veces en ellinfocito T de pacientes con LES, el cual es ma-nifestado con un aumento del flujo de iones cal-cio y una mayor fosforilación de proteínascitosólicas48. Otro componente crítico asociadoa los lipid raft es una proteína tirosina cinasaespecífica de linfocitos T (PTP: Lck). La Lck esimportante para mantener el estado de reposode las células T y la cascada de señales de acti-vación. La Lck fosforila los ITAMs de CD349.

Zap-70 es reclutada a ζζ uniéndose a losITAMs fosforilados; una vez reclutada, zap-70 esfosforilada por Lck o Fyn, volviéndose catalí-ticamente activa, conduciendo a la fosforilaciónde sustratos corriente abajo. La Lck es crítica parala fosforilación y activación de la MAP kinasa-ERK y la función efectora de la célula T con laconsecuente producción de citoquinas. La activi-dad de la Lck es regulada por la fosforilación detirosinas, la cual es mediada por PTP CD45. LaCD45 mantiene la Lck en estado de alerta, asíque la célula T puede responder rápidamente ala activación por defosforilación. En células Tnormales CD45 es excluida de los “lipid raft”después de la estimulación, mientras en célulasT de pacientes con LES se mantiene por periodoslargos de tiempo. La ubiquitinación está asocia-da con una disminución en la expresión de Lck yaumento de la actividad de la enfermedad enpacientes con LES50.

Aumento del flujo de calcio y de la ex-presión de la kinasa CaMKIV en célulasT de pacientes con LES

Como se ha mencionado antes, uno de losprimeros eventos después de la estimulación delas células T es el aumento del calcio librecitoplasmático incrementando los niveles en pa-cientes con LES. Sin embargo, este aumento delcalcio no lleva a una sobrerregulación de losgenes dependientes de calcio; entre tanto se in-duce un aumento en la expresión de CD154(CD40 ligando) en células T, generando un ma-yor estimulo en las células B. La producción de

IL-2 se ve afectada negativamente, resultando enuna disminución de la muerte celular inducidapor activación (AICD)51,52.

En respuesta al aumento de calcio se activanvarias cinasas asociadas a calmodulina ycalcineurina. Los blancos corriente abajo de lacalcineurina son el factor nuclear de activaciónde linfocitos T (NAFT) el cual se encuentra aumen-tado en células T de pacientes con LES y unido apromotores de genes asociados a IL-2 y CD 15453.Sin embargo, mientras NFAT media el aumentoen la transcripción de CD154, un aumento en launión de NFAT al promotor de IL-2, no induceuna mayor síntesis de IL-2. Una razón para la res-puesta dicotómica es el hecho de que NFAT pue-de unirse a sitios cis del promotor o a la proteínaAP1. El promotor de CD154 define un sitio NFATpero esta actividad no depende de AP-1; en con-traste, el promotor de IL-2 define un sitio NFATadyacente al sitio AP-1. La actividad de AP-1 dis-minuye en células T de pacientes con LES54.

La unión de NFAT al promotor de IL-2 noresulta en un aumento de la actividad trans-cripcional de la citoquina, resulta en un incremen-to en la expresión de CD 40L (CD 154). Otra razónpara este fenómeno dicotómico es la activacióny aumento de la traslocación nuclear de la kinasa4 calcio calmodulina55-57.Un importante blancode CaMKIV es el elemento modulador CREMdependiente de cAMP. El represor transcripcionalCREMα incrementa su actividad en células T depacientes con LES, suprimiendo la actividad delpromotor para IL-258.

La activación policlonal y el incremento en lasíntesis de anticuerpos por parte de las células Ben pacientes con LES podría ser debida a unasobreestimulación, resultado de la sobreexpresiónde CD40L por parte de las células T.

En conclusión, las células T de pacientes conlupus presentan muchas anormalidades, con al-teraciones en vías de señalización que favorecensu activación y funciones efectoras anormalesdonde se modifican factores de transcripción queamplifican la respuesta humoral. El resultado esuna célula T que combina algunas característi-cas de célula efectora y de célula anérgica. Lamolécula clave en esta patología es sin duda la

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cadena zeta, ya que orquesta la vía más impor-tante de la señalización intracelular del linfocitoT, además es una molécula crítica para el desa-rrollo y la función de las células T, encontrándosedefectuosa en la mayoría de pacientes con LES.

Agradecimientos

Al departamento de Medicina Interna, Uni-dad de Reumatología de la Universidad Nacio-nal de Colombia por sus valiosos aportes en larevisión del tema y a los comentarios en la edi-ción del artículo. Al apoyo obtenido en la con-vocatoria a proyectos de posgrado de la facultadde medicina, 2008, mediante código quipúnúmero 2010100 11337, que nos proporcionóla ayuda económica para el desarrollo experi-mental del proyecto y a la Asociación Colom-biana de Reumatología.

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