• Son sustancias constituidas

Esteroide Glicosídica

Un anillo de γ-lactonaα,ß-insaturada

CARDENOLIDOS

BUFANOLIDOS O ESCILANOLIDOS

Actúan sobre el músculo cardiaco (Insuficiencia cardiaca

Un anillo de δ-lactona-,α ß-insaturada,

BIOSINTESIS

• La progesterona formada se condensa con una unidad C2 para dar origen a una cadena lateral de 4 carbonos típica de los cardenólidos.

• La posterior oxidación y deshidratación origina el anillo γ-lactona α,ß-insaturada.

• Posteriormente ocurre la glicosilación.

COLESTEROLHidroxilación C22

OxidaciónPregnelonona

ProgesteronaHidroxilación

Oxidación

Reducción

5β- Pregnan-3,20 diona3 β ,14 β ,21-trihidroxi-5β – pregnan-20-one

Hidroxilación

Digitoxigenin

Bufalin

Malonil CoA

Oxalacetil CoA

Digitoxigenin

Bufalin

Digoxina12β-hidroxilación

16β-hidroxilación

Gitoxigenina

5β-hidroxilación y C-19 oxidación

Hellebrigenina

DISTRIBUCION NATURAL

• Principalmente en las hojas de plantas de las familias Scrofulariaceae, Apocynaceae, Liliaceae, Ranunculaceae y Moraceae.

• Los bufanólidos se han encontrado también en ranas del género Bufus, y en las alas de mariposas monarca, han sido considerados de interés por su potencial anticancerígeno.

ENSAYOS DE RECONOCIMIENTO

• Los cardenólidos se pueden reconocer enmuestras biológicas mediante los ensayos decoloración con varios reactivos nitro, tal como seanotó para las sesquiterpenlactonas;específicamente con los reactivos de Kedde, Legaly Raymond. Al igual que las saponinas esteroides,dan resultados positivos con el reactivo deLiebermann-Burchard, lo que permitediferenciarlos de las terpenlactonas y lascumarinas.

ENSAYO DE KEDDE (PARA CARDIOTONICOS)

• Precaución: La formación del color violáceo no durasino algunos pocos segundos.

• Ensayo: Tomar 1 ml de la fase orgánica. Llevar asequedad. Redisolver en 1 ml de

• alcohol. Añadir 0.5 ml de reactivo de Kedde reciénprepa rado (Mezcla de partes iguales

• de las soluciones A y B). Se considera positiva la pruebasi aparece una coloración

• púrpura o violácea. Como referencia se puede comparar con el color producido con 1

• ml de KOH al 5% en alcohol.

HIDROLISIS

• Los glicósidos cardiotónicos se hidrolizanfácilmente en soluciones ácidas liberando lasapogenina y los carbohidratos ligados. Enmedio alcalino, además de liberarse lasapogenina ocurre la apertura del anillolactónico.

HECHOS ESTRUCTURALES

• Los cardiotónicos naturales en su gran mayoría, poseen:– Un anillo lactónico a,ß-insaturado en posición 17ß– Un grupo hidroxilo o glicosilo en posición 3ß– Un grupo hidroxilo en posición 14ß– Configuración cis entre los anillos A/B y C/D– Otros grupos hidroxilo en 1, 5, 12, 16, etc.– El grupo metilo 19 algunas veces oxidado hasta alcohol o aldehído– 1 a 4 unidades de carbohidrato ligadas al oxígeno del carbono 3– Los carbohidratos ligados son principalmente glucosa y

desoxiazúcares como digitoxosa, cimarosa, etc.

• Los desoxiazúcares son una característica importante de los glicósidos cardiotónicos, ya que esta clase de carbohidratos se encuentra prácticamente restringida a estas sustancias naturales.

EXTRACCION Y AISLAMIENTO

• Al igual que las saponinas esteroides y otros glicósidos terpenoides, los cardiotónicospueden aislarse en forma glicosídica o como sapogeninas.

• En el primer caso se utiliza el método ya descrito para las saponinas esteroides(desengrase, extracto polar, resina de intercambio iónico, Sephadex ycromatografía), mientras que en el segundo caso se realiza una hidrólisis ácidaseguida de partición con un solvente orgánico (generalmente cloroformo) ycromatografía en sus diferentes formas, especialmente con sílica gel.

• Para el fraccionamiento por cromatografía en columna con sílica gel puedenutilizarse mezclas de solventes com Diclorometano/Metanol/Agua 91:22:683.

• Luego de este fraccionamiento e hidrólisis ácida, las geninas pueden analizarse ysepararse por HPLC-fase reversa4,5,6,7; mientras que los carbohidratos ligadospueden analizarse por cromatografía en papel eluyendo con la mezcla Butanol/AcidoAcético/Agua 4:1:58.

• Recientemente y gracias al avance de las denominadas técnicas "on-line" y eldesarrollo de interfaces HPLC-Espectrometría de masas se pueden analizar extractoscrudos que contienen glicósidos cardiotónicos o saponinas, mediante técnicascombinadas como LC-TMS (HPLC combinada con Espectrometría de masas coninterfase termospray) y LC-CF/FAB (HPLC combinada con Espectrometría de masasFAB de flujo continuo)9.

VALORACION EN PRODUCTOS FARMACEUTICOS

• La mejor técnica para valorar los glicósidocardiotónicos en extractos vegetales y productosfarmacéuticos es HPLC.

• Otros métodos de valoración de los cardiotónicosson la colorimetría con el Reactivo de Kedde ymétodos biológicos en los que se determina laDosis Letal Mínima (DL-50), el volumen de vómitoen palomas, el paro cardíaco en gatos y con elcorazón aislado de ranas, y los métodosenzimáticos.

ACCION FARMACOLOGICA Y RELACION ESTRUCTURA-ACTIVIDAD

• Tienen acción inotrópica positiva, es decir, incrementan lasfuerzas de contracción del músculo cardíaco. Por otrolado, las hojas de digital tienen un efecto diurético. Porestas razones se les utiliza en tratamientos denefritis, edemas y algunas enfermedades infecciosas. Seha establecido que para que los cardiotónicos manifiestensu actividad requieren además del ciclo lactónico a,ß-insaturado, que:– La configuración sea 14ß,3ß,17ß– configuración A/B cis

• Además, se ha observado que la presencia de azúcaresligados y el número de hidroxilos tienen capacidad enaumentar la actividad farmacológica.

Grac

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